碱性成纤维细胞生长因子及转化生长因子β1在病毒性心肌炎小鼠中的表达

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)在小鼠柯萨奇病毒性心肌炎心肌纤维化中的可能作用及相互关系。方法雄性BALB/c 4周龄小鼠80只随机分为实验组和对照组,实验组用柯萨奇病毒B3重复感染建立心肌炎模型,对照组同期腹腔注射同等剂量磷酸盐缓冲液,实验组及对照组分别于初次接种病毒后第7、14、28、42天,随机抽取8只存活小鼠处死并留取标本,测定小鼠不同时期心肌胶原容积分数(CVF)值(Masson染色)、bFGF和TGF-β1的蛋白及mRNA表达(免疫组化及RT-PCR方法 ),并作相关性分析。结果在各时间点,实验组小鼠bFGF、TGF-β1的蛋白及mRNA表达均高于对照组,并随时间推移逐渐增高,差异有统计学意义(P均0.01),且均与CVF呈正相关(r=0.86~0.95,P均0.01),bFGF与TGF-β1的表达(mRNA和蛋白)也呈显著正相关(r=0.94、0.92,P均0.01)。结论 bFGF与TGF-β1可能协同促进病毒性心肌炎心肌纤维化的发生发展,可为今后心肌纤维化的治疗提供新的靶点。     

转化生长因子-β1和碱性成纤维生长因子与儿童原发性肾小球疾病的相关性研究

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性成纤维生长因子(bFGF)蛋白在儿童肾小球疾病中的表达及其与儿童原发性肾小球疾病的相关性。方法采用免疫组化方法(Envision二步法)检测微小病变(MCNS)10例、系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)25例、局灶节段硬化(FSGS)8例、膜性肾病(MN)7例,观察TGF-β1、bFGF蛋白在儿童肾小球疾病的表达情况。结果在不同肾小球疾病患儿肾小球上皮细胞及肾小管间质细胞均有不同程度的TGF-β1和bFGF蛋白的阳性表达,与正常肾组织比较差异有统计学意义(P<0.001)。小管间质TGF-β1和bFGF的蛋白表达明显高于肾小球内表达,差异有统计学意义(P<0.05)。随肾小管间质损伤和炎症细胞浸润程度及纤维化程度加重,TGF-β1和bFGF蛋白表达明显增加(P<0.05)。TGF-β1、bFGF的表达以FSGS最强,其次依次为MN、MsPGN、MCNS。同步观察发现TGF-β1与bFGF肾内表达在阳性染色强度及分布上基本一致,二者之间存在显著正相关。肾小球疾病肾组织TGF-β1、bFGF表达水平与尿RBP、24h尿蛋白定量显著相关(P<0.05)。结论TGF-β1与bFGF在肾组织内的共同表达,提示二者对肾小球疾病的进展可能有协同作用。其过度共表达参与了肾小球疾病的进展,主要参与肾小管-间质的损害。因此,阻断TGF-β1和bFGF信号传导,可能会延缓肾小球硬化的进展。     

3I、7b型腺病毒感染对人胚肺成纤维细胞转化生长因子β1 mRNA及其蛋白表达的影响

目的探讨3I、7b型腺病毒型感染对体外培养的人胚肺成纤维细胞转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA及其蛋白表达的影响。方法以3I、7b型腺病毒分别攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞,另设正常细胞组。采用酶联免疫吸附试验及原位杂交法检测各组细胞TGF-β1蛋白及TGF-β1mRNA表达。结果3I、7b型病毒感染组较正常细胞组TGF-β1蛋白及mRNA表达均明显增强(Pa<0.01),而3I、7b型病毒感染组间比较无显著性差异(Pa>0.05)。结论肺成纤维细胞和TGF-β1可能参与腺病毒肺炎的发病过程。     

