结缔组织病相关性间质性肺疾病患者外周血Th1/Th2细胞的表达

目的探讨外周血Th1/Th2及细胞因子在结缔组织病相关性间质性肺疾病的表达及意义。方法收集23例正常对照组及28例病理类型为非特异性间质性肺炎(NSIP)的结缔组织病相关性间质性肺疾病(CTD-ILD)患者的外周血单个核细胞及血浆,分别检测PBMC中Th1/Th2的比例及血浆中Th1/Th2及细胞因子的表达情况。结果与正常对照组相比,CTD-ILD患者组Th1比例明显增加,差别具有统计学意义(P=0.04)。而Th2比例明显降低(P=0.000),伴随着Th1/Th2比例的升高(P=0.001)。CTD-ILD患者TNF-α,IFN-γ细胞因子的浓度较正常对照组的血浆浓度均明显增加(P0.05)。IL-4的浓度较正常对照组的血浆浓度降低(P0.05)。结论在CTD-ILD患者体内的存在Th1/Th2平衡失调,向Th1方向偏移。     

系统性红斑狼疮患者外周血白细胞介素-17与辅助T细胞17的检测及其意义

目的 研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血白细胞介素(IL)-17蛋白和mRNA水平、辅助T细胞(Th17)细胞表达比例,探讨其临床意义.方法 用酶联免疫吸附试验检测SLE患者及对照者血浆中IL-17的蛋白水平;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测2组外周血中IL-17 mRNA表达水平;运用流式细胞术检测SLE患者外周血单个核细胞(PBMCs)中Th17细胞比例,进一步分析IL-17/Th17细胞与SLE临床实验室指标的相关性.计量资料组间比较采用t检验,相关性分析采用Spearman秩和相关分析.结果 SLE组患者血浆IL-17含量明显高于健康对照组,SLE组患者外周血IL-17 mRNA表达水平[(28.3±11.7)×10-5]高于对照组[(9.8±2.2)×10-5](P均＜0.01).SLE患者PBMCs中Th17细胞比例(2.5±1.5)%及IL-17荧光强度(1937±1022)显著高于对照组[(1.5±0.7)%,(1245±413)],且SLE活动期患者Th17细胞百分比高于非活动组,SLE肾病组Th17细胞比例较无肾病组明显升高(P均＜0.05).SLE患者血浆IL-17水平、Th17细胞数与SLE疾病活动性指数(SLEDAI)呈正相关(r=0.681,P＜0.01;r=0.426,P=0.034).结论 SLE患者体内IL-17蛋白分泌及基因表达水平存在明显异常,外周血Th17细胞比例亦显著升高,且与疾病活动性有明显相关,提示IL-17/Th17细胞可能在SLE发病中起着重要作用.     

结缔组织病并间质性肺病患者血清IL-32、IL-12的临床意义

目的探讨结缔组织病并间质性肺病患者（CTD-ILD）与非结缔组织病引起的间质性肺疾病（IFP＋NSIP）患者及正常人外周血血清中白细胞介素32（IL-32）和白细胞介素12（IL-12）水平的差异及意义。方法选择8例结缔组织病并间质性肺病患者（CTD-ILD）,其中包括6例类风湿性关节炎（RA）并间质性肺病患者（RA-ILD组）,2例硬皮病（SSA）并间质性肺病患者（SSA-LD组）;10例非结缔组织病引起的间质性肺疾病（IPF＋NSIP）,其中包括8例特发性肺间质纤维化患者（IPF组）,2例非特异性间质性肺炎患者（NSIP组）;选择10例正常人（control组）,采用特异的酶联免疫吸附法测定外周血血清中IL-32、IL-12的水平。结果 CTD-ILD组外周血血清中IL-32、IL-12水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;CTD-ILD组外周血血清中IL-32、IL-12水平明显高于IPF＋NSIP组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论外周血血清中IL-32与IL-12水平差异有助于鉴别诊断CTD-ILD     

