耐热乳糖酶的酶动力学研究

对从栖热菌中分离纯化的耐热乳糖酶进行酶动力学研究。方法：采用单因素试验方法,分别研究了温度、ｐＨ值、底物浓度对酶活性的影响。结果：该酶的最适温度为６０℃,最适ｐＨ为７．０,ｋｍ值为６３．９ ｍｍｏｌ／Ｌ。结论：该酶在工业生产低乳糖乳制品中具有一定意义。     

CM—葡聚糖凝胶固定化脂肪酶的研究

研究以ＣＭ－葡聚糖凝胶为载体的固定化脂肪酶的制备方法及比较固定化脂肪酶与游高酶在酶学特性上的变化。制备固定化脂肪酶的最适条件是ｐＨ７．０,离子浓度为０．０１ｍｏｌ／Ｌ的ＫＨ２ＰＯ４０－ＮａＯＨ缓冲液,加酶量为１２５Ｕ／ｇ载体,固定化反应时间为８ｈ,所得的固定化酶酶活力为１２２．５Ｕ／ｇ载体,回收率为９８％。固定化酶的稳定性较高,最适作用ｐＨ值为１０．０,最适作用温度为４８℃,其催化油脂水解操作半衰     

CM-纤维素固定化脂肪酶的研究

目的 　研究 CM-纤维素为载体的固定化脂肪酶的制备方法及比较固定化脂肪酶与游离酶在酶学特性上的变化。方法 　制备固定化脂肪酶的最适条件是 p H5 .5 ,离子浓度为 0 .0 1mol· L- 1 的柠檬酸缓冲液 ,加酶量为 10 0μ· g- 1 载体 ,固定化反应时间为 8h。结果 　所得的固定化酶酶活力为 49.6μ·g- 1载体 ,回收率为 45 % ,最适作用 p H值为 10 .6,最适作用温度为 46℃ ,其催化油脂水解操作半衰期为 2 2 5 h。结论 　本固定化酶制备简便 ,可重复使用 ,稳定性较高。     

基于乳液体系下荧光假单胞菌脂肪酶固定化的研究

构建油包水型乳液体系下假单胞菌脂肪酶固定化,并研究其酶学性质。采用单因素实验,以固定化脂肪酶的水解活力为指标,确定其固定的条件。利用橄榄油乳化法对固定化脂肪酶的催化最适温度,热稳定性、最适p H、p H稳定性、操作稳定性,酶促动力学参数等进行测定。获得了固定化脂肪酶条件:脂肪酶浓度为25.0 mg/m L,固定化温度为5℃,时间为2.0 h,以大豆油作为乳化体系油相,以80.0μL Triton X-100作为乳液体系的乳化剂,保护剂三丁酸甘油酯添加量为100.0μL,交联剂戊二醛25%水溶液的添加量为40.0μL,并测得在该条件下制备的固定化脂肪酶水解活力为9 220.0 U/g。固定化酶的粒径约10~25μm,固定化酶经过11次重复使用之后仍然有约78%的相对酶活力。基于乳液体系下制备固定化脂肪酶具有工艺简单、条件温和及操作方便的特点。而且,固定化后的脂肪酶稳定性有明显的提高。     

脂肪酶及酯酶定点突变研究进展及其应用

重点介绍了利用定点突变技术对脂肪酶及酯酶性质的改造,包括酶的稳定性,活性,最适温度,最适作用pH以及对映选择性。综述了理性设计在脂肪酶及酯酶改造中的应用现状、存在问题以及前景。     

从猪胰制备甘油三酯测定用脂肪酶

从猪胰制取测定甘油三酯(TG)的脂肪酶,其活性大于2.7×10~4u/mg;比活为5.5×10~4u/mg 蛋白;酶作用的最佳 pH、最适反应时间及最适温度分别为7.5～10.0、15min 及37～50℃。聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得分子量为34700及20900;以橄榄油为底物的米氏常数为0.77%。     

