不同保存时间血浆胆碱酯酶水平变化的研究

目的观察血浆保存时间与血浆胆碱酯酶（ChE）水平变化，探讨重症急性有机磷农药中毒（AOPP）抢救中的合理选择应用。方法随机选择健康志愿者20名采集血浆标本，每人分做13份，一份作为普通血浆于采集当天测定ChE值作为对照，后放置4℃冰箱保存并每天测定1次，连续测定7d；其余12份于采集血浆后立即放入一80℃冰箱速冻，-20℃冰箱保存，即制作成新鲜冰冻血浆。并每月检测ChE 1次，连检12个月。结果①普通血浆除保存1d时ChE与对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05）外，余皆显著低于对照组（P〈0．05），示保存天数与ChE值呈负相关（r=-0．792，P＜0、01）；②新鲜冰冻血浆随保存时间延长，ChE水平有所波动，但10个月内无明显下降，与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0．05）。结论血浆ChE随保存时间延长而逐渐下降，在抢救重症AOPP患者时，应选用保存10个月以内的新鲜冰冻血浆为宜。     

新鲜冰冻血浆融化后4℃冰箱放置不同时间凝血因子、离子、PH值的变化观察

血浆是血液成分中的一种副产品，有新鲜和普通之分。新鲜冰冻血浆是血液采集后6小时内分离制备出来，迅速放置-56℃冰箱快速冰冻成块。其后放置-30℃冰箱保存，保存期为1年；有文献报道这样保存的血浆几乎含有全部的凝血因子，包括不稳定因子FV和FVⅢ，而普通血浆则不含其不稳定的凝血因子，可保存5年。新鲜冰冻血浆可应用于凝血因子缺乏，肝功能衰竭，大量输血，弥漫性血管凝血等疾病。     

关于使用新鲜冰冻血浆的报道

近年来,国内外对新鲜冰冻血浆的使用越来越广泛,因此,有必要对其正确使用作一介绍。新鲜冰冻血浆是指新鲜液体血浆制备后,立即在-25℃以下冰箱冻结保存,最好在乙醇干冰溶液中直接冰冻,然后放入-18℃或更低温度的冰箱内保存。     

探讨影响新鲜冰冻血浆FⅧ：C的主要因素

目的研究影响新鲜冰冻血浆（FFP）FⅧ：C的因素，为确保FFP质量，提高临床疗效提供参考依据。方法对新鲜液体血浆（FLP）速冻前在室温放置不同时间、不同储存温度、FFP溶化后在4℃不同放置时间的FⅧ：c进行检测。结果①在室温放置2h、4h后的FFP较0时FⅧ：C有动态下降趋势，差异有统计学意义（P〈0.05）。②FFP在-50℃、-30℃、-20℃冰箱中保存FⅧ：C与FLP比较差异无统计学意义（P〉0.05）。③FFP融化后，FⅧ：c随时间的改变而有明显的降低，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论FFP是临床常用的一种血液成分，为了确保FFP质量、维持FⅧ活性水平、提高临床疗效，在FFP制备过程中应尽擐缩短FLP在窀温的停留时间，保证在采血后6h-8h内放入-50℃冰箱速冻成块，然后再于-30℃以下冰箱保存，并且FFP一经融化，应尽可能立即输注。     

新鲜冰冻血浆血液凝血因子检测结果与分析

新鲜冰冻血浆（fresh frozen plasma，FFP）是自血液采集后6～8h之内经分离放入-50℃速冻成块，然后在-30℃保存1y，其几乎含有全部凝血因子，包括不稳定因子Ⅴ和Ⅷ。然而，血液凝血因子易受血液采集、血浆制备、血液储存和运输等诸多环节的影响而失活，导致血液疗效的降低。并由于新鲜冰冻血浆仍是目前临床预防和治疗出凝血功能障碍的重要制品之一，所以，了解和掌握FFP中血液凝血因子的含量及活性就显得极为重要，     