布地奈德对支气管哮喘患者Th17/Treg平衡的干预机制研究

目的探讨布地奈德对支气管哮喘(简称哮喘)患者Th17/TregT细胞平衡的干预机制。方法收集轻、中、重度哮喘患者各15例用布地奈德进行干预治疗,健康者15人作为对照组,观察治疗前后外周血Th17及其胞内细胞因子IL-17和IL-23,Treg及其胞内细胞因子IL-10和TGF-β1;同时对以上观察对象进行肺功能检测。结果①Th17/Treg:中及重度哮喘患者Th17及其IL-17、IL-23显著高于健康对照组,而Treg及其IL-10、TGF-β1显著低于健康对照组;经布地奈德干预后Th17及其细胞因子下降,而Treg及其细胞因子回升。②肺功能:治疗后轻及中度患者的FEV1显著回升,且FEV1下降及回升率以及PEF波动率下降,而重度组治疗后上述效果不明显。③相关性分析:Th17与Treg呈显著负相关性。Th17与FEV1呈负相关性;与FEV1下降及上升率、呼吸峰流速波动率呈正相关性。而Treg与FEV1呈正相关性;与FEV1下降及上升率、呼吸峰流速波动率呈负相关性(P<0.05)。结论布地奈德可有效抑制哮喘患者Th17的数量与功能,同时增强Treg平衡数量与功能,使平衡向Treg回落,并且上述改变与哮喘的病变程度及肺功能的恢复紧密联系。     

外周血白介素-17检测在气道慢性炎症性疾病诊断中的临床价值

目的探讨外周血CD4+T细胞亚群Th17代表性细胞因子IL-17在哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)以及哮喘COPD重叠综合征(ACOS)等气道慢性炎症性疾病鉴别诊断中的临床价值。方法收集哮喘患者26例、COPD患者33例及ACOS患者14例的血清、临床资料及实验室检查资料,检测哮喘、COPD、ACOS患者外周血IL-17等细胞因子、炎症介质、外周血白细胞分类计数、血清免疫球蛋白亚型以及肺通气功能,并进行组间比较。健康体检者69例作为对照。结果 Th17细胞因子IL-17在哮喘及ACOS组升高较COPD组更为明显(P0.01)。调节性T细胞的主要细胞因子IL-10在哮喘患者中的水平明显低于COPD患者(P0.05)。外周血炎症细胞比例、免疫球蛋白亚型在哮喘、COPD、ACOS鉴别诊断中具有一定参考价值。但肺通气功能指标对于以上三者的鉴别价值有限。哮喘及ACOS组患IL-17与肺通气功能指标呈负相关关系。结论 IL-17作为新型Th17细胞分泌的代表性细胞因子,在鉴别上述疾病中具有重要的参考价值。Th17/Treg细胞失衡可能是难治性哮喘的潜在发病机制。     

辅助性T细胞17、辅助性T细胞17/辅助性T细胞1比例在急性冠状动脉综合征的变化及临床意义

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血辅助性T细胞(Th)17、Th17/Th1比例及血浆中白细胞介素17(IL-17)和IL-22的变化及意义。方法选择冠心病患者50例,其中急性心肌梗死(AMI)组20例,不稳定型心绞痛(UA)组15例,稳定型心绞痛(SA)组15例;健康查体者15例作为正常对照组。采用流式细胞分析法,检测各组外周血Th17、Th17/Th1细胞占CD4+T细胞比例。采用酶联免疫吸附法检测患者血浆IL-17和IL-22的浓度。结果AMI组和UA组外周血Th17细胞比例[(2.98%±1.01%)和(2.63%±0.61%)]、Th17/Th1细胞比例[(0.71%±0.35%)和(0.66%±0.31%)]均明显高于SA组及正常对照组(均P<0.05)。AMI组血浆IL-17(24.41±7.95 ng/L)和IL-22(34.18±7.04 ng/L)浓度均显著高于SA组和正常对照组(均P<0.05);UA组血浆IL-17浓度(22.86±8.62ng/L)显著高于正常对照组,血浆IL-22浓度(28.98±4.35 ng/L)显著低于AMI组而高于正常对照组。ACS组IL-22浓度与IL-17浓度呈显著正相关(r=0.422,P<0.01),且ACS组Th17细胞与IL-17(r=0.722,P<0.01)、IL-22(r=0.400,P<0.01)浓度均呈显著正相关。结论 Th17细胞可能参与动脉粥样斑块不稳定和ACS的发病。Th17细胞及其相关炎性因子IL-17、IL-22可作为诊断急性心血管事件发生的辅助检测指标。     

