被动吸烟致IUGR幼鼠小脑皮质NGF基因表达的改变

目的　了解宫内发育迟缓 (IUGR)幼鼠脑发育过程中神经生长因子 (NGF)在不同阶段的变化 ,探索IUGR时脑损伤的发生机制。方法　采用孕鼠被动吸烟的方法建立IUGR幼鼠动物模型 ,用免疫组化染色检测IUGR幼鼠出生时及生后第 8天时小脑皮质NGF的变化。结果　①IUGR幼鼠出生体重较正常对照组脑重降低 16 1%± 0 3 2 % (3 49g± 0 2 4g ,P <0 0 0 0 1) ;②IUGR幼鼠出生时脑重较正常对照组脑重降低 (0 15 6g± 0 0 12 g ,P <0 0 5 ) ;③IUGR幼鼠生后第 8天体重与正常对照组无差异 (P >0 0 5 ) ,但脑重与对照组有差异 (0 487g± 0 0 40 g ,P <0 0 5 ) ;④IUGR幼鼠出生时小脑皮质NGF蛋白较正常对照组降低 (P <0 0 0 5 ) ,且在生后第 8天仍有差异 (P <0 0 5 ) ,与脑重改变一致。结论　IUGR幼鼠脑发育落后的发生可能与脑NGF基因表达下降有关 ,并且NGF的降低持续时间长 ,在 8d以上。同时发现 ,IUGR幼鼠体格发育存在追赶性生长 ,而脑发育迟缓不易恢复     

香猪胚胎宫内心电和标准肢体导联心电图时域模型

本建立了小型香猪宫内胚胎心电模型。结果显示：30只妊娠38-48天的胚胎宫内记录的心率为88.5±27.9bpm,R波电压幅度为0.32±0.18mv。保留胎盘血循环，标准肢体导联记录的心率为84.8±29.3bpm,R波电压幅度0.43±0.21mv。该模型为物理因子致香猪胚胎急性受损的研究奠定了基础。     

胎儿宫内发育迟缓(IUGR)动物模型研究进展

胎儿宫内发育迟缓（Intrauterine growth restriction,IUGR）是一种危害胎儿生存质量的严重并发症,病因复杂多样。胎盘功能紊乱是引起IUGR的主要原因之一,但是其发病机制和带来的影响还不清楚,治疗及预后较差。建立与人类临床病理特征相似的IUGR动物模型是研究其发病机制及寻求有效治疗方法的有效途径。本文主要介绍了建立IUGR模型的自然选择法、手术摘除子宫肉阜法、被动吸烟法、营养不良法、子宫动脉结扎法等方法及其效果。     

胎儿宫内窘迫动物模型的建立

目的：建立经济实用的胎儿宫内窘迫动物模型。方法：利用35只20天胎龄的胎鼠，钳夹进入每个胎盘的分支血管，共15分钟，然后松开血管夹，恢复血流，对胎鼠断头处死后进行显微镜检查和测定脑细胞内外钙、钠、钾含量。结果：再灌注15分钟后处死而进行显微镜检查的全部25只胎鼠脑组织均显示结构紊乱，间质和星形细胞水肿，以及神经细胞变性，6／25只（24％）出现神经细胞坏死，7／25只（28％）脑出血。另10只胎鼠在再灌注30分钟后处死进行Fura－2AM法检测，结果显示脑细胞内出现钙超载。结论：此模型可以较好地用于胎儿宫内窘迫脑损害的进一步研究。     

