补肾益智方对老年性痴呆模型大鼠神经递质释放的影响

背景：胆碱乙酰基转移酶活性水平的降低和神经递质囊泡膜蛋白的减少是老年性痴呆的主要生化指标,中药补肾益智方具有补肾、益气、生髓、养脑作用,其含药血清能有效地保护由淀粉样蛋白引起的这些改变.目的：观察补肾益智方含药血清能否改善由淀粉样蛋白产物诱导神经细胞显示的老年性痴呆样病理损害,以此评价补肾益智方治疗老年性痴呆的作用.设计：随机对照实验.单位：广西中医学院第二附属医院神经科学研究所,广州中医药大学老年脑病研究所.材料：实验于2003-09/2004-03在广西中医学院新药研究开发中心完成.选取健康清洁级3月龄Wistar大鼠60只,随机分为空白对照组与中药灌胃组,各30只.补肾益智方主要由枸杞、蛇床子、人参、首乌、丹皮、冰片等组成,临用前配置为成药0.176 g/mL（生药1.13 g/mL）液体.方法：①中药灌胃组每只大鼠每天灌胃成药液1.0～1.5 mL,连续灌胃1个月,于末次给药后4 h内,5 000 r/min离心5 min分离血清,无菌过滤,56℃灭活补体,即为含药血清.空白对照组给予等量生理盐水灌胃,同样方法提取分离血清.②对于NG108-15细胞,当淀粉样蛋白25～35片段在培养液浓度为5 μmol/L或淀粉样蛋白1-42的浓度为200 nmol/L时较为合适.③NG108-15细胞以Dulbecco改良的Eagle培养基在37℃,体积分数为0.1的CO2培养箱中培养1 d,然后加入浓度为5 μmol/L淀粉样蛋白25-35或200nmol/L淀粉样蛋白1-42片段,继续培养1 d后,即为老年性痴呆细胞模型.以含50g/L中药灌胃组血清或空白对照组血清的Dulbecco改良的Eagle培养基更换原培养液,仍加入上述浓度的淀粉样蛋白片段以维持老年性痴呆细胞模型,分化培养5 d后进行各项指标观察,并设立无淀粉样蛋白片段对照.④利用免疫蛋白印迹检查、免疫放射括性测定及电生理学测定方法观察补肾益智方含药血清处理NG108-15细胞老年性痴呆模型后的胆碱乙酰基转移酶活性、突触素蛋白水平及功能性突触形成率.主要观察指标：补肾益智方含药血清对胆碱乙酰基转移酶活性、突触素蛋白水平、NG108-15细胞功能性突触形成、NG108-15细胞微小终板电位频率的影响.结果：实验纳入大鼠60只,全部进入结果分析.①补肾益智方含药血清对胆碱乙酰基转移酶活性的影响：在无淀粉样蛋白或淀粉样蛋白1-42最终浓度200 nmol/L时,中药灌胃组胆碱乙酰基转移酶活性均明显高于空白对照组[（1651.2&;#177;134.5）,（1336.1&;#177;268.2）;（1586.1&;#177;223.4）,（1290.7&;#177;381.5）μmol/（g&;#183;h）;P＜0.05].②补肾益智方含药血清对突触素蛋白水平的影响：中药灌胃组突触素Ⅰ a和Ⅰ b积分吸光度总值在无淀粉样蛋白、淀粉样蛋白25-35、淀粉样蛋白1-42时分别为5.02,1.36和2.46,空白对照组分别为3.18,0.57和0.71,中药灌胃组分别是空白对照组的1.6,2.4,3.5倍.③补肾益智方含药血清对NG108-15细胞功能性突触形成的影响：当无淀粉样蛋白或淀粉样蛋白1-42时,中药灌胃组功能性突触形成水平均高于空白对照组[（90.6&;#177;6.0）%,（63.2&;#177;17.0）%;（58.0&;#177;13.1）%,（34.2&;#177;13.0）%;P＜0.05].④补肾益智方血清对NG108-15细胞微小终板电位频率的影响：无淀粉样蛋白或淀粉样蛋白1-42时,中药灌胃组微小终板电位频率均高于空白对照组[（9.28&;#177;4.1）,（5.48&;#177;5.14）;（5.55&;#177;5.85）,（3.05&;#177;4.46）个/min;P＜0.01,P＜0.05].结论：补肾益智方剂含药血清在无淀粉样蛋白或淀粉样蛋白存在的情况下均能提高胆碱乙酰基转移酶的活性,不仅能保护由淀粉样蛋白引起的细胞突触素水平降低,在无淀粉样蛋白的情况下还可以提高突触素蛋白的表达,提高功能性突触的形成率和递质含量的释放.表明该方能拮抗老年性痴呆的病理发展,并通过提高神经递质的释放能力发挥对老年性痴呆的治疗作用.     

