老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4+CD25+调节性T细胞的表达

背景：研究证实,很多恶性肿瘤患者体内CD4⁺CD25⁺调节性T细胞存在高表达,近期也有研究发现,急性髓细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞同样表现出高比例表达。 目的：分析老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4⁺CD25⁺调节性T细胞的表达特点。 方法：纳入初诊急性髓细胞白血病患者92例,将年龄在60岁以下者设为中青年组(n=22),年龄在60岁以上者设为老年观察组(n=70)。在老年观察组中,32例经规范化疗后完全缓解,设为完全缓解组;将余下38例设为老年组,依据FAB分型标准,分为M2 6例、M3 19例、M4 7例、M5 6例。另选择同期体检健康人群42名作为正常对照组。抽取受试者外周静脉血,检测CD4⁺CD25⁺调节性T细胞表达情况。 结果与结论：老年组、完全缓解组CD4⁺CD25^highFOXP3⁺调节性T细胞比例高于正常对照组(P < 0.01),并且老年组CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞比例高于完全缓解组(P < 0.01)。老年组、完全缓解组CD4⁺FOXP3⁺T细胞比例高于正常对照组(P < 0.01),并且老年组CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例高于完全缓解组(P < 0.01)。老年组CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞与CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例高于中青年组(P < 0.01)。老年组不同分型间CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞和CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例比较差异均无显著性意义(P > 0.05)。Pearson相关性检验结果显示,老年初诊急性髓细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞比例和CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例呈正相关(r=0.87,P=0.019)。表明老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4⁺CD25⁺调节性T细胞比例高于健康人群和中青年急性髓细胞白血病患者。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

外泌体及其对调节性T 细胞作用的研究进展

调节性T 细胞(regulatory T cell,Treg cell)是T 细胞中一类具有免疫抑制功能的T 细胞亚型,其中最关键的亚型是胸腺起源并表达CD4、CD25 以及转录因子FOXP3+的CD4+ CD25+ FOXP3+调节性T 细胞(CD4+ CD25+ FOXP3+ Treg cell)。调节性T 细胞对维持体内免疫稳态极其重要,与多种重大疾病如恶性肿瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病、过敏性疾病、移植排斥的发生发展密切相关。外泌体(Exosome)是一种可由多种细胞分泌的微型盘状囊泡,通过其囊内包裹的蛋白质、mRNA、微小RNA(microRNA)等物质,在细胞间通信,特别是非接触性的细胞远程调控发挥作用。目前研究发现:外泌体对调节性T细胞的诱导发育,增殖及发挥免疫抑制能力具有一定的影响,深入了解两者之间的联系有利于为将来治疗恶性肿瘤、自身免疫性等疾病提供创新性线索。     

芳香化酶与雌激素受体mRNA在肺癌组织中表达相关性的初步研究

本研究采用原位杂交法检测肺癌及其相对应的癌旁组织中芳香化酶与雌激素mRNA的表达,旨在探讨芳香化酶与雌激素受体mRNA在肺癌组织中的定位、分布以及表达的相关性。23例肺癌及其相应癌旁组织,7例肺良性病变及其相应正常肺组织均取自第三军医大学附属西南医院胸外科肺切除标本,均经临床及病理证实。癌旁组织和正常肺组织系取自同一患者距病灶5cm以上,且经大体及光镜检查无异常。肺癌组:男16例,女7例,年龄74～36岁,中位年龄51岁。病理类型:鳞癌11例,腺癌6例,小细胞癌3例,腺鳞癌2例,肺泡细胞癌1例。肺良性病变组:肺结核3例,炎性假瘤3例,肺曲…     

结核病患者外周血中CD4~+ CD25~+调节性T细胞水平的检测

探讨CD4~+CD25~+调节性T细胞及其转录因子Foxp3在结核病发病机制中的作用。研究对象为肺结核患者22例(病例组)以及健康对照者23例(对照组)。采用FACS检测外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的百分率,采用real-time PCR检测外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达以及CD4~+CD25~+调节性T细胞与CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、IFN-γ和IL-4的相关性。结核病患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞占CD4~+T细胞的百分率,病例组(3.38±1.23)%高于对照组(1.97±0.62)%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。血清单个核细胞Foxp3 mRNA相对表达水平为134.54±6.76,高于对照组(40.98±2.34,P0.05)。CD4~+CD25~+调节性T细胞与CD4~+T细胞、CD8~+T细胞以及与IFN-γ和IL-4的表达呈负相关。结核病CD4~+CD25~+调节性T细胞数量增加、特异性转录因子Foxp3 mRNA表达上升,由此引发的免疫抑制效应可能是结核病发生发展的重要原因之一。     