探讨影响新鲜冰冻血浆FⅧ：C的主要因素

目的研究影响新鲜冰冻血浆（FFP）FⅧ：C的因素，为确保FFP质量，提高临床疗效提供参考依据。方法对新鲜液体血浆（FLP）速冻前在室温放置不同时间、不同储存温度、FFP溶化后在4℃不同放置时间的FⅧ：c进行检测。结果①在室温放置2h、4h后的FFP较0时FⅧ：C有动态下降趋势，差异有统计学意义（P〈0.05）。②FFP在-50℃、-30℃、-20℃冰箱中保存FⅧ：C与FLP比较差异无统计学意义（P〉0.05）。③FFP融化后，FⅧ：c随时间的改变而有明显的降低，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论FFP是临床常用的一种血液成分，为了确保FFP质量、维持FⅧ活性水平、提高临床疗效，在FFP制备过程中应尽擐缩短FLP在窀温的停留时间，保证在采血后6h-8h内放入-50℃冰箱速冻成块，然后再于-30℃以下冰箱保存，并且FFP一经融化，应尽可能立即输注。     

临床应用新鲜、普通冰冻血浆体会

随着成分输血在临床的广泛应用，血浆输注比例在逐年提高，逐步提高人们对新鲜、普通冰冻血浆的认识，共同促进输血事业健康发展。 1新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆 新鲜冰冻血浆是全血采集后6h之内经4℃离心将血浆分离，并迅速放入-20℃或更低的温度下冰冻保存，即为新鲜冰冻血浆，保存期1年。     

用混合正常血浆作PT、TT、APTT质控物探讨

目的:探讨用混合正常血浆是否能作为日常工作的室内质控物。方法:用健康人血浆40份混合后分装在加盖小塑料试管中,置于-18~-20℃(冰箱冷冻室)中保存。每天从冰箱冷冻室取出1管置于37℃水浴中溶化后,随同进口质控物检测40 d。结果:分别得出PT、TT、APTT值,与进口质控物作比较,其差异无显著性;20 d内TT、PT、APTT均无显著性差异。结论:混合正常血浆与进口质控物无明显差异,保存-18~-20℃(冰箱冷冻室)内20 d最佳,不超过30 d。     

不同温度下3种血液制剂中FⅧ活性分析

目的了解新鲜冰冻血浆、亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆和冷沉淀融化后在不同环境温度中FⅧ活性变化情况。方法随机选取储存于-20℃以下1年内的新鲜冰冻血浆、病毒灭活血浆和冷沉淀置于融浆机中融化后,分别于0、2、4、8和24 h检测3种血液制剂中FⅧ活性[检测标本分别置于(4±2)℃冰箱和20℃恒温水浴箱中保存]。结果融化后(0 h)3种血液制剂的FⅧ的活性分别为(125.8±5.6)、(75.4±3.5)和(58.4±4.2),其中新鲜冰冻血浆中FⅧ活性明显高于亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆和冷沉淀(P0.001);保存于(4±2)℃和20℃中的3种血液制剂FⅧ活性在24 h后分别为(76.3±5.1)、(39.1±2.9)、(35.1±3.7)和(60.3±4.1)、(35.2±3.0)、(31.7±4.6),其活性均明显下降(P0.001)。结论 3种血液制剂中新鲜冰冻血浆中的FⅧ活性较高,且均随保存时间的延长而活性下降。建议在(4±2)℃保存融化后的血浆制剂,并尽快输注(最好在8 h内输注)。     

PT、TT、APTT自制质控血浆稳定性的探讨

目的探讨用自制正常对照血浆是否能作为日常工作的室内质控物。方法用健康人血浆40份混合后分装在加盖小塑料试管中，置于-18～-20℃(冰箱冷冻室)中保存。每天从冰箱冷冻室取出1管置于37℃水浴中溶化后．随同当日凝血象标本检测。结果分别得出PT、TT、APTT值，与正常血浆作t检验比较得出：20d内TT、PT、APTT均无显著性差异，30d内除了TT有非常显著性差异外．其余均无显著性差异，而保存40dAPTT有显著性差异，PT、TT有非常显著性差异。结论自制正常对照血浆保存-18～-20℃(冰箱冷冻室)内20d最佳．不超过30d。     

