重组人骨形态发生蛋白—2诱导成骨作用的动物实验研究

骨形态发生蛋白（ｂｏｎｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＢＭＰ）的主要作用和用途是诱导新骨形成和促进骨损伤的修复。作用采用多种动物模型，观察了大肠杆菌表达的重组人ＢＭＰ－２（ｒｈＢＭＰ－２）的生物学作用。小鼠股部肌肉内植入试验结果表明，ｒｈＢＭＰ－２具有较强的诱导成骨活性。植入后第２１天，局部有硬有的形成，新生骨有骨皮质和不规则的骨髓腔，植入区局部的股骨增粗，股骨重量明显增加。组织形     

珊瑚复合人工骨骨诱导活性的实验研究

目的弥补单纯珊瑚无骨诱导活性、骨修复能力弱等缺陷,为临床提供理想的骨移植替代材料。方法将珊瑚与胶原和重组人骨形成蛋白２（ｒｈＢＭＰ２）复合,制备珊瑚／胶原／ｒｈＢＭＰ２复合人工骨,将其植入大鼠背部肌肉陷窝,以珊瑚／胶原和珊瑚／ｒｈＢＭＰ２复合人工骨植入作对照;取材后通过组织学方法和图像分析评价其骨诱导活性。结果珊瑚／胶原／ｒｈＢＭＰ２植入后１周,在局部诱导出软骨细胞分化和软骨基质形成;植入后４周,形成含骨髓的板层骨;诱导成骨的量有明显的ｒｈＢＭＰ２剂量依赖性（Ｐ＜０．０１）;而珊瑚／胶原和珊瑚／ｒｈＢＭＰ２植入区均无骨或软骨形成。结论珊瑚／胶原／ｒｈＢＭＰ２复合人工骨具有良好的异位诱导成骨活性,是一种较理想的骨移植替代材料。     

碱性成纤维细胞生长因子增强人重组骨形态发生蛋白-2诱导成骨的调节机理

目的：对ｂＦＧＦ增强ｒｈＢＭＰ－２诱导成骨的调节机理进行探讨。方法：２１０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分为３组,每组７０只,试验侧均位于右后肢。设立ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体、单纯牛松质骨载体为对照组,分别于术后１２ｈ～２１ｄ共１１个时间点取材,观察其诱导成骨过程。结果：ｒｈＢＭＰ－２／ｂＦＧＦ／聚乙烯吡咯啉酮／牛松质骨载体组在诱导间充质细胞增殖、分化,软骨细胞、新生骨形成方面均早于ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体组,成骨量优于ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体组,而单纯牛松质骨载体组在２１ｄ仅出现了少量增殖的间充质细胞。结论：ｒｈＢＭＰ－２和ｂＦＧＦ在诱导成骨调节中存在着协同作用。     

可降解多孔β—TCP／rhBMP—2人工骨的骨诱导活性研究

目的：检测可降解多孔β－ＴＣＰ／ｒｈＢＭＰ－２人工骨的诱导成骨能力。方法：自制要降解多孔β－ＴＣＰ与ｒｈＢＭＰ－２复合后植入４５只小鼠股后肌袋作为实验组，单纯β－ＴＣＰ植入对侧作对照，术后２４，７２小时，１，２，４，８周分别取材做组织学检查，２，４周取材的部分标本做扫描电镜观察：１，２，４周取材的部分标本做碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性测定。结果：实验组有大量新生软骨和骨形成，随着时间的推移，生成量逐渐     

