托吡酯对癫痫大鼠海马神经细胞凋亡的保护作用

目的 :探讨托吡酯 (TPM)对癫痫发作大鼠海马神经元凋亡的影响及其可能的机制。方法 :采用戊四氮致痫模型 ,大鼠癫痫发作后连续给予托吡酯 (80 mg· kg- 1 · d- 1 和 4 0 mg· kg- 1 · d- 1 ) ,共 14 d。以 TU NEL方法标记 DNA片段 ,原位检测海马 CA1和 CA3区的神经细胞凋亡。结果 :各组大鼠海马 CA1、CA3区均出现 TU NEL阳性细胞。对照组海马 CA1、CA3区 TUNEL阳性细胞数分别为 (35 .83± 4 .5 8)个和 (36 .83± 3.87)个 ;4 0 mg· kg- 1 · d- 1 托吡酯组分别为 (31.5 2± 3.4 3)个和 (32 .35± 4 .6 9)个 ;80 mg· kg- 1 · d- 1 托吡酯组为 (2 1.17± 3.0 6 )个和 (2 1.16± 3.87)个。 80 mg· kg- 1 · d- 1 托吡酯组与对照组比较存在极显著差异 (P<0 .0 0 1) ,4 0 mg· kg- 1 · d- 1 托吡酯组与对照组相比无显著差异 (P>0 .0 5 )。结论 :TPM对癫痫发作后神经元凋亡具有一定的保护作用。     

托吡酯在难治性癫痫中的应用

托吡酯是近年来使用的一种新型的抗癫痫药物 ,它具有多种作用机制 ,单一用药效果不佳 ,作为治疗难治性癫痫的添加药物效果较佳。我们对我科收治的 36例癫痫患儿应用了该药 ,现将临床经验报告如下。1　临床资料1.1　一般资料全部病例系我院自 1998～ 2 0 0 2年间住院确诊的各型癫痫 ,其中男 2 0例 ,女 16例 ,年龄 3个月～11岁 ,病程 6个月～ 6年。全部病例均曾长期应用至少一种针对其发作类型的抗癫痫药物 ,且量已到足量仍不能有效控制癫痫发作。发作频度 :3个月内平均每月发作 3～ 4次 14例 ;5～ 7次 6例 ;每周发作 3～ 5次 9例 ;每天发作 4…     

托吡酯对戊四氮点燃慢性癫痫大鼠海马Fas表达的影响

目的探讨托吡酯(TPM)对戊四氮(PTZ)慢性点燃癫痫大鼠海马Fas表达的影响及其对海马神经元的保护作用。方法48只大鼠随机分为健康对照组(A组)、PTZ单纯致痫组(B组)、TPM40mg/kg干预组(C组)、TPM80mg/kg干预组(D组),通过腹腔注射PTZ建立慢性癫痫模型,观察大鼠行为、脑电图及海马组织学改变,并用免疫组化染色观察Fas蛋白的表达。结果TPM可以明显抑制大鼠的痫性放电,减少其痫性发作级别,C组、D组与B组比较重型发作率明显降低(P<0.01);此外,TPM干预组凋亡相关基因Fas表达明显减低(P<0.01)。结论在PTZ慢性点燃癫痫大鼠模型中,TPM可降低凋亡相关基因Fas表达,从而减轻海马神经元的凋亡程度。     

托吡酯对癫痫患儿甲状腺素水平的影响

某些抗癫痫药物治疗后患者甲状腺激素水平下降,导致甲状腺功能减退的有关神经系统临床表现.托吡酯也有中枢神经系统的副作用,这是否与其对甲状腺激素的影响有关?为此,我们对60例癫痫患儿托吡酯治疗前后分别进行了甲状腺激素水平的测定,现将结果报道如下.     

