特异性神经元抗-Hu抗体在小细胞肺癌患者血清中的检测及意义

目的 探讨特异性神经元抗-Hu抗体对小细胞肺癌(SCLC)早期诊断的价值。方法 采用亲舍免疫细胞组织化学ABC法、蛋白免疫印迹法(Western blot)对68例SCLC患的血清进行检测,分析其临床意义。结果 (1)亲合免疫细胞组织化学ABC法在约40％不伴神经系统副肿瘤综合征(PNSNS)的SCLC患血清中检测出特异性神经元抗体,滴度为1：1000至1：6000;在约83％伴PNSNS的SCLC患血清中检测出特异性神经元抗体,滴度为1：1000至1：64000;(2)Western blot在不伴PNSNS的SCLC患血清中检测出1例可识别正常人大脑神经元细胞核提取物中分子量为35～40KD蛋白和40KD的HuD克隆纯化蛋白抗原;在伴PNSNS的SCLC患血清中检测出5例可识别上述蛋白抗原;(3)正常人血清中未检测出特异性神经元抗体。结论 特异性神经元抗-Hu抗体对小细胞肺癌的早期诊断具有重要意义。可以作为早期筛选小细胞肺癌的一项指标。     

血清肺炎支原体抗体效价测定的临床应用

目的采用SERODIA—MYCOII肺炎支原体诊断试剂盒检测患者血清中肺炎支原体（Mp）抗体效价,探讨其在临床上的应用价值。方法采集患者静脉血,血清作倍比稀释,用日本富士肺炎支原体诊断试剂盒SERODIA—MYCOII作颗粒凝集试验,并对测定结果进行分析。结果1164例被检血清中,血清抗体阳性者505例（效价〉1：40）,阳性率为43．27％。〈5岁组阳性率为23．85％,且抗体效价较低,以1：40和1：80多见;5—14岁阳性率为60．57％;〉14岁阳性率为35．74％,且抗体效价较高,多在1：160以上。结论SERODIA—MYCOII检测血清中Mp抗体效价具有敏感性高、特异性强、重复性好等特点,值得临床推广作为实验室筛查Mp感染的常规方法。     

结核抗体检测试剂盒用血清标准品的制备及应用

目的 结核抗体检测试剂盒质量控制用血清标准品的制备及应用。方法 采集结核病患者和健康人血清，用ELISA法进行检测，制备血清标准品：包括10份检测结果为阳性的结核病患者血清、10份检测结果为阴性的健康人血清、1份检测结果为强阳性的结核病患者血清用健康人血清进行倍比稀释而成的5个稀释浓度；并对血清标准品进行稳定性试验；同时用本套血清标准品对不同厂家生产的结核抗体检测试剂盒以及同一厂家生产的不同批号的结核抗体检测试剂盒进行测定。结果 本血清标准品具有良好的稳定性;不同厂家生产的结核抗体检测试剂盒质量不均一，同一厂家生产的试剂盒质量也不均一。结论 本血清标准品可以用于结核抗体检测试剂盒的质量控制；各生产厂家要严格按照生产工艺的SOP进行生产，把好质量关。     

社区获得性呼吸道感染患者肺炎支原体IgM抗体检测结果分析

目的：探讨肺炎支原体（Mp）感染与患者性别、年龄及季节的关系。方法：对本院1335例社区获得性呼吸道感染患者血清标本,应用Serodia-MycoⅡ试剂盒检测Mp-IgM抗体,分析其与患者性别、年龄及季节的关系。结果：1335例患者中Mp-IgM抗体检出阳性者36例,阳性率为2.70%。其中0～20岁组发病率最高,不同性别和各季节阳性率差异无统计学意义。结论：肺炎支原体是青少年社区获得性呼吸道感染的常见病原体,应用Serodia-MycoⅡ试剂盒检测Mp-IgM抗体具有操作简便、敏感度高等优点,有重要的临床应用价值。     

人囊虫病快速ELLISA试剂盒的研制和应用

通过用纯化的猪囊虫的囊液抗原包被聚苯乙烯条板和TMβ显色系统研制的试剂盒,在37℃孵育的条件下,适当稀释血清(1:50),经15分钟,抗原和抗体即可充分结合,通过对临床796例多囊虫病人和200例正常人血清抗体的检测,临床符合率为92.8％,囊虫病人血清抗体滴度在1:50～1:8000,光吸收值范围在0.007～0.05。这表明,在检测囊虫病人血清抗体时,该试剂盒有着简便,快速,敏感性高等优点。     