多孔β—TCP／BMP复合人工骨的研制和动物体内的相关研究

多数人工骨缺损修复材料无骨诱导活性，为使人工植骨材料具有骨诱导活性并可在体内降解，本研究采用可降解陶瓷β－磷酸三钙（β－ＴＣＰ）与骨形成蛋白（ＢＭＰ）复合形成具有骨诱导能力的人工骨。将β－ＴＣＰ／ＢＭＰ、单纯ＴＣＰ、羟基磷灰石（ＨＡ）和ＴＣＰ／ＨＡ分别植入１６８只小鼠股部肌肉内，在２４、７２小时，１、２、４、８周取材，作大体观察、组织形态学观察、扫描电镜观察及碱性磷酸酶（ＡＬＰ）检测。另将上述材料植入５５只兔桡骨１．５ｃｍ缺损中，分别在２、４、８、１２、１６周取材，作大体、Ｘ线、组织形态学观察及计算机图像分析。研究结果显示：将β－ＴＣＰ／ＢＭＰ植入小鼠肌袋后１周软骨生成，４周有造血骨髓的板层骨生成。ＡＬＰ检测１、２周水平最高。植入材料与骨组织之间无纤维组织间隔。在兔桡骨缺损修复的研究中发现，β－ＴＣＰ／ＢＭＰ的骨缺损修复作用最强，１６周植入材料的降解达５３％，成骨量亦最多。研究结果表明：β－ＴＣＰ／ＢＭＰ是一种可降解、具有较强骨诱导能力、生物相容性较好的人工骨。     

碱性成纤维细胞生长因子增强人重组骨形态发生蛋白—2诱导成…

目的：对ｂＦＧＦ增强ｒｈＢＭＰ－２诱导成骨的调节机理进行探讨。方法：２１０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分为３组,每组７０只,试验侧均位于右后肢。设立ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体、单纯牛松质骨载体为对对照组,分别于术后１２ｈ～２１ｄ共１１个时间点取材,观察其诱导成骨过程。结果：ｒｈＢＭＰ－２／ｂＦＧＦ／聚乙烯吡咯啉酮／牛松质骨载体组在诱导间充质细胞增殖、分化,软骨细胞、新生骨形成方面均早于ｒｈＢＭＰ－２／     

β转化生长因子增强人重组骨形态发生蛋白—2诱导成骨的调节机理

随着分子生物学的发展，多种生长因子参与骨和软骨的生成过程逐渐为人们所认识。骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）为一种诱导成骨因子，目前已能利用基因工程获得具有生物活性的ｒｈＢＭＰ２〔１〕，体外和体内实验均证明ｒｈＢＭＰ２〔１〕有明显骨诱导活性〔２〕。它能诱导...     

复合rhBMP_2的异种骨(rhBMP_2/BCB)与骨膜联合移植修复兔桡骨节段性骨缺损

目的　探讨复合基因重组人ＢＭＰ２ 的异种骨（ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ） 移植及其与骨膜联合移植修复节段性骨缺损的效果。方法　将ｒｈＢＭＰ２ 与去抗原牛松质骨载体（ＢＣＢ）复合,制成ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ;并采用兔桡骨干１．５ ｃｍ 缺损的动物模型,通过Ｘ线、生物力学、骨密度、组织学等检测手段,比较单纯ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ移植、ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ 与带血运骨膜联合移植及ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ 与游离骨膜联合移植修复节段性骨缺损的疗效。结果　（１） 单纯ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ 移植,可在１６ 周使节段性骨缺损基本修复,其修复机制与过程和重组异种骨相似;（２）ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ与带血运骨膜联合移植,８ 周即可修复骨缺损,其修复机制与骨折修复相仿,包括膜内成骨和软骨成骨两种机制;（３）ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ与游离骨膜联合移植,在骨缺损修复早期（ ≤１２ 周） ,其成骨速度及成骨质与量均优于单纯ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ移植,约在１２ 周使骨缺损基本修复。结论　上述三种方法均可有效地修复节段性骨缺损,但以ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ与带血运骨膜联合移植较为理想。该方法同时具有良好的骨生成、骨传导和骨诱导作用。     

