原花青素对β-淀粉样肽（25—35）诱导PC12细胞bax和bcl-2基因表达的影响

目的探讨原花青素（Procyanidins，PC）对β-淀粉样肽（25-35）（hi325弗）诱导凋亡PCI2细胞bax和bcl-2基因表达的影响。方法采用MTT比色法分析细胞存活率，Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变，RT—PCR检测bax和bcl-2基因mRNA表达，Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达。结果不同剂量PC预处理PC12细胞1h，可剂量依赖性对抗Aβ25-35引起的细胞凋亡，增加细胞存活率，减少Aβ25-35引起的细胞核固缩、核碎裂，降低baxmRNA及Bax蛋白表达，增加bcl-2mRNA及Bcl-2蛋白表达。结论PC可剂量依赖性对抗Aβ25-35诱导的PCI2细胞凋亡，其机制可能与下调凋亡基因bax和上调抗凋亡基因bcl-2表达有关。     

羟基磷灰石纳米粒子诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡后bcl-2和bax表达的变化

目的探讨凋亡相关基因bcl-2和bax在羟基磷灰石（HAP）纳米粒子诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡后表达的变化。方法采用免疫组化法检测bcl-2蛋白和bax蛋白表达。结果不同浓度的HAP纳米粒子处理细胞24、48、72h后bcl-2蛋白的表达降低，bax蛋白的表达升高，与对照组比较均有显著性差异，并且均呈现时间和剂量依赖性。结论。HAP纳米粒子诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡，与凋亡调控基因bax表达增强、bcl-2表达减少有关。     

刚地弓形虫感染对孕鼠细胞凋亡的影响

目的 探讨刚地弓形虫对孕鼠胎盘细胞凋亡及其相关基因bax、bcl-2表达的影响。方法 建立刚地弓形虫感染的孕鼠模型，采用胎盘组织压片及病理切片，观察胎盘组织的损伤情况；采用DNA缺口末端标记技术（TUNEL）检测胎盘细胞的凋亡情况；采用免疫组织化学法（SP法）观察细胞凋亡调控基因bax和bcl-2在胎盘细胞中的表达。结果 与对照组相比，随着感染时间的延长，感染组胎盘组织压片中可见弓形虫虫体逐渐增加，HE染色可见有大量的淋巴细胞浸润及凋亡小体；TUNEL证实感染组胎盘滋养层细胞凋亡显著增强（P〈0．05）；免疫组织化学结果显示，感染组胎盘滋养层细胞凋亡相关基因bax表达显著增强、bcl-2表达减弱（P〈0．05）。结论 刚地弓形虫侵入胎盘组织，可通过上调滋养层细胞bax基因表达，下调bcl-2基因表达而诱导胎盘滋养层细胞凋亡增加，从而影响胎盘组织结构和功能，导致不良妊娠。     

大肠腺瘤中细胞凋亡和增殖相关基因的表达与意义

目的：探讨大肠腺瘤中细胞凋亡和增殖相关基因的表达与意义。方法：用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的TUNEL法缺口末端标记和免疫组化技术，检测45例大肠腺瘤组织细胞的原位凋亡（AI）、原位增殖（KI）及bcl-2、bax基因表达；并设立20例正常大肠粘膜和40例大肠癌为对照组，探讨细胞凋亡和细胞增殖在大肠癌早期发生中的作用。结果：正常结肠粘膜有少量的bcl-2、bax和ki－67（用KI表示）表达及少量凋亡细胞存在，但无异常表达。大肠腺瘤中bcl-2表达和KI明显增加，与正常组相比P均＜0.05；AI和bax表达轻度增加，与正常相比P＜0.05。bax与AI表达呈正相关（P＜0.01），bcl－2和bax及AI呈负相关。大肠癌中bcl-2表达和KI表达虽增加，但与腺瘤相比无统计学差异P＞0.05；大肠癌组织中AI和bax表达明显增加且与腺瘤组相比P＜0.05。结论：大肠癌发生早期即腺瘤中就有细胞凋亡调控基因及增殖基因的表达异常，且以抗凋亡基因bcl-2和增殖基因表达占主导地位。该基因的表达异常可能是大肠癌发生的一个较早期分子标志；细胞凋亡增加和bax表达异常可能是大肠癌发生的一个相对较早期分子生物学事件。早期检测抗细胞凋亡基因和增殖基因，有助于对大肠癌早期发生的评估。     

