沉默MTA1表达对胃癌SGC7901细胞增殖和侵袭能力的影响

目的:观察转移相关基因1（MTA1）基因沉默对人胃癌细胞SGC7901增殖和迁移侵袭能力的影响,探讨 MTA1基因在胃癌发生发展中的作用。方法:利用脂质体法将靶向MTA1的小分子干扰 RNA（siRNA） 转染到胃癌细胞株 SGC7901中。运用Real time PCR 和Western blot 技术检测SGC7901细胞内MTA1的 mRNA和蛋白表达水平。CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室实验观察细胞迁移和侵袭能力。结果:MTA1 siRNA 可有效抑制SGC7901细胞MTA1基因在 mRNA 和蛋白水平上的表达（P﹤0.01）。CCK-8实验表明MTA1 siRNA 转染后细胞增殖不受影响;Transwell小室实验表明细胞迁移和侵袭能力明显下降。结论:沉默MTA1表达可抑制胃癌细胞株 SGC7901迁移和侵袭,而不影响细胞增殖。MTA1在胃癌侵袭转移过程中可能发挥重要作用。     

食管鳞癌组织MTSS1表达及其与转移潜能相关性研究

目的:探讨食管鳞癌组织中转移抑制基因1(MTSS1)表达与临床病理因素的关系,以及与食管鳞癌细胞迁移和侵袭的关系。方法:蛋白质印迹法和免疫组化检测106例食管鳞癌及癌旁正常组织以及食管鳞癌细胞系中MTSS1的表达;Transwell法检测MTSS1高表达细胞系的迁移和侵袭,观察用小分子干扰RNA(siRNA)敲降MTSS1后对迁移和侵袭的影响。结果:MTSS1在食管组织中表达为0.756±0.101,明显高于食管鳞癌组织的表达(0.596±0.110),差异有统计学意义,t=3.011,P=0.009。MTSS1在食管癌组织中表达与有无淋巴结转移相关,χ2=10.9,P<0.01;MTSS1高表达食管鳞细胞系KYSE180转染MTSS1-siRNA后48h,在mRNA水平的抑制率为(91.96±1.72)%,在蛋白水平的抑制率为(90.40±0.70)%,均能显著降低MTSS1的表达。体外实验发现,MTSS1能够抑制食管鳞癌细胞的迁移和侵袭,降低MTSS1表达后,KYSE180细胞的迁移数从(1 521±122)个升高至(2 122±111)个,P=0.003;侵袭细胞数从(1 297±137)个升高至(1 983±81)个,P=0.002。结论:MTSS1与食管癌的淋巴结转移呈负相关,并且能抑制食管鳞癌细胞的迁移和侵袭。MTSS1可能是食管鳞癌的转移抑制基因。     

TBX3参与恶性肿瘤发生发展的研究进展

TBX3（T-box3）基因在人体的正常生长及发育过程中发挥着举足轻重的作用,而TBX3基因在恶性肿瘤呈现过表达的状态,且其过表达与肺癌淋巴结转移及临床分期有着密切关系,下调TBX3基因的表达能够抑制肿瘤细胞的侵袭与转移能力。因此TBX3基因在肿瘤的侵袭及转移过程中起相当重要的作用。本文对TBX3基因结构、TBX3基因促进恶性肿瘤的侵袭转移研究进展予以综述。     

TOP2A在非小细胞肺癌中的高表达促进肿瘤细胞的增殖和侵袭能力

目的:探讨编码拓扑异构酶Ⅱα的基因TOP2A在非小细胞肺癌组织中的表达情况及其生物学功能。方法:采用荧光定量PCR方法检测102例非小细胞肺癌及其癌旁组织中TOP2A的mRNA表达水平,Western blot检测其中5对组织中TOP2A蛋白表达水平,分析TOP2A 表达与非小细胞肺癌主要临床病理特征的相关性。干扰非小细胞肺癌细胞株A549和HCC827中TOP2A的表达,MTT法检测其表达对肿瘤细胞增殖的影响,Transwell法检测TOP2A表达下调对肿瘤细胞侵袭能力的影响。应用流式细胞术检测TOP2A敲降后细胞的凋亡率和细胞周期。结果:TOP2A在非小细胞肺癌组织中的表达水平相较癌旁组织明显上升（P<0.05）,干扰TOP2A的表达会抑制非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。流式细胞凋亡率实验结果显示转染siTOP2A后的非小细胞肺癌细胞早期凋亡率增加;流式周期分析显示siTOP2A转染后的细胞S期发生阻滞抑制细胞增殖。同时,TOP2A表达水平与非小细胞肺癌的肿瘤分期、淋巴结转移密切相关（P<0.05）。结论:TOP2A在非小细胞肺癌中表达上调,与肿瘤增殖和侵袭等生物学行为密切相关。     