补肾益智方拆方含药血清对阿尔茨海默病细胞模型的作用

背景中药补肾益智方对阿尔茨海默病大鼠模型学习记忆能力有一定的保护作用,该方含药血清也能减轻神经瘤细胞NG 108-15细胞对β淀粉样蛋白的神经毒性反应,为了进一步了解该方的作用机制及其配伍规律,需对该方进行拆方研究.目的研究补肾益智方拆方亚组的含药血清对阿尔茨海默病细胞模型生长、分化等方面的影响,从血清药理学的角度探讨该方的配伍规律.设计随机对照实验.单位广州中医药大学临床药理研究所DME中心.对象实验于2003-01/08在广州中医药大学临床药理研究所DME中心实验室进行.实验对象为3月龄SD雄性健康大鼠40只和冻存的NG 108-15细胞株.方法①制备药物血清将40只SD大鼠随机分为对照组、原方组(蛇床子、枸杞子、人参、何首乌、丹皮、冰片)、补肾组(蛇床子、枸杞等)、益气养血组(人参、制首乌等)、去冰片组(蛇床子、枸杞子、人参、何首乌、丹皮),每组8只.将各组中药浓缩液按按10 μL/g(相当于生药6 g/kg)分别进行灌胃,连续1个月,对照组灌等量生量盐水.各组大鼠最后1次灌胃2h,麻醉后心脏采血,分离血清备用.②细胞增殖、培养及分化将体外培养的NG 108-15细胞分为6组,对照组、模型组孔中的增殖培养液含正常大鼠血清,其余4组分别为原方组及3个亚组的大鼠含药血清;同时每个孔加淀粉样β蛋白25～35至终浓度5 umol/L(对照组除外),继续培养48 h.主要观察指标用MTT法测定细胞增殖数和存活率;同时检测分化突起细胞占总细胞数的比率及突起平均长度.结果①细胞增殖情况模型组A值显著低于对照组(0.520±0.022,0.665±0.037,P＜0.01),各含药血清组A值均高于模型组,但以去冰片组效果最显著(0.636±0.035,P＜0.01).②分化细胞存活率模型组显著低于对照组(58.4%,100%),各含药血清组均高于模型组,但以去冰片组效果最显著(75.8%,P＜0.01).③分化突起细胞占总细胞数的比率模型组显著低于对照组[(42.95±11.42)%,(58.75±12.84)%,P＜0.01],各含药血清组均高于模型组,但以去冰片组效果最显著[(58.20±8.40)%,P＜0.01].④突起平均长度模型组显著低于对照组[(356.0±109.0),(493.8±133.0)μm,P＜0.01],各含药血清组均高于模型组,但以去冰片组效果最显著[(486.8±79.2)μm,P＜0.01].结论补肾益智方及各亚组含药血清都能在一定程度上抑制淀粉样β蛋白25-35对NG108-15细胞的损伤作用,但各组情况有所不同.各组含药血清对细胞的保护作用由强至弱依次是去冰片组＞原方组＞补肾组＞益气养血组.故方中冰片的功效有待进一步研究.     

