Cariporide对糖基化终末产物所致血管内皮损伤的保护作用

目的观察选择性Na /H 交换蛋白1(NHE-1)抑制剂Cariporide对外源性糖基化终末产物(AGEs)所致大鼠血管内皮功能损伤的保护作用。方法将体外制备的糖基化牛血清白蛋白(AGEs-BSA)通过尾静脉注射的方法,1次.d-1,连续4周,诱导大鼠血管功能损伤,治疗组同时给予Cariporide(0.1、1 mg.kg-1.d-1)灌胃。4周后处死动物,取胸主动脉用于血管内皮依赖性舒张功能的检测,主动脉弓做NF-κB-p65免疫组化检测,并测定血清NO及MDA含量。结果大鼠注射AGEs-BSA后,主动脉对乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应明显降低,大鼠血清MDA水平增加,NO水平降低;Cariporide呈剂量依赖性改善AGEs-BSA所致大鼠胸主动脉内皮依赖性舒张反应降低,抑制AGEs-BSA引起的血清MDA浓度升高和血清NO的减少;给予AGEs-BSA后大鼠血管内皮NF-κB活性明显增加,Cariporide能明显抑制AGEs-BSA诱导的NF-κB活化。结论Cariporide对外源性AGEs诱导的大鼠血管内皮功能损伤具有保护作用,其保护作用可能与降低氧化应激、抑制血管内皮细胞的NF-κB活化有关。     

槲皮素对体外糖基化终产物生成的影响

目的：应用体外蛋白质非酶糖基化反应系统．研究槲皮素对体外糖基化终产物(AGEs)生成的作用。方法：将药物加入G-BSA、GA-BSA、3-DG-BSA、post-Amadori糖化系统中，通过检测AGEs的生成水平，观察药物对不同途径、不同糖基化阶段的AGEs生成的影响。结果：槲皮素对G-BSA、GA-BSA、3-DG-BSA糖化系统中AGEs的生成有显著抑制作用；对post-Amadori反应体系中AGEs的牛成抑制作用不明显。结论：槲皮素可能只是非酶糖基化反应早，中期阶段的抑制剂，而对于后期阶段的作用不理想。     

芒果苷滴丸对大鼠慢性肝损伤的保护作用

目的:研究芒果苷滴丸(MDP)对大鼠慢性肝损伤的保护作用并探讨其机制.方法:四氯化碳(CCl4)诱导大鼠慢性肝损伤模型;分光光度法检测血清中ALT、AST、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、羟脯氨酸(HyP)水平和肝组织匀浆中SOD、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)等含量,放免法检测血清中透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)水平,免疫组化法检测肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)的表达,苏木精-伊红(HE)染色法对肝脏组织作病理切片法检查.结果:MDP能显著降低四氯化碳(CCl4)所致大鼠慢性肝损血清中ALT、AST、HA、PCⅢ、HyP、ALB、TP含量(P<0.01或P<0.05),升高肝组织中SOD、GSH-PX的活性(P<0.01或P<0.05),降低MDA的含量(P<0.01或P<0.05);抑制TGF-β1表达;减轻慢性肝损伤的损伤程度.结论:MDP对慢性肝损伤大鼠具有显著保护作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化和肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达有关.     

马钱苷对糖基化终末产物诱导足细胞损伤的保护作用

目的探讨山茱萸环烯醚萜苷特征性成分马钱苷对糖基化终末产物(AGEs)诱导肾脏足细胞损伤的保护作用及其机制。方法体外培养小鼠肾小球足细胞,分为空白对照组、模型组(AGEs组)、马钱苷组,并设氨基胍组作为阳性对照。MTT法检测马钱苷对足细胞存活率的影响;Hoechst33342/PI双染观察足细胞凋亡情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测足细胞AGEs受体(RAGE)、足细胞损伤标志蛋白desmin以及凋亡相关蛋白bax、bcl-2、cleaved caspase-3的表达。结果马钱苷能够抑制AGEs导致的足细胞损伤,下调足细胞Desmin、RAGE蛋白的表达,明显降低AGEs诱导的足细胞凋亡率,降低足细胞Bax/Bcl-2的比值和促凋亡蛋白cleaved caspase-3的表达。结论马钱苷能够改善AGEs诱导的肾小球足细胞损伤,其作用机制与降低RAGE蛋白表达,抑制凋亡通路有关。     