新鲜冰冻血浆融化后不同保存时间及温度对凝血功能的影响

目的:探讨新鲜冰冻血浆融化后不同保存时间及温度下凝血功能的变化,为临床合理有效输注新鲜冰冻血浆提供理论依据。方法:留取新鲜冰冻血浆40例,在融浆机37℃25 min融化后均分为2份,1份于(4±2)℃条件下保存,另1份于(25±2)℃条件下保存,所有样本在融化后0、4、24、48和72 h分别进行血栓弹力图检测,同时进行凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ活性以及APTT和PT检测,并对每份样本进行需氧菌和厌氧菌血培养。结果:新鲜冰冻血浆融化后在4℃和25℃保存72 h后均能形成稳定血凝块,且无细菌生长,反应凝血因子活性及血凝块特性的ACT和TMA在保存4、24、48和72 h时间点与0 h相比均存在显著差异(P0.05),但同一保存时间点的两个不同温度间无差异。新鲜冰冻血浆融化后保存48和72 h时凝血因子Ⅴ活性水平在4℃与25℃之间存在显著差异(P0.05),25℃温度保存时活性衰减比4℃温度保存时快。结论:新鲜冰冻血浆融化后保存72 h时虽然有部分凝血因子活性的衰减,但仍能形成稳定血凝块,临床血浆输注过程中融化后保存72 h的血浆可用于临床患者凝血因子的补充,尽量避免血液成分的浪费。     

标本保存方法和时间对促肾上腺皮质激素检测的影响研究

目的探讨标本的不同保存方法和时间对促肾上腺素皮质激素(ACTH)检测结果的影响。方法试验分3组。1组采集自愿者的乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝血标本2例,将离心血浆分别放置4℃冰箱及室温(20±5)℃保存,在不同的时间点取出标本进行检测;1组采集自愿者的EDTA抗凝血标本21例,每7例标本分别在冰浴、4℃冰箱及室温条件下保存,在不同的时间点进行离心,检测血浆ACTH;1组采集自愿者的EDTA抗凝血标本2例,将标本离心后,放4℃冰箱及室温条件下保存,在不同时间点取出一定量上层血浆进行ACTH检测。结果血浆标本、不同时间点离心的标本、离心后在不同时间点检测的标本,在不同时间点及不同保存方法组间检测结果在24h内变化差异无统计学意义(P0.05)。结论 EDTA抗凝标本检测ACTH时,标本室温或4℃冰箱放置时,在24h内检测结果变化相对稳定。     

温度控制与血液质量的关系探讨

目的　了解血液采集后到进入冰箱冷藏保存这段时间的温度及时间长短对血液保存时效和血液质量的影响。方法　存放在不同温度不同时间的血液 ,测定FHb、GlupH、K+ ,再转放入 4℃冰箱中 ,于保存 3、6、9、12、15、18、2 1d测定FHb、GlupH、K+ 的含量变化。结果　 16℃以下温度时放置时间对血液保存的质量影响不大 ,但随着温度升高 ,放置时间延长 ,其对血液保存时效及血液质量有明显影响。结论　为提高血液质量 ,保证安全输血 ,应积极提倡冷链。     

保存人红细胞的新策略一抗氧化剂保养液保存效果的研究

塑料血袋盛义务献血员的静脉血（含适量保养液）并置4℃冰箱保存。在保存前、后不同时间检查各项指标,旨在研究抗氧化剂保养液延长人血红细胞在4℃条件下的保存时间,以缓解血液保存供应的压力,为输血抢救创造有利条件。实验分3组：ACD组,GMA组和抗氧化剂（SOD）组）。研究结果表明,在4℃条件下保存75天后SOD组红细胞血红蛋白回收率为87．2％,血浆血红蛋白（mg/L)为193．2,P50（mmHg)为34．0（正常值为33．1）,最大变形指数（DImax）为0．2413,即为正常值的74．3％,外观检查无明显溶血、变色、气泡和凝块。结论提示,用抗氧化剂保养液保存红细胞在4℃条件下可延长75天,其红细胞血红蛋白和血浆血红蛋白回收率附合国家《血站基本标准》规定要求。     