托吡酯对癫痫患者糖代谢的影响研究

目的分析癫痫患者服用托吡酯后体质量、体质指数、血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数的变化,探讨托吡酯对癫痫患者糖代谢的影响。方法选择2010年9月—2011年9月我院神经内科门诊及住院的癫痫患者60例,采用随机数字表法分为两组,试验组和对照组,各30例,试验组服用托吡酯治疗,对照组服用丙戊酸钠治疗。分别检测两组治疗前、治疗3个月、治疗6个月时的体质量、体质指数、血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数,并观察试验组治疗前后患者的食欲变化情况。结果两组治疗前体质量、体质指数、血糖、胰岛素水平、胰岛素抵抗指数比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗3个月、6个月试验组较对照组体质量、体质指数及血糖水平降低,胰岛素水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗3个月、6个月两组胰岛素抵抗指数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。试验组治疗前、治疗3个月、6个月体质量、体质指数、血糖、胰岛素水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中治疗3个月、6个月较治疗前体质量、体质指数及血糖水平降低,胰岛素水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗3个月与治疗6个月比较差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组治疗前、治疗3个月、6个月各项观察指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。试验组治疗前患者食欲好17例(56.7%),尚可13例(43.3%);治疗3个月,食欲好15例(50.0%),尚可15例(50.0%);治疗6个月,食欲好11例(36.7%),尚可19例(63.3%)。3个不同治疗阶段食欲情况比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论托吡酯治疗癫痫患者3个月时便可出现体质量下降、食欲减退及糖代谢异常、高胰岛素血症,要真正开发出既能有效控制癫痫发作症状,不良反应又很小的理想药物有待进一步研究。     

托吡酯长期治疗儿童癫痫的临床观察

自1999年起，我院开始应用托吡酯治疗小儿各型癫痫，部分病例已用药3年以上。为了解托吡酯长期疗效的稳定性和安全性，我们对用药2年以上的42例进行追踪观察和分析，报告如下。     

托吡酯对沙土鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

目的　观察托吡酯对沙土鼠脑缺血再灌注损伤后脑神经细胞的病理改变及细胞凋亡的影响。方法　沙土鼠 30只 ,随机分为⑴假手术组 ,⑵缺血再灌注组 ,⑶预防性托吡酯组。采用双侧颈总动脉夹闭法复制沙土鼠脑缺血再灌注模型 ,术后 3d处死动物取材 ,石蜡切片 ,光、电镜观察海马CA1 区神经细胞形态的改变 ;TUNEL法显示凋亡细胞。结果　缺血再灌注组CA1 区神经细胞呈缺血性改变 ,预防性应用托吡酯能明显减轻海马CA1 区神经细胞缺血性损伤 ,细胞凋亡的表达明显减少 ,与缺血再灌注组比较有显著性差异 (P <0 0 1)。结论　托吡酯能减轻沙土鼠脑缺血再灌注所致的神经细胞损伤及凋亡 ,对缺血再灌注损伤有明显的保护作用。     

托吡酯治疗癫痫的临床分析

目的:评价托吡酯的安全性和疗效。方法:将47例癫痫患者随机分成单用托吡酯和加用托吡酯治疗。其中25例未治疗,22例用一线药物治疗无效,6例随访4个月,41例随访6个月。结果:应用托吡酯2个月、4个月、6个月发作频率均明显减少(P<0.01);单用组发作消失者为32.0%,合用组为9.1%(P<0.01),不同发作类型的疗效相似;维持量与疗效无关;8例出现较轻的副反应。结论:托吡酯单用或合用对各种类型发作均有较好的疗效,副反应少且程度低,耐受性好。     