长链非编码RNA FENDRR对宣威肺癌XWLC-05细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:检测非编码RNA FENDRR长链在宣威肺腺癌XWLC-05株细胞与非小细胞肺癌(NSCLC) A549株细胞中的表达,及其对细胞增殖、迁移及侵袭的影响.方法:实时荧光定量PCR检测FENDRR基因在XWLC-05与A549细胞中的表达;构建过表达pEX-3-FENDRR质粒并转染XWLC-05细胞,慢病毒干扰LV3-FENDRR载体转染A549细胞,实时荧光定量PCR检测转染后XWLC-05和A549细胞内FENDRR的表达;MTS法检测细胞增殖;Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭能力的变化.结果:XWLC-05细胞中FENDRR基因表达明显较A549细胞低,成功提高转染pEX-3-FENDRR的XWLC-05细胞和降低转染LV3-FEN-DRR质粒的A549细胞中FENDRR mRNA水平.与对照组相比,过表达FENDRR可明显抑制XWLC-05细胞增殖[(1.23±0.13)vs(1.46±0.25),P＜0.05]并降低其迁移、侵袭能力(P＜0.05);干扰FENDRR表达,能够促进A549细胞增殖[(0.85±0.02) vs (0.77±0.08),P＜ 0.05]、迁移与侵袭能力(P＜0.05).结论:lncRNA FENDRR表达下调与宣威肺腺癌的发生发展相关,其在肿瘤恶性化过程中抑制肿瘤细胞的增殖与转移.     

Nectin 4在肺癌组织中的表达及干扰nectin 4 对肺癌细胞增殖和迁移侵袭的影响

摘 要：［目的］ 研究nectin 4在肺癌组织中的表达及其在肺癌细胞增殖、迁移侵袭过程中的作用。［方法］ 免疫组化法检测20例肺癌组织及其对应癌旁组织中nectin 4的表达情况;QPCR及Western Blot分别检测不同肺癌细胞株及正常肺上皮细胞中nectin 4 mRNA和蛋白的表达情况;设计nectin 4干扰 RNA序列,转染肺癌细胞后,MTT法检测细胞的增殖能力。划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测细胞的迁移能力和侵袭能力。［结果］ 免疫组化结果显示nectin 4在癌旁组织中不表达,而40%的肺癌组织中表达阳性（8/20）,且nectin 4 的表达与肺癌患者淋巴结转移明显相关（r=0.612,P=0.004）。QPCR及Western Blot结果显示,正常肺上皮细胞BEAS-2B中nectin 4表达较低,而在A549和PC-9肺癌细胞株中nectin 4表达明显较高。 设计的其中一条nectin 4 siRNA可以降低肺癌A549和PC-9细胞nectin 4蛋白表达70%以上,且nectin 4基因干扰后,肺癌细胞的增殖能力减弱,迁移和侵袭能力也受到明显抑制。［结论］ Nectin 4表达水平与肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭密切相关,可以作为肺癌转移治疗的重要靶点。     

长链非编码RNA-H19促小细胞肺癌细胞株A549 上皮-间质转化及侵袭

背景与目的：近年来研究发现长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)可能在肿瘤的发生、发展中发挥着重要作用,其中H19在膀胱癌、胃癌、肝细胞癌等多种肿瘤中呈现异常过表达,并且能够促进肿瘤增殖,增加肿瘤细胞迁移和侵袭能力等。但H19在非小细胞肺癌中的表达及功能尚不十分清楚。本研究拟观察H19对非小细胞肺癌细胞株A549增殖、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及侵袭能力的影响。方法：在A549中通过转染质粒使H19过表达,通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测H19过表达对A549细胞增殖能力的影响,通过Transwell检测其对A549细胞侵袭能力的影响,通过光学显微镜观察细胞的形态学变化,通过蛋白［质］印迹法(Western blot)检测EMT相关蛋白的变化,通过荧光素酶报告基因检测CDH1基因启动子活性的变化。结果：在A549中H19过表达后,细胞增殖能力有所增强(空白对照组D值为1.64±0.02,阴性对照组为1.59±0.04,过表达H19组为1.89±0.02,P<0.05),细胞的侵袭转移能力增强［阴性对照组(30±6)个/视野,过表达H19组(110±7)个/视野,P<0.05)］,细胞发生伪足变长增多、细胞间隙增大等EMT特征的形态学变化,同时蛋白水平CDH1表达降低,而VIM及SNAI2的表达升高,伴有CDH1基因启动子活性下降60%以上(P<0.05)。结论：在非小细胞肺癌细胞株A549中H19过表达可诱使其发生EMT,并促进其增殖及侵袭能力。     