TGF-β1影响肺成纤维细胞结缔组织生长因子基因表达的研究

目的：研究转化生长因子-β1（TGF-β1）对体外培养早产鼠的肺成纤维细胞（LFs）结缔组织生长因子（CTGF）基因表达的影响。方法：以孕 19 d Wistar大鼠剖宫取出的仔鼠为对象,原代培养LFs,实验组分别采用不同浓度（1 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL）和不同作用时间（12 h、24 h、48 h）TGF-β1刺激LFs,对照组无血清培养基培养（即0 ng/mL）。应用 RT-PCR 方法检测 LFs 的 CTGF mRNA 表达。结果：与对照组比较,实验组LFs的CTGF mRNA水平增高(P<0.05),且随TGF-β1作用浓度的增加、作用时间的延长CTGF mRNA表达逐渐上升,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：TGF-β1 能刺激肺成纤维细胞中CTGF基因表达,并且以剂量和时间依赖方式上调 CTGF 基因表达。     

LeftyA蛋白对转化生长因子β1所致肾小管上皮细胞纤维化的影响

目的 观察LeftyA蛋白对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化的影响,并初步探讨其作用机制.方法 体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2)细胞,通过LipofectamineTM2000介导基因转染及药物筛选构建LeftyA蛋白稳定表达HK-2细胞系;TGF-β1(10ng/ml)刺激此细胞系,于0、6、12、24、48h通过Western blot分别检测E-钙粘蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及p-Smad2/3的表达变化,通过Real-time PCR检测Ⅰ型胶原(ColⅠ)及结缔组织生长因子(CTGF)基因的表达变化.结果 不同浓度的TGF-β1刺激24 h后HK-2细胞内E-eadherin、α-SMA蛋白的变化均表现出明显的剂量效应,而当TGF-β1浓度达到10ng/ml时,α-SMA蛋白合成达到平台期(P＞0.01),因此本实验中以10ng/ml的TGF-β1作为刺激剂量;TGF-β1(10 ng/ml)刺激HK-2细胞6 h可引起E-cadherin表达下降(P＜0.01),刺激24 h后可诱导其合成表达α-SMA(P＜0.05),同时细胞内ColⅠ基因转录增加(P＜0.01);正常HK-2细胞内没有p-Smad2/3的表达,TGF-β1(10 ng/ml)刺激30min即可诱导其激活表达,并在1 h时迅速达到高峰,其后开始下降;高表达LeftyA蛋白能够减轻TGF-β1所致上皮细胞转分化(EMT)及纤维化的程度,降低p-Smad2/3的表达高峰,并抑制CTGF的表达(P＜0.01).结论 LeftyA蛋白能够通过抑制TGF-β1所致Smad2/3磷酸化及CTGF表达发挥抗肾小管上皮细胞纤维化的作用.     

骨髓转化生长因子-β1与巨核细胞转化生长因子-β1Ⅲ型受体变化在特发性血小板减少性紫癜发病中的意义

目的探讨骨髓转化生长因子-β1(TGF-β1)及臣核细胞转化生长因子(TGF-β1)Ⅲ型受体(TGF-β1RⅢ)变化在特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病中的意义。方法收集急性ITP28例(AITP组)、慢性ITP16例患儿(CITP组)和20例相对正常儿童骨髓;采用Percoll密度梯度及免疫磁珠法分离骨髓巨核细胞;ABC-ELISA法检测TGF-β1水平;原位杂交法检测TGF-β1RⅢmRNA表达情况。结果AITP组与CITP组骨髓TGF-β1水平及巨核细胞TGF-β1RⅢmRNA表达均明显高于对照组(P<0.05),且CITP组明显高于AITP组(P<0.05)。结论检测ITP患儿骨髓TGF-β1水平及巨核细胞TGF-β1RⅢ表达情况对于研究ITP发病机制及早期分型有重要参考价值。     