棘托竹荪锰过氧化酶酶学特性及其分布特征研究

以愈创木酚为底物,采用分光光度法,对棘托竹荪锰过氧化物酶酶学特性及不同生长期不同组织中锰过氧化物酶的分布进行研究。结果表明:棘托竹荪锰过氧化酶最适反应pH为4.5,最适反应温度为50℃;棘托竹荪菌盖中锰过氧化物酶含量最高,菌托中最低;棘托竹荪菌盖锰过氧化物酶提取液的最适pH为6.0。     

埃希菌全细胞转化阿糖尿苷合成阿糖腺苷

利用选择培养基从土壤中筛选到具有高核苷磷酸化酶活性的AEM0812菌株,通过16S rDNA鉴定,初步确定为埃希菌(Escherichia sp.).该菌株的最适生长温度与产酶温度均为37℃,最适产酶pH为7.5～8.0,通气培养最佳产酶的发酵时间为8～9 h.利用该菌全细胞建立了以阿糖尿苷为底物酶促合成阿糖腺苷的反应体系,成功得到阿糖腺苷.优化反应条件,并进行了100 L放大试验,结果阿糖尿苷转化率为78.17%,反应液中阿糖腺苷浓度为9.38 g/L.     

假丝酵母菌脂肪酶在有机合成中的应用影响脂肪酶活力测定若干因素的探讨(Ⅱ)

比较了几种相同pH、不同缓冲对,同一缓冲对、不同缓冲容量,同一缓冲对、不同pH的缓冲液以及温度等因素对假丝酵母菌脂肪酶活力测定的影响。确定了该酶催化反应的最佳条件:0.01M,pH 7.5 Tris—HCl缓冲液,37℃反应10分钟.     

中药饮片麦冬和芫花中耐热菌的考察

目的 考察中药饮片麦冬和芫花中耐热菌的种类和数量,并探索在冷藏储存过程中的变化情况。方法 采用中国药典2015年版方法测定不同沸水浴时间的耐热菌数,并对120 min沸水浴处理后存活耐热菌采用16S rDNA 基因序列分析方法进行菌种鉴定,同时考察了冷藏储存一定时间后耐热菌数的变化。结果 随着沸水浴时间的增加,耐热菌数不断减少。芫花即使经过120 min沸水浴处理后仍含有较高数量的耐热菌,且经48 h冷藏储存后,耐热菌数量出现明显增加。耐热菌株鉴定结果均为芽孢杆菌属。结论 从用药安全性角度考虑,应控制中药饮片中的耐热菌,并关注中药代煎服务存在的微生物污染问题。     

成骨细胞的功能与损伤和骨质疏松的防治

骨质疏松是一种全身性骨骼疾病,导致骨折风险增加。成人的骨量通过破骨细胞的骨吸收和成骨细胞的骨形成作用来维持动态平衡,治疗骨质疏松症的理想策略是抑制破骨细胞的骨吸收和/或增强成骨细胞的骨形成功能。目前针对保护成骨细胞及增强其功能的骨质疏松疗法相对较少。因此,本文针对成骨细胞相关功能蛋白、各种细胞损伤机制（内质网应激、氧化应激、机械过载、微小RNA和长链非编码RNA的影响等）及骨质疏松的治疗与预防作一综述,以期为针对增强成骨细胞功能的骨质疏松治疗策略提供新思路。     

PTEN和DNA含量与非小细胞肺癌侵袭转移的关系探讨

目的 研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中抑癌基因PTEN的表达和DNA含量与NSCLC侵袭、转移的关系.方法 采用免疫组织化学SP方法检测PTEN在78例肺癌标本中的表达,并用流式细胞术检测30例肺癌标本中DNA含量.结果:肺癌标本中PTEN蛋白总缺失率为42.3%,有淋巴结转移组和无淋巴结转移组肺癌表达缺失率分别为52.1%和26.7%(P＜0.05),其表达缺失率随TNM分期增加而上升,分期越晚表达缺失率越高.PTEN缺失率高者生存时间短.DNA指数(DI)的分布范围在1.04～1.93.异倍体肿瘤24例,DI值随TNM分期增加而增加(P＜0.05),与淋巴结转移呈正相关.结论 肺癌组织中PTEN的表达与肺癌淋巴结转移有显著相关性,肺癌细胞DNA含量与肺癌TNM分期及淋巴结转移密切相关.检测PTEN蛋白表达和DNA含量将有助于判断肺癌的转移及预后.     