Graves病患者131I治疗前后CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞的变化

目的:通过对Graves病患者131I治疗前后外周血各淋巴细胞亚群和CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞含量以及相关基因Foxp3mRNA表达水平的测定,探讨131I治疗方法是否可以通过改变调节性T细胞的含量从而改善Graves病患者的免疫功能异常。方法:采集30例Graves病患者131I治疗前及治疗后1个月的外周血,流式细胞仪检测外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD19+、CD3-CD16+CD56+淋巴细胞亚群及CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞的百分率,Real-TimePCR检测外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达水平。结果:和治疗前相比,Graves病患者131I治疗1个月后外周血CD3+CD4+T细胞和CD3-CD19+B细胞百分率都明显减少(P<0.05),CD3-CD16+CD56+NK细胞百分率明显增加(P<0.05),CD3-CD8+T细胞、CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞百分率和Foxp3mRNA的表达水平无明显变化。结论:131I不能通过增加调节性T细胞的含量而改善Graves病患者的免疫耐受障碍,但可以通过减少CD4+T和B淋巴细胞的含量和增加NK细胞的含量来控制过度的免疫应答。     

II型胶原蛋白对CIA大鼠外周血CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞的影响

目的:观察Ⅱ型胶原蛋白对胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg)的影响。方法:建立Ⅱ型胶原蛋白诱导的大鼠类风湿性关节炎(CIA)模型。采用流式细胞术分别检测正常对照组、模型组、Ⅱ型胶原蛋白治疗组和雷公藤多苷组大鼠外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg的水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠外周血CD4+T细胞亚群中CD25+FOXP3+Treg的水平明显下降(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,Ⅱ型胶原蛋白治疗组大鼠外周血CD25+FOXP3+Treg显著升高(P<0.05或P<0.01);而CD25+FOXP3-T细胞和CD25-FOXP3+T细胞的水平则明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:II型胶原蛋白治疗CIA大鼠的可能途径是升高外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg的水平。     

FOXP3基因对ApoE-knockout小鼠动脉粥样硬化的影响

目的:研究FOXP3对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法:构建FOXP3-siRNA慢病毒载体,免疫磁珠分选Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞。利用Westernblot方法对构建的载体进行功能性研究。实验动物分为阴性对照组、阳性对照组、FOXP3-siRNA慢病毒注射组和Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞注射组。比较各组小鼠的斑块面积和不同组织Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞的数目和功能;利用ELISA法检测各组脾细胞炎性因子浓度;利用RT-PCR和Westernblot分析不同组织中FOXP3转录水平和Foxp3蛋白表达水平。结果:与对照组和Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞注射组比较,FOXP3-siRNA慢病毒注射组小鼠斑块面积明显增加(P<0.05);Foxp3+ CD4+ CD25+Treg细胞的数目显著减少(P<0.05),功能下降;Foxp3蛋白表达和FOXP3转录水平降低(P<0.05)。与对照组和FOXP3-siRNA慢病毒注射组比较,输注Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞组斑块面积显著减小(P<0.01);Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞的数目显著增加(P<0.01),功能增强;Foxp3蛋白表达和FOXP3转录水平增高(P<0.01)。结论:FOXP3可能通过调控体内炎症反应而产生抗动脉粥样硬化作用。     

罗格列酮上调成人隐匿性自身免疫糖尿病患者CD4+T细胞Foxp3 mRNA的表达

目的 观察罗格列酮对成人隐匿性自身免疫糖尿病(LADA)患者CD4+调节性T细胞的影响,旨在探讨罗格列酮的免疫调节机制.方法 采用磁珠分离LADA患者CD4+T细胞,1、10和100 μmol/L罗格列酮干预CIM+T细胞.MTT法检测细胞活性,3H-TdR掺人法检测增殖抑制率.流式细胞术检测CD4+CD25+T细胞比值.RT-PCR检测过氧化物酶体增殖激活受体-γ(PPARγ)mRNA、TGF-β1 mRNA表达,实时荧光定量PCR检测Foxp3 mRNA表达.结果 CD4+T细胞表达PPARγmRNA.罗格列酮抑制植物凝集素(PHA)刺激的CD4+T细胞增殖.1μmol/L和10μmol/L组罗格列酮作用的CD4+CD25+T细胞比例无明显变化,100 μmol/L组CD4+CD25+T细胞比例降低.10μmol/L罗格列酮上调CD4+T细胞的Foxp3 mRNA表达,但TGF-β1 mRNA表达无显著变化.小剂量IL-2参与下,1μmol/L罗格列酮(药理浓度范围内)升高CD4+T细胞Foxp3mRNA表达.结论 罗格列酮上调LADA患者CD4+T细胞Foxp3 mRNA表达,改善自身免疫耐受缺陷.     

