微波辐射对大鼠大脑皮质突触结构和神经递质含量的影响

目的 探讨微波辐射对大鼠大脑皮质突触结构和神经递质含量的影响.方法 采用10、30和50mW/cm2微波辐射Wistar大鼠,辐射后6h通过透射电镜观察大鼠大脑皮质突触结构改变;采用高效液相色谱仪检测大脑皮质氨基酸递质含量改变,采用分光光度法检测乙酰胆碱递质含量以及胆碱酯酶活性的变化.结果 10、30、50mW/cm2微波辐射均可引起大脑皮质突触囊泡堆积、活性区延长、突触后致密物和突触曲率增加以及突触穿孔.10mW/cm2/辐射后6h,天门冬氨酸(Asp)和甘氨酸(Gly)含量增加(P<0.01);30mW/cm2辐射后6h,大脑皮质Gly含量减少(P<0.05),50mW/cm2辐射后6h,Asp、谷氨酸(Glu)、Gly、γ-氨基丁酸(GA-BA)含量均增加(P<0.01).10mW/cm2辐射后6h,大脑皮质乙酰胆碱含量增加(P<0.05),胆碱酯酶活性降低(P<0.01);30和50mW/cm2辐射后6h,乙酰胆碱含量增加,胆碱酯酶活性升高(P<0.01).结论 微波辐射可引起大脑皮质突触结构损伤,氨基酸递质和乙酰胆碱代谢紊乱,进而可能影响正常的脑功能.     

微波辐射对大鼠海马线粒体形态及能量代谢的影响

目的探讨微波辐射对大鼠海马线粒体形态及能量代谢的影响。方法采用30mW／cm^2微波辐射30只雄性Wiser大鼠，于辐射后6h、1d、3d和7d活杀取海马，采用电镜观察线粒体超微结构改变，酶活性染色显示线粒体ATP酶活性改变，分光光度计测定线粒体琥珀酸脱氢酶（succino denhydrogenase,SDH）、单胺氧化酶（monoamine oxidase，MAO）活性，高效液相色谱测量线粒体腺苷酸含量的变化。结果30mW／cm^2微波辐射后6h，海马线粒体大小、形状不规则，辐射后1和3d线粒体损伤加重，出现肿胀、空化、嵴紊乱、短小、数量减少等改变。SDH活性和ATP含量在辐射后6h降低，3d降至最低（P〈0．01），7d呈恢复趋势。ATP酶和MAO活性变化一致，于辐射后1和3d活性升高最为显著（P〈0．01）。结论微波辐射可损伤大鼠海马线粒体结构与功能，使线粒体能量代谢酶异常。     

5.8 GHz射频辐射对大鼠学习记忆和海马神经元突触可塑性的影响

目的 探讨5.8 GHz射频辐射（radiofrequency,RF）暴露对大鼠学习记忆和海马神经元突触可塑性的影响,为科学评价5.8 GHz RF的潜在健康危害提供理论和实验参考。方法 56只健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠按随机数表法分为假暴露组（Sham）和射频暴露组（RF）,每组28只,RF组每天暴露1 h,连续暴露15 d或30 d,频率为5.8 GHz,全身比吸收率为1.15 W/kg。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;Nissl染色观察大鼠海马组织结构及神经元数量;Golgi染色观察大鼠海马CA1区树突棘密度;Western blot检测海马组织内突触后致密蛋白PSD95、突触小泡蛋白Synaptophysin的水平;液相色谱-质谱联用仪检测海马组织内神经递质含量。结果 Morris水迷宫实验中,RF暴露15和30 d,Sham组与RF组大鼠的逃逸潜伏期、穿越平台次数、目标象限停留时间百分比及首次到达平台的潜伏期差异均无统计学意义（P>0.05）;Sham组和RF组海马区组织结构与神经元数量、CA1区树突棘密度（顶树突棘密度：15 d分别为5.10±0.20、4.89±0.24,30 d分别为4.58±0.27、4.49±0.24;基树突棘密度：15 d分别为4.81±0.17、4.79±0.34,30 d分别为4.20±0.27、4.22±0.17）、海马组织内PSD95及Synaptophysin表达水平及海马组织内多种神经递质含量均无明显变化（P>0.05）。结论 本实验条件下的5.8 GHz RF暴露对雄性大鼠空间学习记忆及海马神经元突触可塑性无影响。     

