脓毒症胞外组蛋白对血管内皮细胞毒性作用机制的研究

目的：研究脓毒症中胞外组蛋白水平的变化及其对内皮细胞毒性作用机制。方法2010年1月至2014年12月上海儿童医学中心PICU婴儿脓毒症病例130例,根据脓毒症诊断标准分为脓毒症组(51例)和严重脓毒症组(79例),同期健康体检儿童作为对照组(108例)。根据28 d病死率将严重脓毒症组分为生存组(45例)和死亡组(34例)两个亚组。测定各组血清组蛋白浓度,并分析其与疾病严重程度及预后的相关性。培养人脐静脉内皮细胞( human umbilical vein endothelial cell, HUVEC),用小牛胸腺组蛋白(calf thymus histone,CTH)以不同浓度(0、50、100、200及300μg/ml)及不同时间(200μg/ml CHT处理0、5、15、30、45、60 min)处理后,用流式细胞仪检测细胞存活率,以电镜观察细胞的形态学变化,以Western blot检测核因子( nuclear factor,NF)-κB及丝裂原活化蛋白激酶( mitogen-activa-ted protein kinase,MAPK)信号通路中NF-κB抑制因子IκB以及磷酸化p38/p38表达,以ELISA检测肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6表达水平。结果严重脓毒症组患儿血清组蛋白水平(19．17±10．20)显著高于脓毒症组(2．29±1．00)及对照组(0．23±0．26)(P<0．001),并且在严重脓毒症患儿中,死亡患儿血清组蛋白水平显著高于存活者(29．47±5．99 vs．10．94±2．68,P<0．001)。体外实验发现,随CTH处理时间或者剂量增加, HUVEC 的生存率逐步下降。扫描电镜和透射电镜观察 CTH 处理后HUVEC 发现细胞膜破坏现象。组蛋白可以激活NF-κB及MAPK通路,并释放肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6等炎性因子。结论在脓毒症患者中胞外组蛋白浓度与疾病严重程度相关。 CTH可以呈剂量依赖性及时间依赖性诱导HUVEC死亡。胞外组蛋白在脓毒症中通过对血管内皮细胞的毒性作用,介导疾病进程,而这一毒性作用与破坏内皮细胞细胞膜及激活NF-κB及MAPK信号通路有关。     

胞外组蛋白在脓毒症发病机制中的研究进展

脓毒症是儿童重症监护病房常见的危重症，具有较高的病死率。目前脓毒症的发病机制仍不明确。近年来研究发现脓毒症发病与细胞外组蛋白具有相关性，该文对相关文献进行综述，为临床脓毒症的诊断及治疗提供新思路。     

胞外体与婴儿巨细胞病毒感染的相关性

目的 研究婴儿感染巨细胞病毒(CMV)后体内胞外体(EXO)水平的变化,以及细胞因子IL-4、γ干扰素(IFN-γ)水平在CMV感染婴儿血清和(或)EXO中的变化,探讨CMV感染对婴儿免疫功能的影响以及EXO在CMV感染发生发展过程中的作用.方法 选择山东大学齐鲁医院儿科收治的53例CMV感染婴儿(CMV感染组),排除其他病毒感染及遗传代谢性疾病;42例非CMV感染同龄儿童为对照组.分别采用ELISA法检测其血清EXO水平及血清EXO中IL-4水平,以及血清中IFN-γ水平.结果 CMV感染组患儿血清EXO、IFN-γ水平均较对照组显著降低(Pa＜0.05),血清IL-4水平较对照组升高,但差异无统计学意义(P>0 05),EXO中IL-4水平较对照组显著升高(P<0.05);二组血清IL-4与EXO IL-4呈正相关(r=0.794,P=0.000),感染组血清IL-4与EXO IL-4呈显著正相关(r=0.902,P=0.000).结论 1.CMV可破坏人体正常的Th1/Th2平衡,Th2免疫应答占优势,Th1免疫应答受抑制.2.CMV感染后,与Th1细胞相关的细胞因子IFN-γ减少,而与Th2细胞相关的细胞因子IL-4增多.3.EXO可作为细胞因子IL-4分泌的方式,介导机体细胞免疫功能的降低和Th1/Th2失衡,导致免疫耐受和免疫抑制,从而使病毒难以清除,感染持续并慢性化.     

