孕鼠胎盘组织中GLUT1表达与其胎鼠宫内发育迟缓的相关性及机制研究

目的探讨与研究孕鼠胎盘组织中葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达与其胎鼠宫内发育迟缓(IUGR)的相关性及机制。方法孕鼠(n=24)按受孕顺序随机分为模型组和对照组,每组12只大鼠。对照组给予标准饲料(蛋白含量18%)喂养,模型组自妊娠第1 d起给予低蛋白饲料(蛋白含量6~8%)喂养。测定孕鼠胎盘组织中GLUT1表达情况。测定新生大鼠的体重、身长、胰腺重量及胰岛面积,并测定空腹血糖和糖负荷后30、60、120 min血糖值。记录胎鼠IUGR发生情况并进行相关性分析。结果模型组孕鼠的胎盘组织GLUT1相对表达水平为0.78±0.11,显著低于对照组孕鼠(2.47±0.13),差异有统计学意义(P<0.05)。模型组新生大鼠的体重、身长、胰腺重量及胰岛面积为(5.67±0.18)g、(4.65±0.24)cm、(17.33±1.48)mg、(9873.29±347.02)μm²,均显著低于对照组新生大鼠[(6.87±0.22)g、(6.27±0.17)cm、(20.93±1.38)mg、(17898.92±2452.01)μm²],差异均有统计学意义(P<0.05)。模型组新生大鼠的空腹血糖和糖负荷后30、60、120 min血糖值为(4.29±0.22)、(8.87±0.13)、(6.87±0.21)、(5.66±0.22)mmol/L,均显著高于对照组新生大鼠[(3.22±0.13)、(6.28±0.33)、(4.28±0.11)、(3.78±0.18)mmol/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson分析显示孕鼠胎盘组织GLUT1相对表达水平与新生大鼠体重、身长呈正相关(r=0.567,0.655,P<0.05)。结论孕期营养不良可导致孕鼠胎盘组织中GLUT1表达下降,也可诱发胎鼠IUGR的发生与血糖分泌紊乱,孕鼠胎盘组织中GLUT1表达与其胎鼠IUGR存在相关性。     

大鼠牙胚发育早期核心结合因子1表达的时空特异性

目的：探讨采用成骨细胞特异性转录因子核心结合因子1 cDNA探针对大鼠不同时期牙胚进行原位杂交实验，以及其在牙胚发育过程中的表达。方法：实验于2003-05／08在北京军事医学科学院组织工程研究中心实验室完成。取SD孕期大鼠12只，利用核心结合因子1 cDNA克隆产物，自行制备核心结合因子1 cDNA探针，并对同笼后11d（蕾状期）、14d（帽状期）、17d（钟状早期）及出生后1d和9d（钟状晚期）4个时期的大鼠牙胚进行原位杂交实验，观察核心结合因子1在大鼠牙胚不同时期中的表达。结果：①大鼠牙胚蕾状期原位杂交可见明显阳性表达结果，其表达部位主要集中于牙胚及牙蕾顶部邻近的外胚间充质。②帽状期及钟状早期牙乳头、成牙本质细胞及成釉细胞均呈阳性表达。③钟状晚期表现于成牙本质细胞的表达明显下调，而成釉细胞呈阳性表达。结论：核心结合因子1在牙胚不同时期的表达有时空特异性，在大鼠牙胚发育早期即蕾状期的强阳性表达，表明核心结合因子1参与了牙胚的早期发育。     