FDP对微波辐射后大鼠海马COX表达的影响

目的探讨1, 6-二磷酸果糖(FDP)对微波辐射后大鼠海马线粒体呼吸链相关基因细胞色素c氧化酶(cytochrome c oxidase,COX)表达的影响。方法Wistar雄性大鼠随机分为假辐射组(5只),辐射组(10只)和辐射+药物组(10只)。采用30mW/cm²微波辐射,辐射+药物组于辐射前3d 腹腔注射350mg/kg FDP,连续给药3或10d,1次/d。于辐射后6h和7d活杀取海马,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和图像分析检测大鼠海马组织COX亚基Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ mRNA表达,通过Western blot和图像分析检测大鼠海马组织COX Ⅰ蛋白表达变化。结果辐射后6h和7d大鼠海马COX Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ mRNA表达均较假辐射组降低,药物组大鼠海马COX Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ mRNA与相应辐射组相比均见表达增加,以给药后3d(辐射后6h)组增加最为显著(t_{COX Ⅰ}=3.2205,t_{COX Ⅱ}=3.5762,t_{COX Ⅳ}=3.0408,P<0.05)。辐射后6h和7d大鼠海马COX Ⅰ蛋白表达均较假辐射组减少,给药后3d(辐射后6h)与辐射后6h相比COX Ⅰ蛋白表达升高(t=2.9614,P<0.05),给药后10d(辐射后7d)与辐射后7d相比改变不显著。结论FDP对微波辐射后大鼠海马线粒体呼吸链相关基因COX表达降低有一定的促恢复作用。     

2 450 MHz微波辐射对大鼠海马长时程增强和脑组织脂褐素的影响

目的 探讨微波对学习记忆影响的作用机制。方法 对海马诱发电位的长时程增强(LTP)和脑脂褐素含量进行研究，用2450MHz微波理疗机为照射源，以大鼠为实验对象，分别采用在体海马诱发电位法和分光光度法。结果 10～25mW／cm^2强度范围内的连续微波，可以对弱条件刺激和强条件刺激引发的LTP的群峰电位(PS)峰值产生抑制作用，并存在强度一效应关系，在25mW／cm^2时脂褐素含量显著高于对照组和10mW／cm^2组(P＜0．05)。结论 10～25mW／cm^2强度范围内的2450MHz连续微波可以通过抑制海马LTP的生成和脑脂褐素含量增加，造成学习记忆损害。     

电镜定量分析酒精对小鼠海马突触结构的影响

目的 :定量分析饮酒后小鼠海马内突触结构的形态参数变化。方法 :选用 18只 2 0～ 30g昆明小鼠 ,随机均分为A、B、C组。 3组动物分别以纯水、5 %酒精、10 %酒精为唯一饮料连续喂养 6 0d后 ,应用透射电镜及图象分析方法观察并测定海马CA1区突触结构的形态参数。结果 :与A组相比较 ,B、C组突触结构的突触后膜致密物质厚度、突触活性区长度及突触间隙宽度均显著性变小。其中C组与B组相比 ,C组的突触间隙宽度明显变小 ,且有显著性差异 ,而突触后膜致密物厚度和突触活性区长度无显著性差异。结论 :酒精可以引起突触的可塑性变化 ,并影响神经冲动的传递功能及动物的学习记忆     

激光氧液对癫痫持续状态大鼠学习记忆及海马神经元突触素表达的影响

目的:观察激光氧液对戊四氮(PTZ)所致癫痫持续状态(SE)大鼠学习记忆功能及海马神经元突触素(P38)表达的影响.方法:28日龄雄性SD大鼠以PTZ建立癫痫持续状态模型,随机分为PTZ+激光氧液组、PTZ+GS组和NS+激光氧液组、NS+GS组,分别给予激光氧液和5%葡萄糖液(5%GS)尾静脉输入,于模型制作前及模型成功后第0 d、3 d、7 d、10 d、14 d通过Y型电迷宫检测大鼠学习记忆能力,并于模型成功后各时间点通过免疫组化方法观察海马区P38阳性细胞数.结果:①行为学结果:PTZ两组大鼠SE发作后0 d大鼠学会达标次数较相应的NS组明显增多(P<0.05).PTZ+激光氧液组3 d、7 d时大鼠学会达标次数较PTZ+GS组大鼠明显减少(P<0.05).各组大鼠经过多次电迷宫刺激后,随时间延长学会达标次数均逐渐减少;②PTZ+GS组大鼠P38阳性细胞数在SE后3 d时较NS+GS组明显减少(P<0.05),在7 d时增加到接近或超过NS+GS组水平,在10 d、14 d较NS+GS组明显增加(P<0.05).PTZ+激光氧液组P38阳性细胞数与PTZ+GS组相比在7 d、10 d、14 d逐渐增多(P<0.05).结论:激光氧液有助于改善SE大鼠学习记忆能力,增强SE后发育期大鼠海马P38的表达.     