补肾益智方拆方含药血清对阿尔茨海默病细胞模型的作用(英文)

背景:中药补肾益智方对阿尔茨海默病大鼠模型学习记忆能力有一定的保护作用,该方含药血清也能减轻神经瘤细胞NG108-15细胞对β淀粉样蛋白的神经毒性反应,为了进一步了解该方的作用机制及其配伍规律,需对该方进行拆方研究。目的:研究补肾益智方拆方亚组的含药血清对阿尔茨海默病细胞模型生长、分化等方面的影响,从血清药理学的角度探讨该方的配伍规律。设计:随机对照实验。单位:广州中医药大学临床药理研究所DME中心。对象:实验于2003-01/08在广州中医药大学临床药理研究所DME中心实验室进行。实验对象为3月龄SD雄性健康大鼠40只和冻存的NG108-15细胞株。方法:①制备药物血清:将40只SD大鼠随机分为对照组、原方组(蛇床子、枸杞子、人参、何首乌、丹皮、冰片)、补肾组(蛇床子、枸杞等)、益气养血组(人参、制首乌等)、去冰片组(蛇床子、枸杞子、人参、何首乌、丹皮),每组8只。将各组中药浓缩液按按10μL/g(相当于生药6g/kg)分别进行灌胃,连续1个月,对照组灌等量生量盐水。各组大鼠最后1次灌胃2h,麻醉后心脏采血,分离血清备用。②细胞增殖、培养及分化:将体外培养的NG108-15细胞分为6组,对照组、模型组孔中的增殖培养液含正常大鼠血清,其余4组分别为原方组及3个亚组的大鼠含药血清;同时每个孔加淀粉样β蛋白25～35至终浓度5umol/L(对照组除外),继续培养48h。主要观察指标:用MTT法测定细胞增殖数和存活率;同时检测分化突起细胞占总细胞数的比率及突起平均长度。结果:①细胞增殖情况:模型组A值显著低于对照组(0.520±0.022,0.665±0.037,P<0.01),各含药血清组A值均高于模型组,但以去冰片组效果最显著(0.636±0.035,P<0.01)。②分化细胞存活率:模型组显著低于对照组(58.4%,100%),各含药血清组均高于模型组,但以去冰片组效果最显著(75.8%,P<0.01)。③分化突起细胞占总细胞数的比率:模型组显著低于对照组犤(42.95±11.42)%,(58.75±12.84)%,P<0.01犦,各含药血清组均高于模型组,但以去冰片组效果最显著犤(58.20±8.40)%,P<0.01犦。④突起平均长度:模型组显著低于对照组犤(356.0±109.0),(493.8±133.0)μm,P<0.01犦,各含药血清组均高于模型组,但以去冰片组效果最显著犤(486.8±79.2)μm,P<0.01犦。结论:补肾益智方及各亚组含药血清都能在一定程度上抑制淀粉样β蛋白25-35对NG108-15细胞的损伤作用,但各组情况有所不同。各组含药血清对细胞的保护作用由强至弱依次是去冰片组>原方组>补肾组>益气养血组。故方中冰片的功效有待进一步研究。     

补肾益智方对老年性痴呆细胞模型的影响

背景 在体外培养的神经细胞培养液中加入具有神经毒性的淀粉样蛋白( amyliod protein,Aβ)片段可诱导产生阿尔茨海默病 (Alzheimer's disease,AD)相似的病理损害,补肾药是否改善其病理损害是本研究探讨的问题. 目的观察补肾益智方对由 Aβ片段毒性诱导的 NG10815细胞老年性痴呆模型作用的影响. 设计完全随机对照实验研究. 地点和材料 研究地点为广西中医学院第二附属医院神经科学研究所,材料为健康三月龄 Wista大鼠 60只,体质量 200～ 250 g,购自第一军医大学动物实验室. 干预与主要观察指标 将 Wista大鼠随机分为对照组、治疗组,每组 30只,雄雌各半.利用细胞计数、 MTT及流式细胞仪测定等方法观察补肾益智方含药血清处理由 Aβ片段毒性诱导的 NG108-15细胞的存活率、形学改变及细胞周期的改变. 结果 补肾益智方含药血清能增加 Aβ片段毒性诱导的 NG108-15细胞存活率和细胞突起;细胞增殖周期分析显示,含药血清能增加 S期细胞数. 结论 补肾益智方具有减轻细胞对 Aβ的神经毒性反应,表明该方在通过拮抗 AD的病理发展而发挥对 AD的治疗作用.     

