前荷叶碱对人脐静脉内皮细胞一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的:观察前荷叶碱(Pronuciferine)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分泌一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的影响,探讨其对HUVECs血管活性分子分泌的调节作用.方法:从莲子心中提取前荷叶碱,体外培养HUVECs,用不同浓度(10μmol/L、1μmol/L、0.1μmol/L、0.01μmol/L)的前荷叶碱分别作用于HUVECs,观察细胞形态,MTT法观察前荷叶碱对HUVECs活性的影响,比色法测定各组的NO、总NOS(tNOS)、诱导型NOS(iNOS).结果:和对照组比较,前荷叶碱对内皮细胞形态和活性无明显影响,能增加HUVECs释放NO,及tNOS生成(p＜0.01),但对iNOS影响不大.结论:前荷叶碱可能通过增加tNOS生成而提高HUVECs释放NO,从而保护内皮功能.     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑皮层一氧化氮的影响

本研究在大鼠脑缺血再灌注的模型上,应用改良镉还原法测定大鼠脑内ＮＯ的代谢产物──亚硝酸盐含量的变化,并应用免疫组织化学方法测定大鼠脑内ｃＮＯＳ及 ｉＮＯＳ的免疫活性变化。研究结果显示：①大鼠一侧大脑中动脉栓塞３０分钟再灌注２４小时后,脑内ＮＯ代谢产物亚硝酸盐含量明显高于对照例,差异显著（ Ｐ＜ ０． ０５）,同时免疫组织化学显示 ｉＮＯＳ免疫活性增强;②缺血再灌注大鼠电针处理后,缺血侧亚硝酸盐含量与对照例相比虽有升高,但升幅仅为３３．３％,无显著性差异,其升幅与未电针组大鼠相比低 ３６． ４９％;电针缺血侧ｉＮＯＳ免疫活性细胞数明显减少。结果表明：①大鼠局灶性脑缺血再灌注可使脑内ＮＯ代谢水平升高,在ＮＯ代谢产物含量升高的同时,ｉＮＯＳ的活性也增强;②电针抗脑缺血再灌注损伤的机制之一是通过抑制ＮＯ代谢而实现的。     

大鼠“足三里”穴区一氧化氮合酶阳性神经纤维的来源

目的：观察大鼠“足三里”穴区一氧化氮合栈（ＮＯＳ）阳性神经纤维的来源。方法：采用辣根过氧化物酶ＨＲＰ逆行追踪与还原尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）相结合方法。结果：Ｌ４－Ｓ１脊神经节内有ＮＯＳ阳性神经元的周围突分布于“足三里”穴区，Ｌ４－Ｓ１脊髓第Ⅸ板层有ＮＯＳ阳性神经元投射到“足三里”穴区。结论：“足三里”穴区的ＮＯＳ阳性神经纤维联系可能是“足三里”穴针刺效应的主要形态学依据之一。     

逆灸关元穴对自然更年期大鼠子宫HSP70、HSP70 mRNA、SOD、NOS的影响

目的:探讨逆灸关元穴对自然更年期大鼠子宫热休克蛋白70(HSP70)及其信使RNA(HSP70mRNA),超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)的影响及其机制。方法:将112只通过阴道涂片筛查的10月龄SD雌性大鼠随机分为7组,另设3.5月龄1组为对照,每组16只。观察10月龄逆灸关元穴对随后12、14、16月龄子宫HSP70、HSP70mRNA和子宫抗氧化指标的影响。结果:各自然月数组大鼠子宫HSP70、HSP70mRNA表达随着月龄的增长均呈先升后降的变化,子宫SOD、NOS的活性明显降低(P<0.01)。与同自然月龄组相比,逆灸14、16月龄组子宫HSP70、HSP70mRNA表达明显增加(P<0.05或P<0.01)。子宫SOD、NOS的活性增强。结论:逆灸关元穴可以增加外周子宫组织细胞HSP70及其基因的表达,促进组织SOD、NOS活性增强,这可能是该疗法对子宫产生保护作用的机制之一。     

太子参醇提物对自然衰老大鼠组织一氧化氮合酶的影响

太子参[ Pseudostellaria heterophylla(Miq.)Pax et Hoffm,PHPH]系石竹科植物异叶假繁缕的干燥块根,为传统中药,有补肺健脾功效.本实验用自然衰老大鼠模型,观察太子参醇提物(EPHPH)对自然衰老模型大鼠血清、肝、肾、耳蜗中一氧化氮合酶(NOS)活力的影响,旨在探讨衰老与NOS的相关性及太子参醇提物对衰老大鼠NOS的作用.     

