体内和体外条件下Nogo-A在大鼠小脑颗粒神经元上表达差异的研究

Nogo-A是网膜家族蛋白的成员之一,在抑制成年哺乳动物中枢神经系统损伤后轴突再生的过程中发挥着重要作用。Nogo-A表达于寡突胶质细胞和多种神经元,但在成年动物的小脑颗粒神经元中却未检测到。为探讨Nogo-A在小脑颗粒神经元上的表达情况及其影响因素,本实验应用免疫荧光组织化学染色法研究了Nogo-A蛋白在新生大鼠脑切片上和不同体外培养条件下小脑颗粒神经元中的表达。结果显示:在体条件下Nogo-A蛋白在新生大鼠的小脑颗粒神经元上的表达逐渐减少,至新生14d时检测不到;而在体外培养的来源于新生7d大鼠的小脑颗粒神经元中Nogo-A蛋白持续表达,可维持到14d;与胶质细胞共培养,或加入胶质细胞培养上清的小脑颗粒神经元仍然表达Nogo-A蛋白。本研究结果表明,体内和体外两种条件下Nogo-A蛋白在小脑颗粒神经元上的表达存在差异,新生期Nogo-A在小脑颗粒神经元上的表达下调可能与Purkinje细胞有关,提示Nogo-A在生后发育过程中可能与神经元的迁移或突触的形成密切相关。     

SOCS3与中枢神经再生的研究进展

细胞因子信号转导抑制因子（suppressors of cytokine signaling,SOCS）家族是一类对细胞因子信号通路具有负反馈调节作用的蛋白分子,参与多种细胞因子、生长因子和激素的信号调节。细胞因子对中枢神经系统中的各种生物效应具有广泛多样的调节作用,SOCS家族的许多成员（比如SOCS1,SOCS2和SOCS3等）在发育时期和成年脑内均有表达。近来发现,SOCS3在中枢神经再生中有重要作用。     

一氧化氮和白介素对钙黏附蛋白在人子宫内膜的影响

钙黏附蛋白（eadherin）是钙依赖的粘附分子家族,其成员在人体组织分布广泛,越来越多的研究发现其在生理、病理过程中起着不可忽视的作用,其在子宫内膜的表达与胚胎着床有密切关系。为探讨一氧化氮（NO）及炎性细胞因子白细胞介素-1（IL-1）是否参与了E-cadherin在人子宫内膜表达的调节,本研究采用原代培养人分泌中期子宫内膜腺上皮细胞,探讨NO及IL-1对E-cadherin表达的调节作用。     

FHL1的结构和功能及其与疾病的关系

FHL(four and a half LIM domain)家族是含有4 个半LIM结构域的蛋白家族,现发现该家族由5 个成员,即FHL1、FHL2、FHL3、FHL4、FHL5 /ACT 组成,其表达具有组织特异性.它们通过LIM结构域与某些结构蛋白、激酶、转录调控因子等多种蛋白质相互作用,对某些基因的表达、细胞分化与发育、细胞骨架形成等发挥重要调控作用.FHL1(four and a half LIM domain 1)是FHL家族中表达最广泛的成员,尤其在骨骼肌和心肌中高表达.近年研究表明其参与某些病理过程,与心血管疾病、肌肉疾病、肿瘤疾病等相关.     

中枢神经系统腺苷受体

腺苷受体 (ARs)是G蛋白偶联受体家族成员 ,至今已克隆出A1 ,A2A,A2B ,A3四种腺苷受体亚型。腺苷受体在中枢神经系统中分布广泛 ,与神经元兴奋、运动能力调节、脑缺血、帕金森症、精神分裂症、癫痫、脑内奖赏效应、睡眠调节等生理效应有密切关系。腺苷受体有可能成为神经退行性疾病和精神性疾病药物作用的新靶点     

Rab家族及其在囊泡运输中的作用

Rab蛋白家族是Ras超家族中最大的亚家族，为小GTP结合蛋白。目前发现的Rab家族成员已达60多种，各成员之间有相似的结构。除少数特异表达于某一细胞或组织，大多数Rab蛋白广泛存在于组织细胞中，Rab蛋白是囊泡运输重要的调节因子。Rab突变或表达异常引起囊泡运输异常，从而导致一些疾病产生。     

