社区健康人生理性功能衰老和端粒长度分析

目的 探索社区健康人生理性功能衰老随年龄的变化趋势及其与人外周血白细胞端粒长度的关系,为科学评价衰老、延缓衰老提供依据或参考。方法 采取分层随机抽样方法对南昌市20岁以上的健康人进行问卷调查,通过实时荧光定量PCR技术对部分样本外周血细胞端粒长度进行测量。结果 现场实证研究共发放问卷1 000份,有效回收986份（98.60%）,男女比例为0.97：1,分布均匀（t=1.319, P=0.995）,年龄与衰老生理分值成高度正相关（r=0.892,P<0.001）。被测对象平均相对端粒长度为（1.057±0.031）,老、中、青三个年龄段差异具有统计学意义（F=586.930,P<0.001）,端粒长度与年龄（r=-0.814,P<0.001）,生理性衰老分值（r=-0.682,P<0.001）均呈负相关。结论 通过我国老年医学专家论证建立的生理性衰老指标体系,反映了生理衰老总分及方面得分随年龄增大而升高,并与端粒长度呈负相关的趋势。     

灭活乳双歧杆菌U9发酵乳对小鼠溃疡性结肠炎的预防作用

目的 探讨灭活乳双歧杆菌U9(灭活U9)发酵乳对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的预防作用.方法 将40只雄性小鼠随机分为对照、模型、DSS+U9L和DSS+U9H共4组,对照组灌胃生理盐水,模型组前7d灌胃生理盐水,后...     

适于德氏乳杆菌保加利亚亚种质粒抽提的混合培养基

目的探讨适合提取德氏乳杆菌保加利亚亚种质粒的细菌培养基。方法配制含不同比例MRS的营养肉汤混合培养基,进行德氏乳杆菌保加利亚亚种的培养,通过生长曲线测定、细菌形态观察,菌体内天然质粒抽提质量等来确定适于该菌质粒抽提的最佳混合培养基。结果单纯营养肉汤培养基不适合德氏乳杆菌保加利亚亚种的增殖,在含20%、40%、60%及80%MRS的营养肉汤混合培养基中该菌的生长曲线与在MRS中的基本一致,但细菌数略低;形态学检测表明含MRS的营养肉汤培养基培养对德氏乳杆菌保加利亚亚种的形态无影响,质粒抽提结果表明,本研究所配制的几种含不同比例MRS的营养肉汤混合培养基中,含20%MRS的营养肉汤混合培养基最适合该菌质粒的抽提,提取的质粒浓度高,质量好。结论本实验制备的混合培养基中,含20%MRS的营养肉汤混合培养基能保证德氏乳杆菌保加利亚亚种的正常增殖,而且可能由于产生较少的胞外多糖,使溶菌酶更易水解该菌细胞壁肽聚糖,最适于该菌质粒的抽提。     

短小双歧杆菌对小鼠细胞免疫功能的影响

观察热杀的短小双歧杆菌对小鼠单核巨噬细胞（ＭΦ）吞噬功能、自然杀伤细胞（ＮＫ）活性、淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）活性的影响。结果表明，短小双歧杆菌腹腔注射后，小鼠ＭΦ吞噬功能，ＮＫ细胞、ＬＡＫ细胞的细胞毒作用均显著增强，并可提高小鼠ＩＬ２的诱生活性。提示短小双歧杆菌可能通过其细菌细胞壁免疫活性成分而对小鼠细胞免疫功能发挥免疫调节作用     

乳双歧杆菌Bi-07的安全性和健康促进功能的研究现状

Bifidobacterium animalis subsp. lactis Bi-07（动物双歧杆菌乳亚种Bi-07,乳双歧杆菌Bi-07）,来源于人体并在乳中能良好生长,目前已被商业化销售和消费超过20年,在中国、美国、加拿大、澳新、法国、丹麦、日本、韩国等多个国家批准应用于食品及膳食补充剂,如乳制品、益生菌产品等。研究表明,乳双歧杆菌Bi-07具有调节肠道菌群,增强免疫功能等多项健康功能。本文通过对PubMed、ScienceDirect、CNKI、万方等国内外数据库进行检索,系统综述乳双歧杆菌Bi-07的安全性及其对肠道菌群、免疫功能、胃肠道功能等健康促进功能的研究现状。[营养学报,2023,45(2):133-138]     