浅谈体外诊断类生物制品质量标准的规范化

体外诊断类生物制品是指采用免疫学、微生物学、分子生物学等原理或方法制备的检测试剂或试剂盒，主要用于实验室对各种疾病的诊断、检测、流行病学调查，以及生物制品质量标准及药品的临床疗效的判定等。近年来随着相关检测技术的发展，体外诊断类制品在病原的鉴定和监测、临床诊断及对疾病预防和治疗方面的作用显得越来越重要。常见体外诊断类生物制品包括微生物抗原、抗体及核酸、血型、细胞组织配型、人类基因检测、肿瘤标记物、免疫组化与人类组织细胞类、变态反应原类及生物芯片等。     

SARS抗体酶联诊断试剂盒比较

目的：对国内SARS抗体（IgG和／或总抗体）检测试剂盒的质量进行比较和评价。方法：本文选用4种国内SARS抗体ELISA检测试剂盒分别检测已知同样样品，并对结果进行比较。结果：4种试剂盒的阳性参考品符合率均为100％（18／18），阴性参考品符合率均为100％（20／20）；3批D试剂盒的精密性（10／10）试验的CV值均在3％以下，A试剂盒及3批B试剂盒的的CV值均在5％-10％之间，3批C试剂盒的CV值均在10％-15％之间；B、C、D3种试剂盒的灵敏度均达到5／7或以上，其中第1批C试剂盒及前2批D试剂盒灵敏度较高，均达到了7／7。结论：4种试剂盒均有较好的灵敏度、特异性及检出率。     

HSV-1载体在小鼠及猴体内抗体检测方法的建立

目的为了对以HSV-1为载体的基因工程产品在动物体内药物安全评价检测抗体的需要建立一套ELISA检测方法。方法将重组HSV-1抗原作为包被抗原,对HSV-1抗原的最佳包被稀释度、包被效率、阴性和阳性血清标本的最佳稀释度进行了考察。并根据建立的检测方法,对2种动物(Balb/c小鼠和恒河猴)在给予HSV-1载体后得到的阴性血清(小鼠:30份;恒河猴:24份)和阳性血清(小鼠:120份;恒河猴:96份)进行了血清抗HSV-1抗体检测。结果(1)HSV-1抗原的最佳包被稀释度为1∶800(4.5μg),包被效率为82%;(2)阴性和阳性血清标本的最佳稀释度均为1∶100;(3)用所建立的检测方法,能够较好的在小鼠和恒河猴的阳性血清中检测出抗HSV-1的抗体。结论该方法能全面满足以HSV-1为载体的基因工程产品在药物安全评价中抗体的检测需要,该检测方法的建立能够为该类产品或相关基因工程产品的药物安全评价研究中抗体的检测分析提供一定的参考依据。     

小鼠血清乙型肝炎病毒前S1抗体间接ELISA检测方法的建立和验证

目的  建立小鼠血清乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）前S1抗体的间接ELISA检测方法。方法  以合成的HBV前S1（21-47位氨基酸）多肽包被酶标板,利用方阵滴定法确定间接ELISA方法的最适工作条件,对该法的精密度、特异性和灵敏度进行验证,并与商品化试剂盒进行比较。结果  确定最佳抗原包被浓度为1.0 mg/L,血清稀释度为1︰10。该方法的特异性、灵敏度和精密度均符合检测要求。本法与商品化前S1抗体检测试剂盒测定结果的符合率为98.0%。结论  成功建立了HBV前S1抗体间接ELISA方法,可用于小鼠血清中前S1抗体的检测。     

两种双抗原夹心法检测抗人类免疫缺陷病毒抗体的方法比较

目的 探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)与胶体金法检测抗人类免疫缺陷病毒抗体(抗HIV抗体)的灵敏度及特异度.方法(1)灵敏度试验:将15份经免疫印迹法确诊为获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者的血清进行倍比稀释,应用ELISA法和胶体金法检测所有患者血清原液、稀释血清的抗HIV抗体,记录两种方法抗HIV抗体检测结果为阳性的最大稀释倍数.(2)特异度试验:应用上述两种方法同时检测200份非AIDS患者的血清,记录两种方法的阴性率.结果(1)灵敏度试验:ELISA法的最大稀释倍数显著高于胶体金法(P＜0.05).(2)特异度试验:两种方法的阴性率均为100％,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 ELISA法抗HIV抗体的灵敏度优于胶体金法,但是两种方法检测血清原液的灵敏度、特异度结果均一致,因此胶体金法可以代替ELISA法用于AIDS的初筛试验.     