氯化镧诱导脑胶质瘤SHG44细胞凋亡作用的机制

目的探讨氯化镧对人脑胶质瘤细胞株SHG44细胞诱导凋亡及其作用机制。方法体外培养人胶质瘤细胞，流式细胞仪、电镜检查细胞周期和超微结构的改变，原位杂交技术及免疫组化染色技术检测bcl-2、bax基因、蛋白表达情况。结果氯化镧能促进入脑胶质瘤SHG44细胞发生凋亡，明显增加G1期DNA含量，减少S期DNA含量。使bax基因、蛋白表达显著增强，bcl-2、bax基因蛋白表达显著减弱（P〈0．05）。结论氯化镧可抑制人脑胶质瘤SHG44细胞的生长，并促进其凋亡。     

复肝春6号抗H22肝癌作用机制的实验研究

目的探讨复肝春6号（FGC-6）抗肝癌作用机制。方法建立荷H笠肝癌小鼠模型，以DNA琼脂糖凝胶电泳观察FGC-6对肿瘤细胞诱导凋亡的作用，以Western blot检测肿瘤组织中bcl-2、bax基因的蛋白表达水平；制备FGC-6含药血清，观察其对体外培养H22细胞的增殖抑制作用。结果FGC-6可诱导肿瘤组织DNA片段化，琼脂糖凝胶电泳结果可见梯状条带出现；Western blot结果显示FGC-6使肿瘤组织中bcl-2基因表达量明显降低，而bax基因的表达水平却明显升高；FGC-6含药血清对体外培养H22细胞增殖有明显抑制作用。结论FGC-6的抗肝癌作用可能与调节bcl-2和bax基因的表达量，诱导肝癌细胞凋亡有关。     

促红细胞生成素预处理在心肌缺氧复氧损伤中对凋亡相关基因表达影响的研究

目的：观察促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）预处理在大鼠心肌缺氧复氧损伤（hypoxia/reoxygenation,H/R）中的抗凋亡效应以及对凋亡相关基因bcl-2及bax表达的影响。方法：Wistar成年雄性大鼠60只,分为2组,分别为对照组,EPO预处理组（EPO组）,每组30只,EPO组大鼠经腹腔注射5000U/kg重组人促红细胞生成素（Recombinant human erythropoietin,RHuEPO）,对照组注射同体积生理盐水。2组各15只大鼠于给药24h后,检测各项指标,其余15只大鼠置于常压缺氧环境中（O27%）12h后,移至常压常氧环境中2h,予H/R损伤,之后采取心肌标本,DNA末端转移酶标记法（TUNEL法）检测心肌细胞凋亡,免疫组化检测凋亡效应酶胱天蛋白酶-3（caspase-3）、凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2）及B细胞淋巴瘤/白血病相关x蛋白（Bcl-associated x protein,bax）蛋白表达水平,计算bcl-2/bax比值。结果：H/R损伤前2组心肌细胞凋亡率,caspase-3以及bax蛋白表达水平无显著性差异（P〉0.05）,EPO组bcl-2蛋白表达水平、bcl-2/bax比值显著高于对照组（P〈0.01）。H/R损伤后2组心肌细胞凋亡率,caspase-3、bax及bcl-2蛋白表达水平显著高于损伤前（P〈0.01）,而bcl-2/bax比值显著低于损伤前（P〈0.01）,EPO组的心肌细胞凋亡率、caspase-3蛋白表达水平显著低于对照组（P〈0.05,P〈0.01）,而bcl-2蛋白表达水平以及bcl-2/bax比值显著高于对照组（P〈0.05,P〈0.01）,2组bax蛋白表达水平差异无显著性（P〉0.05）。结论：EPO预处理在心肌H/R损伤中具有显著的抗凋亡效应;这一效应与其上调抗凋亡基因bcl-2的表达有关。     