乳双歧杆菌Bl-04的安全性及健康效应

益生菌具有抗炎、免疫调节、调节肠道菌群等健康益处,越来越受到人们的关注。但是益生菌的健康获益是菌株特异性的,阐明特异菌株的健康效应对进一步理解益生菌的益生特性以及健康功效声称具有重要意义。Bifidobacterium animalis subsp. lactis Bl-04（动物双歧杆菌乳亚种Bl-04,乳双歧杆菌Bl-04）可在人体肠道内存活,通常被认为是安全的,近年来广泛应用于乳制品和膳食补充剂。本文收集了相关的体外实验、动物实验和人群干预研究,综述了乳酸歧杆菌Bl-04的安全性、调节肠道菌群、维持呼吸道健康、保护胃肠道、抗炎和免疫调节的健康效应。[营养学报,2023,45(2):127-132]     

保加利亚乳杆菌胞外多糖对人癌细胞抑制作用的研究

乳酸菌胞外多糖（exopolysaccharides，EPS）是乳酸菌在生长代谢过程中分泌到细胞壁外的黏液或荚膜多糖。已有的一些报道表明：乳酸菌EPS通过抑制肿瘤、抗溃疡、免疫调节和降低胆固醇活性进而对人体健康产生促进作用。Oda等早在20世纪80年代就确定了由瑞士乳杆菌约古特亚种（Lb．helveticus ssp．jugurti）产生的EPS具有抑制肿瘤活性。为了明确抑制肿瘤作用机制，部分学研究了EPS或是产EPS菌体对免疫系统的影响，大部分研究均可证明乳酸菌EPS可以通过调节机体免疫力来达到抑制肿瘤的作用，但是，由于生物体内各系统相互作用的复杂性，活性多糖的体内抑制肿瘤机制也较复杂，无法说明它是否直接作用于肿瘤细胞，因此，我们采用体外试验的方法，研究保加利亚乳杆菌对人癌细胞的生长的抑制作用和凋亡作用。     

蒙脱石散与双歧杆菌乳杆菌三联活菌片治疗小儿腹泻的效果比较

目的:对蒙脱石散和双歧杆菌乳杆菌三联活菌片在小儿腹泻治疗中的应用价值分析.方法:在我院2015年6月-2017年6月实施治疗的小儿腹泻患儿中随机选取100例,随机分成两组,其中对照组实施蒙脱石散治疗,观察组实施单纯双歧杆菌乳杆菌三联活菌片治疗,对比两组患儿临床效果.结果:和对照组相比,观察组患儿的临床有效性明显偏高,差异对比显著P<0.05.结论:小儿腹泻治疗中,单纯双歧杆菌乳杆菌三联活菌片的临床效果显著优于蒙脱石散治疗效果,值得推广应用.     

保加利亚乳杆菌产β-半乳糖苷酶特性的研究

目的：研究保加利亚乳杆菌产β-半乳糖苷酶的特性，优化产酶条件。方法：以酸奶中分离的保加利亚乳杆菌wch9901和保加利亚乳杆菌标准菌株1．1480为研究对象，观察培养时间、培养基碳源、摇床转速、气体环境对细菌产酶的影响。结果：wch9901于37℃培养18h产酶达高峰，酶活性达0．246 NLU／ml，比酶活达3．465 NLU／g；1．1480于30℃培养36h产酶达高峰，酶活性达0．221 NLU／ml，比酶活达1．637 NLU／g。停止培养前1h加入2％乳糖利于wch9901产酶。两株保加利亚乳杆菌均于静止培养产酶较多。wch9901于厌氧环境培养产酶较多；1．1480于有氧环境培养产酶较多。结论：wch9901的最适产酶条件为37℃厌氧静止培养18h，培养基含乳糖；1．1480的最适产酶条件为30℃有氧静止培养36h。wch9901与1．1480相比具有产酶量多，产酶迅速的特点。     

赛莱西布对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡影响

目的探讨选择性环氧合酶-2（cox-2）抑制剂赛莱西布（celecoxib）对人肝癌细胞株HepG2细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法用不同浓度的赛来西布处理HepG2细胞，分别应用四甲基偶氮噻唑蓝试验、DNA梯度电泳法、放射免疫法检测赛亚西布对HepG2细胞增殖和凋亡及其COX-2活性的影响；应用免疫印迹法和比色法检测赛莱西布对HepG2细胞胱氨酸蛋白酶3（clasepase-3）蛋白质的表达及活性的影响。结果12．5，25，50μmol／L的赛莱西布作用于HepG2细胞后，HepG2细胞增殖受抑制，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；赛莱西布干预组HepG2细胞DNA明显降解，可见细胞凋亡特征性梯状DNA条带；干预组HepG2细胞caspase3蛋白表达及活性均明显升高。与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；赛莱西布明显抑制HepG2细胞cox-2活性。与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论赛莱西布可通过cox-2通路和easpase3通路抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡。     

甲醛对小鼠染色体端粒DNA相对长度的影响

目的 探讨甲醛对小鼠体细胞染色体端粒的损伤.方法 对昆明小鼠灌胃不同剂量的甲醛(10、20、40 mg/kg)连续7d,通过PCR方法检测小鼠血细胞、肝细胞、肾细胞染色体端粒DNA重复序列的相对长度(OD260).结果 与对照组比较,10、20和40 mg,/kg组小鼠的血细胞、肝细胞和肾细胞染色体端粒DNA重复序列缩短,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),且随着甲醛染毒剂量的升高呈缩短趋势.结论 甲醛暴露能破坏小鼠染色体端粒的稳定.     