牛磺酸对弥漫性脑创伤大鼠脑葡萄糖转运体表达的影响

目的: 检测弥漫性脑创伤(DBI)大鼠脑内葡萄糖转运体1(GLUT1)和葡萄糖转运体3(GLUT3)的表达以及牛磺酸对其的影响。方法: SD雄性大鼠随机分为假手术组、脑创伤组、低剂量牛磺酸组(200 mg/kg)和高剂量牛磺酸组(300 mg/kg),连续灌胃给药7 d。建立大鼠DBI模型,脑创伤后24 h,免疫组化和Western blotting检测脑组织中GLUT1和GIUT3蛋白的表达;透射电镜观察大脑皮层神经元超微结构的变化。结果: 各组脑组织中均可见有GLUT1表达的阳性细胞,其表现为在微血管内皮细胞胞浆或胞膜呈棕黄色。与假手术组相比,脑创伤组大鼠脑GLUT1蛋白表达无显著差异;与脑创伤组相比,低、高剂量牛磺酸组脑GLUT1蛋白表达显著增多(P<0.01);且低剂量牛磺酸组脑GLUT1蛋白表达显著高于高剂量牛磺酸组(P<0.05)。各组仅在第三脑室周围可见GLUT3表达的阳性神经元,阳性细胞胞浆或胞膜呈棕黄色。与假手术组相比,脑创伤组大鼠脑GLUT3蛋白表达显著增多(P<0.01);与脑创伤组相比,低、高剂量牛磺酸组脑GLUT3蛋白表达显著增多(P<0.01);且高剂量牛磺酸组脑GLUT3蛋白表达显著高于低剂量牛磺酸组(P<0.01)。低剂量牛磺酸组大脑皮层神经元病理改变明显减轻。结论: 牛磺酸可对DBI大鼠发挥脑保护作用,其机制可能是上调GLUT1和GLUT3蛋白表达,维持脑组织的能量供给。     

膜铁转运蛋白1与脑铁代谢研究进展

<正>铁作为人体重要的微量元素,广泛分布于脑组织,并有重要的生理作用。研究显示脑铁代谢的区域性失衡与许多中枢神经系统退行性疾病有关,而脑铁代谢紊乱与脑铁转运的改变有关。铁跨血脑屏障进入脑内及神经细胞均依赖于一系列铁代谢相关蛋白的介导,脑内铁代谢相关蛋白的协调表达对脑铁稳态的维持具有重要作用。膜铁转运蛋白1(fer-roportin 1,FP1)是迄今发现唯一的在细胞铁释放中发挥重要作用的蛋白。FP1广泛分布于脑组织,参与血脑屏障铁转运     

水通道蛋白1在哺乳动物体内的分布及功能

水通道蛋白1(aquaporins1,AQP1)是参与水分子跨膜转运的重要膜通道蛋白家族成员之一,广泛分布于各组织中,在机体物质代谢和水平衡中起着重要的作用。本文就AQP1在哺乳动物各组织中的表达和分布及其参与脑脊液的产生、细胞生物学特性的调节和感觉传导等方面相关功能的研究现况和进展作一综述。     

DcR3在结肠癌患者外周血及癌组织中表达水平的检测

诱骗受体3(decoy receptor 3, DcR3)是新近发现的一种可溶性的肿瘤坏死因子受体(tumour necrosis factor receptor, TNFR)家族成员[1].研究表明它在某些肿瘤、自身免疫病等疾病中高度表达, 其蛋白的表达和基因的扩增与人类多种恶性肿瘤的发生、发展以及肿瘤的免疫逃逸密切相关[2].故我们研究DcR3在结肠癌患者外周血及癌组织中的表达, 阐明其与结肠癌的相关性.     

