实时精子分离技术(王氏管法)的实验和临床应用研究

目的 :为临床不育症和优生优育提供一种安全、高效的精子分离技术。方法 :采用实时精子分离技术 (王氏管法 )对 2 0份正常精液和 40份感染精液标本进行了优质精子分离纯化和去除精浆的杂质和微生物 (如细菌、病毒、沙眼衣原体、解脲支原体等 )的效果 ;80例少、弱、畸形精子患者使用王氏管法筛选获得优质精子后对其配偶施行宫内人工授精 (IUI)获孕效果进行了观察 ;与上游法和 Percoll梯度法的分离效果和授精成功率进行了比较。结果 :王氏管法在筛选优质精子、去除精浆杂质和微生物以及使用筛选后的精子作配偶 IUI成功率均明显优于上游法和 Percoll密度梯度离心法。结论 :实时精子分离技术值得临床进一步研究和推广应用。     

实时精子分离系统(王氏管系统)

辅助生殖医学技术是生殖医学的一个重要组成部分.精子的分离、纯化、人工授精、试管婴儿和配子输卵管内移植等均属于这一范畴.精子的分离纯化方法很多,诸如精子浮游技术(ConventionalSwim-up technique)、帕可尔梯度法(Percoll grad-ient),离心法(Centrifugation),浮游沉降法(Mig-ration Sedimentation)和滤网法等.但此类方法均不能达到完全的无菌状态,更无法获得完全优质的精子.故精子的分离纯化一直是辅助生殖医学中的一个重要研究课题.     

精子分离两种方法的比较和评价

目的 :探讨王氏管法和精子上游法在精子分离中的应用 ,比较两者的优缺点。　方法 :随机选择 12 7份精液 ,采用 2种方法进行配对处理 ,比较 2种方法分离前后精子活动率、形态、活力和精子顶体形态、精子染色质以及精子膜完整性等参数的变化。　结果 :2种方法处理后的精子活动率、精子活力以及精子形态有显著的差异 (P <0 0 1) ,王氏管法处理后精子顶体完整率、正常染色质率及精子膜完整率亦显示出显著的差异 (P <0 0 1)。　结论 :王氏管法和精子上游法在精子处理中均可获得较好的精子质量 ,但王氏管法则获得更优质的精子 ,且具有方便操作和实用的特点。     

两种精子优选方法效果比较

目的　探讨精子经王氏管和密度梯度离心法处理后精子参数的变化 ,比较两者在宫内人工授精 (IUI)的临床效果。　方法　选择不育男性精液 15 7份 ,采用两种方法进行配对处理 ,比较两种分离方法前后精子活力、正常形态率、精子顶体形态和精子染色质等变化 ;分离后的精子用于IUI的临床妊娠率。　结果　两种方法处理后的精子活力 (a +b级 )、正常精子形态率、精子顶体完整率、正常染色质率与处理前比较有显著差异 (P <0 .0 1) ;但两种方法分离的精子用于IUI的临床妊娠率无显著差异 (P >0 .0 5 )。　结论　王氏管法和密度梯度离心法处理精子后均获得质量较好的精子 ,但用于IUI后临床妊娠率无明显差异     

人类精子分离研究进展

目前全世界已发现 3 0 0多种性连锁隐性遗传性疾病 ,如色盲、肌营养不良、血友病和 G-6PD缺乏等。这些疾病主要通过携带致病基因的母亲传给男性子代。产前诊断及选择性流产曾经是唯一能避免患儿出生的方法。近年来发展起来的种植前胚胎性别诊断可以说是产前诊断的延伸。广义的种植前性别诊断还应包括受精前配子的性别诊断 ,即 X和 Y精子的分离和鉴别。1 973年 Ericsson等 [1] 首次报道用白蛋白柱法分离 Y精子 ,随后 Check和 Katsoff[2 ]报道用改良的上游法也可收集更多的 Y精子。Steeno 等 [3]和 Iizuka 等 [4 ]则相继报道Sephadex柱…     

体外受精—胚胎移植中三种附睾精子分离方法的比较

1992年卵母细胞浆内单精子注射技术 (ｉｎｔｒａｃｙ ｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ,ＩＣＳＩ)的问世 ,使体外受精-胚胎移植 (ｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｅｍｂｒｙｏｔｒａｎｓ ｆｅｒ ,ＩＶＦ ＥＴ)首先在治疗男方少弱畸精不育方面获得成功[1] 。但单纯ＩＣＳＩ技术对于男性无精子症仍然是力不从心 ,而该病患者在男性不育患者中占很大比例。经皮穿刺附睾取精 (ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｅｐｉｄｉｄｙ ｍａｌｓｐｅｒｍａｓｐｉｒａｔｉｏｎ ,ＰＥＳＡ)方法的建立 ,使ＩＶＦ ＥＴ用于无精子症的…     