三氧化二砷诱导小细胞肺癌细胞凋亡及p53、bcl-2基因表达的研究

目的：研究三氧化二砷（As2O3）诱导小细胞肺癌细胞凋亡及其机制。方法：采用末端脱氧核苷酰转移（TUNEL）法检测细胞凋亡，免疫组织化学（SABC）法分析As2O3对小细胞肺癌细胞（NeI-H细胞）p53、bcl-2基因蛋白表达的影响。结果：As2O30.5μmol/L、1.0μmol/L、2.0μmol/L作用72h，NeI-H细胞均可呈现凋亡所特有的亚G1峰，凋亡比率随药物作用浓度增加和作用时间延长而增高。实验组p53基因蛋白表达较对照组明显增多，药物浓度越高表达越多（P=0.001）；bcl-2基因蛋白表达较对照组明显减少，药物作用浓度越高表达越少（P=0.001）。结论：As2O3抗肿瘤作用主要是通过诱导细胞凋亡实现的，其机制与上调p53基因表达及下调bcl-2基因表达有密切关系。     

bax、bcl-2和caspase-3基因在肝星状细胞株HSC-T6中的表达

目的：研究灌服赤芍水提物后的犬药物血清作用于肝星状细胞株HSC-T6基因蛋白表达的变化。方法：采用乙醛造模后的肝星状细胞株HSC-T6细胞作为酒精性肝纤维化的体外研究模型；以赤芍水提物给彼格犬一次性灌胃．取给药后2小时的血清作为实验药物血清。以免疫细胞化学法检测药物血清对HSC—T6作用72小时后bax、bcl-2、caspase-33种基因蛋白表达情况，并与乙醛造模后的HSC—T6细胞相比较。结果：乙醛造模后的HSC-T5细胞中bcl-2的表达较正常培养组细胞增加，bax、caspase-3表达降低；药物血清作用后的HSC-T6细胞中bcl-2的表达较造模组的HSC-T6细胞显著降低，bax、caspase-3的表达较模型组细胞显著增加。结论：赤芍水提物入血后可能是通过bax、bcl-2、casoase-3等基因异常表达来实现对HSC-T6的抑制增殖及促进凋亡作用。     

灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及bax、bcl-2表达的影响

目的探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡及对bax和bcl-2 mRNA表达的影响。方法健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组（NC）、糖尿病组（DM）和灯盏花治疗组（EB）,EB组行灯盏花素20mg·kg^-1·d^-1腹腔内注射。给药后2周和6周处死,检测肾脏细胞凋亡、肾脏bax和bcl-2 mRNA的表达。结果与NC组比较,（1）DM组及EB组肾小管凋亡细胞数明显增多,且DM组高于EB组;（2）DM组肾脏bax、bcl-2 mRNA的表达显著增强,bax／bcl-2值明显升高;EB组与DM组比较bcl-2 mRNA表达增强,bax mRNA减弱,bax／bcl-2比值降低;（3）EB组及DM组体重下降,肾指数、肾小球面积、体积升高,且EB组较DM组体重增加,肾指数、肾小球面积、体积下降。血尿素氮、肌酐比较：DM组〉EB组〉NC组。结论灯盏花素可能通过影响凋亡相关基因bcl-2和bax的表达而抑制。肾脏细胞凋亡,从而发挥肾脏保护作用。     

培养神经细胞的氧自由基损伤及银杏叶提取物的治疗作用

目的 探讨氧自由基在Alzheimer病(AD)发病中的作用和评价银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract，EGb)的临床应用价值。方法 以产生超氧阴离子系统黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶(X／XO)作用于PC12细胞，并以EGb拮抗其作用，电镜观察细胞形态变化，MTF法检测细胞存活率，流式细胞术分析细胞凋亡情况，RT-PCR技术分析凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达变化。结果 经X／XO损伤后，细胞存活率降低，凋亡率增加，促凋亡基因Bax表达上调。EGb(20mg／L)能改善凋亡情况。结论氧 自由基可诱导神经细胞凋亡而促进AD发生，EGb对神经细胞有保护作用，提示可用于AD的临床治疗与预防．     

cAMP-induced apoptosis in granulosa cells is associated with up-regulation of P53 and bax and down-regulation of clusterin.