复合骨形态发生蛋白胎儿骨修复长骨缺损的实验研究

寻找满意的骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）的载体一直是应用ＢＭＰ修复骨缺损研究中的一个重要课题，为探讨胎儿骨（ＦＢ）能否成为ＢＭＰ载体，制备了复合ＢＭＰ胎儿骨（ＢＭＰ／ＦＢ），将其植入兔桡骨中段１５ｍｍ人工缺损处，以单纯ＦＢ植入、异体骨（ＡＬＢ）植入、空白作为对照，通过Ｘ线摄片，光镜观察，电子探针钙磷元素测定等方法了解各组骨缺损修复速度和愈合程度。结果发现ＢＭＰ／ＦＢ植入侧４周时骨缺损处有大量间充质细胞聚集，８周形成骨小梁，ＦＢ基本被吸收，１２周出现部分板层骨，钙磷值达到正常桡骨皮质骨水平，１６周骨细胞成熟，髓腔再通，外观塑形较好，在不同时间点骨缺损修复程度，ＢＭＰ／ＦＢ组明显优于ＦＢ组，ＦＢ组优于ＡＬＢ组，空白组骨缺损则被纤维组织，脂肪组织等填充。实验证明ＦＢ是一种良好的ＢＭＰ载体。     

新型复合异种骨的研制及其修复骨缺损的免疫组化观察

将人重组骨形成成骨白－２与经综合化学处理的新生小羊骨松质结合制备成新型复合异种骨。将其移植修复兔下颌骨缺损，免疫组织化学观察结果表明；复合异种骨移植后，术后各时期移植工成骨活跃，成骨细胞及软骨细胞呈强阳性染以；而单纯松质骨组移植区新骨形成少，染色浅谈，从而证实，ｒｈＢＭＰ－２对复合异种骨内新骨形成具有决定性意义。     

骨胶原的制备及作为骨形成蛋白载体修复骨缺损的研究

在提取ＢＭＰ的过程中，从废去的中间产物骨基质胶中同时提取胶原作为ＢＭＰ的载体用于修复兔颅骨缺损。４０只大白兔随机分为Ａ、Ｂ两组，在兔颅顶骨两侧对称各制造直径为１ｃｍ的圆形骨缺损，Ａ组兔颅顶骨缺损左侧植入骨胶原／ＢＭＰ，右侧植入单纯骨胶原。Ｂ超兔左侧植入ＢＭＰ，右侧空白对照，组织学检查显示：植入后７天，骨胶原／ＢＭＰ组即有软骨细胞岛出现，且在各期的成骨面积均大于单纯ＢＭＰ组和胶原组。另外，移植材料内     

聚乳酸作为骨形态发生蛋白载体修复骨缺损的实验研究

目的 探讨聚乳酸（ｐｏｌｙｌｄａｃ ａｃｉｄ,ＰＬＡ）作为骨形态发生蛋白（ｂｏｎ ｅ ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ ｐｒｏ－ｔｅｉｎ,ＢＭＰ）载体的可行性及观察其诱导成骨能力。方法 手术造成日本大耳白兔左尺骨中上段１２ｍｍ骨缺损实验模型。随机分为实验。对照及空白组,实验组植入以ＰＬＡ为载体的ＢＭＰ１０ｍｇ、对照组植入以牛松质骨基质为载体的ＢＭＰ１０ｍｇ、空白组不做任何处理,术后摄Ｘ线片观察各组不同时相骨缺损修复情况,并于术后第４、８、１２周观察各组缺损内组织学变化。图像分析骨小梁的生成量。结果 实验修复情况优于对照组,无论是骨连接发生时间还是骨成熟时间,实验组均较对照组提前２周左右,同期骨生成量也明显多于对照组,而空白组缺损内主要形成纤维组织。结论 ＰＬＡ可以作为ＢＭＰ的载体修复骨缺损,它比异种松质骨基质载体的成骨效     

