金葡菌及其L型诱导脐静脉内皮细胞凋亡及相关基因的研究

目的:探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)及其L型诱导细胞凋亡的作用及可能的分子机制.方法:用流式细胞术检测金葡菌及其L型感染人脐静脉内皮细胞(HUVECs) 后2 h、4 h、6 h、8 h和10 h的细胞凋亡率,并同时用免疫组化方法检测各时间点bcl-2及Fas基因的表达情况. 结果:金葡菌及其L型均能诱导HUVECs发生凋亡,与对照组比较差异有显著性(P<0.05～P<0.01).金葡菌L型诱导细胞的凋亡率均低于金葡菌(P<0.01);bcl-2及Fas基因表达率在感染后6 h与对照组比较差异均有显著性(P<0.01),在诱导的时间内bcl-2基因表达率逐渐降低,而Fas基因表达率逐渐增加(P<0.01).结论:金葡菌及其L型均能诱导HUVEC发生凋亡,其机制可能与下调bcl-2蛋白及上调Fas蛋白有关.     

涂阴PCR-TB-DNA阳性患者组织标本病原学研究

对146例胸水或痰涂阴PCR-TB-DNA阳性患者62例活检组织和84例石蜡包埋组织进行了PCR-TB-DNA扩增和抗酸染色检测,结果146例患者病理诊断结核108例,肿瘤24例,炎症14例;组织标本抗酸染色阳性107例,其中杆菌型31例,L型76例(结核组、肿瘤组和炎症组分别为99例、7例和1例);组织标本PCR检测阳性121例(结核组、肿瘤组和炎症组分别为106例、13例和2例);38例非结核患者有结核病和结核密切接触史者33例。临床标本PCR结果与组织标本的病理学诊断、抗酸染色和PCR结果符合率分别为74.0％(108/146)、73.3％(107/146)和82.9％(121/146);组织标本抗酸染色和PCR检测总符合率为83.6％。提示PCR-TB-DNA扩增对于涂阴结核患者快速诊断有很大帮助,临床标本PCR阳性大多为结核所致,非结核患者有结核感染史者PCR大多数可出现阳性;PCR-TB-DNA阳性除抗酸菌杆菌型外大多数与抗酸菌L型感染有关。     

多重PCR法检测金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因

目的：了解金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）耐药基因及所携带致病毒素基因PVL与TSST-1的特点。方法：应用多重PCR法检测mecA基因、TSST-1基因及Py￡基因。结果：84株金 葡球经多重PCR法对其mecA基因进行检测．检出率为58．3％（49／84）。PVL基因阳性菌株的分离率为23．8％（20／84）,州￡阳性的MRSA为13株（13／49,26．5％）,PyL阳性的MSSA为7株（7／35,20．O％）,差异无统计学意义（P〉0．05）;未检出TSST-1基因。结论：金葡菌的耐药性呈上升趋势,且金葡菌可产生多种毒素,在分离金葡菌的同时,应加强其耐药基因及毒素基因的检测。     

金黄色葡萄球菌L型对宫颈癌细胞生长的影响

目的:研究金黄色葡萄球菌(金葡菌)L型对体外培养的单层人宫颈癌细胞(HeLa)生长的影响作用.方法:用常规方法诱导金葡菌为L型后感染HeLa细胞,采用光学显微镜、透射电子显微镜检测金葡菌L型黏附及侵入细胞情况,并采用改良的MTT比色法检测细胞增殖能力.结果:光镜、电镜检查显示金葡菌L型能够黏附并且进入HeLa细胞;改良的MTT法检测表明金葡菌L型能够促进HeLa细胞增殖(P<0.01).结论:金葡菌L型能够感染并促进HeLa细胞增殖生长,揭示金葡菌L型可能与宫颈癌的发生有关.     