托吡酯对戊四氮点燃大鼠脑电图影响的定量分析

目的:定量观察托吡酯(TPM)对戊四氮(PTZ)点燃大鼠脑电图(EEG)的影响.方法:72只成年健康雄性SD大鼠随机分为4组.Ⅰ组大鼠胃灌入生理盐水(10 ml/kg)后1 h腹腔注射10g/L PTZ生理盐水溶液(35 mg/kg);Ⅱ和Ⅲ组大鼠腹腔注射PTZ(剂量同Ⅰ组)前1 h分别按100 mmg/kg和40 mg/kg胃灌注10 g/L TPM生理盐水溶液;Ⅳ组大鼠按10 ml/kg和3.5 ml/kg分别胃灌注和腹腔注射生理盐水.各组每d给药1次.当Ⅰ组大鼠痫性发作行为达到Ⅲ级(2周)、Ⅴ级(4周)和Ⅴ级后2周(6周)时分别描记EEG.结果:4周时,Ⅰ组大鼠出现多量阵发性短程高幅棘波、尖波及其综合波,Ⅱ组大鼠出现散在中、高幅尖波及尖慢综合波,Ⅲ组大鼠偶见中、高幅尖波及尖慢综合波.20 minEEG连续描记中,Ⅱ组大鼠出现的异常波数量多于Ⅲ组大鼠(P＜0.01);Ⅱ组、Ⅲ组大鼠发作的潜伏期延长,持续时间缩短(P＜0.05).2周时Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组大鼠注射PTZ后总功率、8、θ和α功率均增加(P＜0.05或0.01),β功率无改变(P＞0.05);4周时,除Ⅰ组大鼠β功率改变外,Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组注射PTZ后总功率和其他各频段功率均增加(P＜0.05或0.01).6周时,Ⅰ组大鼠注射PTZ后总功率、δ、α和θ功率增加(P＜0.05或0.01),β功率无变化(P＞0.05);除Ⅱ组总功率增加外(P＜0.01),Ⅱ、Ⅲ组大鼠其他各频段功率无变化(P＞0.05).结论:TPM可拮抗大鼠PTZ点燃,抑制EEG的癫痫样放电.     

托吡酯添加治疗难治性癫痫Meta分析

目的综合评价托吡酯(Topiramate TPM)添加治疗难治性癫痫的疗效及耐受性。方法利用中国生物医学文献数据库(CBM disc)检索2001年1月至2002年12月共21项相关研究。选择研究的标准限定在神经科专业期刊的论著性文章。每一研究的样本量大于10。入组病例年龄2岁以上。结果 13项研究(n=1095)符合纳入标准。均系自身对照开放性研究。在资料完整13项研究中,完全缓解率为23.8%,有效率为61.5%,无效率为10.1%。有关的不良反应集中在体重减轻237例(21.6%),嗜睡68例(6.2%),肢体麻木63例(5.7%),厌食72例(6.5%),头痛头晕59例(5.3%),其他103例(9.4%)。去除研究结果描述略为粗糙及样本含量偏小的4项研究后,完全缓解率、有效率、无效率及有关不良反应的比例与上述结果相近(P>0.01;P>0.05)。结论托吡酯添加治疗难治性癫痫疗效确切,不良反应多在可耐受范围,临床上应注意各年龄段、不同发作类型亚组之间有关疗效及不良反应的研究。     

caspase-3在创伤性脑损伤诱导神经细胞凋亡中的作用

目的探讨创伤性脑损伤诱导神经细胞凋亡的机制。方法分别采用流式细胞术和借助caspase-3荧光分析试剂盒检测大鼠头颅打击伤后不同时间(3、12、24h和2、3、7、14d)损伤脑组织的神经细胞凋亡率和cas-pase-3活性的变化。结果损伤脑组织神经细胞凋亡率和caspase-3活性均随着伤后时间的延长而迅速增高,两者均至3d达峰值,分别为(14.6±2.4)%和(0.545±0.024)nmolAFC,然后逐渐下降,伤后14d分别下降到(3.2±0.8)%和(0.128±0.012)nmolAFC,但仍高于正常水平(P<0.01)。加入特异性caspase-3抑制剂z-DEVD-fmk后神经细胞凋亡率和caspase-3活性均显著降低(P<0.01)。结论caspase-3参与了创伤性脑损伤诱导的神经细胞凋亡。     