Comparison of formation of thiolactones and active metabolites of prasugrel and clopidogrel in rats and dogs

1. Prasugrel and clopidogrel are antiplatelet prodrugs that are converted to their respective active metabolites through thiolactone intermediates. Prasugrel is rapidly hydrolysed by esterases to its thiolactone intermediate, while clopidogrel is oxidized by cytochrome P450 (CYP) isoforms to its thiolactone. The conversion of both thiolactones to the active metabolites is CYP mediated. This study compared the efficiency, in vivo, of the formation of prasugrel and clopidogrel thiolactones and their active metabolites.

2. The areas under the plasma concentration versus time curve (AUC) of the thiolactone intermediates in the portal vein plasma after an oral dose of prasugrel (1 mg kg^?1) and clopidogrel (0.77 mg kg^?1) were 15.8 ± 15.9 ng h ml^?1 and 0.113 ± 0.226 ng h ml^?1, respectively, in rats, and 454 ± 104 ng h ml^?1 and 23.3 ± 4.3 ng h ml^?1, respectively, in dogs, indicating efficient hydrolysis of prasugrel and little metabolism of clopidogrel to their thiolactones in the intestine.

3. The relative bioavailability of the active metabolites of prasugrel and clopidogrel calculated by the ratio of active metabolite AUC (prodrug oral administration/active metabolite intravenous administration) were 25% and 7%, respectively, in rats, and 25% and 10%, respectively, in dogs.

4. Single intraduodenal administration of prasugrel showed complete conversion of prasugrel, resulting in high concentrations of the thiolactone and active metabolite of prasugrel in rat portal vein plasma, which demonstrates that these products are generated in the intestine during the absorption process.

5. In conclusion, the extent of in vivo formation of the thiolactone and the active metabolite of prasugrel was greater than for clopidogrel’s thiolactone and active metabolite.

     

阿立哌唑与利培酮治疗自闭症谱系障碍与注意缺陷多动障碍共病患儿的疗效与安全性评价

目的：评价阿立哌唑与利培酮治疗自闭症谱系障碍（ASD）与注意缺陷多动障碍（ADHD）共病患儿的疗效与安全性。方法：选取在某院精神科治疗的ASD和ADHD共病患儿68例,根据随机数字表法将患儿分为阿立哌唑组（n=34）和利培酮组（n=34）。阿立哌唑组患儿接受起始剂量为5 mg·d^-1的阿立哌唑片口服治疗,最终剂量增加至15 mg·d^-1。利培酮组患儿接受起始剂量为1 mg·d^-1的利培酮片口服治疗,最终剂量增加至2 mg·d^-1;2组患儿均治疗12周。在基线（T₀）、治疗6周（T₁）与12周（T₂）时,采用注意缺陷/多动评定量表（ADHD-RS）评价患儿总体ADHD症状变化情况;采用康纳斯行为评定量表（CRSR）教师用量表多动因子（CRSR-I）评价患儿多动症的改善情况;采用CRSR不注意缺陷-冲动因子（CRSR-H）评价患儿注意力缺陷的改善情况;采用临床整体印象-严重程度量表（CGI-S）及儿童总体评估量表（C-GAS）评分评价患儿整体功能。对患儿的相关临床指标进行常规监测,比较2组患儿药物不良事件与安全性。结果：与T₀时比较,阿立哌唑组患儿T₁与T₂时,ADHD-RS、CRSR-I、CRSR-H与CGI-S评分均显著降低（均P<0.05）,C-GAS评分显著提高（P<0.05）。利培酮组患儿T₂时,ADHD-RS、CRSR-I、CRSR-H与CGI-S评分均显著降低（均P<0.05）,C-GAS评分显著提高（P<0.05）。2组患儿的ADHD症状显著改善,多动症状与不注意缺陷-冲动症状显著改善,患儿的整体功能也显著改善。2组患儿主要的不良事件是食欲增加、体质量增加与嗜睡,但均没有发生严重的不良事件。T₂时,利培酮组患儿催乳素水平显著提高（t=9.619,P<0.001）,其他临床指标没有显著性差异（均P>0.05）。结论：阿立哌唑和利培酮能够通过减少ASD和ADHD共病患儿的注意力涣散和多动症症状来改善患儿整体功能,具有较高的疗效、安全性,值得临床推广应用。     