Comparative study on efficacy of three sperm-separation techniques

Aim: To evaluate the comparative effectiveness of real-time sperm separation technique (Wang's tube method) andother two conventional methods in isolating high-quality sperm preparation, and to compare the spouse pregnancy ratein intrauterine insemination (IUI) with sperm preparations isolated by these methods. Methods: The effectivenessof the real-time sperm separation technique, the conventional swim-up and the Percoll discontinuous density gradientmethods in isolating sperm preparations from 60 infertile patients (20 with apparently normal semen and 40, abnormalsemen contaminated with microorganisms and other impurities) was evaluated and compared. The microorganisms to beremoved included bacteria, vires, Chlamydia trachomaticum, Ureaplsama urealyticum, etc. The spouse pregnancyrates in IUI with sperm preparations isolated by these three techniques from 80 oligoasthenoteratospermic patients werealso compared. Results: The quality (including the percentages of normal form, normal-chromatin and motiles     

显微技术附睾管输精管吻合治疗梗阻性无精子症

目的　探讨附睾管梗阻性无精子症的有效治疗方法。方法　我科自2001年12月～2006年12月应用显微外科技术对9例附睾管梗阻性无精子症患者行附睾管输精管吻合术进行回顾性分析。结果　7例术后精液分析可见精子,其中5例精液分析结果正常,2例已生育。手术成功率77．8％。结论　应用显微外科技术行附睾管输精管吻合术是目前治疗附睾管梗阻性无精子症的有效方法。     

可变投射显微镜系统对活体精子形态学的视屏诊断

布拉福德博士首创可变投射显微镜系统［ＢｒａｄｆｏｒｄＶａｒｉａｂｌｅＰｒｏｊｅｃｔｉｏｎＭｅｄｉｃａｌＭｉｃｒｏｓｃｏｐｙＳｙｓｔｅｍＢＶＰＭＴＭ］用于活血片及干血片检查来诊断疾病。随着男性学领域研究工作的不断开拓，评价男性生育能力的各项检测手段日益更新，精液质量分析已成为了解男性生育能力的重要检测项目，ＢＶＰＭＴＭ活体精子形态学视屏诊断这一新技术为临床、科研、教学开辟了新途径，现报告如下。材料和方法一、仪　器美国ＢＶＰＭＴＭ由中国总代理浙江省公安厅华达实业公司提供。二、标　本门诊男性不育病人…     

3种精子计数池在计算机辅助精液分析系统中的质量评价

目的:应用计算机辅助精液分析(CASA)系统对3种常用精子计数池进行比较,评价其在精子密度及活力分析方面的差异。方法:用浓度为(20±5)×106/ml乳胶珠溶液模拟精液样本,以Makler计数池、Leja计数池、Microcell计数池3种精子计数池作为精液分析工具,每组测定30次,以CASA系统对其密度进行分析并统计均值(x±s)和变异系数(CV);同时收集54例门诊患者精液标本用3种精子计数池分别进行活力分析,计算各组计数池前向运动精子百分率及活动精子百分率。结果:Makler计数池、Leja计数池、Microcell计数池等3种精子计数池的密度均值和变异系数分别为(25.90±3.97)、(18.74±1.62)、(20.35±2.55)×106/ml和15.31%、8.64%、12.54%。3种精子计数池密度均值间均存在明显的差异(P<0.05);Makler计数池、Leja计数池、Microcell计数池3种精子计数池的前向运动精子百分率和活动精子百分率分别为(46.54±17.09)%、(30.65±14.88)%、(30.49±13.21)%和(59.75±16.12)%、(46.76±14.11)%、(43.11±14.02)%。Makler计数池的分析结果均明显高于Leja计数池、Microcell计数池(P<0.05),而Leja计数池与Microcell计数池比较则无明显差异(P>0.05)。结论:不同类型的精子计数池得到的密度结果会存在明显的差异,在进行精子活力分析时,Makler计数池获得的结果会较Leja计数池与Microcell计数池的结果偏高。     

人类精液冷冻前后精子运动变化的计算机辅助分析

目的 :利用计算机辅助精液分析 (CASA)系统分析冷冻前后人类活动精子的运动参数 ,并观察相关参数的变化规律。　方法 :2 38份精液样本在冷冻前和复苏后均采用CASA分析其运动参数。　结果 :复苏后精子活动率下降 ;除精子鞭打频率 (BCF)外 ,冷冻前与复苏后全部精子运动参数呈显著正相关且差异存在显著性 ;平均路径速度 (VAP)、直线速度 (VSL)、曲线速度 (VCL)下降 ,精子头侧摆幅 (ALH)下降 ,但直线性 (LIN)、前向性 (STR)升高。　结论 :CASA系统可对冻融前后精子运动参数进行客观细致的分析 ,有一定的临床应用价值。     