补肾益智方对老年性痴呆细胞模型的影响

背景：在体外培养的神经细胞培养液中加入具有神经毒性的淀粉样蛋白(amyliod protein，Aβ)片段可诱导产生阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)相似的病理损害，补肾药是否改善其病理损害是本研究探讨的问题。目的：观察补肾益智方对由Aβ片段毒性诱导的NG108-15细胞老年性痴呆模型作用的影响。设计：完全随机对照实验研究。地点和材料：研究地点为广西中医学院第二附属医院神经科学研究所，材料为健康三月龄Wista大鼠60只，体质量200～250g，购自第一军医大学动物实验室。干预与主要观察指标：将Wista大鼠随机分为对照组、治疗组，每组30只，雄雌各半。利用细胞计数、MTT及流式细胞仪测定等方法观察补肾益智方含药血清处理由Aβ片段毒性诱导的NG108-15细胞的存活率、形学改变及细胞周期的改变。结果：补肾益智方含药血清能增加Aβ片段毒性诱导的NG108-15细胞存活率和细胞突起；细胞增殖周期分析显示，含药血清能增加S期细胞数。结论：补肾益智方具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应，表明该方在通过拮抗AD的病理发展而发挥对AD的治疗作用。     

补肾益智方拆方含药血清对阿尔茨海默病细胞模型的作用术

背景；中药补肾益智方对阿尔茨海默病大鼠模型学习记忆能力有一定的保护作用，该方含药血清也能减轻神经瘤细胞NG 108—15细胞对β淀粉样蛋白的神经毒性反应，为了进一步了解该方的作用机制及其配伍规律，需对该方进行拆方研究。目的：研究补肾益智方拆方亚组的含药血清对阿尔茨海默病细胞模型生长、分化等方面的影响，从血清药理学的角度探讨该方的配伍规律。设计：随机对照实验．单位：广州中医药大学临床药理研究所DMF中心。对象：实验于2003—01／08在广州中医药大学临床药理研究所DME中心实验室进行。实验对象为3月龄SD雄性健康大鼠40只和冻存的NG 108—15细胞株。方法：①制备药物血清：将40只SD大鼠随机分为对照组、原方组（蛇床子、枸杞子、人参、何首乌、丹皮、冰片）、补肾组（蛇床子、枸杞等）、益气养血组（人参、制首鸟等）、去冰片组（蛇床子、枸杞子、人参、何首乌、丹皮），每组8只：将各组中药浓缩液按按10μL／g（相当于生药6g／k曲分别进行灌胃，连续1个月，对照组灌等量生量盐水。各组大鼠最后1次灌胃2h，麻醉后心脏采血，分离血清备用。②细胞增殖、培养及分化：将体外培养的NG 108—15细胞分为6组，对照组、模型组孔中的增殖培养液含正常大鼠血清，其余4组分别为原方组及3个亚组的大鼠含药血清；同时每个孔加淀粉样β蛋白25～35至终浓度5umol／L（对照组除外），继续培养48h。主要观察指标：用MTT法测定细胞增殖数和存活率；同时检测分化突起细胞占总细胞数的比率及突起平均长度结果：①细胞增殖情况：模型组A值显著低于对照组（0．520&;#177;0．022，0．665&;#177;0．037．P〈0．01），各含药血清组A值均高于模型组，但以去冰片组效果最显著（0．636&;#177;0．035.P〈0.01）。②分化细胞存活率：模型组显著低于对照组（58．4％，100％），各含药血清组均高于模型组，但以去冰片组效果最显著（75．8％，P〈0．01）。③分化突起细胞占总细胞数的比率：模型组显著低丁对照组[（42．95&;#177;11.42）％，（58．75&;#177;12.84）％，P〈0．01]，各含药血清组均高于模型组，但以去冰片组效果最显著[（58.20&;#177;8．40）％，P〈0．01]。④突起甲均长度：模型组显著低于对照组[（356．0&;#177;109．0），（493．8&;#177;133．0）μm，P〈0．01]，各含药血清组均高于模型组，但以去冰片组效果最显著[（486．8&;#177;79.2）μm，P〈0．01]．结论：补肾益智方及各亚组含药血清都能在一定程度上抑制淀粉样β蛋白25—35对NG108—15细胞的损伤作用，但各组情况有所不同。各组含药血清对细胞的保护作用南强至弱依次是去冰片组〉原方组〉补肾组〉益气养血组：故方中冰片的功效有待进一步研究.     