蛋白质糖基化产物抑制剂的研究

本文主要对近十年来国内外关于蛋白质糖基化产物抑制剂及其在糖尿病慢性并发症预防中的重要作用的研究进行了总结，论述了蛋白质糖基化产物抑制剂的分类和不同作用机制。     

山茱萸环烯醚萜总苷对糖尿病大鼠胸主动脉血管内皮的保护作用

在发达国家，糖尿病大血管病变如糖尿病心脏病变导致50％的糖尿病人死亡，美国糖尿病心脏病居致死原因的第5位。糖尿病血管病变已严重地威胁着人类的健康,寻找能阻止或控制糖尿病血管病变发生、发展的有效药物已成为世界医药学研究的重点之一。现代研究认为，血管内皮损伤在糖尿病血管病变中是一早期的关键过程，故本文从形态学的角度观察其对糖尿病大鼠胸主动脉血管内皮的保护作用。     

山茱萸环烯醚萜苷对糖尿病大鼠胸主动脉血管内皮的保护作用

<正> 在发达国家,糖尿病大血管病变如糖尿病心脏病变导致50％的糖尿病人死亡,美国糖尿病心脏病居致死原因的第5位。糖尿病血管病变已严重地威胁着人类的健康,寻找能阻止或控制糖尿病血管病变发生、发展的有效药物已成为世     

芒果苷利胆作用及对胆囊平滑肌痉挛的影响

目的：探讨芒果苷利胆作用及对胆囊平滑肌痉挛的影响.方法：利用胆管引流法测定芒果苷对大鼠胆汁的流量及成分的影响;通过对豚鼠胆囊肌条的收缩试验观察芒果苷对乙酰胆碱所致胆囊平滑肌痉挛的影响.结果：芒果苷4.74×10-5 mol·kg-1剂量组可显著提高大鼠的胆汁流量,显著提高胆汁中胆红素浓度（P ＜0.01）;2.37×10-5 mol·L-1剂量组可显著抑制由乙酰 胆碱引起的豚鼠胆囊痉挛（P＜0.01）.结论：芒果苷具有利胆作用,可缓解乙酰胆碱引起胆囊痉挛.     

芒果苷滴丸对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的：研究芒果苷滴丸（MDP）对小鼠实验性肝损伤的保护作用及其机制。方法：以MDP对小鼠灌胃给药,对MDP进行最大耐受量（MTD）测定;采用四氯化碳（CCl4）、D-氨基半乳糖盐酸盐（D—GaIN）诱导小鼠急性肝损伤模型;卡介苗（BCG）加脂多糖（LPS）联合诱导小鼠免疫性肝损伤模型。分光光度法检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）含量和肝组织匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）含量,苏木精-伊红（HE）染色法对肝脏组织作病理切片法检查。结果：①以MDP对小鼠灌胃给药,其MTD为180g·kg^-1,相当于原药材36g·kg^-1。②MDP能显著降低急性、免疫性肝损伤小鼠血清中ALT、AST含量（P〈0．01）,能降低急性肝损伤小鼠肝匀浆MDA含量（P〈0．01）,升高肝匀浆SOD、GSH—PX活性（P〈0．01）,病理结果表明MDP能减轻免疫性小鼠肝损伤的肝损伤程度。结论：MDP对急性、免疫性肝损伤小鼠具有显著保护作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化有关。     