安多霖对微波辐射致大鼠海马细胞色素C氧化酶变化的影响

目的探讨中药复方制剂（安多霖）对微波辐射后大鼠海马线粒体呼吸链细胞色素C氧化酶（cytochromec oxidase,COX）变化的影响。方法 100只Wistar雄性大鼠随机分为3个对照组,即正常对照组、辐射预防对照组、辐射治疗对照组和2个安多霖组,即3 g/（kg.d）安多霖预防组及3 g/（kg.d）安多霖治疗组,每组20只。安多霖预防组大鼠于给药后第15天进行微波辐射;安多霖治疗组大鼠于辐射后当天开始连续给药14 d,均1次/d。采用30 mW/cm2微波辐射15 min,于辐射后6 h和14 d活杀动物取海马,通过比色法检测大鼠海马COX活性的变化;采用实时定量PCR和Western印迹检测大鼠海马COXⅠ、ⅣmRNA以及COXⅠ蛋白表达变化。结果辐射预防和治疗两对照组于停药后6 h COX活性、COXⅠ、ⅣmRNA,COXⅠ蛋白均降低（P〈0.05或P〈0.01）;安多霖预防组较辐射预防对照组COX活性及基因表达有不同程度提高,与正常对照组无明显差异;安多霖治疗组与辐射治疗对照组相比明显提高（P〈0.05）,且基本恢复正常。结论给予3 g/（kg.d）安多霖对微波辐射致大鼠海马线粒体呼吸链COX表达降低有较明显改善作用,其治疗效果更为显著。     

微波辐射对大鼠学习记忆与海马组织中神经递质的影响研究

目的探讨微波辐射对大鼠学习记忆能力及大鼠海马组织中神经递质含量的影响。方法采用30 mW/cm2微波辐射40只Wistar雄性大鼠15 min,运用Morris水迷宫方法、高效液相色谱法、碱性羟胺比色法分别检测大鼠平均逃避潜伏期、海马组织中氨基酸类神经递质含量及乙酰胆碱酯酶（acetylcholine esterase,AchE）活性变化。结果 30 mW/cm2微波辐射后14 d,大鼠平均逃避潜伏期增加（P〈0.05）,海马组织中谷氨酸、甘氨酸、γ-氨基丁酸和天冬氨酸含量均显著升高（P〈0.01）,AchE活性显著升高（P〈0.01）;辐射后21 d,除谷氨酸含量外上述各项指标与假辐射组相比均未见明显变化。结论一定剂量微波辐射,可影响大鼠学习记忆功能并引起大鼠海马组织中氨基酸类、胆碱类神经递质代谢紊乱。     

高压氧对创伤性脑损伤大鼠神经行为和突触素表达的影响

目的 研究高压氧治疗对脑创伤大鼠神经行为和突触素表达的影响.方法 24只Sprague Dawley (SD)大鼠按数字表法随机分为3组,即假手术组、脑创伤组(采用50 g重锤30 cm高度自由落体撞击制备大鼠运动皮质区脑损伤模型)和高压氧治疗组[脑创伤+高压氧治疗(每天1次,连续治疗7d)],每组8只.术后13d对各组大鼠进行神经功能缺损(neurological severity score,NSS)评分,观察动物运动和平衡功能缺损及改进情况;免疫组织化学方法检测各组脑组织突触素的表达情况.结果 大鼠脑创伤后出现不同程度抽搐、瘫痪和平衡功能缺失.NSS评分结果显示:与假手术组(0.31±0.11)比较,脑创伤组NSS评分(4.11±0.50)明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);高压氧治疗组(3.07±0.45)较脑创伤组NSS评分明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫组化染色结果显示:脑创伤组脑组织突触素阳性表达数量(71±10)较假手术组(50±11)明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05);高压氧治疗组突触素阳性表达数量(89±13)较脑创伤组明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 高压氧治疗能促进脑创伤大鼠神经功能恢复,其作用机制可能与突触素表达增加有关.     