扩张型心肌病患者Treg/Th17的检测及意义

目的:探讨扩张型心肌病(DCM)患者外周血中Treg/Th17的水平及意义.方法:采用流式细胞术和ELISA法检测30例DCM患者和30例健康对照组Treg/Th17的水平.结果:DCM患者较正常组,外周血Treg细胞比例明显降低,而Th17细胞比例明显增高.Treg细胞相关细胞因子(TGF-β1和IL-10)的血浆水平明显降低,而Th17相关细胞因子(IL-17,IL-6,IL-23)水平明显增加.结论:DCM患者体内Treg细胞与Th17细胞平衡发生负向偏倚.     

系统性红斑狼疮患者体内Th17、Th1细胞及其相关因子的表达及意义

目的 研究系统性红斑狼疮（SLE）患者血浆IL-17、干扰素（IFN）-γ水平及外周血辅助性T细胞（Th）17和Th1细胞表达比例,探讨其临床意义.方法 用酶联免疫吸附法检测SLE患者及对照组血浆中IL-17、IFN-γ浓度;运用流式细胞术检测SLE患者外周血单个核细胞（PBMCs）中Th17、Th1细胞表达比例.进一步分析Th17/Th1细胞及其相关因子与SLE临床实验室指标的相关性.结果 SLE患者PBMCs中Th17细胞比例显著高于对照组,且SLE活动期患者Th17细胞百分比高于非活动期患者（P〈0.05）,而SLE患者Th1细胞比例与对照组无差异（P〉0.05）.SLE患者血浆IL-17水平、Th17细胞数与SLE疾病活动性指数呈正相关.结论 SLE患者体内IL-17水平、Th17细胞比例显著升高,且与疾病活动性明显相关,提示IL-17/Th17细胞在SLE发病机制中可能发挥重要作用.     

慢性阻塞性肺疾病患者辅助性T细胞17/调节性T细胞变化及其与肺功能的相关性研究

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者辅助性T细胞17(Th17细胞)/调节性T细胞(Treg细胞)变化,探讨其与肺功能的相关性。方法选取2013年9月—2015年9月四川省成都市西区医院收治的老年COPD稳定期患者36例作为稳定期组,COPD急性加重期患者29例作为急性加重期组;另选取同期在本院体检健康者50例作为对照组,其中吸烟者22例作为吸烟对照组,不吸烟者28例作为正常对照组。比较4组受试者外周血Th17细胞分数、Treg细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值,血清IL-17、IL-10水平及肺功能指标〔第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、用力肺活量占预计值百分比(FVC%)及第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)〕,并分析外周血Th17细胞分数、Treg细胞分数及Th17细胞/Treg细胞比值与肺功能指标的相关性。结果急性加重期组和稳定期组患者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值及血清IL-17水平高于吸烟对照组和正常对照组,外周血Treg细胞分数及血清IL-10水平低于吸烟对照组和正常对照组(P0.05);急性加重期组患者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值及血清IL-17水平高于稳定期组,外周血Treg细胞分数及血清IL-10水平低于稳定期组(P0.05);吸烟对照组受试者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值高于正常对照组(P0.05)。4组受试者FVC%比较,差异无统计学意义(P0.05);急性加重期组和稳定期组患者FEV1%、FEV1/FVC低于吸烟对照组和正常对照组,急性加重期组患者FEV1%、FEV1/FVC低于稳定期组(P0.05)。Pearson相关性分析结果显示,外周血Th17细胞分数与FEV1、FEV1%/FVC呈负相关(r值分别为-0.736、-0.694,P0.05),Th17/Treg细胞比值与FEV1、FVC%、FEV1%/FVC呈负相关(r值分别为-0.892、-0.222、-0.748,P0.01),而外周血Treg细胞分数与FEV1、FVC%、FEV1%/FVC呈正相关(r值分别为0.837、0.368、0.822,P0.01)。结论 COPD患者存在Th17/Treg细胞失衡,而Th17/Treg细胞失衡与吸烟、COPD病情变化及肺功能损伤等密切相关。     