抗C1q抗体在狼疮肾炎血清中的表达及其临床意义

目的:探讨抗C1q抗体在狼疮肾炎(LN)患者血清中的表达及其临床意义。方法:使用ELISA法对46例LN患者血清进行检测,并与31例无肾炎临床表现的系统性红斑狼疮(SLE)患者作对照。结果:LN患者血清中抗C1q抗体浓度显著高于对照组(P<0.01)。LN患者中抗C1q抗体有较高的阳性率,与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:在LN患者中,存在着抗C1q抗体的高表达。抗C1q抗体在LN发病中起重要的作用,在LN诊断和判定其活动性方面有重要作用。     

自身抗体联合检测在原发性胆汁性肝硬化诊断中的意义

目的 探讨自身抗体联合检测在原发性胆汁性肝硬化(PBC)诊断中的意义.方法 选取本院2013年1月至2015年12月收治的291例肝病患者作为本组研究的研究样本,根据患者疾病类型将其分为PBC组(98例)、自身免疫性肝炎组(AIH组,91例)和其他肝病组(LDC组,102例).采用间接免疫荧光法(IIF)测定抗线粒体抗体M2亚型抗体(AMA-M2),采用ELISA法测定抗SP100以及抗-GP210抗体;结合PBC的诊断标准对自身抗体联合检测的临床诊断价值进行分析.结果 PBC组抗-Sp100以及抗-GP210的阳性率分别为28.57％(28/98)和43.87％(43/98),抗-GP210、抗-Sp100两者同时出现的阳性率为9.18％(9/98);AIH组与LDC组均末出现抗-Sp100阳性或抗-GP210阳性病例.PBC组的AMA-M2阳性率为96.94％(95/98),其中AMA-M2抗体滴度水平≥1∶800的患者39例(39.80％,39/98),AMA-M2抗体滴度水平在1∶25～1∶200的患者24例(24.49％,24/98),AMA-M2抗体滴度水平在1∶200～1∶800的患者32例(32.65％,32/98).AIH组的AMA-M2阳性率为5.49％(5/91),且所有阳性患者AMA-M2抗体滴度水平均在1∶25～1∶200内,明显低于PBC组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 AMA对PBC的诊断具有标志性意义,抗SP100对PBC的疾病进展具有提示作用,抗-GP210对阴性PBC患者具有诊断作用.     

两种肺炎衣原体抗体检测方法的比较及临床应用分析

目的比较两种常用肺炎衣原体血清学实验室诊断方法并分析其临床应用价值。方法对226例临床怀疑为肺炎衣原体感染的患者血清,分别进行间接免疫荧光法、酶联免疫吸附法检测肺炎衣原体IgM抗体,比较两种试验方法的临床应用价值。结果间接荧光法和间接ELISA法在检测CPIgM抗体中,阳性检出率无统计学意义(P>0.05)。在已确诊的70例CP感染患者中,轻度CP感染38例(54.3%),中度感染17例(24.3%),重度感染15例(21.4%);CP抗体滴度1∶10有24例(34.3%),滴度1∶32有15例(21.4%),滴度1∶100有3例(4.3%),滴度1∶320有9例(12.9%)。滴度1∶1000有19例(27.1%),应用spearman等级相关分析,血清CP抗体滴度高低与CP感染患者的病情分级呈正相关(r=0.894,P<0.05)。结论间接ELISA法与间接荧光免疫法检测血清肺炎衣原体抗体结果比较无显著差异,适合临床大批量筛查,以及流行病学调查。间接荧光法能准确测定患者血清抗体滴度,有助于指导临床医师判断患者的病情轻重,为临床确定有效的治疗方案提供科学依据。     

糖尿病自身抗体的检测及临床意义

目的探讨糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、胰岛细胞抗体(ICA)和胰岛素自身抗体(IAA)的变化及联合检测的临床意义。方法用免疫印迹技术检测67例1型糖尿病(T1DM)患者、133例2型糖尿病(T2DM)患者血清中的GADA、ICA、IAA阳性率,并进行对比分析。结果 T1DM组中GADA、ICA、IAA的阳性率分别为66%、40%、24%,至少一种抗体呈现阳性的比例为92%,T2DM组中3种抗体的阳性率分别为9%、16%、11%,至少一种抗体呈现阳性的比例为30%。T1DM患者的GADA、ICA、IAA阳性率明显高于T2DM患者(P<0.05),三种抗体联合检测优于单一抗体。结论血清GADA、ICA和IAA的联合检测对早期、准确诊断1型糖尿病,及时规范治疗、预测B细胞功能衰竭、预测疗效及在高危人群中筛查1型糖尿病有重要临床意义。     