新鲜冰冻血浆保存期中胆碱酯酶水平变化

目的为应用新鲜冰冻血浆置换治疗重症有机磷农药中毒(AOPP)提供检测数据。方法随机选择志愿供血者10名,按《输血技术操作规程》留取新鲜冰冻血浆标本,每月检测胆碱酯酶(CHE);同时以新鲜血浆测胆碱酯酶作对照。结果新鲜冰冻血浆随保存时间延长,胆碱酯酶水平有所波动,但半年内活力无明显下降。结论抢救重症有机磷中毒患者过程中应用新鲜冰冻血浆能提供高活性胆碱酯酶。     

4℃冷藏保存血小板对体外大失血模型的纠正效果

目的探讨4℃冷藏保存血小板对体外大失血模型的纠正效果。方法手工汇集(10人份)血小板200mL等分为2×100 mL,分别于4℃冷藏保存和22℃振荡保存,共计制备5×200 mL,等分后放置4℃冷藏冰箱和22℃血小板振荡保存箱。采用血液稀释法(全血∶盐水=1∶9)制备体外大失血模型,应用TEG检测指标及血常规等指标对比、评价悬浮红细胞、新鲜冰冻血浆与4℃冷藏保存血小板(简称4℃血小板)或22℃振荡保存血小板(简称22℃血小板)按1∶1∶1比例对体外大失血模型的纠正效果。结果保存1、3、5 d时,4℃血小板组和22℃血小板组在对相同血样制备的体外失血模型纠正,Plt(×109/L)从20-27分别升至127-161 vs 128-160(P0.05),TEG-MA值(mm)由12.7-14.4分别升至45-51 vs 47-50,TEG-R值(min)由27.7-9.9分别升至4.4-4.3 vs 4.5-4.7(P0.05)。保存7-14 d,4℃血小板组:Plt(×109/L)由18-27纠正到162-161,TEG-MA值(mm)由8.8-14.5纠正为46-43,TEG-R值(min)由24-13纠正为5.5-5.2(P0.05)。结论按悬浮红细胞、新鲜冰冻血浆和4℃冷藏保存血小板作用于体外大失血模型达到了纠正效果,佐证了4℃冷藏保存10-14 d的血小板具有良好的止血效果。     

供血者血液冰冻于-20°～-25℃贮存解冻后能存活35天

本文报道了应用标准血库设备和相互连结能互通的塑料袋盛装供血者红细胞,以甘油和右旋糖的混合物作冷冻保护剂,能冰冻贮存于市售冰箱内,在-20°～-25℃温度范围内保存至少6个月.解冻后加入添加剂,使红细胞悬浮,将此红细胞放置于4-6℃冰箱内能保存达35天.该方法适宜于常规临床输血.方法:采集450ml血液于塑料袋系统(5个塑料袋相互连结,能互通)的袋1(内含63ml枸橼酸盐-磷酸盐和277mmol/L葡萄糖作抗凝剂),700×g离心10分钟,将血浆通过虹吸管压入另一容量为400ml的袋5,如不再需要可将此袋密封后分开.袋2装有致冷剂     