老年代谢综合征患者趾臂指数与Th17细胞及相关细胞因子的相关性

目的 探讨老年代谢综合征患者趾臂指数(TBI)与Th17细胞及其与细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的相关性.方法 依据2004年中国糖尿病学会(CDS)提出的标准入选161例代谢综合征患者,应用全自动动脉硬化测定仪VP1000测定患者的TGBI,将患者分为TBI正常组和TBI降低组.采用流式细胞检测技术检测患者外周血中Th17细胞水平,并采用ELISA法检测所有高血压患者的血清IL-17、IL-6及TNF-α浓度水平.结果 TBI降低组外周血Th17细胞比例明显高于TBI正常组(t=7.116,P＜0.01).TBI降低组Th17细胞因子IL-17、IL-6及TNF-α血清浓度较TBI正常组显著升高(P＜0.01).相关及回归分析显示,TBI与外周血Th17细胞比例、血清IL-17、IL-6及TNF-α血清浓度水平呈负相关(r=-0.443、-0.485、-0.348及-0.429,均P＜0.001),Th17细胞比例、IL-17、IL-6、TNF-α血清浓度水平是影响baPWV的主要因素.结论 老年代谢综合征患者TBI与Th17细胞及其细胞因子相关.     

静脉注射丙种球蛋白无反应型川崎病Th17细胞的变化及意义

目的 探讨Th17细胞在静脉注射丙种球蛋白(IVIG)无反应型川崎病(KD)免疫发病机制中的作用.方法 选取KD患儿45例,其中IVIG敏感型KD 35例,IVIG无反应型KD 10例,同年龄健康对照组30名.KD患儿分别于IVIG治疗前后直接取血备检,IVIG无反应型KD分别在病程第8、9、11天取血备检.采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测CD4~+T细胞白细胞介素(IL)-17A/F、转录因子ROR-γt mRNA表达;采用流式细胞术检测外周血Th17细胞占CD4~+T细胞比例.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Th17细胞相关的细胞因子IL-17A和IL-6的表达.结果 ①急性期KD患儿CD4~+T细胞IL-17A/F表达明显高于对照组(P<0.01);②急性期IVIG无反应型KD患儿CD4~+T细胞内IL-17蛋白、IL-17A/F mRNA、Th17细胞转录因子ROR-γt的基因表达明显高于IVIG敏感型KD,经IVIG治疗后敏感型KDTh17细胞相关因子表达明显降低(P<0.01),无反应型KD Th17细胞相关因子仍持续高表达(P>0.05);③急性期KD患儿治疗前IL-17A和IL-6血浓度明显高于对照组(P<0.01),其中IVIG无反应型KD活化细胞因子水平明显高于1VIG敏感型KD组(P<0.01).经治疗后均有下降趋势,但IVIG无反应型KD仍高于敏感型KD(P<0.01);④甲泼尼龙冲击治疗IVIG无反应型KD当天退热.血浆IL-6,IL-17A较前明显降低,C反应蛋白(CRP)恢复快,能够迅速控制血管炎性反应.结论 Th17细胞过度活化可能是导致IVIG无反应型KD的原因之一.     