曲古霉素A对脂多糖诱导的人微血管内皮细胞损伤和凋亡的影响

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古霉素A(TSA)对脂多糖(LPS)诱导的人微血管内皮细胞(HMEC)损伤和凋亡的影响。方法以HMEC为实验细胞, 建立LPS诱导的脓毒症细胞模型, 根据处理方式不同分为3组:空白对照组(加入磷酸盐缓冲液150 μL)、LPS处理组(加入5 μg/mL的LPS 150 μL)、LPS+TSA干预组(加入5 μg/mL的LPS和500 μg/L的TSA 150 μL)。各组细胞处理后继续培养24 h和48 h, ELISA法检测细胞培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)浓度并使用流式细胞术检测细胞凋亡程度, 进行组间比较。结果与空白对照组比较, LPS处理组LDH浓度在24 h[(4.67±1.27)ng/L比(11.57±0.83)ng/L]和48 h[(7.93±0.80)ng/L比(12.72±0.89)ng/L]显著升高;与LPS处理组比较, LPS+TSA干预组LDH浓度在24 h[(6.01±0.29)ng/L]和48 h[(5.96±0.27)ng/L]明显下降, 差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组相比, LPS处理组HMEC细...     

脓毒症时内皮细胞高渗透性的分子机制

在脓毒症、创伤、缺血再灌注、急性呼吸窘迫综合征、血栓形成中,血管炎症反应可表现为内皮细胞高渗透性,在这个过程中重要的机制是炎症刺激,如组胺、凝血酶、血管内皮生长因子、中性粒细胞可导致细胞骨架收缩,内皮细胞间连接增宽,液体和蛋白的渗出增加。这种结构的变化起始于激动剂与受体的结合,启动了细胞内信号传导分子,通过激酶磷酸化过程等改变细胞间通透性。针对关键信号分子介导内皮骨架分解的研究,为改善炎症损伤时血管屏障功能提供了治疗的新方向。     

组蛋白乙酰基转移酶与组蛋白去乙酰基酶在哮喘发病中的作用研究

目的 探讨哮喘病程中各种细胞因子及组蛋白乙酰基转移酶(HAT)和组蛋白去乙酰基酶(HDAC)在哮喘发病中的作用。方法 将32 只BALB/c 小鼠随机分为对照组、哮喘组、激素治疗组和HDAC 抑制剂TSA治疗组, 每组8 只。哮喘小鼠模型采用卵清蛋白腹腔注射致敏及雾化吸入法制作, 对照组采用等量生理盐水行替代注射和雾化吸入, 激素治疗组和TSA 治疗组小鼠在每次激发前30 min 分别予地塞米松1.0 mg/kg(0.2 mL)和TSA 1.0 mg/kg(0.2 mL)腹腔注射。末次激发24 h 后取外周血, 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组血清中细胞因子IL-4、IL-8 和IFN-γ 水平, 酶联免疫荧光法测定各组外周血单个核细胞中HAT 及HDAC 活性。结果 哮喘组血清中IL-4 及IL-8 水平较对照组、激素治疗组和TSA 治疗组升高(P<0.05), IL-4 及IL-8 水平在对照组、激素治疗组和TSA 治疗组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。哮喘组HDAC 活性较对照组、激素治疗组和TSA 治疗组均降低, HAT 活性较激素治疗组明显升高(P<0.05);HDAC 和HAT 活性在对照组、激素治疗组和TSA 治疗组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 哮喘发病与HDAC 活性下降有关, HDAC活性下降可能引起炎症因子分泌增多从而诱发哮喘。     