创伤性脑损伤对大鼠海马CA1区锥体神经元的影响

目的研究创伤性脑损伤对大鼠海马CA1区神经元兴奋性的影响。方法建立大鼠液压打击脑损伤（FPI）模型，对海马CA1区锥体细胞进行细胞内记录，观察神经元输入-输出关系、双脉冲易化、微小兴奋性突触后电位（EPSPs）等电生理指标。结果FPI损伤同侧组输入-输出关系曲线的斜率比对照组增加（P〈0．05）；牡丹荷包碱存在时，20V刺激诱发的FPI损伤同侧的锥体神经元放电数量高于对侧和对照组（P〈0．05）；刺激间期为60ms时，损伤对侧组双刺激易化的比值高于对照组（P〈0．01），刺激间期为70ms时，损伤同侧组双刺激易化的比值高于对照组（P〈0．05）；FPI损伤双侧微小兴奋性突触后电位的间期比对照组减小（P〈0．01），而其幅值无显著改变。结论液压脑损伤大鼠海马CA1区锥体神经元产生了高兴奋性，这可能是因为谷氨酸能突触传递的易化而导致的。     

高功率微波辐射后大鼠海马组织中突触后致密物-95及cAMP反应元件结合蛋白的变化

目的 观察高功率微波(HPM)辐射后大鼠海马组织中突触后致密物(PSD)-95及cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的变化。方法 采用10、30和100 mW/cm² HPM照射75只Wistar雄性大鼠,于辐射后6 h、1、7、14和28 d活杀取海马组织,采用免疫组化、凝胶阻滞实验和图像分析等技术,观察海马神经元中PSD-95及CREB的变化。结果 HPM辐射后大鼠海马神经元胞浆中PSD-95的表达有不同程度的增加;10 mW/cm²组辐射后6 h, PSD-95表达增加,于辐射后1 d达高峰,28 d基本恢复正常;100 mW/cm²组辐射后6 h, PSD-95表达增加,MOD于1 d达高峰,IOD于7 d达高峰,28 d基本恢复至正常水平;30 mW/cm²组于辐射后3 d内,海马组织CREB与DNA的结合能力进行性降低。结论 HPM辐射后大鼠海马PSD-95表达增加,CREB与DNA结合能力减弱,参与了HPM辐射后海马组织损伤及海马神经元突触可塑性改变的病理生理过程。     

微波辐射对小鼠联合型学习记忆功能及海马组织结构的影响

目的 探讨微波辐射对联合型学习记忆功能及海马组织结构的影响。方法 将小鼠按随机数表法分为假辐射组和微波辐射组,各27只。采用2.856 GHz、8 mW/cm²微波辐射C57BL/6N小鼠15 min,建立微波辐射动物模型。采用Morris水迷宫和穿梭箱行为学实验,研究微波辐射对小鼠空间学习记忆和联合型学习记忆功能的影响。观察海马组织病理学变化,研究微波辐射后海马组织超微结构改变。结果 Morris水迷宫结果表明,微波辐射后小鼠反向空间探索实验跨越平台次数减少,由(3.60±0.79)次降至(2.55±0.47)次(t = 2.21,P= 0.046);穿梭箱实验结果表明,辐射后小鼠平均主动逃避率显著下降(t = 2.70,P<0.05),平均主动潜伏期和总电击时间显著延长(t = -3.09、-3.02,P < 0.05)。辐射后8 d,海马CA3和DG区部分神经元核固缩,海马CA3区神经元凋亡、突触间隙模糊、胶质细胞肿胀、血管周隙增宽。结论 微波辐射可引起小鼠空间参考记忆能力及联合型学习记忆能力下降,海马组织形态学病理改变是其功能障碍的结构基础。     

大鼠脑干损伤早期突触素的免疫组织化学改变

目的：探讨突触素在脑干损伤早期的改变及意义。方法针刺法造成大鼠脑干损伤,用免疫组织化学和计算机图像分析技术定量观察脑干中突触素在伤后不同时间的改变。结果脑干损伤部位的突触素免疫阳性物在伤后３－６ｈ显著减少,其后恢复正常,持续至伤后２４ｈ。结论脑干组织中的突触前成分在损伤早期即有改变,有可能影响神经递质的释放。     