胎儿宫内心脏介入手术动物模型的建立

目的通过动物实验模拟人类胎儿宫内心脏介入手术过程,对介入手术方法学及相关问题进行研究,以推动人类胎儿严重心血管畸形介入手术临床实践。方法以8只中后期双胎妊娠黑山羊为研究对象,在超声引导下经皮/子宫穿刺胎羊左心室,并在主动脉瓣水平模拟人类主动脉瓣球囊扩张术,从而建立胎儿宫内心脏介入手术动物模型,从动物准备、术中胎羊体位、穿刺部位选择、介入技术要领、超声使用、胎羊保温、胎盘脐带保护等方面进行探讨总结。结果因胎羊术中死亡或术后被处死,术后处死2只孕羊,另6只孕羊术后存活,继续怀孕直至自然分娩,早产、足月产各3胎,无伤口感染、绒毛膜羊膜炎等发生,孕期及产后母羊情况良好。16只胎羊中8只胎羊施行了宫内心脏介入手术;术中死亡/处死4只胎羊,体质量(1.77±0.14)kg,红细胞压积29%～33%,早产存活5只,体质量(2.15±0.23)kg,红细胞压积27%～35%,足月产6只,体质量(2.41±0.19)kg,红细胞压积37%～41%,施行/未施行介入手术的胎羊/新生羊之间无明显差异。病理解剖发现施行手术的8例胎羊/新生羊胸壁穿刺点均位于左侧心前区,心脏进针部位在左室心前区近心尖部位6例,近流出道1例,近室间隔1例;4只少量心包积液(1～2.5mL),1只心包积液5mL,3只未发现心包积液;除1只胎羊有室间隔穿刺伤外,其余胎羊心内膜、瓣膜、腱索、乳头肌及主动脉内膜均未发现损伤;未发现肺、肝等胸腹腔脏器穿刺损伤;均未发现心包、胸腔感染迹象。结论胎儿心脏介入手术动物模型成功建立。其经验值得人类胎儿心脏介入手术关注和借鉴。     

局部脑缺血食蟹猴动物模型的建立

目的:构建局部脑缺血食蟹猴动物模型,从而为局部脑缺血的研究提供必要的条件.方法:选择10只健康的食蟹猴,采用血管介入法从股动脉插管,将微导管超选至大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)M1分支,注入自体血栓堵塞其血管、阻断其血流.结果:栓塞后,通过数字影像血管造影系统(DSA)照影MCA M1分支血管显影不良;栓塞1 h后CT灌注成像可见急性局部脑缺血病灶;48 h后进行CT平扫可见低密度陈旧性局部脑缺血病灶.对2例尸体进行解剖,取出大脑组织TTC染色呈阳性;其余动物清醒后均表现出不同程度的脑缺血症状与体征.结论:用超选MCA自体白色血栓可建立稳定的猴局部脑缺血模型,因该动物模型是目前最接近临床病例的模型,对脑卒中的发生发展机制的研究、诊断及治疗,特别是溶栓治疗有着切实的临床前期应用价值.     

建立胎羊肾积水动物模型的宫内手术方法

 【目的】 建立胎羊单侧输尿管梗阻性肾积水的动物模型,并探讨其宫内手术的方法&#65377;【方法】 取12只单胎妊娠2.5个月的山羊在右侧卧位静脉麻醉下进行宫内手术&#65377;F6 “C”形硅胶环环套胎儿左侧输尿管上段以造成输尿管不全梗阻&#65377;【结果】 12只孕羊中有3只分别于术后第3&#65380;7&#65380;22天流产;2只早产;7只术后足月顺产&#65377;除术后第3天流产的胎羊外,其余胎羊及羔羊均有左肾积水形成&#65377;【结论】 对山羊单胎妊娠中期胎羊进行宫内手术建立胎儿单侧输尿管梗阻性肾积水的动物模型是可行的&#65377;成功的手术方法包括:熟悉山羊妊娠期宫内解剖,选择合适的体位和子宫切口,避免胎盘和尿囊损伤,以及保护羊水和胎羊&#65377;     

建立胎羊肾积水动物模型的宫内手术方法

【目的】建立胎羊单侧输尿管梗阻性肾积水的动物模型,并探讨其宫内手术的方法。【方法】取12只单胎妊娠2．5个月的山羊在右侧卧位静脉麻醉下进行宫内手术。F6“C”形硅胶环环套胎儿左侧输尿管上段以造成输尿管不全梗阻。【结果】12只孕羊中有3只分别于术后第3、7、22天流产;2只早产;7只术后足月顺产。除术后第3天流产的胎羊外,其余胎羊及羔羊均有左肾积水形成。【结论】对山羊单胎妊娠中期胎羊进行宫内手术建立胎儿单侧输尿管梗阻性肾积水的动物模型是可行的。成功的手术方法包括：熟悉山羊妊娠期宫内解剖,选择合适的体位和子宫切口,避免胎盘和尿囊损伤,以及保护羊水和胎羊。     

慢性咽炎动物模型研究

为探索慢性咽炎动物模型的复制以供实验研究之用,根据慢性咽炎的临床诊断标准用氨水在咽部喷雾和松节油在其粘膜下注射的方法研制慢性咽炎的动物模型,并从症状体征,血液学,组织学及超微结构等方面进行了观察。     