长链非编码RNA LINC00313通过铁死亡抵抗促进肺癌细胞的增殖和迁移

目的:探讨长链非编码RNA（LncRNA）LINC00313促进肺癌细胞增殖、迁移的作用机制。方法:选用肺癌细胞株A549、H466、H1299、H522,通过实时荧光定量PCR检测LncRNA LINC00313在肺癌细胞中的表达。采用Transwell实验和划痕实验等表型实验检测肺癌细胞侵袭和迁移情况。敲除LINC00313,CCK-8实验及流式细胞仪检测过量GPX4对肺癌细胞增殖和细胞凋亡的影响。LINC00313基因敲除后,检测在Erastin或RSL-3处理的A549细胞内的铁水平及ROS含量,探讨LINC00313与肺癌细胞铁死亡的关系。结果:与正常细胞相比,肺癌细胞中LINC00313的表达明显升高（P＜0.05）;表型实验结果显示LINC00313促进肺癌细胞增殖,同时抑制其凋亡。Transwell实验和划痕实验结果表明LINC00313可以促进肺癌细胞侵袭和迁移。GPX4过表达可以逆转LINC00313敲除导致肺癌细胞的增殖下降和凋亡增加。在Erastin或RSL3处理的A549细胞中,LINC00313基因敲除后细胞内的铁和Fe2+水平下降,脂质过氧化ROS（Lipid ROS）含量产生显著减少。结论:肺癌细胞中LINC00313表达明显升高,过表达LINC00313可以促进肺癌细胞侵袭和迁移,作用机制可能与促进肺癌细胞铁死亡抵抗,从而导致肺癌的发生及转移有关。     

MTA家族蛋白表达与非小细胞肺癌侵袭转移的相关性探讨

目的:探讨肿瘤转移相关基因(matastasis associated gene,MTA)家族蛋白作为非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）预后预测因子的价值,为进一步了解该基因家族与肿瘤侵袭和转移相关的分子机制提供参考。方法:应用免疫组化(SABC)检测MTA家族（MTA1、MTA2、MTA3）蛋白在54例NSCLC肿瘤组织中的表达水平,分析与NSCLC临床病理特征的关系;选取正常肺上皮细胞BEAS-2B、肺癌高转移细胞株95-D与低转移细胞株95-C,对比MTA1在其中的表达与细胞侵袭转移的相关性。结果:MTA1、MTA2和MTA3在NSCLC组织中均有较高的表达,而MTA1表达水平与淋巴结转移状态相关;细胞学实验结果显示MTA1在肿瘤细胞中高表达,而MTA1在肺癌高转移细胞95-D中的表达水平显著高于低转移细胞95-C。结论:MTA1表达水平与肿瘤侵袭、转移关系密切,可考虑作为肿瘤转移、预后预测因子。     

下调ZEB-1表达对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的:探讨ZEB-1对非小细胞肺癌细胞株A549生物学行为的影响。方法:构建干扰ZEB-1的质粒,转染至A548细胞株,运用体外增殖、迁移、侵袭实验来观察ZEB-1表达下调后对非小细胞肺癌细胞株A549生物学行为的影响。结果:下调ZEB-1的表达可降低A549细胞株的增殖、迁移和侵袭能力。结论:ZEB-1表达水平与非小细胞肺癌侵袭转移的能力显著相关。     

LINC00909靶向miR-365a-5p/FGFBP1分子轴调控结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的实验研究

目的 探讨LINC00909对结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响及可能机制.方法 购买正常结肠上皮细胞NCM460,结肠癌细胞HCT8、Caco-2及DLD-1;用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹法(Western blotting)检测NCM460细胞及结肠癌细胞中LINC00909、miR-365a-...     

LncRNA HOTAIR通过Wnt/β-Catenin信号通路调控NSCLC细胞增殖、迁移及侵袭

目的 探究长链非编码RNA HOTAIR对非小细胞肺癌增殖、迁移和侵袭的影响及其分子作用机制.方法 采用qRT-PCR法检测NSCLC细胞系A549、H460、H1650中HOTAIR的相对表达.转染干扰序列siRNNA敲降HOTAIR基因表达,验证干扰效率.采用CCk-8法、Transwell实验分别检测敲降HOTA...     