Evidence indicates that cAMP induces apoptosis in granulosa cells of rat and human ovary. The mechanism by which cAMP induces apoptosis is not known. This study was carried out to evaluate changes in expression of cell death promoters, P53 and bax, and cell death repressor, bcl-2, in cAMP-treated granulosa cells. Treatment of granulosa cells with forskolin (FSK), or 8-bromo-cAMP induced apoptosis as evidenced by internucleosomal DNA fragmentation and chromatin condensation as revealed by gel electrophoresis and fluorescent DAPI staining, respectively. The apoptotic effect of cAMP was accompanied by an increase in the expression of P53 and bax proteins as evaluated by Western blot and immunocytochemistry. No change in bcl-2 protein level was observed in cAMP-treated granulosa cells as compared to control. These data suggest that cAMP may activate apoptosis in granulosa cells by shifting the ratio of the death promoter to death repressor genes via alteration of P53 and bax expression. cAMP was also shown to inhibit gene expression of clusterin, an apoptosis-associated protein, suggesting a role for this protein in cAMP-induced apoptosis in granulosa cells. The data of the present study provide a basis for future studies to elucidate the molecular mechanism of follicular atresia and regulation of apoptotic cell death in ovarian follicles.     

神经生长因子对缺氧神经干细胞凋亡和分化功能的影响

目的探讨缺氧环境对培养的胎鼠大脑神经干细胞(neural stem cells,NSCs)凋亡和分化的影响及神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的作用。方法将培养至第3代的NSCs分为3组,对照组:正常培养;缺氧组:缺氧培养(5%CO2、90%N2);NGF作用组:缺氧培养同时加入NGF,分别培养3天。Western blot测定NSCsBcl-2、Bax蛋白含量;RT-PCR测定NSCs分化细胞bcl-2、bax和nse、nne、gfap基因表达。结果NSCs分化的第1、2、3天,缺氧组bcl-2较NGF作用组和对照组明显降低,bax明显增加(P<0.01);NGF作用组bcl-2在NSCs分化的第1、3天与对照组比较差异有显著性意义,bax在NSCs分化的第1、2、3天均无差异。缺氧组nse、nne表达在第1、2、3天均低于对照组和NGF作用组,gfap表达高于对照组和NGF作用组(P<0.01);NGF作用组与对照组比较,nse表达在第2、3天差异有显著性意义,nne表达在第1、3天差异有显著性意义,gfap表达在第2天差异有显著性意义(P<0.01)。结论缺氧可引起NSCs凋亡,NGF具有保护NSCs抗凋亡的功能。     

基质细胞衍生因子-1及其受体对大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的研究基质细胞衍生因子-1(SDF-1)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖与凋亡的影响。方法选用体外培养的大鼠主动脉VSMC,并分为正常对照组、ox-LDL组[动脉粥样硬化(AS)模型]、SDF-1组(AS模型+SDF-1)、SDF-1+12G5组(AS模型+SDF-1+CXCR4单克隆抗体)和12G5组(AS模型+CXCR4单克隆抗体),应用MTT法测VSMC细胞增殖,TUNEL法测细胞凋亡率,RT-PCR法测凋亡基因bax、bcl-2mRNA的表达。结果ox-LDL组的增殖率0.38±0.01,明显高于正常对照组0.28±0.02(P<0.01),明显低于SDF-1组0.44±0.02(P<0.01),与SDF-1+12G5组和12G5组比较差异无显著性(P>0.05);ox-LDL组的凋亡率24.2±2.4,高于正常对照组19.8±2.7和SDF-1组20.7±2.8(P<0.05),而与SDF-1+12G5组和12G5组比较差异无显著性(P>0.05);ox-LDL组bcl-2和bax的比值明显低于正常对照组和SDF-1组(P<0.01),而与SDF-1+12G5组和12G5组差异无显著性(P>0.05)。结论SDF-1可明显促进ox-LDL诱导的VSMC增殖,并抑制细胞凋亡;SDF-1及其受体CXCR4构成的生物学轴可能通过bcl-2/bax途径影响VSMC凋亡。     