小儿铜绿假单胞菌脓毒症的临床特点

目的 探讨小儿铜绿假单胞菌脓毒症的临床特点及其治疗措施.方法 对广州市妇女儿童医疗中心儿童医院院区2008年5月-2010年7月收治的7例铜绿假单胞菌脓毒症病例资料进行回顾性分析.结果 7例铜绿假单胞菌脓毒症患儿中男6例,女1例;5例年龄＜1岁,最大2岁.2例患儿有基础疾病,分别为阑尾炎行阑尾切除术和粒细胞减少症;4例为社区获得性感染,3例为院内感染.患儿均有发热、皮肤损害和多器官功能损害,皮肤损害表现为坏疽性深脓疱疹,全身均可分布,肛门周围皮肤多有受累(4/7例),5例存在深部组织和体内器官的化脓性病变.患儿血培养铜绿假单胞菌均阳性,血清超敏CRP均升高,其中3例患儿还有1个或1个以上病灶组织培养出铜绿假单胞菌;外周血白细胞计数和血小板计数多降低(5/7例),患儿出现高胆红素血症和低清蛋白血症.7例入院后均进行抗生素治疗,5例住院早期即使用敏感抗生素;6例住院期间进行外科手术,2例行多次血浆置换、连续静脉-静脉血液滤过单独或联合治疗.治愈或好转出院6例,死亡1例,平均住院天数33 d.结论 社区获得性铜绿假单胞菌脓毒症并不罕见,坏疽性深脓疱疹是铜绿假单胞菌脓毒症的特征性表现.早期使用有效抗生素、适时的外科干预治疗很重要,对多器官功能损害的患者血液净化治疗有助于改善病情.     

儿童铜绿假单胞菌脓毒症1例报告

目的探讨儿童铜绿假单胞脓毒症的临床特点。方法回顾性分析1例儿童铜绿假单胞菌脓毒症的临床经过,总结其临床特点。结果患儿,男,10个月。以发热、烦躁、嗜睡,伴轻微咳嗽及喉间痰鸣为主要表现。经痰培养及血培养确诊为铜绿假单胞脓毒症,经敏感抗生素抗感染治疗后好转出院。结论正确及时选用敏感抗生素,可减少铜绿假单胞菌脓毒症引起的严重并发症及病死率。     

糖皮质激素在严重脓毒症及脓毒性休克中的研究及应用

严重脓毒症及感染性休克目前仍是ICU中最主要的致死原因,病死率在30%～50%之间。虽然经过清除感染灶、合理应用抗生素、通气及血流动力学支持,病死率并没有明显改善。近年来陆续报道小剂量激素替代疗法能改善严重脓毒症及感染性休克患者血流动力学指标及提高生存率,小剂量激素在此类患者中的应用再次引起讨论。该文就糖皮质激素在严重脓毒症及感染性休克中应用的进展进行综述。     

儿童铜绿假单胞菌脓毒症 14 例临床分析

目的了解儿童铜绿假单胞菌脓毒症的临床特点及药敏情况。方法回顾性分析2006-2016年诊断为铜绿假单胞菌脓毒症患儿的临床资料。结果符合铜绿假单胞菌脓毒症诊断患儿共14例,多于婴幼儿发病(78.6%),常见并发症为弥漫性血管内凝血(DIC)、肺出血。14例患儿中,7例治愈、4例死亡、3例因病情重家属放弃治疗。药敏结果提示所分离铜绿假单胞菌对氨基糖苷类和喹诺酮类抗生素具有良好的敏感性。结论铜绿假单胞菌脓毒症以婴幼儿多见,病死率高。对于疑诊患儿,早期抗感染治疗应使用覆盖铜绿假单胞菌的抗生素。     