Whole-body retention of mercury and selenium and histopathological and morphological studies of kidneys and liver of rats exposed repeatedly to mercuric chloride and sodium selenite

Distribution and retention of mercury and selenium was studied in rats exposed repeatedly to HgCl₂ injections (0.5 mg Hg/kg to the tail vein every other day) and intragastrically to Na₂SeO₃ (0.5 mg Se/kg every day), applying combined and separate administration of these metals for 2 weeks. Whole-body retention of mercury in the presence of selenium was augmented by 20% and that of selenium in the presence of mercury by 4% with respect to the administered dose. Combined administration of mercuric chloride and sodium selenite brought about damage to the epithelial cells of renal proximal convolutions and formation of protein casts in their lumen. These changes had the same pattern as those induced by administration of mercuric chloride alone, but the intensity was lower. Submicroscopic studies revealed that repeated combined administration of sodium selenite and mercuric chloride did not completely abolish the mercury-induced mitochondrial swelling and contributed to chromatin destruction in the hepatocyte nuclei.This work was supported by the Section of Medical Sciences of the Polish Academy of Sciences (Agreement 537/VI)     

军地药品招标模式利弊分析及对军队药品招标的启示

目的分析现阶段全军统筹药材网上集中采购和地方基本药物招标采购实施情况,探索建立具有军队特色的药品招标模式。方法通过文献收集、实地调研和资料分析等方法,对军队和地方省市药品招标模式利弊进行分析。结果全军统筹药材网上集中采购在运行中存在一定问题,各省市基本药物招标有一定借鉴价值。结论建议总部组织专家,建立统一规范的药品质量评分指标体系和相关落实措施。     

阿立哌唑与利培酮治疗痴呆精神行为症状的疗效及安全性比较

目的观察阿立哌唑和利培酮治疗老年痴呆精神行为症状的疗效及安全性。方法采用随机对照研究,将具有精神行为症状的痴呆患者68例完全随机分为阿立哌唑组及利培酮组,各34例。阿立哌唑组患者服用阿立哌唑,起始剂量2．5mg／d,最大剂量不超过15mg／d;利培酮组患者口服利培酮,起始剂量0．5mg／d,最大剂量不超过3mg／d。疗程均为8周。治疗前和治疗第2、4、8周末采用痴呆病理分析评定量表（BEHAVE—AD）评定疗效,用副反应量表（TESS）评定不良反应,并于入组时和治疗第8周末分别检测2组患者空腹血糖、餐后2h血糖、TC、TG、LDL—C、HDL—C及体重。结果阿立哌唑组和利培酮组患者治疗2、4、8周后BEHAVE—AD评分均明显低于治疗前[阿立哌唑组：（14．8±4．2）、（10．2±3．6）、（6．8±2．8）分比（16．4±4．6）分;利培酮组：（15．2±3．9）、（11．8±3．8）、（7．2±3．0）分比（17．2±5．O）分,P〈0．05或P〈0．01]。2组患者间治疗前及治疗后BEHAVE—AD评分比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。2组不良反应发生率均为8．8％（3／34）,差异无统计学意义（P〉0．05）。利培酮组治疗8周末体重较治疗前增加明显[（71±6）kg比（66±6）kg,P〈0．05],TG及LDL—C升高[分别为（1．62±0．46）mmol／L比（0．96±0．29）mmol／L．（3．82±0．86）mmol／L比（3．08±0．74）mmol／L,而阿立哌唑组则改变不明显（均P〉0．05）。结论阿立哌唑治疗老年痴呆精神行为症状总体疗效、安全性与利培酮相当,但阿立哌唑对患者血糖、血脂及体重影响小于利培酮。