腭裂小鼠牙胚发育中β-连环蛋白的表达

背景:牙齿发育生物学中信号传导是热点问题,β-连环蛋白是Wnt信号传导通路中的关键效应因子,其在发育的牙胚中有普遍表达,并且在内釉上皮、釉结、星网状层、中间层的表达有时空变化。目的:通过苏木精-伊红染色和免疫组化技术,观察牙胚在维甲酸诱导腭裂发生中的形态学变化及β-连环蛋白的表达变化。方法:选取C57BL/6J近交系小鼠,按雌雄比2:1于晚8时合笼,次日8时检查雌鼠,发现阴栓视为妊娠,定为E0d。18只孕鼠随机分为3组:在E10d,实验组以维甲酸100mg/kg对孕鼠行一次性灌胃,制备腭裂动物模型;植物油对照组给予10mL/kg橄榄油灌胃;空白对照组不做任何处理。结果与结论:β-连环蛋白在空白对照组E13d牙胚蕾状期、E14d帽状期、E16d钟状期上皮内均有表达,且空白对照组的表达随着牙胚发育的成熟而逐渐增加,实验组的变化趋势与空白对照组相同。3个时期的实验组β-连环蛋白在牙胚中的表达水平均高于空白对照组,植物油对照组和空白对照组表达无明显差异。提示维甲酸在诱导腭裂发生过程中,可能通过干扰上皮-间充质间的相互作用,上调β-连环蛋白在牙胚中的表达,使牙胚发育受阻。     

大鼠牙胚发育早期核心结合因子1表达的时空特异性

目的:探讨采用成骨细胞特异性转录因子核心结合因子1cDNA探针对大鼠不同时期牙胚进行原位杂交实验,以及其在牙胚发育过程中的表达。方法:实验于2003-05/08在北京军事医学科学院组织工程研究中心实验室完成。取SD孕期大鼠12只,利用核心结合因子1cDNA克隆产物,自行制备核心结合因子1cDNA探针,并对同笼后11d(蕾状期)、14d(帽状期)、17d(钟状早期)及出生后1d和9d(钟状晚期)4个时期的大鼠牙胚进行原位杂交实验,观察核心结合因子1在大鼠牙胚不同时期中的表达。结果:①大鼠牙胚蕾状期原位杂交可见明显阳性表达结果,其表达部位主要集中于牙胚及牙蕾顶部邻近的外胚间充质。②帽状期及钟状早期牙乳头、成牙本质细胞及成釉细胞均呈阳性表达。③钟状晚期表现于成牙本质细胞的表达明显下调,而成釉细胞呈阳性表达。结论:核心结合因子1在牙胚不同时期的表达有时空特异性,在大鼠牙胚发育早期即蕾状期的强阳性表达,表明核心结合因子1参与了牙胚的早期发育。     

先天性牙胚发育异常的产前超声特征

先天性牙发育异常患者常表现为先天性无牙或少牙,多有牙形态异常,牙槽嵴及颌骨发育亦可受影响,严重者影响患者口腔功能、美观与心理健康,甚至生长发育期及成人期均需要持续修复治疗.患者通常就诊年龄较小,口腔修复时配合差,需多学科参与,治疗难度高,任何治疗不当都可能导致不良后果[1-2].此外还可合并全身其他器官轻重不等的异常表...     

早期营养干预对宫内发育迟缓大鼠小肠发育及黏膜双糖酶活性的影响

目的探讨生后早期营养干预对胎儿宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)大鼠小肠发育及小肠黏膜双糖酶活性的影响.方法采用母鼠全程饥饿法建立IUGR大鼠模型.实验分为以下4组①正常对照组(C组);②IUGR模型组(S组);③IUGR低蛋白组(SL组);④IUGR高蛋白组(SH组).各组大鼠分别于出生、第3周(哺乳期)、4周(幼年期)和12周(成年期)各取8只雌鼠处死后测量其小肠长度、质量,测定空肠黏膜双糖酶活性.结果①IUGR大鼠出生时小肠长度、质量均显著小于C组;乳糖酶、麦芽糖酶活性显著高于C组(均P＜0.05).②小肠长度和质量SL组在3、4、12周时均显著低于C组(P＜0.05);而SH组在4、12周时与C组比较均无统计学差异(P＞0.05).③乳糖酶活性3周时SL、SH组显著高于C组(P＜0.05);12周时双糖酶活性各组间无统计学差异(P＞0.05).结论宫内和生后早期营养对IUGR大鼠小肠发育及成年期能否达正常水平有重要的影响.各组IUGR大鼠生后4周恢复正常饮食,其小肠黏膜双糖酶活性在成年期可恢复正常水平.     