芒果苷对小鼠免疫功能影响的初步研究

目的：研究芒果苷对小鼠免疫功能的影响。方法：应用氢化可的松复制免疫低下模型；测定胸腺、脾脏重量并计算脏器系数；碳粒廓清法测定单核巨噬细胞吞噬功能；比色法测定血清溶血素IgG、IgM含量；MTT法测定细胞增殖。结果：在50、100mg／kg剂量下，芒果苷能对抗氢化可的松引起的小鼠脾、胸腺萎缩；显著增加氢化可的松免疫抑制小鼠的碳粒廓清率；增加小鼠血清溶血素IgG、IgM的生成；芒果苷还能显著增强小鼠脾细胞和腹腔巨噬细胞的增殖。结论：芒果苷能增强小鼠非特异性免疫功能和体液免疫功能。     

Chlorogenic acid inhibits the formation of advanced glycation end products and associated protein cross-linking

Advanced glycation end products (AGEs) play an important role in the development of chronic diabetic complications. Chlorogenic acid (CGA) is a phenolic compound formed by the esterification of caffeic and quinic acids. In this study, we evaluated the inhibitory effects of CGA against the formation of AGEs and AGEs protein cross-linking in vitro. An in vitro assay for glycation of bovine serum albumin by high glucose showed that CGA inhibited AGEs formation with an IC₅₀ value of 148.32 μM and was found to be more effective than aminoguanidine, a well-known AGEs inhibitor (IC₅₀; 807.67 μM). In an indirect AGE-ELISA assay, the CGA exhibited more potent inhibitory activity on the cross-linking of AGEs to collagen than aminoguanidine. In addition, the inhibitory effects of CGA on AGEs formation and on its cross-linking with collagen might be caused by its interactions with reactive decarbonyl compounds, such as methylglyoxal. These results suggest that CGA could be beneficial in the prevention of AGEs progression in patients with diabetes because CGA can attenuate AGEs deposition in glucose.     

Inhibitory effect of GSPE on RAGE expression induced by advanced glycation end products in endothelial cells

Advanced glycation end products' (AGEs) engagement of a cell-surface receptor for AGEs (RAGE) has been causally implicated in the pathogenesis of diabetic vascular complications via induction of reactive oxygen species (ROS) and subsequent alteration of many gene expressions, including RAGE itself. Grapeseed proanthocyanidin extract (GSPE), which is a naturally occurring polyphenolic compound, has been reported to possess potent radical-scavenging and antioxidant properties and to display significant cardiovascular protective action. In this study, we investigated whether GSPE could inhibit AGE-induced RAGE expression through interference with ROS generation in human umbilical-vein endothelial cells (HUVECs). AGE-modified bovine serum albumin (AGE-BSA) was prepared by incubating BSA with high-concentration glucose. Stimulation of cultured HUVECs with 200 microg/mL of AGE-BSA significantly enhanced intracellular ROS formation and subsequently upregulated the protein and mRNA expression of RAGE; unmodified BSA and GSPE alone had no effect. However, GSPE preincubation markedly downregulated AGE-induced surface expression of RAGE in a time- and concentration-dependent manner. In AGE-stimulated HUVECs, GSPE also dose-dependently decreased RAGE mRNA levels and inhibited AGE-induced ROS generation at defined time periods. These results demonstrate that GSPE can inhibit enhanced RAGE expression in AGE-exposed endothelial cells by suppressing ROS generation, thereby limiting the AGE-RAGE interaction. Hence, GSPE may have therapeutic potential in the prevention and treatment of vascular complications in diabetic patients.     

西红花酸对糖尿病大鼠体内晚期糖基化终产物的形成及其受体表达的影响

目的:观察西红花酸对糖尿病(diabetic melli-tus,DM)大鼠晚期糖基化终产物(AGEs)的形成和受体(RAGE)蛋白表达的影响。方法:以链脲佐菌素诱导DM大鼠模型,并将DM大鼠随机分为DM模型组和西红花酸治疗组(50 mg.kg-1.d-1),另设正常组,给药21 d后,血糖仪测定大鼠空腹血糖;试剂盒分别测定AGEs中间产物即血清果糖胺(FMN)和糖化血红蛋白(GHb)的含量;荧光分光光度法测定主动脉及肠系膜血管床AGEs的水平;病理切片观察肠系膜动脉的变化;免疫组化法检测RAGE蛋白在肠系膜动脉中的表达。结果:西红花酸治疗后,对DM大鼠血糖值无明显影响;但FMN和GHb水平与模型组比明显下降;AGEs在主动脉和肠系膜血管床中沉积减少;肠系膜动脉血管损伤减轻;RAGE蛋白表达显著下降。结论:西红花酸可抑制蛋白质非酶糖化反应,减少AGEs及其中间产物的形成,下调RAGE蛋白表达,保护DM大鼠血管。     