结缔组织生长因子在病毒性心肌炎心肌组织中的变化

目的 观察结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在病毒性心肌炎( viral myocarditis,VMC)小鼠心肌组织中的表达情况.方法 实验选取BALB/C小鼠100只,分为对照组、VMC组各50只.应用柯萨奇B3病毒(coxsackie virus B3,CVB3)感染小鼠建立VMC模型.在CVB3感染后第4、7、14、21天各随机抽取8只采集心脏标本,行HE染色测定心肌病理积分,应用Masson染色法观察小鼠心肌胶原纤维分布,测量胶原容积分数(collagen volume fraction,CVF),检测血清CK-MB水平,应用免疫组织化学方法检测转化因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、CTGF蛋白在小鼠心肌中的分布;应用RT-PCR方法检测小鼠心肌组织TGF-β1、CTGF mRNA的相对表达量;并作相关性分析.结果 (1)VMC组小鼠CK-MB水平于第7天达高峰,后逐渐下降(各时间点分别为455.45±37.95,606.95±35.64,573.62±42.90,308.60±20.49),其中第4、7、14天时高于对照组,差异有统计学意义(t值分别为6.144,12.558,11.182,P均＜0.01);(2)VMC组小鼠第14、21天时CVF明显高于对照组(CVF值分别为8.22±1.95,9.46±1.87,t值分别为4.486,5.552,P均＜0.01);(3)免疫组织化学法检测VMC组小鼠各时间点心肌CTGF蛋白(各时间点分别为171.50±10.25,141.70±10.863,110.35±11.051,81.05±10.190)及TGF-β1蛋白(184.90±11.480,150.25±9.915,103.50±10.455,84.15 ±9.848)阳性表达均较对照组高(P均＜0.01);(4)VMC小鼠心肌组织中CTGF mRNA(0.4728±0.0328,0.5750±0.0439,0.6228±0.0458,0.7265±0.0469)及TGF-β1mRNA(0.5757 ±0.0426,0.6922 ±0.0408,0.7447±0.0510,0.8513±0.0505)表达随病毒感染时间延长而增强(P均＜0.01);(5)VMC小鼠心肌组织中CTGF的表达与TGF-β1的表达呈显著正相关(r=0.987,P＜0.01);VMC小鼠心肌组织中CTGF的表达与CVF密切相关(r=-0.901,P＜0.01),但CTGF的表达早于心肌纤维化的出现.结论 CTGF的表达伴随VMC的心肌纤维化程度而增加,提示CTGF的异常表达可能参与了VMC中心肌纤维化的发展过程.     

福辛普利对大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子-β1蛋白及其mRNA表达的影响

目的观察血管紧张素酶抑制剂（ACEI）-福辛普利（FOS）对脂多糖（LPS）诱导大鼠肾小球系膜细胞（GMC）转化生长因子-β（TGF-β1）蛋白及mRNA表达的影响，探讨FOS延缓肾小球硬化机制。方法按经典方法体外培养大鼠GMC，转种培养后分为对照组、LPS组、LPS＋FOS组。采用ELISA法测定GMC培养上清6、12、24hTGF-β1蛋白水平，荧光半定量RT-PCR法检测TGF-β1mRNA表达。结果LPS诱导组GMC分泌TGF-β1蛋白及mRNA表达均高于对照组，LPS＋FOS组GMC分泌TGF-β1及mRNA表达较LPS组明显下降。结论FOS从蛋白和mRNA两个水平均对体外培养大鼠GMC产生TGF-β1有明显抑制作用，提示FOS抑制GMC产生TGF-β1可能是延缓肾小球硬化的重要作用机制之一。     

不同时期卡维地洛干预对柯萨奇病毒致心肌纤维化模型小鼠心肌组织炎性因子表达的影响

目的 研究柯萨奇病毒诱导小鼠病毒性心肌炎后心肌纤维化发病中转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、内皮素-1(ET-1)等炎性因子的表达及不同时期应用卡维地洛干预对其影响.方法 雄性BALB/c小鼠40只随机分为对照组、模型组、急性期治疗组、慢性期治疗组,每组10只.对照组皮下注射9 g/L盐水,其余组腹腔注射100TCID50的柯萨奇病毒B3(CVB3) 0.1 mL,以后每2周腹腔接种同批次CVB3,每次递增0.05 mL,共6周;急性期治疗组第2天开始、慢性期治疗组第4周开始给予卡维地洛10mg/(kg·d)灌胃,共2周;对照组和模型组均给予等量9 g/L盐水灌胃.第6周末各组取心脏计算心脏质量指数(HWI),心肌组织行Masson染色测胶原容积积分(CVF);酶联免疫吸附试验法检测心肌组织ET-1水平,免疫组织化学检测TGF-β1和CTGF水平;反转录-聚合酶链反应测定三者mRNA表达.结果 与对照组相比,模型组小鼠HWI及心肌组织CVF明显升高,差异有统计学意义(P均＜0.01);急、慢性期治疗组较模型组下降,差异有统计学意义(P均＜0.01);且急性期治疗组低于慢性期治疗组,差异有统计学意义(P均＜0.05);模型组心肌组织中TGF-β1、CTGF、ET-1 mRNA和蛋白的表达明显升高(P均＜0.01),急、慢性治疗组较模型组下降,且急性期治疗组较慢性期治疗组降低(P均＜0.01).结论 TGF-β1、CTGF、ET-1参与CVB致心肌纤维化的发病过程,卡维地洛可通过下调炎性因子的过度表达减轻心肌纤维化程度,早期应用效果好.     