FOXP3在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 研究FOXP3+淋巴细胞和FOXP3蛋白在人乳腺癌细胞中的表达及其与患者临床病理特征的关系.方法 采用组织芯片平台,应用免疫组织化学方法 检测92例浸润性乳腺癌和26例癌旁乳腺组织中FOXP3+淋巴细胞和FOXP3蛋白的表达.结果 乳腺癌间质浸润的FOXP3+淋巴细胞阳性率高于癌旁组织(32.7% vs 7.7%,P<0.01);乳腺癌实质FOXP3蛋白阳性率也高于癌旁组织(52.2% vs 7.7%,P<0.01);乳腺癌间质浸润的FOXP3+淋巴细胞数和癌实质FOXP3蛋白表达无相关性(P>0.05);乳腺癌间质浸润的FOXP3+淋巴细胞与淋巴结转移、组织学分级、pTNM分期和c-erbB-2过表达呈正相关;乳腺癌实质FOXP3蛋白表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.05);乳腺癌间质浸润的FOXP3+淋巴细胞和乳腺癌实质FOXP3蛋白表达与乳腺癌的预后无关(P>0.05).结论 FOXP3+淋巴细胞可能在乳腺癌的免疫逃逸中发挥一定作用;FOXP3表达异常可能与乳腺癌的转移关系密切;FOXP3可作为评估乳腺癌生物学行为的一种潜在标记物.     

CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞在与原因不明反复自然流产的相关性研究

目的探讨外周血中CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr）在原因不明反复自然流产（URSA）发病中的作用。方法应用三色荧光标记流式细胞术检测21例原因不明反复自然流产妇女（URSA组）、20例正常妊娠妇女（正常对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr及T细胞亚群水平的表达情况。结果URSA组妇女外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr表达率为（1.36±0.61）%,明显低于正常对照组（5.59±1.02）%,两组比较差异显著（P（0.05）,但两组相比较外周血中T细胞亚群CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋水平无显著差异（P（0.05）。结论原因不明反复自然流产的发生可能与患者外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr数量减少有关。     

Wip1在非小细胞肺癌组织及细胞中的表达

目的： 检测肺癌组织和3种肺癌细胞中Wip1的表达水平,探讨肺癌中Wip1的表达水平与其各种临床病理特征之间的关系。方法: 利用实时荧光定量PCR检测44例肺癌及相应正常肺组织中Wip1 mRNA的表达,分析Wip1 mRNA表达与各临床病理参数之间的关系;利用实时荧光定量PCR的方法检测人肺腺癌细胞A549、人鳞癌细胞NCI-1299、人大细胞肺癌细胞NCI-H460和人正常支气管上皮细胞HBE中Wip1 mRNA的表达量,进行相对定量分析。结果: 44例非小细胞肺癌及相应正常肺组织均有Wip1 mRNA的表达,其中17例肺癌中Wip1 mRNA高表达,占38.6%,两者表达差异显著(ratio=2.1644±1.3940,P＜0.05);分化程度低的肿瘤细胞Wip1 mRNA表达量显著高于分化程度高者（P<0.05）。3种肺癌细胞中的Wip1 mRNA表达量显著高于正常支气管上皮细胞,差异显著(均P＜0.05)。结论: Wip1mRNA在非小细胞肺癌中过表达,可能与肿瘤发生有关,有望成为非小细胞肺癌基因治疗的新靶点。Wip1 mRNA在非小细胞肺癌中的表达与肿瘤细胞分化程度有关,可能成为确定肿瘤恶性程度的分子生物学参考指标。     