金黄色葡萄球菌(普通型、L型)的药敏试验及临床应用

目的分析金葡菌及其L型耐药性变化规律,指导临床合理应用抗生素。方法采用K-B法对临床标本中分离出的金葡菌及其L型做药敏试验。结果金葡菌对苯唑西林和头孢他啶呈高度耐药,对头孢噻肟的耐药率上升相对较快。220株L型金葡菌对苯唑西林和氨苄西林呈高度耐药。结论金葡菌及其L型对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类等耐药率的逐年上升与药物在临床广泛应用、用法不合理及对药敏试验结果没有足够重视而采取经验用药有关。     

随机森林法筛选新生儿社区感染甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌耐药和分子特征

目的 探究新生儿感染金黄色葡萄球菌(金葡菌)的耐药特征和分子特征,为指导临床预防和治疗新生儿金葡菌感染提供依据.方法 采集柳州市妇幼保健院新生儿感染临床标本,对分离出的金葡菌进行药敏试验和毒素基因检测,并收集相关临床资料.结果 共收集92株新生儿金葡菌,其中甲氧西林耐药金葡菌(MRSA)29株和甲氧西林敏感金葡菌(MS...     

金黄色葡萄球菌感染与特应性皮炎

特应性皮炎 (atopicdermatitis ,AD)是一种慢性、瘙痒性、炎症性皮肤病。到目前为止 ,其病因尚不十分清楚 ,发病可能与遗传因素、免疫异常、环境因素等相关。近年来 ,各种微生物感染尤其是细菌感染或定植与AD发病成为研究热点。细菌感染的种类较多 ,但以金黄色葡萄球菌 (staphylococcusaureus ,金葡菌 )感染倍受关注。本文就金葡菌感染与AD的相关性、金葡菌超抗原在AD发病中的作用、AD抗菌治疗等简述如下。1　金葡菌感染与AD的相关性1 1　金葡菌在AD皮损处定植　葡萄球菌是体表正常菌群之一 ,分为凝固酶阳性和凝固酶阴性两大类。正常…     

金黄色葡萄球菌L型产B型肠毒素及其基因的研究

目的: 探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)L型肠毒素B的产生量及其基因存在情况。方法: 将金葡菌诱导成稳定L型后,用ELISA法检测葡萄球菌肠毒素B(SEB),用PCR法检测SEB基因。结果: 金葡菌L型SEB的产生量与原菌比差别无显著性(P>0.05),PCR发现478bp的阳性条带。结论: 金葡菌变异为L型后SEB产生量不变,其基因也未丢失。     

产B型肠毒素金黄色葡萄球菌及其L型某些致病物质的比较

目的：比较产B型肠毒素金黄色葡萄球菌（金葡菌）及其L型的某些致病物质。方法：检测金葡菌L型产生血浆凝固酶、耐热核酸酶及肠毒素B的情况，并与原菌进行比较。结果：金葡菌L型使血浆延迟至24h发生凝固，耐热核酸酶的透明环减小，肠毒素B的光密度（OD）值未见明显减少。结论：金葡菌L型仍能产生致病物质，其致病力减弱。     

尿可溶性抗原检测早期诊断军团菌肺炎的实验研究

为探讨应用生物素－亲和素的酶联免疫测定法检测军团菌可溶性抗原对早期诊断军团菌肺炎价值，用ＢＡ－ＥＬＩＳＡ法检测２７只Ｌｐ１型军团菌肺炎豚鼠尿标本，发现感染后第１ｄ３６．８％（７／１９）的豚鼠尿中可测出军团菌可溶性抗原，至感染后第５ｄ达８３．３％（２０／２４），累计敏感性达１００％。４７只非军团菌感染豚鼠尿检示该法的特异性为９１．５％（４３／４７），与金黄色葡萄球菌（金葡菌）及某些假单胞菌有交叉反应     

聚合酶链反应和改良抗酸染色诊断L型结核杆菌感染

目的　探讨 L 型抗酸菌的 IK染色和 PCR检测的临床应用价值 .方法　采用 IK染色和 PCR技术 ,对结核病患者(35例 )、非特异性淋巴结炎患者 (30例 )和正常胎儿 (1 0例 )的石蜡切片进行对比研究 .结果　两种方法 (PCR和 IK染色 )对上述 3组 75例的检测阳性率分别为 80 % ,83% ;6 7% ,6 0 %及 0 % .结论　 PCR技术及 IK染色 ,检测抗酸菌 L 型的阳性率及灵敏度均较高     