干扰LASP1基因表达对胃癌细胞BGC823增殖、迁移及侵袭能力的影响

背景与目的：LASP1是一种新的肌动蛋白结合蛋白,参与细胞骨架的重组调控及细胞迁移,在多种恶性肿瘤中高表达,并与肿瘤的增殖、侵袭和转移密切相关。但目前LASP1在胃癌发生、发展中的作用少见报道。该研究旨在探讨LASP1在胃癌增殖和侵袭中的作用及分子机制。方法：利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白［质］印迹法(Western blot)检测LASP1在不同胃癌细胞系中的表达,应用RNA干扰技术抑制BGC823细胞中LASP1的表达,采用RTFQ-PCR和Western blot检测转染后LASP1的表达,应用体外增殖、迁移和侵袭实验检测转染后细胞的增殖、迁移和侵袭能力,通过F-actin聚合实验检测细胞的F-actin的聚合能力,采用Western blot检测转染前后BGC823细胞中Akt的磷酸化情况。结果：LASP1在胃癌BGC823细胞中高表达。RNA干扰技术沉默LASP1基因后,干扰组与对照组相比,LASP1的mRNA和蛋白表达水平均明显下降。细胞增殖实验显示,干扰组细胞的增殖率低于对照组(P<0.05);Transwell迁移和侵袭实验发现,与对照组相比,干扰组细胞的迁移和侵袭能力均明显降低(P<0.05);在干扰组细胞内的F-actin聚合量比对照组减少(P<0.05);在干扰组细胞内Akt磷酸化受到抑制。结论：LASP1的表达降低可以抑制胃癌BGC823细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力,LASP1通过调节F-actin的聚合和Akt磷酸化从而影响胃癌细胞的侵袭、转移。     

大肠癌组织和细胞中KDM3A的表达及其对癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的:研究大肠癌组织和细胞中赖氨酸组蛋白甲基化酶(lysine histone demethylase 3A,KDM3A)的表达及其对大肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:通过生物信息学检索分析公开数据库中KDM3A在大肠癌组织中的表达及相关临床信息。采用qRT-PCR技术检验KDM3A在4种大肠癌细胞HT-29、SW480、SW620、DLD-1以及正常人结肠上皮细胞NCM460中的表达水平,筛选出KDM3A表达量低的大肠癌细胞系进行过表达并进行CCK-8增殖实验、Transwell实验及Western blot检测KDM3A过表达对细胞增殖、侵袭及迁移的影响。结果:KDM3A在大肠癌组织中表达明显高于癌旁组织,且KDM3A高表达患者生存率更低。过表达KDM3A可以促进大肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结论:高表达的KDM3A可以促进大肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

下调 IQGAP1 的表达对非小细胞肺癌 PC14/B 细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响

目的：探究IQGAPl对非小细胞肺癌细胞株PCI4／B生物学行为的影响。方法：构建干扰IQGAP1的质粒,转染至PCI4／B细胞株,体外增殖、迁移、侵袭实验观察下调IQGAP1表达后对非小细胞肺癌细胞株PCI4／B生物学行为影响。结果：成功构建IQGAPl表达下调的细胞株RNAi—PCI4／B。与转染空载体的细胞株相比,下调IQGAPl的表达能够抑制PCI4／B细胞增殖、迁移和侵袭能力。结论：IQGAPl表达可能与肺癌转移相关。     

miR-93 通过靶向EphA4 激活ERK通路促进非小细胞肺癌细胞的增殖和迁移

目的：探讨miR-93/Eph受体A4（EphA4）分子轴通过细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases,ERK）通路对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）H460 和H1299 细胞增殖和迁移的影响。方法：用qPCR 检测H460 和H1299 细胞中miR-93 表达水平。分别在H460 细胞中转染miR-93 模拟物（mimics）和EphA4 过表达质粒、在H1299 细胞中转染miR-93 抑制剂（inhibitor）后,用MTT、Transwell 实验检测miR-93 对转染细胞增殖和迁移的影响。用双荧光素酶报告基因实验验证miR-93 与EphA4 之间的靶向调控关系。用Western blotting检测细胞中增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）、EphA4、ERK和p-ERK 蛋白的表达水平,用MTT、Transwell 实验检测同时过表达miR-93 和EphA4 对H460 细胞增殖和迁移的影响。结果：miR-93 在H1299 细胞中表达水平高于H460 细胞（P<0.01）。过表达miR-93 促进H460 细胞增殖和迁移（均P<0.01）,敲低miR-93 抑制H1299 细胞增殖和迁移（均P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验证实miR-93靶向调控EphA4,过表达miR-93明显下调H460细胞中EphA4 mRNA和蛋白表达水平（均P<0.05）,过表达miR-93 通过靶向EphA4 并激活ERK通路促进H460 细胞的增殖和迁移（均P<0.01）。结论：miR-93 促进NSCLC细胞增殖和迁移,其机制可能与靶向调控EphA4 并激活ERK通路有关。