FVB小鼠超排卵及胚胎冷冻技术的研究

目的为制备FVB转基因小鼠及保种繁殖提供最佳超排周龄及胚胎冷冻方法。方法对4—6周、6．8周、8．10周FVB小鼠进行超数排卵效果的比较及采用体外培养受精卵至2-cell法和输卵管吹卵法两种不同方法收集2-cell受精卵进行胚胎冷冻。结果4．6周雌鼠经超排后回收的受精卵（24．6个）明显高于6—8周龄、8—10周龄的FVB雌鼠（14．5个、16．2个），差异有显著性；两种方法回收的2-cell受精卵经冷冻保存后，Ⅱ组受精卵解冻后2-cell形态正常的胚数（106个）高于I组解冻后2-cell形态正常的胚数（90个），但两者无显著性差异。结论本研究将为制备FVB转基因小鼠及转基因动物的种系保存和繁殖提供了基础。     

移植性胰腺癌动物模型的建立和研究进展

胰腺癌发病隐匿,而且是一个早期转移、局部浸润、传统治疗不敏感的致命性疾病。建立适宜的人胰腺癌动物模型,可以为深入研究胰腺癌的发生发展、侵袭转移机制以及寻找新的治疗策略提供有效的手段。本文从理想的模型实验动物、3种不同的裸鼠移植性胰腺癌动物模型建立方法、人胰腺癌肝转移动物模型的研究进展等3个方面综述了国内外移植性胰腺癌动物模型的研究现状,并提出了不同研究目的应如何选用不同建模方法以及建立胰腺癌高肝转移模型的理论和实验进展。     

鼠疫动物模型:经典与问题

一直以来,鼠疫菌的研究多围绕致病机制、疫苗效果评价及鼠疫治疗方案选择展开,而合理有效的鼠疫动物模型正是这些实验研究的基础与前提.研究者构建了包括小鼠、豚鼠及非人灵长类模型在内的多种动物模型,而这些模型也为人类认识、防御及治疗鼠疫菌提供了帮助,特别是一些经典动物模型沿用至今.但随着研究的深入,有些动物模型由于存在某种问题而逐渐被淘汰.本文就鼠疫菌动物模型构建以来,不同模型的优势与不足及其应用展开综述,以期为研究者提供参考.     

维生素A缺乏胎鼠作为先天性心脏病动物模型的实验研究

目的　探讨将维生素Ａ缺乏（ＶＡＤ）胎鼠作为先天性心脏病动物模型的可行性。方法取１１－１９ｄ不同胎龄正常及ＶＡＤ胎鼠心脏经石蜡包埋、切片及 ＨＥ染色观察其发育情况。结果 １．实验组饲料含维生素Ａ（ＶＡ）７μｇ／１００ｇ，经ＶＡＤ饮食喂养后实验组大鼠血清ＶＡ水平明显低于对照组［（０．１６８±０．０５９）μｍｏｌ／Ｌ Ｖｓ（２．１８±０．２３）μｍｏｌ／Ｌ，ｔ＝３２．８８， Ｐ＜０．００１］。 ２．大鼠死亡百分比：饲养于屏障系统的ＶＡＤ大鼠死亡百分比较饲养于开放系统中的要低４．６倍（１０％ Ｖｓ ４５．８３％．ｘ ２＝１６．６４， Ｐ＜０．００１），对照组为０。 ３．实验组大鼠受孕百分比及每只孕鼠产仔数均低于对照组［５８．３３％ Ｖｓ ８１．５％， ｘ ２＝４．３７，Ｐ＜０．０５：（６．９７±２．７９） Ｖｓ（１３ ±１．０５），ｔ＝７．１６， Ｐ＜０．００１］。 ４．经切片观察１１～１５ ｄ胎龄胎鼠实验组心脏出现明显发育延迟的占３６．６７％， １６～１９ ｄ胎龄胎鼠实验组心脏畸形占４１．４３％，血管异常占１８．５７％。结论ＶＡＤ胎鼠可用来作为先天性心脏病动物模型，但需改进饲养环境以减少异常死亡。     