CD133与SLC7A11在NSCLC中的表达及其与病理特征的关系

目的 探讨CD133及SLC7A11在非小细胞肺癌（NSCLC）组织及邻近正常肺组织中的表达及临床意义。方法 选取2015年1月~2019年7月我院经病理科确诊的NSCLC组织标本42例,并选取病理证实无癌细胞浸润的邻近正常肺组织标本（距癌组织＞5 cm）30例,比较NSCLC组织和邻近正常肺组织中CD133和SLC7A11阳性率表达、CD133及SLC7A11阳性表达与临床病理的关系及其在NSCLC组织中共表达关系。结果 NSCLC组织中CD133、SLC7A11阳性率为57.14%、64.29%,高于邻近正常肺组织的10.00%、6.67%,差异有统计学意义（P＜0.05）。不同分化程度、淋巴结转移、TNM分期癌组织中CD133、SLC7A11阳性表达比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;不同性别、年龄、组织学类型癌组织中的CD133、SLC7A11阳性表达比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。24例CD133阳性表达中,有21例SLC7A11阳性表达;18例CD133阴性表达中,有12例SLC7A11阴性表达,CD133、SLC7A11在NSCLC中的表达呈正相关（r=0.532,P＜0.05）。结论 CD133、SLC7A11在NSCLC中的高表达与癌组织的恶性行为及患者较差预后密切相关,对NSCLC早期诊断和靶向治疗具有重要意义。     

Organ-specific endoglin (CD105) expression in the angiogenesis of human cancers

Some markers of angiogenic endothelial cells are emerging as targets for cancer therapy. The present study compared the expression of CD105 with that of other endothelial markers in cancers from various organs. Surgically resected cancer tissues from 188 patients comprising brain (n = 17), lung (n = 38), breast (n = 30), stomach (n = 30), colon (n = 31), liver (n = 32), and kidney (n = 10) cancers were immunohistochemically analyzed on tissue microarrays using a panel of eight endothelial markers. CD31 was expressed in vascular endothelial cells in cancer lesions as well as in non-cancerous areas (30-100%) in all core tissue samples. CD105 expression was intense and restricted to capillary endothelial cells in cancer lesions (>73%). In contrast, positive expression of CD105 was seen in <20% of non-cancerous areas in the same organs. However, no significant difference in CD105 expression in vascular endothelial cells between cancer lesions and non-cancerous areas from liver and renal cancer samples was found. Vascular endothelial growth factor (VEGF), Flt1, and Flk1 were also expressed, but only sporadically and in few samples (<30%), and transforming growth factor (TGF)-beta1 and TGF-betaRII were negative in vascular endothelial cells but generally positive in cancer cells. CD44 was strongly expressed in sinusoidal endothelial cells of the liver (90-100%). These results show that CD105 is expressed specifically in the tumor angiogenesis of brain, lung, breast, stomach, and colon cancers.     

CD44和NANOG在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义

目的:探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)中CD44及转录因子NANOG的表达及其临床意义。方法:用免疫组织化学法检测良性卵巢肿瘤和EOC组织中CD44及NANOG的表达,并对EOC中CD44和NANOG的表达水平做相关性分析。Western blot法检测不同浓度顺铂对卵巢癌SKOV3细胞中CD44及NANOG蛋白表达水平的影响。结果:CD44和NANOG在EOC中的阳性表达率均明显高于良性卵巢肿瘤组织(P0.01);EOC中CD44与NANOG的表达水平呈正相关(r=0.346,P0.01)。CD44在EOC中的阳性表达率与临床分期和淋巴结转移有关(P0.05),而与年龄、病理分级、病理类型和肿瘤位置无关;NANOG在EOC中的阳性表达率与病理分级和临床分期有关(P0.05),而与年龄、病理类型、淋巴结转移和肿瘤位置无关。顺铂可诱导卵巢癌SKOV3细胞中CD44和NANOG表达上调(P0.05)。结论:CD44和NANOG在EOC中高表达,且与EOC发生和发展有关。顺铂可诱导卵巢癌SKOV3细胞中肿瘤干细胞标记物CD44及胚胎干细胞多能性基因产物NANOG表达升高。肿瘤干细胞的产生可能是促进EOC发生、发展及化疗耐药的潜在机制。     