补肾活血中药促进体外培养软骨细胞增殖和蛋白质合成的作用

目的：利用体外软骨细胞培养体系。观察中药补肾活血方含药血清对软骨细胞增殖及蛋白质合成的影响，以探讨补肾活血中药防治骨性关节炎的作用。 方法：实验于2003-05／2004—08在广州中医药大学实验动物中心完成。①4周龄新西兰兔，用于分离培养软骨细胞。②雄性SD大鼠10只。体质量250-300g，随机分为正常组和中药补肾活血方组，每组5只，用于制备含药血清。③将传一代的软骨细胞接种于96孔培养板和24孔培养板中，培养24h后细胞贴壁进行分组试验。培养孔随机分为6组。每组4孔：空白对照组（加体积分数为0．05血清DMEM）5％中药含药血清组，10％中药古药血清组，20％中药含药血清组，5％丹参注射液组，5％葛根素注射液组；用噻唑蓝法检测细胞活性和增殖，考马斯亮蓝法检测细胞总蛋白。 结果：①5％，10％，20％中药含药血清组软骨细胞增殖与空白对照组相比有显著差异[（1．10&;#177;0．04）,（1．14&;#177;0．04），（1．14&;#177;0．06），（0．66&;#177;0．07），P〈0．05]。②5％，10％，20％中药含药血清组细胞总蛋白合成与空白对照组相比有显著差异[（137．60&;#177;5．98），（135．20&;#177;9．37），（130．80&;#177;2．50）,（99．15&;#177;5．08），P〈0．05]。③5％丹参及葛根紊注射液组对软骨细胞增殖和蛋白合成无明显影响。 结论：补肾活血中药含药血清可促进软骨细胞的增殖和蛋白合成，这可能是补肾活血中药防治骨性关节炎的重要作用机制之一。     

神经细胞黏附分子L1促进神经细胞突起和功能性突触的形成

背景神经细胞黏附分子L1对神经细胞的发生、发育和神经-神经黏附发挥重要作用,然而L1对细胞突起和功能性突触形成的影响是不清楚的.目的探讨神经细胞黏附分子L1在神经细胞突起生长和功能性突触形成中的作用.设计完全随机对照实验研究.地点和材料地点为广西中医学院神经科学研究所.材料为NG108-15神经细胞株、L1 eDNA、抗L1抗体由日本金泽大学神经物性部门提供.方法在体外细胞培养,用脂质转染剂将黏附分子L1cDNA表达到NG108-15细胞,用光学显微镜观察细胞形态和电生理学检查技术测定细胞-肌突触的突触后膜电位变化.主要观察指标细胞突起指数、突触形成率、微小终板电位的频率.结果以分化剂cAMP处理4 d后,L1-转染组有突起分叉的细胞占细胞总数的百分数为(31±8)%,明显高于非转染组的(13±2)%或Mock-转染组的(15±5)%(P＜0.001).L1-转染组的细胞突起平均长度为(142.5±12.3)μm,明显高于非转染组的(94.2±12.3)μm或Mock-转染组的(86.8±6.7)μm(P＜0.05).L1转染组功能性突触的形成率为(58.0±11.5)%,也高于非转染组的(36.7±0.83)%或Mock-转染组的(39.2±0.84)%(P＜0.001).但突触后膜电位的频率在3组之间差异无显著性意义(P＞0.05).结论L1在NG108-15细胞的高度表达提高cAMP诱发的神经细胞突起和功能性突触的形成,功能性突触形成率的增加是通过增加神经细胞突起分叉和突起的长度,从而增加神经-肌连接数量来实现,而不是通过增加递质的释放量.     