类风湿关节炎患者外周血高迁移率族蛋白1RORγt和白细胞介素-17表达水平的检测及临床意义

目的 检测类风湿关节炎(RA)患者外周血高迁移率族蛋白1(HMGB1)及Th17细胞特异性转录因子、相关细胞因子的表达水平,同时分析其与C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)和类风湿因子(RF)的关系,初步探讨RA患者HMGB1的表达水平及其与Th17的关系.方法 收集80例RA患者外周血标本,其中静止期32例、活动期48例,健康志愿者50名.采用实时荧光定量聚合酶链反应(QRT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)中HMGB1、RORγt和白细胞介素(IL)-17的mRNA水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆HMGB1、IL-17、IL-23的蛋白浓度,采用单因素方差分析和Spearman相关分析进行统计学处理.结果 RA患者PBMC中HMGB1、RORyt和IL-17 mRNA的表达水平均高于健康对照组(P<0.05).且活动期[HMGB1(0.424±0.262)pg/ml,RORγt(0.34±0.25)pg/ml,IL-17(1.42±0.38)pg/ml]明显高于静止期(P<0.01).o血浆HMGB1、IL-23和IL-17蛋白水平也显示类似的结果,RA组明显高于健康对照组(P<0.05),且与CRP、ESR、RF呈正相关(P<0.05).结论 检测RA患者外周血HMGB1和Th17细胞特异性转录因子及相关细胞因子水平,有助于探讨HMGB1和IL-17在RA发病过程中的病理生理作用,也为寻找RA的治疗靶点提供了新的思路.     

抗结核治疗对肺结核患者Th17/Treg的影响

目的分析抗结核治疗前后肺结核患者外周血(CD3+CD4+IL-17+)辅助性T细胞17(Th17)和(CD4+CD25+Foxp3+)调节性T细胞(Treg)平衡状态的变化及其临床意义。方法收集本院2014年10月至2015年5月感染科收治的肺结核患者80例,选择30例健康体检者作为对照组。流式细胞术检测患者抗结核药物治疗前、治疗6个月以及对照组的外周血Th17细胞和Treg细胞的表达,ELISA检测外周血中IL-17A的表达。结果流式结果显示,治疗前肺结核患者外周血Th17细胞,Treg细胞表达率为分别为(1.18±0.74)%、(7.68±0.92)%,均明显低于健康体检者((3.95±1.17)%,(4.17±1.12)%,P0.05);治疗6个月后肺结核患者外周血Th17细胞,Treg细胞表达率分别为(2.98±1.42)%,(5.26±0.72)%,均明显高于治疗前、但仍显著低于健康体检者(P0.05)。治疗前肺结核患者Th17/Treg为0.15±0.21,明显低于健康体检者(0.95±0.45,P0.05);治疗6个月后肺结核患者Th17/Treg为0.56±0.39,明显高于治疗前、但仍显著低于健康体检者(P0.05)。ELISA检测结果显示,治疗6个月后肺结核患者外周血IL-17A表达水平为39.06±5.83 pg/m L,明显高于治疗前、但仍显著低于健康体检者(P0.05)。结论结核分枝杆菌可破坏肺结核患者机体Th17/Treg平衡,抗结核治疗可缓解患者外周血Th17/Treg失衡状态。     