二甲双胍对晚期糖基化终产物诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨二甲双胍对晚期糖基化终产物( AGE)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响.方法 采用传代细胞培养法培养VSMC细胞;将100、200、400mg/L的AGE分别作用于VSMC,且设200 mg/L BSA组与空白对照组;10-5、10-3、10-3mol/L的二甲双胍+200 mg/L的AGE分别作用VSMC,于加药后12、24、48及72 h观察增殖变化;后用四氮唑蓝法测定其吸光度值.结果 各浓度AGE组在不同时间均能促进VSMC增殖;其中,100 mg/L AGE组12 h时对VSMC就有增殖作用,而200 mg/L AGE组增殖作用最明显,且在24h作用最强;400mg/L组同200 mg/L组相比无统计学差异(P＞0.05);各浓度二甲双胍组在24h、48 h、72 h各组均能抑制VSMC增殖,相比均有统计学意义(P＜0.05);各浓度二甲双胍组相比,10-4mol/L、10-3 mol/L组24h抑制作用最强,经比较有统计学意义(P＜0.05).结论 二甲双胍对AGE诱导的VSMC增殖有抑制作用.     

氯沙坦抑制糖基化终末产物刺激培养的人内皮细胞外基质基因的表达

目的　探讨氯沙坦防治糖尿病血管病变的作用机理。方法　用反转录 聚合酶链反应 (RT PCR)和Northern印迹杂交方法测定了 0 .1～ 10 μmol·L- 1浓度的氯沙坦对经体外制备的糖基化终末代谢产物(AGEs)处理培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)转化生长因子 (TGF) β1和纤连蛋白 (FN)基因表达的影响。结果　由AGEs处理的HUVECsTGF β1和FNmRNA表达较正常对照组明显增高 ;与AGEs组相比 ,TGF β1和FNmRNA的表达在氯沙坦 1.0 μmol·L- 1时分别降低了 2 9%和 2 3%,10 μmol·L- 1时降低了 5 6 %和 6 2 %。结论　氯沙坦通过抑制AGEs刺激的内皮细胞TGF β1和FNmRNA表达 ,从而抑制细胞外基质的生成 ,防止血管重构可能是其防治糖尿病血管并发病的机理之一。     

氯沙坦抑制糖基化终末产物刺激培养的人内皮细胞外基质基因的表达

目的 探讨氯沙坦防治糖尿病血管病变的作用机理。方法 用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Northern印迹杂交方法测定了0.1～10 μmol·L^-1浓度的氯沙坦对经体外制备的糖基化终末代谢产物（AGEs）处理培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）转化生长因子（TGF）-β₁和纤连蛋白（FN）基因表达的影响。结果 由AGEs处理的HUVECs TGF-β₁和FN mRNA表达较正常对照组明显增高；与AGEs组相比，TGF-β₁和FN mRNA的表达在氯沙坦1.0 μmol·L^-1时分别降低了29%和23%，10 μmol·L^-1时降低了56%和62%。结论 氯沙坦通过抑制AGEs刺激的内皮细胞TGF-β₁和FN mRNA表达，从而抑制细胞外基质的生成，防止血管重构可能是其防治糖尿病血管并发病的机理之一。     