体外培养获得稳定高效胚胎干细胞滋养层的实验研究

目的筛选并优化获得稳定的胚胎干细胞（embryonic stem cells,ESCs）滋养层细胞的来源及其体外培养的最佳条件,为胚胎干细胞体外存活提供必要条件。方法分别取人工流产胎儿皮肤组织、昆明小鼠孕12.5、14.5、18.5d胚胎和新生鼠（P0）组织,分离培养原代胚胎成纤维细胞（embryonic fibroblasts,EFs）并传代制成滋养层。采用活细胞拒染法和免疫细胞化学染色等技术,观察并比较两种来源以及不同时相来源制备的滋养层细胞的功能状态差异。结果细胞活性状态：①人胚来源第1～5代成纤维细胞活性均好;但1～2代时杂细胞较多,此后可见深染色细胞逐渐增多。②E12.5d、E14.5d鼠胚来源的各代细胞均较同代E18.5d和P0来源的活性细胞数目高（P〈0.05）。以E14.5d第3～6代细胞最易培养存活。P0来源第6代与E14.5d来源同代细胞相比,深染变形细胞增多达30%。细胞分泌功能：①人胚来源第3～5代细胞I型胶原蛋白免疫阳性细胞数目少且染色较淡。②鼠胚来源的以E12.5d、E14.5d、E18.5d的第3～6代细胞免疫阳性细胞数目最多,且染色深;P0来源第6代细胞免疫阳性细胞染色深浅不一。结论采用人胚胎来源的成纤维细胞的活性尚可,但分泌功能稳定性欠佳。鼠胚E12.5～18.5d来源的第3～6代成纤维细胞,具有细胞活性强、分泌功能旺盛的特点,是作为胚胎干细胞赖以存活滋养层的最佳选择。     

转基因动物研究进展

转基因动物就是指通过人工的方法将外源基因导入动物染色体基因组,使之稳定表达并能遗传给后代的一类动物。目前制备转基因动物的方法主要有显微注射法,反转录病毒感染法,胚胎干细胞法等。转基因动物技术已广泛渗透于分子生物学、免疫学、生物制药、畜牧育种以及器官移植等研究领域中。本文通过对当前转基因动物的研究进展做出分析,以探讨当前转基因动物的发展方向和展望未来转基因动物的前景。     

建立卵巢过度刺激综合征大鼠模型的研究

目的构建卵巢过度刺激综合征(OHSS)的大鼠模型。方法32只未成年Wistar雌鼠,随机分为常规刺激组和过度刺激组。过度刺激组:22日龄Wistar雌鼠连续4天皮下注射含有10 IU PMSG的生理盐水0.2ml,至26日龄皮下注射含有30 IU hCG的生理盐水0.2ml。设立对照组为常规刺激组:24日龄Wistar雌鼠皮下注射含有10IU PMSG的生理盐水0.2ml,再予皮下注射含有10IU hCG的生理盐水0.2ml。测血E2水平,尾静脉注入美兰溶液30min后取腹腔灌洗液和卵巢,用分光光度计分别测定腹腔灌洗液和卵巢组织中的美兰含量来判断腹膜和卵巢血管通透性;比较两组间卵巢重量,血E2水平及卵巢、腹腔液中美兰含量。结果注射hCG 48h后,过度刺激组大鼠卵巢重量、血E2水平、腹腔液和卵巢中美兰含量均显著高于常规刺激组。结论利用适当日龄Wister大鼠可以成功构建OHSS动物模型。     

胎儿心电图对宫内缺血缺氧早期诊断的研究

胎儿宫内缺血缺氧是威胁胎儿生长发育及生命活动的重要原因之一。本文通过对１６４例经母体体表间接测出胎儿心电图的临床研究，不正常心电图５２例（占３１．７％），宫内缺氧及脐带因素为其主要原因。在各项异常心电图中，宫内缺氧可具有一项或两项以上异常，其中ＳＴ段改变更为敏感，应给予足够的重视，并积极治疗，以减少围产儿的窒息率，降低围产儿的死亡率。     

兔乳腺移植性鳞癌模型的建立及其生物学特征的观察

为乳腺癌的实验研究建立大动物模型,采用组织块移植法,将ＶＸ２肿瘤组织块移植于兔乳腺组织内,观察其生物学特征。结果显示移植成瘤率１００％,荷瘤兔平均存活时间为５８±１２天,肿瘤移植后４周出现肺和腋窝淋巴结转移。移植后１周肿瘤直径为４．６７±０．４７ｍｍ,８周为１６．２１±３．２９ｍｍ。病理组织学检查见肿瘤生长于乳腺组织内,其细胞形态结构与荷瘤种兔的ＶＸ２肿瘤细胞一致。兔乳移植性鳞癌模型具有稳定的生物学特征,它为乳腺癌的基础和临床应用研究提供一种大动物模型。