补肾活血中药促进体外培养软骨细胞增殖和蛋白质合成的作用

目的:利用体外软骨细胞培养体系,观察中药补肾活血方含药血清对软骨细胞增殖及蛋白质合成的影响,以探讨补肾活血中药防治骨性关节炎的作用。方法:实验于2003-05/2004-08在广州中医药大学实验动物中心完成。①4周龄新西兰兔,用于分离培养软骨细胞。②雄性SD大鼠10只,体质量250～300g,随机分为正常组和中药补肾活血方组,每组5只,用于制备含药血清。③将传一代的软骨细胞接种于96孔培养板和24孔培养板中,培养24h后细胞贴壁进行分组试验,培养孔随机分为6组,每组4孔:空白对照组(加体积分数为0.05血清DMEM)5%中药含药血清组,10%中药含药血清组,20%中药含药血清组,5%丹参注射液组,5%葛根素注射液组;用噻唑蓝法检测细胞活性和增殖,考马斯亮蓝法检测细胞总蛋白。结果:①5%,10%,20%中药含药血清组软骨细胞增殖与空白对照组相比有显著差异眼(1.10±0.04),(1.14±0.04),(1.14±0.06),(0.66±0.07),P<0.05演。②5%,10%,20%中药含药血清组细胞总蛋白合成与空白对照组相比有显著差异眼(137.60±5.98),(135.20±9.37),(130.80±2.50),(99.15±5.08),P<0.05演。③5%丹参及葛根素注射液组对软骨细胞增殖和蛋白合成无明显影响。结论:补肾活血中药含药血清可促进软骨细胞的增殖和蛋白合成,这可能是补肾活血中药防治骨性关节炎的重要作用机制之一。     

三七总皂甙对淀粉样β25～35肽诱导的NG108-15细胞老年性痴呆模型的保护作用

背景阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)的病理病因虽然还没有完全清楚,但目前认为β-淀粉样肽(amyloid β-peptide,Aβ)是引起AD的胆碱能神经功能紊乱的主要成分.因此,Aβ的产生及其对神经细胞的影响,以及寻找该病的发病机制、治疗方法及其有效的治疗药物成了医药界的研究热点.目的观察三七总皂甙(PNS)对NG108-15细胞老年性痴呆模型的影响,为寻找该病的发病机制提供佐证,为研究和开发中药的新成分提供理论依据.设计体外平行对照实验.单位广西中医学院新药开发中心,广西中医学院生物化学教研室.对象实验在广西中医学院新药开发中心完成.NG108-15细胞中国科学院上海细胞研究所提供.PNS云南玉溪维和制药厂生产.Aβ25～35片段德国Sigma公司产品,批号042K49501.MTT(四甲基噻唑蓝),德国Sigma公司产品,批号020609.cAMP(环一磷酸腺苷)日本ヤマサ酱油株式会社产品,批号00207.胚胎牛血清(FBS)由美国Hyclone公司提供,批号0405.DMEM培养基美国GIBCO公司产品,批号0311.干预NG108-15细胞培养法含50 mL/L胚牛血清、10 g/L HAT、10 g/L青霉素和链霉素(11)的DMEM培养液,置100 mL/L CO2、37℃用的培养箱内培养殖,每隔一天换一次液,4 d传代一次.主要观察指标利用MTT法、细胞计数法和细胞形态学检测法观察PNS对NG108-15细胞存活率和细胞突起的改变.结果PNS能增加Aβ25～35片段神经毒性诱导的NG108-15细胞存活率[增殖状态(311±21)%,分化状态(113±31)%,P＜0.05,F=5.567]、细胞突起率[增殖状态(25.66±3.65)%,分化状态(67.97±2.47)%,P＜0.05,F=6.471]和细胞突起平均长度[增殖状态(25.66±3.09)μm,分化状态(25.66±3.65)μm,P＜0.001,F=12.641].结论PNS具有减轻细胞对Aβ的神经毒性反应和促进细胞突起生长的作用,表明PNS能对老年性痴呆的病理发展有拮抗作用.     