槲皮素脂质体对糖尿病大鼠肾脏糖基化终产物及其受体表达的影响

摘要： 目的 观察槲皮素脂质体 （LQ） 对糖尿病大鼠肾脏糖基化终产物 （AGEs） 及其受体 （RAGE） 表达的影响。方法 采用旋转蒸发法制备槲皮素脂质体, 高糖高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素 （STZ） 建立 2 型糖尿病大鼠模型, 并随机分为糖尿病模型组 （DM 组）, 槲皮素脂质体低 （LQ-L）、 中 （LQ-M）、 高 （LQ-H） 剂量组, 氨基胍 （AG） 对照组（AG 组）, 另设正常组 （N 组）。灌胃治疗 8 周后测定各组大鼠血糖、 体质量、 肾脏肥大指数 （KI）、 血尿素氮 （BUN）、 血肌酐 （Scr）, ELISA 法测血清 AGEs 表达和 24 h 尿微量白蛋白, PAS 染色观察肾脏病理改变, 免疫组化测肾组织 AGEs 表达, RT-PCR 检测肾皮质 RAGE mRNA 表达水平。结果 与 N 组比较, DM 组大鼠血糖、 KI、 BUN、 Scr、 血清 AGEs 和 24 h 尿微量白蛋白显著升高, 体质量明显降低; 肾小球体积萎缩, 基底膜增厚; 肾组织 AGEs 和 RAGE mRNA 表达增高 （均 P < 0.05）。与 DM 组比较, LQ 各剂量组大鼠血糖、 KI、 BUN、 Scr、 血清 AGEs 和 24 h 尿微量白蛋白均降低, 体质量增加; 病理改变明显减轻; 肾组织 AGEs 和 RAGE mRNA 表达降低, 以中剂量组作用更明显 （均 P < 0.05）。结论 LQ 可抑制蛋白质非酶糖基化反应, 从而减少肾组织 AGEs 生成及 RAGE mRNA 表达水平, 对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用。     

葛根素对糖尿病大鼠主动脉糖基化终产物的形成及其受体表达的影响

目的　观察葛根素 (Puerarin ,Pue)对糖尿病 (DM)大鼠主动脉糖基化终产物 (AGEs)的形成及其受体 (RAGEmRNA)表达的影响。方法　以STZ诱导DM大鼠模型 ,并将DM大鼠随机分为DM对照组 (DM)、不同剂量葛根素治疗组 (0 5、0 2 5、0 1 2 5g·kg-1 ,ig )和氨基胍治疗组 (0 1g·kg-1 ,ig) ,另设一正常对照组 ,给药 1 2wk后 ,分别以葡萄糖氧化酶法测定血糖 ,NBT法测定血清果糖胺的含量 ,采用荧光法、RT PCR方法分别对主动脉AGEs的沉积及RAGEmRNA的表达进行检测。结果　Pue治疗后DM大鼠血糖、血清果糖胺含量明显降低 ,主动脉AGEs的形成量也明显低于DM模型组 (P <0 0 1 ) ,其治疗作用与氨基胍 (AG)相当 ;RAGE主要在内皮细胞表达 ,其表达量与AGEs的沉积量呈明显正相关 ,而葛根素也可明显下调RAGEmRNA在DM大鼠主动脉中的表达 (P<0 0 1 )。结论　葛根素可通过有效降低糖尿病大鼠血糖、血清果糖胺的含量 ,减少主动脉AGEs的沉积 ,下调主动脉中RAGEmRNA的表达 ,即通过抑制糖尿病大鼠主动脉非酶糖化的形成来防治DM血管病变的发生发展     

碧罗芷体外抑制蛋白糖化终末产物生成作用的研究

目的　应用体外蛋白糖化反应系统 ,确定碧萝芷抑制蛋白糖化终末产物生成的作用。方法　对照组将葡萄糖与牛血清白蛋白分别在 37、50、70℃共同孵育 ,实验组则加入不同剂量的碧萝芷或氨基胍。在不同时间取孵育样品用荧光分光光度计检测其荧光强度代表为蛋白糖化终末产物的生成量。结果　在本体外系统中 ,蛋白糖化产物的生成与孵育温度及时间呈正相关。碧萝芷在 0 3～ 2 0 g·L- 1 剂量范围内可有效抑制蛋白糖化终末产物的生成 ;其抑制作用相当于同剂量的氨基胍。结论　具有抗氧化作用的植物提取物碧萝芷在体外可有效抑制蛋白糖化终末产物的生成