HBV-DNA的含量与宫内感染的关联性

目的：探讨孕妇血清中HBV—DNA含量与胎儿宫内感染及造成宫内感染的相关因素．方法：用ELISA方法筛选HBsAg阳性孕妇228例,并用定量PCR技术检测HBsAg阳性孕妇血清以及脐血中HBV—DNA．新生儿根据有无HBV感染分为胎儿感染组及非感染组（对照组）,调查宫内感染的相关因素,结果：HBsAg,HBeAg、抗HBc阳性孕妇的新生儿脐血HBV—DNA捡出率21％（14／68）;HBsAg．抗HBe,抗HBc阳性者为1．7％（2／117）;HBsAg和HBeAg双阳性者为20％（3／15）;HBsAg和抗HBc阳性者为11％（2／19）;HBsAg单一抗原阳性者脐血中未捡出HBV—DNA．胎儿总感染率为9,2％（21／228）．胎儿宫内感染率随孕妇血清中HBV—DNA含量增加而升高,宫内感染的危险性越大．胎儿感染组与非感染组在多种临床相关因素中先兆早产孕妇胎儿感染者多于非感染组（P〈0．05）．结论：孕妇不同的感染状态影响宫内HBV感染率,HBeAg与HBV—DNA高滴度是胎儿宫内感染的高危因素．孕妇出现先兆早产使胎儿的感染率增加．     

新生儿咽部巨细胞病毒感染状况的研究

目的：追踪观察新生儿咽部巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染状况，进一步分析感染对其生长发育的影响。方法：采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和病毒分离方法检测４２例新生儿咽部分泌物中ＣＭＶ感染状况。结果：新生儿咽部ＣＭＶ感染率为１６．７％（７／４２），７例咽部ＣＭＶ阳性者母亲宫颈分泌物或外周血ＣＭＶＤＮＡ均阳性。宫颈或外周血ＣＭＶＤＮＡ阳性者其新生儿咽部感染的危险性为４３．７％（７／１６），自然分娩和剖宫产者新生儿咽部ＣＭＶ感染率分别为１２．５％（２／１６）和１９．２％（２／１６），二者无显著差异。结论：孕妇ＣＭＶ感染可通过宫内和产道传播给胎儿，剖宫产不能防止新生儿咽部感染。     

三重聚合酶链反应快速诊断耐甲氧西林葡萄球菌感染

目的建立一种能快速有效地对葡萄球菌感染进行病原体诊断的方法.方法利用三重聚合酶链反应技术(Triplex PCR)同时检测葡萄球菌特异性16S rRNA 基因、金黄色葡萄球菌特异性Sa442基因和编码青霉素结合蛋白(PBP2a)的mecA基因.结果 84株葡萄球菌的16S rRNA 基因100%阳性,其中33株金黄色葡萄球菌的Sa442基因100%阳性,mecA基因阳性率为78.8%.51株凝固酶阴性葡萄球菌的Sa442基因100%阴性,mecA基因阳性率为76.5%.30株其他临床常见菌16S rRNA、Sa442、mecA基因100%阴性.结论该技术具有简便、快速、特异性强等特点,是一种非常有效的耐甲氧西林葡萄球菌感染快速诊断方法.     

沈阳市孕妇弓形虫感染的临床研究

目的：探讨孕妇弓形虫（TOX）感染的状况及感染后对其胎儿的影响。方法：用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测孕妇血中弓形虫循环抗原（CAg）、IgG及IgM抗体。结果：93例病理妊娠的孕、产妇血清中CAg阳性者19例（20．43％）,TOX—IgG阳性者21例（22．58％）及TOX—IgM阳性者9例（9．68％）。而93例正常产孕妇血清中CAg阳性者仅为2例（2．15％）,TOX—IgG阳性者3例（3．23％）及TOX-IgM阳性者1例（1．08％）。结论：TOX感染对胎儿有较大的危害,是引起胎儿流产、死产死胎和畸形的主要原因之一。因此,孕妇妊娠早期应进行弓形虫感染检测,感染者应进行治疴。     

Identification of bacterial antigens and super antigens in synovial fluid of patients with arthritis: a cross sectional study

Background

An accurate and prompt diagnosis of bacterial arthritis is essential for earlier treatment and a good outcome. Superantigens produced by Staph. Aureus are among the most lethal toxins. The paper objective was Identification of common bacterial antigens and S.aureus superantigens in synovial fluid (SF) of children with negative culture and direct smear for other bacteria except for S.aureus.