早期作业治疗对全面性发育迟缓患儿认知发育的影响

目的:探讨早期作业疗法对全面性发育迟缓患儿智力发育的影响。方法:将62例全面性发育迟缓患儿分为观察组38例和对照组24例,对照组患儿接受运动训练、慢性小脑电刺激、水疗等康复训练治疗,观察组在此基础上进行早期作业治疗。2组治疗前和治疗12周后分别进行Gesell智力测试评估检查(GDS)和Peabody运动发育量表(PDMS)测试。结果:治疗12周后,2组GDS及PDMS各项评分均较治疗前明显提高(P0.05),且观察组更高于对照组(P0.05)。在不同年龄段,治疗前后观察组患儿的GDS各项评分差值有统计学差异(P0.05),1岁以内的患儿治疗前后发育商差值最大。结论:早期作业训练治疗可有效的提高全面性发育迟缓患儿的智力各能区的发育水平,越早干预效果越好,值得临床推广。     

高温联合辐射对胚胎神经发育及脑热应激蛋白的影响

目的探讨高温联合辐射致胚胎神经发育与早期胚胎脑蛋白质和HSPs表达的关系。方法将130只孕鼠按随机抽签分为13组,每组10只。在鼠妊娠第8d,第9d分别接受60Co及γ-射线全身照射各1次,照射剂量1.0Gy;第10d各置温箱中,分别使其肛温保持在37±0.5℃,41±0.5℃,42±0.5℃,并持续3,4,5min。移出温箱2h后,每组每时段随机取5只脱颈法处死,采用Westerndotblot和lowry方法定量分析胚胎脑HSP70和蛋白质含量与胚胎神经系统畸形。结果高温联合辐射对胚胎神经毒性明显增加,并与高温强度及作用时间呈正相关;高温联合辐射作用于胚胎早期对胚胎脑蛋白质降低有复合作用(P<0.01),并可诱导脑HSP70合成。结论高温与辐射联合致神经发育与胚胎脑蛋白质合成及热应激蛋白的诱导有一定的相关性。     

超声辐照次数对孕鼠血生化指标及胎鼠向量元素含量的影响

本实验探讨了在固定辐照时间及探头频率的实验条件下，对孕中期母鼠不同次数的诊断级超声辐照产生的生物学儿应及对胎鼠的影响。结果显示：（１）孕鼠红细胞中超氧化物歧化酶含量，胎鼠身长，体重各实验组与对照组间存在显著性差异，且各实验组均氏于对照组。ＳＯＤ值与各实验组辐照次数呈负相关关系；（２）孕鼠血清中微量元素含量各组间均无显著性差异。     

言语疗法对发育迟缓儿童智力的影响

目的观察言语治疗对发育迟缓儿童智力的影响。方法对20例言语发育迟缓儿童进行评估后,制订个别化言语训练计划,尤其是训练抽象思维和逻辑思维以及注意力认知能力的发育。将适合言语发育迟缓儿童的训练内容融合并演变为游戏方式进行训练,共训练1～3个疗程。训练前后分别进行言语发育水平和智力测验。结果治疗后,10例儿童(50%)言语智商达到正常水平,总有效率100%。结论综合言语康复训练可使言语发育迟缓儿童的智商、言语发育水平均明显提高。     