大鼠“内关”穴区一氧化氮合酶阳性神经的来源

采用辣根过氧化物酶 (HRP)逆行追踪与还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶 (NADPH-d)相结合方法 ,观察大鼠“内关”穴区一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经纤维的来源。结果 :当 HRP注入“内关”穴后 ,在脊神经节的颈 6至胸 1 (C6-T1)节和脊髓前角观察到 HRP-NOS双标记神经元。结论 :“内关”穴区有 NOS阳性感觉和运动神经纤维分布。     

充血性心力衰竭患者血浆一氧化氮和一氧化氮合酶的改变

目的 :探讨血浆一氧化氮 ( NO)和一氧化氮合酶 ( N OS)在充血性心力衰竭 ( CHF)病程中的改变及其临床意义。方法 :用比色分析法测定 40例 CH F患者治疗前后血浆 N O和 NOS的含量 ,并与 40例健康、无症状者进行比较。结果 :CHF组治疗前 NO与 NOS测定值显著高于对照组 ( P <0 .0 1)。治疗后 CHF组血浆 NO,NOS测定值明显下降 ,但仍明显高于对照组 ( P<0 .0 5 ) ,且心功能 级患者的 NO与 NOS测定值明显高于心功能 ～ 级患者 ( P<0 .0 5 )。结论 :血浆 NO和 NOS参与了CHF的病理生理过程 ,且与 CHF的严重程度相关     

一氧化氮及诱导型一氧化氮合酶的研究进展

一氧化氮(Nitric Oxide,NO)是一个普遍存在的第二信使,具有广泛的生理病理作用,其在呼吸、消化、循环、免疫、神经等全身多系统的生理、病理生理及有关临床疾病中起着重要作用。由于其独特的理化性质和生物学活性,使得对于NO的研究主要集中在其合成的关键酶一氧化氮合酶(NOS)上,特别是对于诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的研究更是成为近年的研究热点。本文将对NO及iNOS作用机制、调节及在部分临床疾病中的作用研究作一综述。     

电针“内关”穴对心肌缺血再灌注大鼠心肌组织一氧化氮、一氧化氮合酶和细胞内钙的影响

目的:观察电针"内关"穴对实验性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞内钙超载及内源性保护物质一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响,为针刺防治心血管疾病及经脉脏腑相关理论提供实验依据。方法:50只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注模型组、电针内关组、电针列缺组、电针合谷组。采用冠脉结扎法建立心肌缺血再灌注模型,各电针组于冠脉结扎前后各电针20 min(30 Hz/100 Hz,2～4 mA)。硝酸还原酶比色法检测各组心肌组织NO、NOS的含量,在Fluo-3/AM染色后于激光共聚焦显微镜下检测心肌细胞内Ca2+荧光强度。结果:与假手术组比较,模型组心肌组织NOS含量明显降低(P0.05),心肌细胞内Ca2+荧光强度明显升高(P0.01);电针心包经"内关"穴组与模型组比较,心肌组织NO、NOS含量明显升高(P0.05),心肌细胞内Ca2+荧光强度明显降低(P0.01);电针肺经"列缺"穴及电针大肠经"合谷"穴与模型组比较,各指标的差异无统计学意义(P0.05)。结论:电针心包经"内关"穴可上调心肌内源性保护物质的水平,降低Ca2+超载,且这种效应存在经脉(穴)与脏腑间的相对特异性联系。     