转化生长因子-β1及结缔组织生长因子在病毒性心肌炎小鼠中的表达及缬沙坦的干预作用

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)在病毒性心肌炎(VM)小鼠中的表达及缬沙坦的干预作用.方法 雄性Balb/c小鼠54只随机分为对照组、模型组和治疗组.模型组和治疗组小鼠腹腔注射CVB3悬液0.1 mL建立VM模型,治疗组从接种病毒日起口饲含缬沙坦10 ms/(kg·d)的饮水.分别于第7、14、28天每组随机抽取6只小鼠断颈处死.对其心脏称重后采用40 g/L多聚甲醛固定,HE染色后光镜下观察其心肌组织形态学改变,半定量计算其病理积分.免疫组织化学法检测其心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达,并应用病理图像分析仪进行图像分析,分别计算Ⅰ型、Ⅲ型胶原面积.大鼠心肌组织CTGF、TGF-β1水平采用免疫组织化学法测定.结果 与对照组比较,模型组病理积分,心肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达,心肌组织CTGF、TGF-β1表达水平均显著升高(Pa<0.05).治疗组病理积分,心肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达、心肌组织中CTGF、TGFβ1表达水平均较模型组显著降低(Pa<0.05).相关分析显示,心肌Ⅲ型胶原蛋白表达与CTGF、TGF-β1水平呈正相关,TGF-β1与CTGF表达亦呈正相关.结论 TGF-β1及CTGF协同参与了VM小鼠心肌纤维化的发生、发展过程.缬沙坦可延缓心肌纤维化的发生发展,其与降低VM小鼠的CTGF、TGF-β1的表达有关.     

福辛普利对肾小球系膜细胞 TGF-β1/Smad 信号通路的干预作用

目的观察新型血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)--福辛普利(fosinopril,FOS)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)Ⅰ型胶原(ColⅠ)蛋白分泌和Smad2、Smad7mRNA表达量的影响。方法建立体外培养的大鼠GMC,鉴定后3～10代用于实验。实验分为正常对照组、TGF-β1刺激组(加5ng/L TGF-β1和5%的胎牛血清)和FOS组(加5ng/L TGF-β1、10μmol/L FOS和5%的胎牛血清)3组,分别于6、24和48h后ELISA法测定细胞培养上清液中ColⅠ蛋白表达量,荧光定量PCR法检测Smad2、Smad7 mRNA表达量的变化。结果①正常培养的大鼠GMC均有一定量的ColⅠ蛋白表达;TGF-β1刺激组在各时间点ColⅠ蛋白分泌均高于对照组(P<0.01),FOS各组ColⅠ蛋白分泌均低于TGF-β1刺激组(P<0.05)。②正常培养的大鼠GMC可表达一定量Smad2、Smad7 mRNA,TGF-β1刺激组在各时间点Smad2、Smad7 mRNA表达量均高于对照组,FOS治疗组Smad2 mRNA表达量均低于TGF-β1刺激组;Smad7 ...     