Methods

In this cross-sectional study a total of 62 patients with a mean age of 11 ± 3.8 years (range: 5 months-16 years) with acute arthritis in pediatric and orthopedic wards of Rasoul Hospital (2008-2010) were studied. Three common bacterial antigens (e.g. S.pneumonia, H.influenza, N. meningitis) using LPA (latex particle antigen) and Staphylococcal superantigens (TSST1; Enterotoxin A; B; C) using ELISA method (ABcam; USA) were identified in 60 adequate SF samples with negative culture and negative direct smears) for other bacteria except for S.aureus. Staphylococcal superantigens were compared with S.aureus infection (positive culture or direct smear).

Results

Positive bacterial antigens (LPA test) were found in 4 cases including two S. Pneumonia, one N.meningitis, and one H.influenza. S.aureus was diagnosed in 7 cases including 4 positive cultures and 3 positive smears. Staphylococcal superantigens (toxins) were found in 73% of SF samples. Some cases had 2 or 3 types of toxins. S.aureus toxins were reported in 47% of culture negative SF samples. Positive TSST1, Enterotoxin B, Enterotoxin A, and Enterotoxin C were found in 47% (n= 28), 18% (n= 10), 39% (n= 22), and 39% (n = 21) of cases respectively. The most common type of superantigens was TSST1; and Enterotoxin A was the less common type. Except for Enterotoxin A, no relation between positive S.aureus culture and positive tests for superantigens in SF was found.

Conclusion

S.aureus has a prominent role in septic arthritis. S.aureus toxins might have a prominent role in arthritis with negative SF culture. Rapid identification of bacterial antigens (LPA) or S.aureus superantigens (toxins) are valuable for diagnosis in cases with negative cultures. We recommend usage of complementary methods (e.g. antigen detection tests) in children. Those tests are cheaper and easier in comparison with PCR as a complex and time-taking method. Identification of S.aureus superantigens in SF of all cases with negative culture, or treatment with antagonist drugs needs further clinical trial studies.     

人巨细胞病毒感染与染色体着丝粒点变异关系研究

目的：研究孕妇ＨＣＭＶ感染对胚胎染色体着线粒点（Ｃｄ）变异的影响,探讨ＨＣＭＶ感染引起出生缺陷的原因和机制。方法：用我入良的Ｃｄ－ＮＯＲ同步银染技术对１５例ＨＣＭＶ感染和２５例非感染孕妇的胚胎或绒毛组织ＣＤ消失、ＣＤ变进行比较分析。结果：前者ＣＤ消失、ＣＤ变异频率较后者有显著和极显著的增高。结论：染色体ＣＤ的变化可能是ＨＣＭＶ感染引起胚胎发育的重要原因之一。对ＨＣＭＶ感染孕妇的胚胎或绒毛杂色体ＣＤ     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的多重聚合酶链反应检测方法

目的 建立多重聚合酶链反应9multiplex poly-merase chain reaction,mt-PCR)快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。方法 对临床分离的63株金黄色葡萄球菌，采用mt-PCR快速检测MRSA的决定基因mec和辅助基因femA,用16SrRNA基因作内参照。结果 mt-PCR的预期扩增结果为耐药株出现3条扩增区带，敏感株只有femA基因和16SrRNA基因出现2条扩增区带。在63株金黄色葡萄球菌中，药敏法34.9%（22/63）耐药；mt-PCR增增mecA基因34.5%(23/63)阳性，femA基因和16SrRNA基因100%阳性；单引物PCR与mt-PCR两者阳性扩增符合率为100%。结论 采用多重聚合酶链反应，可在同一扩增体系内同时检出mecA基因，femA基因，对MRSA临床株的快速，及时检出，有效控制MRSA造成的感染，限制其传播等具有重要的现实意义。     

TORCH感染检测技术在异常妊娠中的临床应用

目的研究肇庆市端州区孕妇TORCH感染与异常妊娠的相关性。方法采用抗体捕获ELISA法对产前检查及近期自然流产诊治的妇女共778例,进行TORCH-IgM抗体检测。结果480例无异常妊娠史者阳性病例54例,IgM总阳性率为11.24%;285例有异常妊娠史者阳性病例126例,IgM总阳性率为44.21%(P<0.05);13例近期自然流产者阳性病例9例,IgM总阳性率为69.22%(P<0.05)。结论在孕早期自觉进行TORCH感染检测,是做好优生优育工作的首要环节。