Th17、Treg细胞及其细胞因子变化在特发性肺动脉高压患者中的监测作用

目的分析特发性肺动脉高压(IPAH)患者外周血Th17、Treg细胞及其细胞因子的变化,探讨其在IPAH中的作用。方法以2013年3月-2015年9月本院收治的特发性肺动脉高压患者28例为研究对象,以同期收治的慢性支气管炎患者54例为对照(其中慢性支气管炎合并肺动脉高压者24例,单纯慢性支气管炎患者30例),测定各组外周血Th17和Treg细胞比例和细胞因子。结果 IPAH组和(慢支+PAH)组外周血Th17细胞比例均高于慢支组,而IPAH组和(慢支+PAH)组外周血Th17细胞比例差异无统计学意义;IPAH组和(慢支+PAH)组外周血Treg细胞比例低于慢支组,IPAH组低于(慢支+PAH)组(P0.05);IPAH组和(慢支+PAH)组外周血IL-17水平均高于慢支组,IPAH组高于(慢支+PAH)组(P0.05);IPAH组和(慢支+PAH)组外周血IL-10水平均低于慢支组,IPAH组低于(慢支+PAH)组(P0.05)。IPAH组外周血IL-17水平与肺动脉压力呈正相关(P0.01);IL-10水平与肺动脉压力呈负相关(P0.01)。结论Th17/Treg失衡及其细胞因子变化在特发性肺动脉高压的发生发展中起着重要作用。     

Profile of Th17 cytokines (IL-17, TGF-β, IL-6) and Th1 cytokine (IFN-γ) in patients with immune thrombocytopenic purpura

The data on polarization of the immune system towards T helper 1 (Th1) or T helper 2 (Th2) cells in immune thrombocytopenic purpura (ITP) are limited and contradictory. Th17 characterized by the production of Interleukin 17 (IL-17) has been shown to play a crucial part in the induction of autoimmune diseases. To further investigate the role of Th cytokines in the pathogenesis of ITP, we measured the plasma concentration of three Th17-associated cytokines [IL-17, transforming growth factor-ss (TGF-ss), IL-6] and Th1 cytokine interferon-gamma (IFN-gamma) in ITP patients, and evaluated their clinical relevance. The concentration of IL-17, TGF-ss, IL-6, and IFN-gamma in plasma specimens from 29 adults with chronic ITP and 38 controls was analyzed by enzyme-linked immunosorbent assay method. No significant differences of Th17 cytokines (IL-17, TGF-ss, and IL-6) and Th1 cytokine (IFN-gamma) concentration were observed between patients with active ITP and the control group. And the IFN-gamma/IL-17 ratio representing Th1/Th17 cytokine profile was not significantly different between ITP patients and control, either. However, significantly positive correlation between IL-6 and IFN-gamma in ITP patients was observed (r = 0.48, P = 0.01). Among the ITP patients, Plasma IL-17 levels in male were marginally higher than those in female, while similar for TGF-ss, IL-6 or IFN-gamma. There was a significantly positive correlation between age and IL-6 concentration in ITP patients (r = 0.56, P = 0.0002), while no statistical significance between age and the other three cytokines. No significant correlation between cytokine concentrations and platelets or megakaryocytes number was found in ITP patients. In summary, ITP may not be associated with changes of plasma Th17 and Th1 cytokine concentrations relative to control population.     

利妥昔单抗对弥漫大B细胞淋巴瘤患者外周血Th17细胞的作用

目的:研究弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者接受利妥昔单抗治疗后,外周血Th17细胞比例的变化及其临床意义.方法:分别应用ELISA法和流式细胞术检测DLBCL患者治疗前、接受2个疗程标准RCHOP或CHOP方案诱导缓解治疗后、CHOP诱导治疗未达完全缓解再接受2个疗程RCHOP治疗后达完全缓解者的外周血中IL-17水平以及Th17阳性细胞比例,并与正常对照组比较.结果:DLBCL初治前(50例)外周血Th17细胞比例和IL-17水平较正常对照组(25例)明显升高(均P＜0.05),经RCHOP方案治疗达到完全缓解组(11例)Th17细胞比例、IL-17水平较初治前和较CHOP方案治疗后完全缓解组明显下调(均P＜0.05);CHOP治疗后完全缓解组(14例)Th17细胞比例、IL-17水平,与初治前比较无明显差异,其中8例未达完全缓解者,再接受2个疗程RCHOP达完全缓解,其Th17细胞比例、IL-17水平明显下调(均P＜0.05).结论:利妥昔单抗有下调DLBCL患者外周血Th17细胞比例及IL-17水平的作用,且与疗效有关系.