不同冻存时间与温度对兔骨髓基质干细胞存活率的影响

目的：以二甲基亚砜作为保护剂，采用慢冻快融法观察不同温度及不同时间冻存的免骨髓基质干细胞复苏后存活率的变化。 方法：实验于2003-09／2005—06在浙江省医学科学院生物工程所完成。①选取清洁级3月龄新西兰大白兔5只，抽取兔髂骨及胫骨的骨髓液，密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化出兔骨髓基质干细胞，并进行增殖。②取第3代骨髓基质干细胞，经消化后离心重悬，用完全培养液调整细胞浓度为6&;#215;10^9L^-1。将质量浓度为250g／L的二甲基亚砜缓慢滴入同体积含骨髓基质干细胞的上述培养液中，混匀，二甲基亚砜的终浓度为125g／L，骨髓基质干细胞的终密度为3&;#215;10^9 L^-1，1mL／安瓿冻存。③4℃冻存直接将安瓿置4℃冰箱中；-20℃及-60℃冻存，则将安瓿置于有脱脂棉的聚丙烯泡沫盒中，壁厚1．5cm，扎紧密封，各置-20℃及-60℃冰箱过夜，取出后分别直接放于-20℃及—60℃冰箱保存；-196℃液氮冻存，则将置有安瓿的泡沫盒于-60℃冰箱过夜后，取出冻存安瓿直接放于液氮中保存。骨髓基质干细胞分别于4℃、-20℃、-60℃、-196℃条件下进行3d，10d，1，3，8个月以及1年的冻存。④经不同温度及不同时间冻存后，给予复苏。复苏时将冻存安瓿从液氮或冰箱中取出，立即置37℃水浴并轻轻摇动，约1min迅速解冻。含骨髓基质干细胞的冻存液经5倍于冻存液量的完全培养液稀释后，离心重悬，进行骨髓基质干细胞存活率测定。复苏后的骨髓基质干细胞以1&;#215;10^4／cm^2用完全培养液再培养，观察骨髓基质干细胞的形态变化及生长活性情况。结果：实验选取3月龄新西兰大白兔5只，全部进入结果分析。①兔骨髓基质干细胞原代培养情况：培养3d时，骨髓基质干细胞数量较少，散在分布，呈短梭形形态。培养1周时细胞形成大量的小集落，细胞变长。此后集落细胞迅速增多，逐渐汇合成片，形态为均一的长梭形，呈旋涡状排列，2周时细胞长成单层。②兔骨髓基质干细胞传代培养情况：刚传代的骨髓基质干细胞呈圆形，数小时后迅速贴壁，重新成为梭形。之后细胞呈长梭形均匀分布生长，形态比原代培养更均一，细胞生长旺盛、增殖迅速。连续传代22代无明显变化。但随传代次数增多，细胞形态出现多样性，逐渐呈老化现象。③不同温度不同冻存时间下复苏后的兔骨髓基质干细胞存活率的比较：兔骨髓基质干细胞液氮保存1年，存活率为79％；-60℃保存1，3，8个月的存活率分别为67％，38％和0％；不宜于4℃及-20℃保存。（少复苏后的骨髓基质干细胞再培养情况：复苏后的骨髓基质干细胞细胞形态及生长状况与冻存前无明显差异，呈长梭形生长，增殖旺盛。 结论：分离纯化的兔骨髓基质干细胞生长增殖能力强，短期保存可用-60℃冻存，长期需液氮保存，为择期进行骨髓基质干细胞实验和应用提供实验依据。     

全血保存24小时对血浆凝集因子的影响

背景 目前需要在全血采集后8小时内制备新鲜冰冻血浆,这是为了保持凝集因子活性。然而,这使大型血液中心制备新鲜冰冻血浆受到限制。有关CPD全血保存24小时影响凝血因子活性的资料不多。研究设计与方法 10名自愿供者每人采集全血500ml。在采集后1小时,离心分离血浆,并将每单位血浆等分为2份,1份在4℃(范围,1～6℃)保存,另1份22℃(范围:20～24℃)保存8小时。16小时后全在4℃保存。在采血后8小时、24小时,从每份血浆中取标本。所有血浆标本均置-18℃冰冻保存。检测因子Ⅴ、因子Ⅶ、因子Ⅷ及因子Ⅹ、纤维蛋白原、抗凝血酶Ⅲ、蛋白质C和蛋白S。结果 在保存的24小时,因子V、因子Ⅶ及因子Ⅹ、纤维蛋白原、抗凝血酶Ⅲ、     

032．去白细胞前延长全血保存时间对血浆中凝血因子的影响[英]／Kretzschmar E…／／VoxSang

背景和目的本研究的目的是为评估全血经聚亚安酯滤器过滤前不同保存时间的情况下，去白细胞全血制备去白细胞血浆的质量。材料和方法用联接有全血滤器的四联袋从48名自愿者供血者采集全血，于室温在过滤前保存1、2、6和18小时。采集5份标本：一份直接从供血者采集、一份采血后立即采集、过滤前后各采1份以及血浆冰冻前采集一份。