An ELISA method for detection of human antibodies to an immunotoxin

INTRODUCTION: The use of biological molecules, such as immunotoxins, as pharmaceuticals is limited by the presence and development of human antibodies to these agents. This immune response can cause significant inflammatory-related toxicities and can interfere with the efficacy of the biological agent. Therefore, a clinically applicable method to detect these human antibodies is needed for screening patients prior to enrollment and for monitoring patients during treatment. The SS1(dsFv)-PE38 immunotoxin currently in clinical trials is a hybrid molecule targeted against mesothelin-expressing cancer cells via the Fv portion of a murine antibody linked to the Pseudomonas exotoxin (PE), which can inhibit protein synthesis leading to cell death. The objective of this study was to determine if an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)-based method could be used to detect human anti-SS1(dsFv)-PE38 antibodies in patient serum. METHODS: Human antibodies to the immunotoxin in serially diluted serum specimens were captured on immunotoxin-coated ELISA plates, and detected using a secondary goat antihuman antibody linked to biotin in combination with horseradish peroxidase linked to avidin D (HRP-Avidin). The color was developed with tetramethyl benzidine (TMB). Curves of optical density (OD(630)) versus dilution for 44 serum specimens were compared with positive and negative control serum specimens to classify the serum as positive or negative for anti-immunotoxin antibodies. RESULTS: Ten out of the 40 patients screened were positive for anti-immunotoxin antibodies. Repeated testing of seven samples produced the same results in two independent experiments. The first two patients treated with the immunotoxin developed anti-immunotoxin antibodies during treatment. The results were in perfect concordance with a tissue culture-based neutralization assay performed by an independent laboratory. DISCUSSION: An ELISA-based strategy using an immunotoxin to capture human anti-immunotoxin antibodies provides a consistently accurate technology for screening and monitoring patient serum specimens in clinical trials.     

患者术前乙肝、丙肝、艾滋及梅毒现患率分析

目的 探讨患者术前感染性指标的现患率.方法 采用酶联免疫试验(ELISA)法检测2893例术前患者的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg),丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、人类免疫缺陷病毒(1/2)型抗体(抗-HIV1/2)及梅毒螺旋体抗体(TPAb).所有检测项目均严格按照试剂盒操作说明书进行,同时进行质量控制.结果 2...     

尿脱落细胞CK20检测对膀胱癌诊断的意义

目的 研究膀胱癌患者尿脱落细胞中细胞角蛋白20（CK20）的表达探讨及其对膀胱癌的诊断意义.方法 利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测47例膀胱癌患者,19例非肿瘤患者及9例健康志愿者尿脱落细胞CK20 mRNA的表达情况.结果 47例膀胱癌患者中,尿脱落细胞CK20阳性表达41例,阳性率87.2%;对照组28例中,阳性表达2例,阳性率7.1%.RT-PCR方法检测膀胱癌尿脱落细胞中CK20敏感性为87.2%,特异性为92.9%.Pta～T1期及PT2～T4期膀胱癌,其阳性率分别为85.7%（18/21）和88.5%（23/26）,两者差异无统计学意义（P〉0.05）.在G1、G2及G3级膀胱癌,其阳性率分别为85.7%（12/14）、85.7%（18/21）及91.7%（11/12）,各级间差异无统计学意义（P〉0.05）.CK20的表达同膀胱癌的分期、分级无关.结论 CK20是一种较为理想的膀胱肿瘤标记物,利用RT-PCR检测尿脱落细胞中CK20可用于膀胱癌的诊断.     

鸡胚细胞疫苗制品宿主细胞蛋白残留量检测方法的建立

目的 建立鸡胚细胞疫苗制品中宿主细胞蛋白残留量的检测方法.方法 制备鸡胚细胞蛋白和抗鸡胚细胞蛋白抗体,摸索ELISA双抗体夹心法的试验条件,建立酶联免疫检测方法,并进行各项指标的验证.结果 纯化的鸡胚细胞蛋白抗体纯度达到90％以上,抗体效价可达1∶128.蛋白质印迹法分析显示,纯化抗体与鸡胚细胞蛋白呈现特异性结合.该方...