艾灸预处理“天枢”穴对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障保护的机制研究

目的：观察艾灸预处理“天枢”穴对UC大鼠的抗炎效应,探讨艾灸预处理“天枢”穴对UC大鼠肠黏膜屏障的保护机制。方法：SD雄性大鼠28只,随机分为正常组、模型组、隔药灸预处理组和温和灸预处理组,每组7只。造模前先予隔药灸、温和灸预处理干预7天;预处理后予模型组、隔药灸预处理组、温和灸预处理组4%葡聚糖硫酸钠水溶液连续饮用7天。采用HE染色法观察大鼠结肠组织病理学变化;免疫组化法和western blot法检测大鼠结肠组织分子的蛋白表达。结果：与正常组比较,模型组结肠组织病理学评分显著升高,Occludin、JAM1、MUC2、ZO-1蛋白表达显著降低,NF-κBp65、IL-1β蛋白表达显著升高（P ＜ 0.05）;与模型组比较,隔药灸预处理组结肠组织病理学评分显著降低,Occludin、MUC2、JAM1、ZO-1蛋白表达显著升高,NF-κBp65、IL-1β蛋白表达显著降低（P ＜ 0.05）,温和灸预处理组结肠组织病理学评分显著降低,Occludin、MUC2、ZO-1蛋白表达显著升高,IL-1β蛋白表达显著降低（P ＜ 0.05）。结论：隔药灸预处理、温和灸预处理“天枢”穴均能升高UC大鼠肠黏膜屏障相关蛋白的表达,可能是艾灸有效预防减轻UC的机制之一。     

逆灸“天枢”穴干预大鼠结肠组织基因表达谱的实验研究

目的:探讨逆灸"天枢"穴干预对健康大鼠结肠组织基因表达谱的影响,本文首次从转录组学的角度探讨逆灸的作用机制。方法:16只成年的雄性SD大鼠随机分成2组,正常组(NC)、正常+隔药灸组(NM),采用隔药灸天枢穴(双侧)7 d,在2%戊巴比妥钠麻醉下获取结肠组织。从大鼠的一般状况、体重、结肠组织病理学,观察隔药灸天枢穴对健康的正常大鼠的效应。每组各取3只提取总RNA,采用RNA-seq的高通量测序的方法检测结合生物信息学,分析结肠组织的mRNA表达谱。结果:与NC组比较,隔药灸不导致的健康大鼠体重降低,不影响结肠组织病理学形态观察。与NC组比较,NM组的结肠组织差异表达基因有866个,其中上调604个,下调262个。差异表达基因涉及的基因本体(GO)主要与细胞周期、免疫分子和蛋白质生物过程相关,基因通路(Pathway)主要与机体免疫和蛋白质代谢相关。结论:艾灸"天枢"穴不损伤健康成年大鼠的结肠组织的形态,或能通过影响结肠组织的差异表达基因的生物学过程及通路,调节机体免疫功能而发挥艾灸保健与养生的作用。     

基于代谢组学探讨艾灸关元穴对老年大鼠肾能量代谢的影响＊

目的 通过UHPLC-Q-TOF-MS代谢组学探讨艾灸关元穴对老年大鼠肾代谢物的影响，进而为艾灸关元穴的作用机制提供参考。方法 将8月龄SD雄性大鼠设为成年对照组（8只），21月龄SD雄性大鼠随机分为老年对照组（8只）、老年金匮肾气丸组（7只）、老年艾灸组（8只）。老年金匮肾气丸组每日按体重给药，老年艾灸组每日艾灸关元穴15 min，均每周5天。实验持续13周后检测大鼠肾组织线粒体呼吸耗氧速率、琥珀酸脱氢酶（SDH）活性以及血清肾功能指标，观察肾脏病理变化，结合UHPLC-Q-TOF-MS技术对大鼠的肾组织进行代谢轮廓分析，筛选代谢差异物并进行鉴定。结果 与老年对照组比较，老年艾灸组大鼠肾线粒体的呼吸耗氧速率和SDH酶的活力显著提高（P<0.01）。代谢组学结果显示，肾组织中筛选出13个共同差异化合物，分别是丁酸十二烷基酯、亚油酰胺、5-甲基四氢叶酸、PC（16∶0/22∶5（7Z，10Z，13Z，16Z，19Z））、6，8-二羟基嘌呤、1，2，3-丙烷三羧酸、3-（4-甲氧基苯基）-2-氧代丙酸、吲哚-3-乙酰甘氨酸、亚麻油酸、9，10-环氧十八烷酸、二十二碳五烯酸（22n-6）、牛磺胆酸、LysoPS （18∶0/0∶0）。结论 艾灸关元穴可通过调控老年大鼠的牛磺酸和亚牛磺酸代谢、α-亚麻酸代谢、亚油酸代谢、甘油磷脂代谢来调节肾的能量代谢。     