输精管附睾管端侧吻合术治疗附睾梗阻性无精子症1例报告

梗阻性无精子症占男性不育症的 3%～10 % [1] ,附睾梗阻是最常见的病因之一。传统的附睾输精管吻合术治疗附睾梗阻性无精子症效果较差。我们于 2 0 0 3年 1月采用显微技术行输精管附睾管端侧吻合术 1例 ,报告如下。1　临床资料病人 ,男 ,2 7岁。因婚后 2年不育 ,多次精液检查诊为“无精子症”于 2 0 0 3年 1月 7日来院。体检 :男性性征发育正常 ,外生殖器发育正常 ,睾丸大小正常 ,两侧附睾尾部可及结节 ,大小 1.0cm× 1.0cm×1.2cm ,质地中等 ,界清 ,与周围无粘连 ,无触痛。否认结核、性病、泌尿生殖系统感染病史。B超示 :两侧附睾尾部结节…     

肝胆管肿瘤手术的非接触分离技术

近十多年肝脏外科的飞速发展使得肝胆管肿瘤的外科处理逐步向肝内扩展,解剖性的肝段切除、肝叶切除、半肝切除乃至肝移植术.肝门部肿瘤的切除率由上一世纪70年代的0%,已经上升到75%以上[1-2].     

Fertilization of in vitro matured human oocytes by intracytoplasmic sperm injection （ICSI） using ejaculated and testicular spermatozoa

AIM: To evaluate the fertilization competence of spermatozoa from ejaculates and testicle when the oocytes were matured in vitro following intracytoplasmic sperm injection (ICSI). METHODS: Fifty-six completed cycles in 46 women with polycystic ovarian syndrome were grouped according to the semen parameters of their male partners. Group 1 was 47 cycles that presented motile and normal morphology spermatozoa in ejaculates and Group 2 was the other nine cycles where male partners were diagnosed as obstructive azoospermia and spermatozoa could only be found in testicular tissue fragment. All female patients received minimal stimulation with gonadotropin. Immature oocytes were matured in vitro and inseminated by ICSI. The spermatozoa from testes were retrieved by testicular fine needle aspiration. RESULTS: A total of 449 and 78 immature oocytes were collected and cultured for 48 hours, 75.5 % (339/449) and 84.6 % (66/78) oocytes were matured in Groups 1 and 2, respectively. The percentage of oocytes achieving normal fertilization was significantly higher in Group 1 than that in Group 2 (72.9 % vs. 54.5 %, P 0.05). There were no significant differences in the rates of oocytes cleavage and clinical pregnancies in these two groups [87.4 % (216/247) vs. 88.9 % (32/36); 21.3 % (10/47) vs. 44.4 % (4/9)]. A total of 15 babies in the two groups were healthy delivered at term. CONCLUSION: It appears that IVM combined with ICSI using testicular spermatozoa can produce healthy infants, while the normal fertilization rate of in vitro matured oocytes after ICSI using testicular spermatozoa was significantly lower than using the ejaculated spermatozoa.     

精子DNA碎片与复发性流产相关性的系统评价

目的系统评价精子DNA碎片与复发性流产之间的相关性。方法以"Sperm DNA integrity","The sperm DNA integrity","sperm DNA fragmentation index","sperm DNA fragmentation","SDF","DFI","Habitual Abortion","Habitual Abortions","Miscarriage,Recurrent","Recurrent Miscarriage","Recurrent Miscarriages","Abortion,Recurrent","Recurrent Abortion","Recurrent Abortions","Recurrent Early Pregnancy Loss","recurrent spontaneous abortion"为主题词及自由词检索PubMed、The Cochrane Library、Embase、Web of science,检索时间为各数据库建库至2019年7月10日,对最终纳入的非随机对照研究根据纽卡斯尔-渥太华评分(NOS)进行质量评价,运用系统评价方法阐明两者之间的相关性。结果经过仔细的搜索和排除后,最后纳入28篇非随机对照研究。结果显示:应用Acridine orange test(AO)、Comet assay(Comet)、Sperm Chromatin Structure assay(SCSA)、Sperm Chromatin Dispersion(SCD)、The terminal deoxyuridine nick labeling assay(TUNEL)方法测定精子DNA碎片,复发性流产与精子DNA碎片存在明显的相关性。结论复发性流产患者配偶精子DNA碎片指数是高于配偶无复发性流产史的正常生育男性。