高原环境对大鼠海马超微结构影响及可塑性的研究

本文采用形态计量方法对海拔(397m)移居到海拔(3400m)一周(急性)、四周(亚急性)及返回到海拔(397m)四周的Wistar大鼠海马的突触、锥体细胞超微结构进行定量观察研究。结果:急性组变化为线粒体数量增加,粗面内质网池轻度扩张和脱颗粒。亚急性组海马锥体细胞肿胀、粗面内质网明显分布紊乱、脱颗粒和断裂;核糖体减速少,线粒体不同程度肿胀、嵴断裂、数量减少、外膜臌出和变性;轴突和树突内线粒体也发生同样变化。轴棘、轴树突触间隙宽度变窄(P<0.01),突触小泡数量减少(P<0.01)。恢复组:海马锥体细胞内部分线粒体和粗面内质网仍未完全恢复正常。本文对形态改变的机制进行了探讨。     

衰老过程中有氧运动干预对海马突触可塑性及PDE-4基因表达的影响

目的:探讨大鼠衰老过程中进行有氧运动干预对海马突触可塑性及磷酸二酯酶-4(Phos-phodiesterase 4,PDE-4)基因表达水平的影响。方法:雄性SD大鼠,45只,随机分为对照组(C组)、D-半乳糖致衰老模型组(A组)、D-半乳糖致衰老+有氧运动干预组(AE组)。进行6周衰老造模,AE组在造模过程中进行中等负荷游泳运动干预。取材后,尼氏染色观察大鼠海马齿状回(dentate gyrus,DG区)神经元形态结构变化;免疫荧光检测大鼠海马DG区突触素(synaptophysin,Syp)、代谢型谷氨酸受体1(metabo-tropi glutamate receptor 1,m Glu R1)数量和密度的变化;Real-Time PCR及Western Blotting检测大鼠海马磷酸二酯酶-4(Phos-phodiesterase 4,PDE-4)m RNA及蛋白的表达。结果:(1)与C组比,A组大鼠出现精神不振、嗜睡、动作迟缓等衰老体征,海马神经元数量明显减少,排列紊乱,细胞间距增大,胞质中尼氏体着色变浅等;(2)Syp和m Glu R1 IOD值变化趋势一致:A组非常显著性低于C组(P<0.01),AE组非常显著性高于A组(P<0.01)。(3)PDE-4 m RNA及蛋白表达变化趋势一致:A组非常显著性高于C组(P<0.01),AE组非常显著性低于A组(P<0.01)。(4)PDE-4 m RNA与Syp、m Glu R1的IOD值呈显著性负相关(P<0.01,P<0.05)。结论:(1)衰老过程中进行有氧运动干预可以修复海马神经元的形态结构,使Syp和m Glu R1数量和密度保持在一定水平上,以维持突触可塑性,进而改善脑功能,延缓脑衰老;(2)运动可能通过下调PDE-4基因的表达影响脑功能。     

β-内啡肽在高功率微波辐射后大鼠海马神经元中的表达及其意义

目的 探讨高功率微波（HPM）辐射后大鼠海马神经元中β-内啡肽的表达及其意义。方法 采用12mW／cm^2HPM模拟源辐照50只Wistar雄性大鼠,于照射后6h、1、3、7、14、28天活杀取大脑海马组织,经光镜、电镜、免疫组化和图像分析等技术,研究HPM辐射后大鼠海马损伤的特点、β-内啡肽的表达及其意义。结果HPM辐射后6h,海马神经元线粒体肿胀,髓鞘融合、解离。照射后3天神经元线粒体肿胀、空化,嵴断裂,核染色质浓缩、边集,突触间隙不清,囊泡堆积或排空。照射后1-7天,神经元胞浆中争内啡肽表达进行性增加,7天达高峰,14天后逐渐恢复,28天基本恢复至正常水平。结论 HPM辐射可引起海马组织学和超微结构的损伤,而β-内啡肽表达增加,且呈规律性变化,参与了海马损伤与修复的病理生理过程。     

大鼠海马LTP电位数据的DMA采集及处理的软件设计

描述海马的时程突触增强（LTP）电位的数据采集、参数提取和分析处理软件方法，郑重介绍DNA方式的数据传送和FORTRAN的数组地址的联系和参数提取、分析处理中值得注意的问题；关于波形中特征点定位，该程序提供多种数据处理方式，便于实验研究中的使用。