逆灸对不同运动强度小鼠心肌细胞的保护作用

目的:探讨逆灸对不同运动强度小鼠心肌细胞凋亡损伤的影响。方法:将60只昆明小鼠随机分为空白对照组、空白逆灸组、中等运动对照组、中等运动逆灸组、力竭运动对照组、力竭运动逆灸组,每组10只。采用不同运动强度对小鼠进行训练。各逆灸组取"足三里""关元"穴进行艾灸治疗,每穴每日灸5壮,每日1次,每周休息1d,共治疗3周。采用TUNEL法检测各组心肌细胞凋亡率,电镜观察各组心肌亚细胞结构破坏程度。结果:中等运动对照组与空白对照组相比,心肌细胞凋亡率升高(P0.05);中等运动逆灸组与中等运动对照组相比心肌细胞凋亡率下降(P0.05);力竭运动对照组与中等运动对照组相比,心肌细胞凋亡率升高(P0.05);力竭运动逆灸组与力竭运动对照组相比,心肌细胞凋亡率明显下降(P0.05)。电镜观察显示,中等运动逆灸组比中等运动对照组心肌细胞亚细胞结构破坏程度轻,力竭运动逆灸组比力竭运动对照组心肌细胞亚细胞结构破坏程度轻。结论:不同运动强度的运动训练均可引起心肌细胞发生凋亡损伤,且伴有心肌组织损伤,随着运动强度加大,心肌细胞发生凋亡更加明显;艾灸可减轻高强度运动对小鼠心肌细胞造成的损伤,减少细胞的凋亡。     

电针"关元"与"三阴交"对围绝经期模型大鼠性激素及下丘脑βEP调整作用的比较

目的:探讨电针"关元""三阴交"对围绝经期模型大鼠神经内分泌的调整作用及二穴间相互影响.方法:复制大鼠去卵巢模型,测定电针各单穴及配伍后对模型大鼠血清雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、下丘脑β-EP、子宫脏器指数、子宫内膜厚度的影响.结果:电针能降低围绝经期模型大鼠血清LH、FSH含量,升高血清E2和下丘脑β-EP的含量,增加子宫脏器指数和子宫内膜厚度.在对下丘脑β-EP的影响上,二穴配伍作用强于任一单穴.结论:在对下丘脑β-EP的影响方面,"关元"与"三阴交"存在协同作用.     

逆针灸对去卵巢大鼠子宫保护效应的观察

目的:探讨逆针灸"关元"穴对随后去卵巢更年期模型大鼠子宫保护效应的部分机制。方法:将3.5月龄SD雌性大鼠80只随机分为5组:正常组、假手术组、去卵模型组、逆针组和逆灸组,每组16只。逆针组、逆灸组于大鼠去卵巢之前分别针刺和艾灸"关元"穴,每周2次,共4周,其余3组与逆针、逆灸组同步以手抓放大鼠。至大鼠4.5月龄开始造模,去卵模型组、逆针组、逆灸组行卵巢切除术,假手术组仅切除卵巢周围少量脂肪,正常组不造模。大鼠于造模1个月后(即5.5月龄)取材,采用HE染色、免疫比浊、放射免疫、免疫组化、原位杂交等方法,观察逆针灸对随后去卵巢大鼠子宫组织形态、激素水平、雌激素受体与其基因表达及抗氧化相关指标的影响。结果:大鼠去卵巢后子宫组织形态有明显的衰退表现,子宫内雌二醇(E2)、孕酮(P)含量,雌激素受体(ER)-α及其基因表达,超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活性均明显降低,丙二醛(MDA)显著升高(均P<0.01)。与去卵模型组相比,逆灸、逆针组子宫结构的整体情况明显改善,且子宫内P含量、ER-α及基因表达明显升高,MDA显著下降(P<0.05,0.01);同时子宫E2含量,SOD、NOS活性亦有升高趋势,但无统计学意义(P>0.05)。结论:逆针灸"关元"穴对随后去卵巢更年期大鼠子宫退行性变有延缓作用,其保护效应可能与调节子宫局部E2、P含量,ER-α及其基因表达,提高机体抗氧化能力有关。     