外周血DNA 端粒长度在非小细胞肺癌患者中的表达

摘要:目的　检测非小细胞肺癌患者外周血DNA端粒长度并探讨其与临床病理因素的关系。方法　采用实时荧光定量PCR方法测定136例非小细胞肺癌组、140例肺良性疾病组及145例健康体检者（对照组）外周血DNA相对端粒长度。结果　肺癌患者外周血DNA端粒长度均短于对照组、肺良性疾病组,差异有统计学意义（P＜0.05）;肺癌患者外周血DNA端粒长度与肺癌的组织学类型及临床分期有关（P＜0.05）。结论　外周血DNA端粒长度变短可能是非小细胞肺癌发病的早期效应生物学标志。     

镉暴露对HepG2细胞NRF2信号通路影响

目的 探讨镉暴露对HepG2细胞转录因子NF-E2相关因子2（NRF2）信号通路的影响。方法 采用甲臢比色法测定CdCl₂（0、1、2.5、5、10、25、50、100、200 μmol/L）处理24 h后,HepG2细胞活力变化;应用蛋白免疫印迹法检测CdCl₂（1、2、5、10、20 μmol/L）处理细胞6 h后,NRF2蛋白水平;采用RT-qPCR方法检测10 μmol/L CdCl₂处理细胞2、4、6、12、24 h后,GCLC、GCLM、HO1 和 AKR1C1 mRNA水平变化,检测CdCl₂（1、2、5、10、20 μmol/L）处理细胞6 h后,GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 mRNA水平变化。结果 HepG2细胞活力随镉处理剂量升高而降低（P<0.05）;与对照组（0.60±0.01）比较, 1、2、5、10、20 μmol/L镉处理组HepG2细胞NRF2蛋白表达水平[分别为（0.65±0.01）、（1.37±0.04）、（1.94±0.05）、（2.24±0.07）、（2.22±0.05）]均明显升高（P<0.05）;与对照组比较,镉处理6 h时,HepG2细胞内GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 mRNA水平[分别为（45.76±7.04）、（114.21±5.23）、（59.52±1.50）、（674.13±27.12）]明显升高（P<0.05）;与对照组比较,5 μmol/L镉处理组HepG2细胞内GCLC和GCLM mRNA水平[分别为（24.77±2.16）、（29.93±0.67）]升高,2 μmol/L镉处理组HepG2细胞内HO1和AKR1C1 mRNA水平[分别（28.55±2.02）、（186.32±12.63）]升高（P<0.05）。结论 镉暴露能激活HepG2细胞系中NRF2信号通路。     

硒化合物在HepG2细胞中代谢生成硒蛋白效应

目的 探讨亚硒酸钠(Na₂SeO₃), 硒代蛋氨酸(SeMet)和甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys)3种硒化合物在HepG2细胞内代谢生成硒蛋白P(SEPP)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)效应。方法 将HepG2细胞分为对照组、低、中、高剂量硒化合物组(0.01、0.10、1.00 μmol/L), 作用48、72 h, 收集细胞上清液和裂解液;采用双抗夹心酶联免疫吸附试验检测上清中SEPP浓度与裂解液中GPx活力。结果 与对照组比较, 高剂量Na₂SeO₃、SeMet、MeSeCys作用HepG2细胞48 h时, 上清中SEPP浓度[分别为(115.78±1.70)、(140.73±0.97)、(114.92±1.46)pg/mL]均明显升高(P<0.01), 裂解液中GPx活力[分别为(490.52±5.40)、(643.26±5.40)、(603.35±6.40)U/L]明显升高(P<0.01);与Na₂SeO₃、MeSeCys比较, SeMet作用效果最好(P<0.05);3种硒化合物作用HepG2细胞48 h与72 h比较, 各指标差异均无统计学意义。结论 3种硒化合物中, 以SeMet作用于HepG2细胞后代谢生成SEPP和GPx的效果最明显。     