依达拉奉对癫痫大鼠海马硫氧还蛋白还原酶活性影响的研究

目的研究依达拉奉（Ed）对海人酸（KA）诱导癫痫大鼠海马组织硫氧还蛋白还原酶（TrxR）活性的影响。方法 SD大鼠随机分为癫痫对照组（saline组）、癫痫组（KA组）和药物对照组（KA＋saline组）及药物组（Ed＋KA组）。采用脑室注射KA制作大鼠癫痫模型,Ed于KA注射前40 min腹腔用药。KA注射6h取海马组织匀浆,应用DTNB还原法对海马TrxR活性进行测定,用Western blot法检测cleaved caspase-3的表达。结果 Saline组、KA组、KA＋saline组、Ed＋KA组TrxR活性分别为（U/mg protein）：66±18、111±42、102±40、75±12;KA组和KA＋saline组cleaved caspase-3的表达均较saline组增加（均P〈0.05）,而Ed＋KA组较KA＋saline组则降低（P〈0.05）。结论 KA诱导癫痫大鼠海马组织TrxR活性增加,依达拉奉可能通过抑制TrxR的活性以增加对神经元的保护作用。     

姜黄素对大鼠脑损伤恢复作用的实验研究

目的探讨姜黄素对大鼠脑缺氧缺血损伤时NOS活力、caspase-3表达及细胞凋亡的影响。方法采用大鼠Rice模型。雄性SD大鼠48只,每组6只。随机分为假手术对照组（SH组）、脑缺氧缺血组（HI组）、姜黄素组（CU组）、溶剂对照组（SC组）;生化方法检测脑组织NOS（一氧化氮合酶）活力;免疫组织化学测定大脑海马CA1区caspase-3（半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3）的表达;电镜观察大脑海马形态学结构变化。结果姜黄素可显著减少大脑海马神经细胞损伤数量,NOS酶活力含量明显减低,并且抑制caspase-3蛋白的表达。结论细胞凋亡参与了大脑缺氧缺血损伤的发生,姜黄素可能通过减低NOS酶活力、下调caspase-3的表达,从而抑制细胞凋亡,减轻脑缺氧缺血性损伤。     

针刺对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡的影响

目的研究针刺对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经细胞凋亡的影响。方法建立大鼠中动脉阻塞再灌注模型（MCAO）,应用TUNEL法观察神经元凋亡,免疫组织化学法检测Caspase-3蛋白表达。结果脑缺血再灌注后应用针刺疗法能够降低大鼠神经细胞受损后出珊的Caspase-3蛋白表达,并能减轻神经细胞凋亡。结论针刺疗法能通过有效的抑制脑缺血再灌注后大鼠神经细胞的凋亡起到脑保护作用。     

复方肠泰对人结肠癌SW480细胞凋亡caspase3途径的影响

目的:;考察复方肠泰(FFCT)对人结肠癌细胞SW480的凋亡作用与主要作用途径。方法:;建立人结肠癌细胞SW480 裸鼠种植瘤模型,观察FFCT对移植瘤瘤质量和凋亡的影响和 SW480 结肠癌细胞内 caspase3 的活性,并考察抑制剂AcDEVDCHO 对 SW480 凋亡的影响。结果:; FFCT可以明显提高移植瘤的早期凋亡率和晚期凋亡率（P<0.05,P<0.01）;经不同时间的FFCT培养液作用后的SW480 结肠癌细胞caspase3 酶活性均有显著性增加,呈先增高而后逐渐降低的趋势;加了caspase3抑制剂的 FFCT 各浓度及不同时间组结肠癌细胞SW480的早期凋亡率与空白组比较均有所增加,细胞的死亡率与晚期凋亡率的总和也有所增加,呈一定的量效、时效关系。结论:;caspase3 途径是 FFCT 促进人结肠癌细胞SW480凋亡的重要途径,但不是唯一途径,其它的作用途径有待进一步的研究探讨。      