019 神经元Slit蛋白抑制趋化因子诱导的白细胞趋化

白细胞趋化是成年哺乳动物最典型的细胞游走模式之一 ,神经元移行也是神经发育过程中的重要步骤。Ｓｌｉｔ蛋白家族的基因分为Ｓｌｉｔ1、Ｓｌｉｔ2和Ｓｌｉｔ3,Ｓｌｉｔ1仅在脑中表达 ,Ｓｌｉｔ2和Ｓｌｉｔ3则表达于各组织中 ,如脑、肺、肾、心脏、脾脏、淋巴结等。已有研究表明 ,分泌的Ｓｌｉｔ蛋白能控制轴突传递信息与神经元移行 ,但目前尚不清楚其在造血或免疫系统中的作用。文章作者首先用标准的趋化活性测定观察了Ｓｌｉｔ蛋白是否影响白细胞趋化。以滤过板将容器分为两层 ,趋化因子 (ＳＤＦ 1)置于下层 ,白细胞 (大鼠淋巴细胞 )在上…     

NET-1蛋白表达与肝癌临床病理因素相关性探讨

NET-1属于四次跨膜蛋白（TM4S）家族成员,其有显著上调癌形成的作用。我们在研究人体组织中NET-1表达及分析肝与肝癌组织中NET-1表达差异的基础上,通过基因生物工程的方法制备NET-1多克隆抗体,用免疫组织化学方法检测肝癌中NET-1蛋白表达,探讨其临床病理因素的关系。     

e6-ap与蛋白降解

e6-ap基因是HECT E3蛋白家族成员,根据N端的不同分为3个转录本,编码的3种蛋白均具有降解蛋白的功能. E6-AP的功能复杂,主要包括:①降解抑癌基因如p53、pml、tsc2、pdz家族基因的功能;②诱导htert基因启动子激活、提高端粒酶活性的功能;③与C型肝炎病毒的核心蛋白结合,参与rb基因的降解;④双向调节固醇类激素受体的表达;⑤调节ANNEXIN A1蛋白的表达、促进其降解. E6-AP的蛋白表达受泛素及E6的调控,在肿瘤发病机制中起着重要作用.     

具有天然N端的小鼠高活性IL-18的高效表达与纯化

IL-18是IL-1家族成员,与IL-1β相似,IL-18也是以前体形式合成,其成熟和分泌需要Caspase-1的作用。我们正确克隆了小鼠IL-18全长cDNA,并成功构建了真核表达载体pcDNA3-proIL-18,能在真核细胞COS7中得到正确表达;为了得到具有天然N端的成熟IL-18(mIL-18),IL-18cDNA上Caspase-1的识别位点被转换成FactorXa的作用位点,并克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,IPTG能大量诱导GST-IL-18融合蛋白的可溶性表达,经一步亲和纯化后,能得到30～50mg融合蛋白/升菌;经过FactorXa作用融合蛋白,能得到大量(5～8mg/升菌)、高纯度(>95%)的mIL-18。与商品化的IL-18相比,所得mIL-18能诱导小鼠脾细胞表达更高水平的IFN-γ,表现出更强的生物学活性,这为进一步在小鼠系统中研究IL-18的功能、人成熟IL-18蛋白的高效表达、纯化以及其后可能的临床应用奠定了基础。     

Olig家族在中枢神经发育和损伤中的作用

<正>Olig家族广泛表达于各种生物的中枢神经系统(centralnervous system,CNS)中,在决定神经干细胞(neural stemcells,NSCs)分化成熟过程中起了关键性作用,精确调控着神经元和胶质细胞的分化亚型。近年发现它还广泛参与了CNS损伤的修复过程。本文试从Olig家族概述,Olig家族与CNS发育的关系以及Olig家族参与CNS损伤修复的情况进行综述。     

Copines蛋白家族的研究进展

Copines蛋白家族是新近发现的一类分布广泛、进化保守的Ca2 依赖性磷脂结合蛋白,它们的结构特征为:N端有2个C2结构域,与突触结合蛋白(synaptotagmin)和蛋白激酶C的C2结构域不但高度同源,而且同样具有Ca2 依赖性的磷脂结合功能;C端有1个A结构域,与整合蛋白A结构域部分同源,是蛋白与蛋白相互作用的结构域。近年来研究表明,Copines家族成员与细胞的膜转运、胞内信号转导、肿瘤发生等重大生物过程都密切相关。     