细胞外组蛋白在先天性心脏病围手术期的变化及临床应用

目的 研究先天性心脏病患儿首次纠治术围手术期细胞外组蛋白的变化趋势,及其预测临床预后的价值.方法 分别收集32例紫绀型先天性心脏病患儿在术前(T0)、术后即刻(T1)、4h(T2)、24 h(T3)、48 h(T4)和72 h(T5)的外周血,检测血清细胞外组蛋白及血清氨基末端脑钠肽前体(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP).将细胞外组蛋白与NT-proBNP及术后临床参数作相关性分析,并用受试者工作特征曲线(ROC曲线)对细胞外组蛋白的预后价值进行评估.结果 细胞外组蛋白术后开始升高,在T1时达到峰值(0.762±0.287) μg/ml,在T4时(0.271±0.145)μg/ml回降接近T0时(0.194±0.098) μg/ml水平.NT-proBNP于T3时达到峰值(7 725.0±3 502.3)pg/ml,T5时水平(5 123.0±3 211.8) pg/ml仍显著高于T0时(478.4±206.1) pg/ml.线性回归分析示,T1时细胞外组蛋白与T3时NT-proBNP(r=0.772,P＜0.01)、体外循环时间(r=0.882,P＜0.01)、主动脉阻断时间(r=0.795,P＜0.01)、术后机械通气时间(r=0.607,P＜0.01)、重症监护室(ICU)时间(r=0.602,P＜0.01)之间均有统计学相关性.ROC曲线分析示T1时细胞外组蛋白水平对术后48 h内正性肌力药物评分(VIS)＞10的预测敏感度为61.5％,特异度为84.2％,界值为0.786 μg/ml,曲线下面积(area under curve,AUC)为0.729;对术后ICU时间＞5d的预测敏感度为81.8％,特异度为76.2％,界值为0.837 μg/ml,AUC为0.814.结论 术后细胞外组蛋白较NT-proBNP更早达到峰值,且其峰值与病情严重程度相关,可作为紫绀型先天性心脏病患儿首次纠治术后的早期临床预后指标.     

Transient low level of IgG3 induced by sepsis

Staphylococcus aureus sepsis developed in a 14 year old girl. Immunological evaluation revealed low level of IgG3, although total IgG level was normal. The level of IgG3 increased gradually along with the recovery from sepsis. Immunoglobulin replacement therapy might have been useful in this patient, even though the total immunoglobulin level was within normal limits.     

极低出生体重儿败血症的临床分析

目的 分析极低出生体重儿败血症的发生情况及临床特征.方法 收集2019年1月至2020年6月南京医科大学附属妇产医院新生儿科收治的极低出生体重儿(出生体重<1500 g)的临床资料,分析败血症发生率、病原菌分布及危险因素.结果 共369例患儿纳入研究,其中败血症138例,包括早发型败血症(early-onset sep...     

����P���ʶԸ�����¶�¢��ͷ�����Ƥϸ����Ӱ�켰����ϸ�����źŵ��ڼ�ø�ź�ת��ͨ·��ϵ�о�

??Abstract Objective??To investigate the regulatory mechanism of neuropeptide substance P??SP?? in lung injury induced by hyperxia and the relationship between SP and extracellular signal-regulated protein kinase??ERK??signal transduction pathway. Methods??The primary premature rats type II alveolar epithelial cells??AEC?? were isolated and purified.They were randomly divided into 3 groups?? including air group?? hyperxia group and SP intervention group. Air??21% oxygen?? group and hyperxia??95% oxygen?? group were placed in the closed oxygen chamber for 48 h respectively. With regard to SP intervention group?? SP??1×10-6 mol/L?? was added before the exposure.As following?? the group was exposed to 21% and 95% oxygen for 48 h respectively. Sample of each group was obtained at 12??24 and 48 h and morphologic change of AEC?? was observed under electron microscope.MTT and flow cytometry was employed to detect the growth rate and apoptosis rate respectively.Dynamic change of phosphorylated ERK was determined using Western blot. Results??Growth rate of AEC?? in hyperxia group decreased signifcantly and the apoptosis rate increased remarkbly compared to air group.The growth rate increased notablely and the apoptosis rate decreased obviously after the intervention of SP.Meanwhile?? the morphologic injure improved signifcantly.Hyperxia stimulation could result in activation of ERK phosphorylation??and the expression of phosphorylated ERK increased remarkbly in the impaired AEC?? induced by hyperxia.Nevertheless??the expression of ERK increased notably after the intervention of SP. Conclusion??SP could promote the proliferation and inhibit the apoptosis of AEC?? exposed to hyperxia via suppressing activation of ERK signal and then inhibiting the apoptosis??which has a protective effect on AEC??under oxidative stress.     