Effect of Spermatozoa Apoptosis on the Clinical Outcomes with Human in vitro Fertilization

Objective To analyze the effect of spermatozoa apoptosis on the clinical outcomes during in vitro Fertilization (IVF-ET). Methods A prospective analysis was carried out, 519 infertile couples were divided into 3 groups according to the clinical outcomes with IVF, including pregnancy and birth (liveborn group), pregnancy but abortion (miscarriage group), failure to pregnancy (failure group). Spermatozoa collected from 519 male partners were processed through density gradient centrifugation (DGC) and swim-up and the apoptosis of the spermatozoa, in ejaculated / processed semen, were evaluated using flow cytometry by determining the levels of disruption of mitochondrial membrane potential (d-MMP) and activation of caspase-3 (CP3). Results For ejaculated semen, apoptosis was significantly different among 3 groups individually, the result was as follows: liveborn group < failure group < miscarriage group (P<0.05). For processed semen, miscarriage had the highest apoptosis level (P<0.05), and there was no significant difference between liveborn group and failure group (P>0.05). Compared with the d-MMP, the activation of CP3, either in ejaculated or processed semen, showed more powerful predictive value for miscarriage other than liveborn and failure. The cutoff value of CP3 in ejaculated semen was 42.0%, with sensitivity: 0.931, specificity: 0.804. Conclusion The level of apoptosis of spermatozoa played a strongly impact on the clinical outcomes with IVF and the activation of CP3 in ejaculated semen possessed a high predictive value for miscarriage.     

妥泰对红藻氨酸致痫大鼠模型海马和颞叶皮层神经细胞caspase-3表达的影响

目的观察红藻氨酸(KA)的致痫作用并探讨妥泰(TPM)对KA致痫大鼠模型海马和颞叶皮层caspase-3表达的影响。方法取21～30日龄SD大鼠60只,随机分为3组:对照组、模型组和观察组,每组20只。对照组给予生理盐水;模型组仪用KA制作癫痫模型;观察组用KA制作癫痫模型后,加用TPM治疗。观察癫痫大鼠的行为表现、脑电图表现和病理学表现。用免疫组织化学法显示各组大鼠脑切片海马和颞叶皮层caspase-3表达的变化,并用HPIAS-2000显微图像定量分析系统进行图像分析。结果致痫大鼠的行为、脑电图和病理学改变符合癫痫的典型表现。对照组海马和颞叶皮层内存在少量caspase-3基础表达,模型组和观察组注射TPM 6 h后可见海马和颞叶皮层有少量棕褐色caspase-3阳性神经元,3 d时明显增多并达到高峰。与对照组比较,模型组和观察组相同时间点海马和颞叶皮层caspase-3阳性细胞计数均增多(P<0.05),观察组海马和颞叶皮层caspase-3阳性神经元计数与模型组相同时间点比较均减少,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组和观察组海马和颞叶皮层caspase-3阳性神经元平均光密度值测定结果显示各相同时间点与对照组相比较所得数值显著增高,且有统计学意义(P<0.05),观察组海马和颞叶皮层caspase-3阳性神经无平均光密度值低于模型组(P<0.05)。结论KA的致痫作用很强,妥泰能抑制癫痫大鼠海马和颢叶皮层caspase-3表达,对癫痫发作大鼠具有神经细胞保护作用。     