氯沙坦片对糖尿病肾病大鼠转化生长因子-β1及结缔组织生长因子的影响

目的 观察糖尿病肾病（DN）大鼠转化生长因子-β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）在肾组织中的表达，检测尿液中两者的水平。观察氯沙坦片对肾组织TGF-β1、CTGF蛋白的表达及尿液中水平的影响。方法 Wistar大鼠摘除右肾后，注射链脲菌素制造DN大鼠模型。随机分为糖尿病肾病实验组和氯沙坦治疗组。于第6、12周用免疫组织化学法检测肾组织TGF-β1、CTGF蛋白质的表达，ELISA法检测尿液中两者水平。结果 与治疗组相比，实验组12周时尿液TGF-β1、CTGF水平、肾间质纤维组织相对面积显著增加，肾组织TGF-β1、CTGF蛋白质的表达显著升高（P均〈0．01）；肾小球系膜基底膜相对面积扩大（P〈0．05）。与6周相比，实验组12周时尿液TGF-β1、CTGF水平，肾间质纤维组织相对面积显著增加。肾组织内TGF-β1、CTGF蛋白质的表达亦明显升高（P均〈0．01）；治疗组12周肾小球TGF-β1蛋白质的表达升高（P〈0．05），肾小管TGF-β1蛋白质的表达明显升高（P〈0．01）。肾组织内TGF-β1蛋白与CTGF蛋白的表达呈显著正相关（r=0．85P〈0．01），尿液中两者排泄量亦呈明显正相关（r=0．76P〈0．01）。结论 TGF-β1、CTGF蛋白在DN大鼠肾组织表达及尿液中的排泄显著升高。氯沙坦可减轻肾组织TGF-β1、CTGF蛋白的表达，减少两者尿液中的排泄，具有肾保护作用。     

转化生长因子-β1诱导新生大鼠肺成纤维细胞增殖的细胞周期调控研究北大核心CSCD

目的探讨转化生长因子（TGF）-β1刺激下细胞周期调控对肺成纤维细胞增殖的影响,了解支气管肺发育不良（BPD）的发病机制。方法对出生1 d新生大鼠的肺成纤维细胞进行分离、纯化和鉴定,将原代肺成纤维细胞经TGF-β1刺激后,应用免疫组织化学及Western blot技术检测周期蛋白依赖性激酶-2（CDK2）及p27的蛋白表达情况,实时荧光定量PCR检测CDK2及p27的mRNA表达,并同时应用CCK8试剂盒检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果对鉴定后的新生大鼠肺成纤维细胞进行TGF-β1刺激后,可以观察到原代成纤维细胞的CDK2蛋白及mRNA表达增加,并伴p27蛋白及mRNA水平下降;CCK8显示吸光度值增高,增殖明显,S期细胞所占比例同时增加,G0/G1期逐渐减少。0、10 μg/L的TGF-β1刺激后S期细胞所占比例分别为4.63%、67.09%,G0/G1期为83.67%和67.09%。10 μg/L的TGF-β1刺激12 h和48 h后S期细胞所占比例分别为7.64%、9.11%,G0/G1期为73.99%和59.81%。随着TGF-β1水平增加（0 μg/L、5 μg/L及10 μg/L）,CDK2蛋白及mRNA表达进一步增加;并且相同水平TGF-β1刺激,随着时间的延长（10 μg/L的TGF-β1刺激12、24、48 h）,CDK2蛋白及mRNA表达进一步增加,48 h较对照组增加显著（P〈0.05和〈0.01）,p27蛋白及mRNA水平随之进一步下降,48 h较对照组增加显著（均P〈0.01）。结论TGF-β1能够使新生大鼠肺原代成纤维细胞CDK2/p27表达失衡,加速细胞周期进程,使成纤维细胞过度增殖。     

高氧诱导早产鼠肺纤维化中结缔组织生长因子的表达及其意义

目的：结缔组织生长因子（CTGF）是新近发现与纤维化发生密切相关的一种因子，但其与早产儿慢性肺疾病（CLD）的肺纤维化有何关系，迄今未见报道。该文旨在阐明CTGF在高氧致早产鼠CLD发生、发展的表达规律，并探讨其在纤维化中表达及意义。方法：采用高浓度氧诱导早产鼠CLD模型，应用酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫组织化学及反转录聚合酶链反应（RT-PCR）等技术，动态观察CTGF mRNA表达，并同时测定肺成纤维细胞的增殖性细胞核抗原（PCNA）指数及肺组织 Ⅰ 型胶原的含量和TGF-β1蛋白表达水平。结果：生后1 d，3 d，两组 Ⅰ 型胶原、PCNA指数、TGF-β1蛋白及CTGF mRNA表达水平无差异（P>0.05）；实验组肺组织TGF-β1蛋白表达7 d升高（P<0.05），Ⅰ 型胶原、PCNA指数及CTGF mRNA表达14 d升高（P<0.05），21 d均达高峰（P<0.01）；肺组织CTGF mRNA表达与 Ⅰ 型胶原呈明显正相关（γ=0.89, P<0.01）。结论： 高氧致CLD早产鼠肺组织CTGF mRNA表达水平与肺组织纤维化的程度相一致，CTGF与CLD的肺纤维化密切相关。［中国当代儿科杂志，2007，9（5）：449-452］     