Sonic hedgehog mRNA及其蛋白在大肠癌的表达及其临床意义

目的 探讨大肠癌中Hedgehog信号通路相关基因Sonic hedgehog(SHH)的表达及其临床意义.方法 应用RT-PCR及免疫组织化学法(Envison二步法)检测本院2008年12月至2009年4月收集的43例大肠癌组织和距离癌10 cm以上的癌旁组织的SHHmRNA及蛋白的表达情况,并与20例非肠癌患者的正常大肠组织对照,分析其与大肠癌患者临床和病理各变量的相关性.结果 凝胶成像分析显示阳性表达的样本SHH mRNA片段大小为280 bp,与理论值相符,未表达的样本则未见相应条带.大肠癌组织SHHmRNA表达阳性率为27.9%(12/43),与癌旁组织的18.6%(8/43)差异无统计学意义(P＞0.05),但均显著高于正常大肠黏膜的0%(0/20)(均P＜0.05).SHH mRNA在大肠癌组织的表达强度显著高于癌旁组织(P＜0.05),在正常大肠黏膜则未见其表达.免疫组织化学显示SHH蛋白在大肠癌组织和癌旁组织均有阳性表达,细胞膜及胞质内出现棕黄褐色颗粒,背景不着色;正常大肠黏膜阴性表达.SHH蛋白在大肠癌组织的表达阳性率显著高于正常大肠黏膜[25.6%(11/43)比0%(0/20),P＜0.05],在大肠癌组织与癌旁组织、癌旁组织与正常大肠黏膜的表达阳性率差异则无统计学意义(均P＞0.05).SHH蛋白的表达强度大肠癌组织＞癌旁组织＞正常大肠黏膜(均P＜0.05).大肠癌组织中的SHH mRNA和蛋白表达强度与患者的年龄、性别、临床分期、肿瘤部位、肿瘤浸润深度、病理分型等变量均无明显关系(均P＞0.05).结论 SHH mRNA和蛋白在大肠癌组织中表达显著增强,但与临床和病理各变量无关联.     

肿瘤干细胞表面标记物CD44在胃癌组织中的表达及意义

BACKGROUND:Studies have shown that CD44 expression is closely associated with malignant transformation of gastric cancer. OBJECTIVE:To study the expression of CD44 in gastric cancer tissues and its clinical significance. METHODS:Gastric cancer specimens from 94 cases of gastric cancer after surgery and normal gastric tissue specimens from 30 cases undergoing gastroscope examination were collected and detected using S-P method. The positive expression rate of CD44 protein in these two groups was compared, and the relationship between CD44 and prognosis was analyzed. RESULTS AND CONCLUSION:The positive expression rate of CD44 protein in the gastric cancer group (73%) was significantly higher than that in the normal group (3%) (P < 0.05). The positive expression rate of CD44 protein in gastric cancer patients was remarkably associated with TNM stage, differentiation degree, invasion depth and lymph node metastasis (P < 0.05). The 3-year survival rate of gastric cancer patients positive for CD44 protein was significantly lower than that of negative patients (P < 0.05). The higher TNM staging indicated the lower differentiation degree, and lymph node metastasis and CD44 positive expression were independent risk factors (P < 0.05). To conclude, the expression of CD44 protein is related to the clinical pathological features and prognosis of gastric cancer patients to some extents.     

整合素α6β1和CD44V4在卵巢上皮癌中表达及相关性分析

目的 通过检测上皮癌病理组织及正常卵巢组织中整合素α6β1和CD44V4表达情况,探讨其表达特点与临床病理特征的相关性。方法 收集2015年1月~2016年12月手术切除的20例正常卵巢组织、40例卵巢上皮良性肿瘤及65例卵巢上皮癌组织,利用免疫组织化学法检测整合素α6β1和CD44V4的表达水平,结合病理组织特征进行相关性分析。结果 卵巢上皮癌组织中整合素α6β1和CD44V4的表达水平显著高于正常卵巢及上皮良性肿瘤组织,差异有统计学意义（P＜0.05）,且在不同病理分期及分化程度的卵巢上皮癌组织之间的差异有统计学意义（P＜0.05）;但在不同组织学分型病理组织中差异无统计学意义（P＞0.05）;α6β1和与CD44V4在卵巢上皮癌组织中的表达存在明显正相关（r=0.599,P＜0.05）。结论 整合素α6β1和与CD44V4在卵巢上皮癌组织中高表达且有相关性,可作为卵巢上皮癌发展的分子标志物。     

eIF3S10在肺癌组织中的表达及与化疗反应的关系

目的:研究eIF3S10在肺癌中的表达及其与化疗反应的关系,探讨其在肺癌预后中的作用。方法:收集在湖南省肿瘤医院治疗的31例支气管纤维镜检肺癌组织和20例肺良性病变组织及10例肺癌边缘正常组织的石蜡组织切片。采用免疫组织化学技术检测eIF3S10蛋白在肺癌组织、肺良性病变组织和正常肺组织中的表达,并分析eIF3S10表达水平与患者化疗敏感性的关系。结果:肺正常组织和肺良性病变组织中eIF3S10阳性率分别为30%和15%,而肺癌组织中eIF3S10的阳性率达61%。eIF3S10表达水平与化疗敏感性存在一定相关性。结论:肺癌组织中有eIF3S10过表达,而肿瘤组织eIF3S10表达过高可能提示患者对化疗反应敏感。