双下肢缺血预处理对未成熟心肌细胞凋亡和相关凋亡蛋白表达的影响

目的　探讨双下肢缺血预处理对未成熟心肌细胞凋亡和 B淋巴细胞瘤 /白血病 2蛋白 (bcl- 2 )、bcl- 2家族 bax蛋白、神经生长因子 fas蛋白表达的影响。方法　采用兔离体心脏灌注 (L angendorff)模型 ,2 4只幼兔随机分为 3组 ,对照组 (C,n=8) :仅灌注重碳酸氢盐缓冲液 (KH) 180 min,然后取标本 ;缺血 /再灌组 (I/ R,n=8) :灌注 2 0 min后 ,停灌 4 5 min,复灌 12 0 min;双下肢缺血预处理组 (DL IP,n=8) ,反复 3次阻断双下肢血流 5 m in/放开 5 min,建立L angendorff模型 ,然后重复 I/ R组缺血 /再灌方法。以凋亡细胞原位标记与半定量分析、琼脂糖凝胶电泳检测 DNA片段梯及 bcl- 2、bax、fas基因蛋白的表达作为检查指标。结果　凋亡细胞原位标记与半定量分析 :DL IP组与 I/ R组比较 ,心肌细胞凋亡率明显减少 ;琼脂糖凝胶电泳检测 DNA片段梯 :DL IP组与 I/ R组比较 ,光密度明显增强 ;DL IP组与 I/ R组比较 ,bcl- 2表达明显增多 ,bax、fas表达明显减少。结论　 DL IP通过影响 bcl- 2、bax、fas基因蛋白的表达减少心肌细胞凋亡。     

重症肺炎时心肌bcl-2、bax基因表达及相关因素的实验研究

目的 研究重症肺炎的bcl-2基因和bax基因表达及其相关因素。方法 30只大鼠建立金葡菌肺炎模型、20只大鼠作对照，检测大鼠心肌细胞凋亡率、心肌病理积分、心肌细胞bcl-2、bax基因表达、心功能及血清脑钠肽，并分析其相互关系。结果 重症肺炎时心肌心功能降低者bcl-2基因及bax基因表达增加，bcl-2基因及bax基因表达与心肌病理积分、心肌细胞凋亡、脑钠肽呈正相关；bax基因表达与心功能呈负相关；bax基因与上述指标之间的相关性高于bcl-2基因。结论 重症肺炎可并发心衰，其发生机制与bcl-2基因及bax基因过度表达有关。     

Dynamic expression of apoptosis-related genes during development of laboratory hepatocellular carcinoma and its relation to apoptosis

AIM:To explore the expression of p53,bcl-2,bax,survivin and the cell apoptosis during the development of tree shrew hepatocellular carcinoma(HCC),the relationship between expression of these genes,its impact on HCC development,and its relation to cell apoptosis.METHONS:Tree shrew HCC was induced with aflatoxin B1(AFB1),and regular biopsy of liver tissues was carried out and the biopsy tissues were collected during cancer inducement.Liver biopsy tisue and HCC tissue were collected from 35pre-cancerous experimental animats at wk 30 and 60 and at the 30th_,60th_,and 90th-wk,Liver biopsy tissues were collected from 13 blank control animals at wk 30,60,and 90.Expression of p53,bcl-2,bax,and survivin at each stage was examined by immunohistochemistry method.Apoptotic cells were detected in situ by the terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick end labeling(tunel)technique.RESULTS:The apoptosis rate of normal hepatic cells was extremely low,whereas it increased during the formation of HCC.Expression of the apoptosis-related genes p53,bd-2,bax,and suvivin during the formation of HCC presented an increasing tendency.Expression of p53 did not noticeably relate to that of bcl-2,bax,and survivin,whereas expression of bcl-2 and bax was closely related.In HCC,p53 did not present a distinct relation to cell apoptosis,whereas its high level expression was probably related to liver cell proliferation.Survivin negetively correlated apoptosis index,and its overexpression could inhibit cell apoptosis.CONCLUSION:Apoptosis-related genes p53,bcl-2,bax,and survivin are all related to the occurrence of HCC.The anti-apoptosis effect of bcl-2 is influenced by bax,and ratio bcl/bax reflects more correctly the extent of cell apoptosis.