肾病综合征患儿转化生长因子β基因表达与激素反应的关系

目的探讨肾病综合征(NS)患儿血清中转化生长因子β(TGF-β)的浓度和外周血单个核细胞 (PBMC)TGF-β mRNA的表达与激素反应类型的关系。方法将21例NS患儿分为激素敏感型(13例)和激素耐药型(8例),应用ELISA方法检测NS患儿血清和PBMC上清液TGF-β的浓度,采用原位逆转录多聚酶链反应(In Situ-RT PCR)方法检测PBMC中TGF-β mRNA的表达。结果①临床各项指标与激素疗效无关;激素疗效与治疗前血肌酐(SCr)的水平有关。②NS激素耐药型病理以MsPGN为主(57．1％)。③血清TGF-β浓度组间比较差异无显著性(P>0．05)。④PBMC上清液TGF-β浓度在激素敏感型与激素耐药型组间比较差异有显著性(P<0．01); 激素敏感型与对照组比较差异无显著性(P>0．05)。⑤PBMC中TGF-β mRNA表达在激素耐药型组明显增强,激素敏感型组仅有微弱表达,对照组无表达。结论儿童NS中FGF-β产生和mRNA表达与激素反应类型有关,NS 早期检测TGF-β浓度可作为对激素反应的一个预测指标。     

人气道平滑肌细胞在TGF-β1刺激下细胞表型转换标志物——基质Gla蛋白mRNA和主要纤维化蛋白表达研究

目的平滑肌细胞表型具有可塑性,在哮喘气道重建中,平滑肌细胞表型由收缩型向合成型转化.本研究探讨气道平滑肌细胞在转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激下细胞表型转换的特异性标志物基质Gla蛋白(MGP)mRNA和主要纤维化蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ的表达.方法人气道平滑肌细胞体外原代培养,传2～3代后重新接种,实验组10组,给予TGF-β1100μg/ml刺激,每组均设未予TGF-β1复管作为对照,其余培养条件相同,7 d后90%的细胞融合,收获.RT-PCR方法研究平滑肌细胞MPG mRNA的表达,Western blot法分析胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ的表达水平.结果经TGF-β1刺激后,气道平滑肌细胞表达MGP mRNA为(62.3±13.1)%,对照组MGP mRNA为(27.4±11.4)%,两组差异有统计学意义(P＜0.01),TGF-β1刺激后的平滑肌细胞表达胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ分别为(灰度值)67.6±10.0,94.5±9.8,83.8±16.2,高于对照组的平滑肌细胞,差异有统计学意义(P＜0.01).结论TGF-β1促进气道平滑肌细胞表达MGP mRNA和胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ,后两者作为气道平滑肌细胞表型转化的早期标志物,表明平滑肌细胞存在由收缩型向合成型转化的趋势.可以认为TGF-β1与平滑肌细胞的相互作用促进了气道重建过程.     

地骨髓转化生长因子-β1与巨核细胞转化生长因子-β1Ⅲ型受体变化在特发性血小板减少性紫癜发病中的意义

目的探讨骨髓转化生长因子-β（TGF-β1）及巨核细胞转化生长因子（TGF-β1）Ⅲ型受体（TGF-β1 RⅢ）变化在特发性血小板减少性紫癜（ITP）发病中的意义。方法收集急性ITP 28例（AITP组）、慢性ITP 16例患儿（CITP组）和20例相对正常儿童骨髓；采用Percoll密度梯度及免疫磁珠法分离骨髓巨核细胞；ABC-ELISA法检测TGF-β1水平；原位杂交法检测TGF-β1 RⅢ mRNA表达情况。结果AITP组与CITP组骨髓TGF-β1水平及巨核细胞TGF-β1 RⅢ mRNA表达均明显高于对照组（P〈0．05），且CITP组明显高于AITP组（P〈0．05）。结论检测ITP患儿骨髓TGF-β1水平及巨核细胞TGF-β1 RⅢ表达情况对于研究ITP发病机制及早期分型有重要参考价值。     