氯胺酮麻醉对乳鼠脑细胞凋亡的影响

目的探讨临床上常用的麻醉剂氯胺酮对乳鼠脑细胞凋亡的影响。方法新生7日龄SD大鼠15只,随机分成3组:氯胺酮低剂量组、高剂量组分别腹腔注射20 mg/kg、80 mg/kg氯胺酮,对照组给予等量的生理盐水。麻醉后24 h,取脑组织作HE染色,用TUNEL法检测脑细胞的凋亡情况,用免疫组织化学法检测Caspase-3的表达水平。结果与对照组比较,氯胺酮低剂量组的凋亡细胞增多但不明显(P0.05),神经元核固缩和Caspase-3阳性细胞数明显增多(P0.05);氯胺酮高剂量组的凋亡细胞数、神经元核固缩及Caspase-3阳性细胞数显著性增加(P0.05)。神经元核固缩、凋亡细胞和Caspase-3阳性细胞均以皮层区多见。结论 80 mg/kg氯胺酮可引起乳鼠脑细胞凋亡,以皮层区为主,Caspase-3的激活可能是其作用机制之一;20 mg/kg氯胺酮对乳鼠脑细胞凋亡的影响较轻微,其临床等效剂量为3 mg/kg。氯胺酮小儿麻醉用量不宜过多,避免引起脑细胞的凋亡。     

白藜芦醇对脊髓损伤大鼠神经细胞凋亡的抑制作用

目的:研究脊髓损伤后管饲白藜芦醇对大鼠脊髓神经细胞凋亡的影响。方法:将96只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分成4组,假手术组、损伤组、甲基强的松龙组、白藜芦醇组,根据Allen法造模,术后即刻按100mg/kg管饲白藜芦醇或甲基强的松龙;TUNEL法检测脊髓损伤后8h,1d,3d及7d凋亡细胞数变化,并与甲基强的松龙组对比。结果:脊髓损伤后,白藜芦醇组与损伤组细胞凋亡情况相比具有显著性差异(P<0.01),而白藜芦醇组与甲基强的松龙组间相比无显著性差异(P>0.05),但前者要略优于后者(损伤后1d,P<0.05),这显示白藜芦醇与甲基强的松龙作用相似。结论:白藜芦醇经过管饲后能明显抑制神经细胞的凋亡,发挥了神经细胞保护作用,这与腹腔注射途径一致。     

通精灵对精索静脉曲张模型大鼠生精细胞凋亡及凋亡因子Cyt C、caspase-9的影响

[目的]探讨通精灵对精索静脉曲张模型大鼠睾丸组织的保护作用及与凋亡因子细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)、半胱氨酸蛋白酶-9(cysteine aspartic acid specific protease-9,caspase-9)表达的关系。[方法]72只SPF级Wistar大鼠,随机分成假手术组、模型组、通精灵低、中、高剂量组及左卡尼汀组。采用左肾静脉部分结扎法联合"夹尾激怒法"建立实验性精索静脉曲张合并中医肝气郁结证候复合大鼠模型。模型建立后,通精灵低、中、高剂量组分别给予浓度为1.6、3.2、6.4g·m L-1通精灵生药水煎液灌胃,假手术组和模型组予以0.9%氯化钠溶液灌胃,左卡尼汀组则予0.021g·mL-1左卡尼汀口服液灌胃,以上各组灌胃体积均为1mL/100g体质量,1次/d,持续8周。以HE染色观察睾丸组织结构;TUNEL染色和Annexin V-FITC法检测生精细胞凋亡情况;Western blot检测睾丸组织中Cyt C、caspase-9的表达。[结果]模型组中睾丸组织发生明显病理损伤,而通精灵各剂量组及左卡尼汀组中睾丸的病理损伤有不同程度改善。模型组中睾丸生精细胞凋亡率明显高于假手术组,差异有统计学意义(P0.05),通精灵中、高剂量组及左卡尼汀剂量组中生精细胞凋亡率明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。Western blot提示,模型组大鼠睾丸组织中Cyt C、caspase-9蛋白表达显著高于假手术组(P0.01);通精灵中、高剂量组及左卡尼汀组中Cyt C、caspase-9表达低于模型组(P0.05或P0.01);高剂量组中Cyt C、caspase-9蛋白表达明显低于左卡尼汀组(P0.05,P0.01)。[结论]通精灵可以有效改善精索静脉曲张大鼠睾丸组织损伤,降低Cyt C和caspase-9的表达,从而调控生精细胞的凋亡。这可能是通精灵改善精索静脉曲张患者生育能力的机制之一。