三氧化二砷对肝癌HepG2细胞铁死亡影响的研究

目的 探究三氧化二砷是否会诱导肝癌细胞铁死亡,并比较Alamar blue 法和MTT法在肝癌细胞铁死亡中检测细胞活力的差异。方法 以人肝癌HepG2细胞为研究对象,分为对照组、三氧化二砷处理组、公认的铁死亡诱导剂Erastin处理组以及联合铁死亡抑制剂Ferrostatin-1处理组,分别采用倒置生物显微镜观察各组细胞形态及存活情况,采用MTT法和Alamar blue 法检测各组细胞活力,探索三氧化二砷是否可以诱导铁死亡。结果 不同浓度三氧化二砷或Erastin处理后,HepG2细胞出现不同程度的死亡;铁死亡抑制剂Ferrostatin-1可以抑制Erastin诱导的细胞铁死亡,但不能抑制三氧化二砷诱导的细胞死亡;与MTT法相比,Alamar blue 法在检测细胞铁死亡时与显微镜观察结果一致,且各浓度组内检测值标准差较小。结论 三氧化二砷可能不会诱导肝癌细胞铁死亡;Alamar blue 法较MTT法在肝癌HepG2细胞铁死亡后活力检测中有更高的灵敏性,是细胞铁死亡研究中活力检测的首选方法。     

siRNA抑制NFBD1基因表达对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的:研究siRNA抑制NFBD1基因表达对人肝癌HepG2细胞凋亡的作用原理及caspase途径在此过程中的作用。方法:应用流式细胞法及RT-PCR检测沉默NFBD1对人肝癌HepG2细胞凋亡及凋亡基因组表达水平的影响。MTT法检测NFBD1 siRNA对HepG2细胞的抑制作用。结果:转染48 h后,转染组与阴性对照组和空白组相比,NFBD1mRNA表达明显减弱,转染组NFBD1 mRNA较空白组相对下降74.75%;HepG2细胞组中促凋亡基因Bc1-xl表达减少,Bid及caspase-3表达量增加(P<0.05)。MTT结果显示NFBD1 siRNA能明显抑制HepG2细胞增殖,抑制率达到92.131±0.893%。流式法检测结果显示转染组细胞凋亡明显高于阴性对照组和空白组。结论:NFBD1可通过改变Bc1-xl/Bid的表达比,激活caspase-3来诱导HepG2细胞凋亡。     

Effects of epigallocatechin 3-O-gallate on cellular antioxidative system in HepG2 cells

To elucidate the interactions of catechins with the cellular antioxidative system, human hepatoma HepG2 cells were incubated in a serum-free medium with catechins, and the level of thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS) as a marker of lipid peroxidation was determined, as well as the contents of alpha-tocopherol (alpha-Toc) and glutathione (GSH) and the activities of superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH-Px). TBARS was promptly decreased by the incubation with epigallocatechin 3-O-gallate (EGCG), and 12h later TBARS in the cells with 10microM EGCG was about 15% (p < 0.05) of that in the controls (without catechins). Epigallocatechin, epicatechin 3-O-gallate, and epicatechin also had an antioxidative activity, but a higher concentration was required to induce the same effect as EGCG. In the cells incubated with EGCG, the consumption of alpha-Toc and the formation of the oxidized form of GSH were suppressed. Although EGCG showed no effects on the Cu/Zn-SOD activity, the Mn-SOD activity in the cells was enhanced (p < 0.05) by the incubation with EGCG. Moreover, the GSH-Px activity was maintained at a higher level (p < 0.05) in the cells with EGCG, compared with that in the controls. When the cells were preincubated with EGCG, the cytotoxicity of H2O2 was significantly reduced. Furthermore, the decrease of cellular alpha-Toc content induced by exposure to H2O2 was prevented by the pretreatment of EGCG. These results suggest that EGCG taken up into HepG2 cells is preferentially used as an antioxidant, rather than alpha-Toc and GSH, to suppress lipid peroxidation and to protect these cells from oxidative damages.     

茶多酚、茶色素对人肝癌细胞株HepG2端粒酶活性的影响

目的　利用人肝癌细胞株HepG2观察茶多酚和茶色素对端粒酶活性的影响。方法采用TRAP PCR ELISA方法对HepG2细胞端粒酶活性进行定性和定量检测。结果　TRAP PCR定性分析表明空白对照组、茶多酚组和茶色素组均端粒酶阳性 ;ELISA定量结果显示 ,5 0mg/L和 10 0mg/L茶多酚组端粒酶活性 (A450 690 值 )分别为 1 5 6和 1 4 6 ;5 0mg/L和 10 0mg/L茶色素处理组为 1 5 5和1 4 9,与空白对照组 (A450 690 值为 2 11)相比 ,茶多酚和茶色素处理后HepG2细胞端粒酶活性有统计学意义。结论　茶多酚和茶色素显著抑制HepG2细胞端粒酶活性 ,端粒酶活性可能是癌症化学预防研究的一个有用的生物标志物