大黄水提物对成年大鼠子宫及卵巢的影响

目的: 观察长期灌胃大黄对雌性大鼠子宫及卵巢的影响。 方法: 8周龄180~220 g 雌性Wistar大鼠90只,随机分为正常对照组、大黄水提取物1.0,2.0 g·kg^-1组、各剂量组再分为灌胃30,40,50,60 d组,每组10只,计算大鼠子宫、卵巢指数,观察子宫和卵巢的组织形态学变化。 结果: 大黄水提取物1.0 g·kg^-1给药60 d组子宫和卵巢指数分别为(0.21±0.058),(0.07±0.001),均显著低于正常对照组(0.26±0.038),(0.07±0.007)(P<0.05);大黄水提物2.0 g·kg^-1给药40,50,60 d组子宫指数分别为(0.20±0.045),(0.19±0.054),(0.19±0.041),显著低于正常对照组(0.26±0.038)(P<0.05或P<0.01),大黄水提物2.0 g·kg^-1给药30,40,50,60 d组卵巢指数分别为(0.068±0.008),(0.065±0.007),(0.065±0.005),(0.061±0.006),均显著低于正常对照组(0.07±0.007)(P<0.05或P<0.01);组织形态学显示,2.0 g·kg^-150,60 d组大鼠子宫内膜水肿,腺体减少;卵巢萎缩,卵泡数减少,卵泡内细胞排列不规则。 结论: 长期应用大黄可影响成年雌性大鼠的生殖功能,并有明显的剂量/时间依赖关系。     

脾气虚对雄性大鼠阴茎组织NOS活性影响的实验研究

目的:观察脾气虚对雄性大鼠阴茎组织NOS活性的影响,为临床男性性功能障碍从脾论治提供实验依据。方法:选择健康Wistar雄性大鼠40只,按随机数字表法随机分为4组,正常组、模型组、男宝组、四君子汤组。正常对照组不给予任何刺激,其余各组采用苦寒泻下加劳倦过度法(大黄灌胃加游泳法)复制大鼠脾气虚模型。检测各组大鼠血清胃泌素、D-木糖醇含量及阴茎组织一氧化氮合酶(NOS)活性等指标的变化。结果:与正常组比较,模型组、男宝组大鼠血清胃泌素、D-木糖醇水平明显降低,四君子汤组大鼠血清胃泌素、D-木糖醇水平较模型组及男宝组明显升高,与正常组无明显差异。模型组与男宝组大鼠阴茎组织NOS活性明显低于正常组,四君子汤组大鼠阴茎组织NOS活性明显高于模型组与男宝组,与正常组比较差异不明显。结论:脾气虚可降低大鼠阴茎组织的NOS活性,影响性功能,补益脾气可改善其NOS水平。     

艾灸关元、足三里穴对戊四氮致痫大鼠血清中IL-6的影响

目的:通过研究艾灸关元、足三里穴对戊四氮致痫大鼠血清中IL-6含量的影响,探讨其抗癫痫的可能机制.方法:取27只雌性Wistar大鼠,体重(200±15)g,分为4组:空白组(3只)、模型组(8只)、药物组(8只)和艾灸组(8只).腹腔注射戊四氮35.0 mg/kg诱发大鼠点燃致痫模型,艾灸组大鼠艾灸关元、足三里穴进行治疗,每天1次,每次15 min.药物组给予丙戊酸钠15.75 mg/100 g灌胃,每日1次.模型组、空白组不给予任何治疗.治疗20天后利用酶联免疫法测大鼠血清中IL-6的含量.结果:空白组和模型组、模型组和艾灸组相比有明显差异(P＜0.01),艾灸组和空白组、药物组和空白组比较无统计学意义(P＞0.05).结论:艾灸关元和足三里穴治疗癫痫大鼠有效,其机制可能与降低血清中IL-6相关.