脱蛋白骨、骨形态发生蛋白和三种生长因子重组合人工骨成骨能力的比较研究

目的　比较三种重组合人工骨的成骨能力。方法　在５０ 只兔的１００ 个颅骨缺损动物模型中分别植入：①牛脱蛋白骨（ｂ Ｄ Ｐ Ｂ）／牛骨形态发生蛋白（ｂ Ｂ Ｍ Ｐ）／肿瘤坏死因子α（ Ｔ Ｎ Ｆα）;②ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／碱性成纤维细胞生长因子（ｂ Ｆ Ｇ Ｆ）;③ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／表皮细胞生长因子（ Ｅ Ｇ Ｆ）;④ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ。植入后１、２、４、６ 及８ 周行组织学检查及 Ｘ 线摄片; 植入后１０ 及４２ 天行　３５ Ｓ和４５ Ｃａ 液闪计数及灰重测定。结果　成骨能力：ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／ Ｔ Ｎ Ｆα＞ ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／ｂ Ｆ Ｇ Ｆ（ Ｐ＜ ０．０１） ＞ ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／ Ｅ Ｇ Ｆ（ Ｐ＜ ０．０１）;ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／ Ｅ Ｇ Ｆ 与 ｂ Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ 无显著性差异（ Ｐ＞ ０．０５）。结论　 Ｔ Ｎ Ｆα与 Ｂ Ｍ Ｐ及载体复合后,在体内对骨修复产生明显的促进作用,在载体／骨诱导因子／生长因子的重组合人工骨模式中, Ｄ Ｐ Ｂ／ｂ Ｂ Ｍ Ｐ／ Ｔ Ｎ Ｆα是一种有价值的骨移植材料。     

BMP／DBM修复关节软骨缺损的实验研究

作者旨在对骨形态生成蛋白／脱钙骨基质（ＢＭＰ／ＤＢＭ）复合体在关节软骨缺损修复中的作用进行探讨。在１６只雄性兔双侧股骨髁间凹各做一直径４ｍｍ，深２．５ｍｍ的全层关节软骨缺损。１６个右膝缺损区植入ＢＭＰ／ＤＢＭ，８个左膝缺损内单独植入ＤＢＭ，另外８个左膝为空白。术后１２周处死动物，取材，石蜡包埋，连续切片，做苏木素一伊红，甲苯胺蓝及ｓａｆｒａｎｉｎ－Ｏ染色。结果显示，在ＢＭＰ／ＤＢＭ组，植入物完全被吸收并被新生软骨替代，１４例（１４／１６）愈合，且１２例ｓａｆｒａｎｉｎ－Ｏ阳染，新生软骨厚度和特征与邻近正常软骨相似。ＤＢＭ组只有２例（２／８）愈合，ｓａｆｒａｎｉｎ－Ｏ染色全部阴性。空白组未见新生软骨。结果说明，ＢＭＰ／ＤＢＭ能在关节腔内诱导软骨再生，并能以透明软骨修复全层关节软骨缺损。     

骨诱导性载体复合骨形态发生蛋白的双重成骨作用

本文用猪骨基质明胶（ｐＢＭＧ）复合猪骨形态发生蛋白（ｐＢＭＰ）植入小鼠肌肉内，以期达到ｐＢＭＧ和ｐＢＭＰ双重诱导成骨的叠加作用，并与单独植入的明胶海绵、ｐＢＭＧ、ｐＢＭＰ和无机骨－ｐＢＭＰ（ＡＯＢ－ｐＢＭＰ）的成骨效应相比较。结果显示，含有ｐＢＭＰ的各组术后４天有明显的间充质细胞化，新骨在１０天左右开始形成。ＡＬＰ的活性高峰出现在术后２１～２８天，组间钙、磷含量差异具有高度显著性（Ｐ＜０．０１），明胶海绵组最低，而ｐＢＭＧ－ｐＢＭＰ组含量最高。各组的钙、磷相关系数为高度正相关。作者讨论了ｐＢＭＧ复合ｐＢＭＰ后的双重成骨作用及其优越性，认为ＡＬＰ主要由诱导性新骨成熟期的成骨细胞和骨细胞所产生，新骨中的钙、磷含量因呈高度正相关，两者均可作为新骨定量的指标，但以钙含量为主。     