TGF-β1与神经性膀胱逼尿肌纤维化

目的探讨神经性膀胱逼尿肌纤维化与TGF-β1表达的关系.方法 1998年10月～2000年6月在我院行手术治疗的神经性膀胱患儿21例,男14例,女7例,平均年龄8.4岁.对照组为12例同期在我院行膀胱造瘘的患儿,男8例(尿道下裂),女4例(输尿管囊肿),平均年龄6.3岁.术中自膀胱顶部切取膀胱肌层,10%甲醛固定,石蜡包埋,连续切片,分别应用原位杂交技术、免疫组化方法观察病例组和对照组儿童逼尿肌中TGF-β1mRNA以及Ⅲ型胶原的表达.应用χ2检验比较病例组与对照组逼尿肌中TGF-β1mRNA与Ⅲ型胶原表达,spearman秩相关分析分析病例组逼尿肌中TGF-β1 mRNA与Ⅲ型胶原表达的关系.结果显微镜下观察见病例组逼尿肌中TGF-β1mRNA阳性表达率为80.1%,而对照组阳性表达率为33.3%.Ⅲ型胶原的高表达率为76.2%,对照组高表达率为25.0%.χ2检验结果表明病例组逼尿肌中TGF-β1mRNA及Ⅲ型胶原的表达较对照组明显增加,spearman秩相关分析示病例组TGF-β1mRNA的表达与Ⅲ型胶原的表达正相关(r=0.52,P<0.05).结论神经性膀胱的显著的病理特征是逼尿肌间质中胶原纤维的沉积,TGF-β1可能在逼尿肌纤维化中起重要作用.     

转化生长因子β1对高体积分数氧暴露早产新生大鼠肺纤维化的调控作用

目的 探讨转化生长因子(TGF-β1)对高体积分数氧(高氧)暴露早产新生大鼠肺纤维化的调控作用.方法 将80只早产新生SD大鼠随机分为空气组和高氧组,每组40只;每组又随机分为3、7、14、21 d4个亚组.采用原位杂交法检测各亚组早产大鼠肺组织TGF-β1 mRNA表达与分布;采用免疫组织化学法检测各亚组早产大鼠肺组织TGF-β1蛋白、Ⅰ型与Ⅲ型胶原表达与分布;并用图像分析方法 检测各亚组早产大鼠肺组织TGF-β1 mRNA及其蛋白与Ⅰ型、Ⅲ型胶原阳性表达的PU值.结果 高氧第3天,肺组织TGF-β1mRNA及其蛋白呈现弱阳性表达,第7、14、21天呈强阳性表达,其表达量于第7天开始增高,第14天达高峰;肺组织TGF-β1 mRNA及其蛋白阳性表达的Pu值在第7、14、21天均高于空气组(Pa<0.01).Ⅰ型胶原在第3、7天时呈弱阳性表达,第14、21天时呈强阳性表达,其表达量从第14天开始增加,第21天时达高峰;Ⅲ型胶原表达强度在第3天时呈弱阳性,第7天时开始增强呈中等阳性表达,第14、21天时呈强阳性表达,其表达量在第7天时开始增加,第14天时达高峰,表达量高于Ⅰ型胶原;肺组织Ⅰ型、Ⅲ型胶原阳性表达的PU值在第14、21天时均明显高于空气组(Pa<0.01).高氧组肺组织TGF-β1 mRNA及其蛋白与Ⅰ型、Ⅲ型胶原阳性表达均分布于支气管和血管周围结缔组织及肺间质中;在第14、21天高氧组肺组织TGF-β1蛋白表达与Ⅰ型胶原呈显著正相关(r=0.881,0.793 P.<0.01),与Ⅲ型胶原亦呈显著正相关(r=0.866,0.891 Pa<0.01).结论 TGF-β1过度表达而介导的细胞外基质(ECM)过度合成是肺纤维化发生的重要机制,在肺纤维化形成过程中TGF-β1对Ⅰ型、Ⅲ型胶原等ECM的沉积发挥重要的调控作用.