SNCG真核表达载体构建及其在胶质瘤细胞中的稳定表达和影响

目的:利用神经突触核蛋白-γ(SNCG)真核表达载体,构建人胶质瘤细胞株U373稳定过表达SNCG模型,初步探讨过表达SNCG对U373细胞的影响。方法:应用RT-PCR法扩增SNCG基因,将PCR产物插入至真核表达载体pIRES2-EGFP中。通过EcoR I、BamH I双酶切及测序鉴定后转染至人神经胶质瘤细胞U373,G418筛选建立SNCG稳定转染的U373细胞系。运用实时定量PCR(real-time RT-PCR)检测转染后SNCG表达,流式细胞术(FCM)检测SNCG对细胞周期的影响。结果:构建pIRES2-EGFP-SNCG真核表达载体,建立稳定转染SNCG的U373细胞系。与U373/neo细胞相比,U373/SNCG细胞SNCG mRNA表达上调17倍;经紫杉醇(PTX)处理后,U373/SNCG细胞G2/M比例(49±3.6)%较U373/neo细胞(66±1.7)%下降17%(P<0.05)。结论:成功构建人SNCG真核表达载体,并在U373细胞中稳定表达,初步证实过表达SNCG可降低抗微管药物诱导的U373细胞有丝分裂期阻滞,为进一步体外研究SNCG在神经胶质瘤中的功能奠定了基础。     

解偶联蛋白在脑缺血缺氧性损伤中的作用

线粒体解偶联蛋白(uncoupling proteins,UCPs)是线粒体载体蛋白家族的一个亚族,位于线粒体内膜,可以将线粒体内膜外的质子转运回基质,降低线粒体的跨膜质子电动势,形成质子漏,使氧化磷酸化解偶联,ATP生成减少.目前共发现有5个成员,UCP1仅存在于棕色脂肪组织,主要参与机体非震颤产热;UCP2,UCP4和UCP5(又名脑线粒体膜载体蛋白1)在脑组织中表达较多.近年来UCPs在脑缺血缺氧性损伤中的病理生理作用研究较多,但也颇多争议.有人认为UCPs通过解偶联作用加重能量衰竭,进一步促进脑缺血缺氧损伤;也有人认为UCPs通过调节线粒体膜电位,抑制活性氧簇生成,维持线粒体内钙稳态,从而起到对神经系统的保护作用.     

脑水通道蛋白的分布、功能及调控机制

背景：在哺乳动物脑中主要表达的水通道蛋白是水通道蛋白1、水通道蛋白4和水通道蛋白9,其他的仅为零星表达。目前国内外尚未见到系统分析维持脑正常生理功能的水通道蛋白分布、功能及其调节机制的综述报道。 目的：综述近年国内外维持脑正常生理功能的水通道蛋白分布、功能及其调节机制的研究进展。 方法：应用计算机检索1980年1月至2013年7月PubMed数据库、中国期刊全文数据库有关脑正常生理功能维持中水通道蛋白分布、功能及其调节机制的文章,英文检索词“AQP1, AQP4,AQP9, function, brain, adjusting mechanism”;中文检索词“水通道蛋白,功能,脑,调节机制”。共检索到163篇相关文献,85篇文献符合纳入标准。 结果与结论：近年来,有大量学者对脑水通道蛋白的表达、功能及其调节机制进行了较深层次的研究,具体归纳为如下3个方面：①水通道蛋白1主要表达于脑室脉络丛参与脑脊液的形成;在其他类型的细胞中,气体小分子CO2,NO,NH3 及O2也可通过水通道蛋白1。②水通道蛋白4主要表达在胶质细胞足突、胶质界膜以及室管膜中,帮助水进出脑组织,并加速胶质细胞迁移及改变神经活动。③水通道蛋白9主要分布于星形胶质细胞及儿茶酚胺等神经元中,主要功能是参与脑内能量代谢。水通道蛋白被认为是对脑中水运输提供关键路径的主要水通道,有关水通道蛋白分布、功能及调控机制的研究对于攻克脑相关疾病起重要作用。水通道蛋白在维持脑正常生理及相关疾病中表达的调节机制尚未明晰,相关分子信号通路尚待更加深入、系统地研究。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：