小剂量芬太尼在PICU中的应用

目的　 探索芬太尼的镇静、镇痛作用在PICU中的临床应用。 方法 　选择 36例危重患儿用芬太尼 1～ 4μg/(kg·h)持续静脉滴注 ,观察用药后 4h、8h、2 4h、48h的镇静、镇痛效果和对危重儿动脉血气分析、经皮氧饱和度、Ramsay的镇静分级影响 ,以及恶心、呕吐、心律失常的副反应情况。 结果 　 36例危重患儿在持续静脉滴注芬太尼后发生呼吸机对抗情况减轻 ,氧合和通气功能有所改善 ,用药前、后动脉血气分析变化有显著差异性 (P <0 0 5 ) ,镇静达到 2～ 4级 ,有效率达到 94 4%。 结论 　芬太尼的镇静、镇痛作用可减轻危重患儿应激反应 ,减少氧耗等 ,安全有效实施各种操作、治疗 ,而且该药不良反应较小 ,有利于提高危重患儿急救的存活率。     

中性粒细胞胞外诱捕网在新生儿急性呼吸窘迫综合征中的表达及意义北大核心CSCD

目的动态观察中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)的标记物游离DNA(cell free-DNA,cf-DNA)在新生儿急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)中的变化,并评估其与ARDS病情严重程度及早期诊断的关系。方法前瞻性纳入2021年1月—2022年6月入住江苏大学附属医院诊断为ARDS的新生儿作为研究组(ARDS组),根据氧指数(oxygen index,OI)分为轻度ARDS组(4≤OI<8)、中度ARDS组(8≤OI<16)及重度ARDS组(OI≥16)。对照组选自同期在该院新生儿科观察的黄疸新生儿,均无引起新生儿黄疸的病理性因素。ARDS组在入院后第1、3、7天采集外周血标本,对照组在入院时采集外周血标本。采用荧光酶标仪检测血清cf-DNA水平;采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平。采用Pearson相关分析法评估血清cf-DNA水平与血清IL-6和TNF-α水平的相关性。结果ARDS组共纳入50例患儿,其中轻度ARDS 15例,中度ARDS 25例,重度ARDS 10例;对照组纳入25例新生儿。与对照组相比,不同病情程度的ARDS各组血清cf-DNA、IL-6、TNF-α水平显著增加(P<0.05)。与轻度ARDS组相比,中度及重度ARDS组血清cf-DNA、IL-6、TNF-α水平显著增加(P<0.05),重度ARDS组增加更为明显(P<0.05)。与入院后第1天相比,ARDS各组血清cf-DNA、IL-6、TNF-α水平在入院后第3天显著增加,而第7天显著下降(P<0.05)。Pearson相关分析显示,在50例ARDS新生儿中,血清cf-DNA水平与血清IL-6及TNF-α水平均呈正相关(P<0.05)。结论ARDS新生儿存在NETs过量表达,动态监测cf-DNA水平在评估新生儿ARDS病情严重程度及早期诊断中有一定临床价值。     

体外头孢曲松对人肾小管上皮细胞凋亡基因的影响

目的探讨头孢曲松对人肾小管上皮细胞凋亡基因的影响。方法体外培养人肾小管上皮细胞,以不同浓度头孢曲松刺激后,倒置显微镜观察人肾小管上皮细胞形态,荧光定量PCR法检测不同浓度头孢曲松作用下人肾小管上皮细胞中凋亡相关基因p53、bcl-2及c-Myc的相对表达量。结果以不同浓度的头孢曲松(0、20、40、80 mg/L)体外刺激人肾小管上皮细胞,光镜下细胞形态未见明显改变。p53、c-Myc和bcl-2三个基因相对表达量在不同浓度头孢曲松的组间差异有统计学意义(P均0.01)。与另外三组相比,80 mg/L组p53及c-Myc基因相对表达量升高,bcl-2基因相对表达量降低,差异有统计学意义(P均0.01);而0、20、40 mg/L三组间3个基因相对表达量的差异无统计学意义(P均0.05)。结论头孢曲松在较高血药浓度下导致人肾小管上皮细胞促凋亡基因的表达增加,抑制凋亡基因的表达降低,这可能是临床头孢曲松引起肾损伤的机制之一。