构建大鼠牙胚肾被膜下培养模型及其牙胚组织混合后的成牙能力

目的:通过取孕16d的大鼠牙胚,植入同种异体大鼠肾被膜下,建立牙胚发育、形成的研究模型,人为干预发育中的牙胚,对比、观察该干预对牙胚发育、成牙能力的影响。方法:实验2004-04/08在解放军第四军医大学口腔组织工程中心实验室进行。①牙胚的获取:取孕16d的SD胎鼠的下颌第一磨牙牙胚,随机取分离的磨牙胚4个样本,行常规组织学切片以确定牙胚发育期。其余牙胚分两组:正常组和混合组。混合组将组织剪成4小块,随意混合后组成一个混合牙胚,分别加入DMEM培养液置37℃孵箱中备用。②肾被膜下牙胚植入:取成年雄性SD大鼠10只,采用随机数字表法随机分为正常组和混合组,每组5只,于两组大鼠的肾被膜下分别植入上述两组牙胚。③8周时取植入物,常规进行大体及牙胚植入前、后组织学观察。结果:10只大鼠进入结果分析。①两组大鼠牙胚植入后大体观察:牙胚植入肾被膜下后可继续发育,8周时正常组形成类似于正常天然牙齿样的形态和组织结构,混合组则形成不完整的类牙样结构。②牙胚植入前及植入后组织学观察:植入前牙胚处于帽状发育期;植入后正常组形成类似于天然牙有序排列的组织结构;而混合组形成类牙样结构,与正常组有一定差别。结论:以肾被膜下为大鼠牙胚培养环境,成功建立了牙胚继续发育、牙齿形成的研究模型。该模型便于牙齿发育形成过程中人为干预的实施和观察。人为干扰后,牙胚能继续发育,形成类牙样结构。     

Effect of smoking on caffeine clearance

The elimination of caffeine from saliva was compared in groups of healthy smokers (n = 13) and nonsmokers (n = 13). Mean caffeine t1/2 in smokers (3.5 hr) was shorter than that in the nonsmokers (6.0 hr). The body clearance of caffeine in the smokers (155 +/- 16 ml . kg-1 . hr-1) was greater than that in the nonsmokers (94 +/- 18 ml . kg-1 . hr-1) (p less than 0.05). No significant difference was noted in the apparent volume of distribution in smokers (720 +/- 67 ml . kg-1) and nonsmokers (610 +/- 80 ml . kg-1). These differences probably reflect the induction of hepatic aryl hydrocarbon hydroxylase (AHH) activity in smokers. The increased clearance of caffeine by smokers may contribute to the higher consumption of coffee reported to occur in this group.     

Effect of quinolones on caffeine disposition

Six healthy volunteers received a single caffeine dose after pretreatment with norfloxacin, pipemidic acid, or placebo in a crossover, randomized, single-blind clinical trial. Quinolones altered the pharmacokinetics of caffeine, with a significant increase in the AUCs and a decrease in plasma clearance. The elimination half-life increased significantly with pipemidic acid. The apparent volume of distribution, mean renal clearance, and time to reach maximum caffeine concentrations remained unaltered. There was a decline in caffeine metabolite levels in the 24-hour urine samples for both quinolone treatments, suggesting that pipemidic acid and, to a lesser degree, norfloxacin inhibit metabolism of the N-demethylation pathways of caffeine. The practical consequence of this observation could be caffeine accumulation during repeated intake of coffee. In two additional healthy volunteers under a controlled multiple-dose regimen of caffeine ingestion, administration of pipemidic acid for 2 days caused a fourfold increase in the plasma concentrations of caffeine.     

Cartilage tissue engineering on macroporous scaffolds using human tooth germ stem cells

The main objective was to study cartilage regeneration through differentiation of human tooth germ stem cells (HTGSCs) into chondrocytes on different three‐dimensional (3D) scaffolds (PCL, PLLA and PCL–PLLA). Scaffold topographies were studied by scanning electron microscopy and it was found that the scaffolds had interconnected macroporous structures. HTGSCs were isolated from impacted third molar tooth germs of young adult patients and grown for 3 weeks on the scaffolds in chondrogenic differentiation medium. Cell proliferation on the scaffolds was determined by MTS assay and it was observed that all scaffolds supported cell proliferation. Immunostaining was carried out for morphological and differentiation analyses. Immunohistochemical analyses revealed that the cells attached onto the scaffolds and deposited cartilage‐specific extracellular matrix (ECM). Real‐time PCR was performed to determine the expression levels of cartilage‐specific genes. After 21 days of incubation in cartilage differentiation medium, expression of collagen type II increased only in the cells seeded onto PCL–PLLA blend scaffolds. Similarly, aggrecan expression was the highest on PCL–PLLA scaffolds after 3 weeks. These results suggest that all the scaffolds, and especially PCL–PLLA, were suitable for chondrogenic differentiation of HTGSCs. Copyright © 2015 John Wiley & Sons, Ltd.