纯化天然骨唾液蛋白的体内成骨活性

目的 评价骨唾液蛋白（ｂｏｎｅ ｓｉａｌｐｒｏｔｅｉｎ,ＢＳＰ）在大 本内的成骨活性。方法 应用从牛骨中提取纯化的ＢＳＰ与经盐酸胍处理诱导活性的不溶性骨基质（ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ ｂｏｎｅ ｍｔｒｉｘ,ＩＢＭ）或提纯的１型胶原形成共价交联的复合物,将ＢＳＰ－ＩＢＭ复合物和ＢＳＰ－１型胶原复合物分别植入直径８ｍｍ的大鼠颅骨骨缺损和胸部皮下组织内。不含ＢＳＰ的ＩＢＭ或１型胶原也分别植入上述部位作为对照。     

生物性骨载体修复股骨长段缺损

骨干长段缺损的修复是骨科临床的难题之一。人骨生物性骨载体（ＢＢＣ）属同种生物源性材料，组织相容性好，又具有骨的成份、结构和相似的生物力学强度，植入后能很快与人体组织建立血运，由植入时的无活力状态变成具有正常代谢的骨组织，是修复骨干长段缺损理想的替代材料之一。应用ＢＢＣ修复股骨长段缺损２例，缺损长度分别为１３ｃｍ和１１ｃｍ，随访２～３年，植入的ＢＢＣ已与原股骨呈骨性连接，具有正常骨的代谢和密度，效果满意。     

不同骨愈合方式的细胞与分子机理研究——BMP与骨祖细胞的？…

目的：研究骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）及骨祖细胞的分布与作用,探讨不同愈合方式的细胞与分子机理。方法：制造兔桡骨中下段骨折,缺损３ｍｍ,不同时期取骨痂作ＨＥ及ＢＭＰ免疫组化染色显微下观察结果并和计算机图像分析。结果膜内成骨区及软骨内成骨区骨祖细胞、成骨细胞、成软骨细胞及未成熟的骨细胞ＢＭＰ染色呈强阳性;但肥大的软骨细胞和成纤维细胞为阴性染色。计算机图像分析显示：膜内成骨区较软骨内成骨区有较高ＢＭＰ浓度     

骨髓基质成骨细胞-松质骨基质复合人工骨修复颅骨缺损的实验研究

目的 观察松质骨基质－骨髓基质成骨细胞复合工人骨在骨缺损区的成骨作用，探索该组织工程化人工骨修复颅骨缺损的可行性。方法 成年新西兰兔骨髓细胞体外培养、诱导后，接种于藻酸盐－松质骨基质中，形成松质骨基质－藻酸盐－骨髓基质成骨细胞复合人工骨，修复自体颅骨缺损。分别植入松质骨基质和骨髓基质成骨细胞作为对照。植入4周和8周后行X线摄片和组织学检查，观察骨形成情况。结果 复合人工成骨量优于单纯植入松质骨基持或骨髓基质成骨细胞组，并明显优于空白对照。结论 松质骨基质－骨髓基质成骨细胞复合人工骨髓修复颅骨缺损效果良好，可以作为临床大型骨缺损修复的途径之一。     

自身骨泥成骨活性的实验研究

目的：观察长管状骨钻孔产生的骨泥的成骨活性。方法：选健康家兔２２只,桡骨中段连续钻孔采集骨泥,植入兔股四头肌。２周取５只兔做ＥＣＴ检查,１、２、３周分别做组织学检查、Ｅｌｉｖｉｓｉｏｎ二步法免疫组化染色及碱性磷酸酶测定。结果：自身骨泥具有良好的异位诱导成骨活性。植入区放射性浓聚程度明显高于对侧正常组织（Ｐ＜００５）。植入１周软骨生成,３周网织骨形成。组织碱性磷酸酶活性明显高于正常肌肉（Ｐ＜００１）,免疫组化发现细胞及组织ＢＭＰ强阳性。结论：长管状骨钻孔产生的自身骨泥具有诱导成骨作用,可做为需少量植骨的植骨材料。