天泰1号对自发老年性痴呆模型中枢胆碱能系统活性的影响

背景:天泰1号由天麻、当归、槟榔等组成,具有补肝养髓和益智开窍的功能。目的:观察天泰1号对自发老年性痴呆模型学习记忆功能及中枢胆碱能活性的影响。设计:随机对照观察。单位:深圳市中西医结合研究所。材料:选取昆明种雄性小鼠,13个月龄,饲养至21个月龄,筛选自发老年性痴呆鼠52只。随机分为空白对照组、西药对照组、天泰1号6.80g/kg组、天泰1号20.41g/kg组4组。同期选取13只筛选出的老年学习记忆正常鼠做正常对照组。方法:西药对照组给以Hydergine0.6mg/kg,天泰1号6.80g/kg组和20.41g/kg组分别予天泰1号6.80g/kg及20.41g/kg,连续60d,正常对照和空白对照组均灌以等量双蒸馏水。采用跳台实验检测学习记忆成绩鸦脑组织冰冻切片,Hedreen法示胆碱酯酶纤维,Burt及Silver法示胆碱乙酰转移酶,全自动显微图像分析系统定量检测相关脑区胆碱酯酶纤维及胆碱乙酰转移酶活性。主要观察指标:①观察天泰1号对老年性痴呆大鼠学习记忆的影响。②观察颞叶皮质和海马CA1区的胆碱酯酶阳性纤维面密度。③观察基底前脑Meynert核区胆碱乙酰转移酶活性。结果:①天泰1号对自发性老年痴呆鼠学习记忆的改善作用:天泰1号6.80g/kg组、天泰1号20.41g/kg组、正常对照组和西药对照组的错误次数显著低于空白对照组(5.08±2.18,3.77±1.48,3.25±1.27,6.17±3.12,9.31±3.65,P<0.05)。②胆碱酯酶阳性纤维面密度:在颞叶皮质区,天泰1号6.80g/kg组、天泰1号20.41g/kg组、正常对照组和西药对照组显著高于空白对照组(20.19±4.18,25.01±6.44,26.38±6.52,19.44±4.33,14.36±3.21,P<0.05)。在海马CA1区,天泰1号20.41g/kg组和正常对照组显著高于空白对照组、西药对照组和天泰1号6.80g/kg组(13.88±3.07,14.11±4.36,6.57±2.30,10.13±2.94,9.63±2.40,P<0.05)。③神经元胆碱乙酰转移酶活性:天泰1号20.41g/kg组、天泰1号6.80g/kg组、西药对照组和正常对照组显著高于空白对照组(0.683±0.179,0.589±0.179,0.552±0.173,0.705±0.141,0.354±0.131,P<0.05)。结论:天泰1号可明显改善自发老年性痴呆模型的学习记忆障碍,显著增强其中枢胆碱能系统活性,且呈现明显的量效关系。     

阿尔茨海默病患者血清Aβ1-42和血小板聚集功能联合测定的临床意义

目的：探讨血清β-淀粉样蛋白（Aβ-42）、血小板聚集功能（PAgT）在阿尔茨海默病（AD）诊疗中的临床意义。方法：采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测26例AD患者和28例健康对照者血清中Aβ1-42蛋白水平,采用比浊法检测其PAsT水平。结果：AD患者Aβ1-42水平为（38．5±12．4）Pg／ml明显低于于对照组（56．6±14．2）Pg／ml（P〈0．01）,PA盯水平为为（64．2±13．5）％则明显高于对照组（53．6±7．6）％（P〈0．01）。Pearson相关分析显示简易智能状态检查量表（MMSE）评分与PAgT呈明显负相关（r=-0．439,P〈0．05）。结论：动态检测AD患者血清AB1-42、PAgT水平的变化,在AD临床诊疗中有着重要意义。     

补肾益气活血方对实验性膝骨关节炎兔关节软骨组织形态学的影响

背景目前治疗膝骨关节炎的药物主要是非类固醇类药,应用后可产生胃肠道副作用.研究表明,补肾益气活血方能明显改善膝骨关节炎患者关节疼痛和功能,并且副作用较小.目的通过建立兔膝关节骨关节炎模型,探讨补肾益气活血方对兔病变膝关节软骨病理过程的影响.设计以实验动物为研究对象,随机对照观察研究.单位一所大学动物实验中心.材料健康雄性新西兰兔36只,体质量2.0～3.0kg.方法实验于2002-01/2003-01在广州中医药大学动物实验中心完成.新西兰兔36只,建立Hulth膝骨关节炎模型,术后随机分成3组模型组、醋氨酚组和补肾益气活血方组.各组采取相应的处理方法,术后4,8和12周取材,进行组织病理学评估.主要观察指标主要结局各组关节软骨病理改变积分.次要结局①各组关节软骨肉眼观察.②各组关节软骨光镜观察.结果模型组、醋氨酚组、补肾益气活血方组关节软骨病理变化总积4周分别为(18.50±1.00),(14.25±1.26),(11.75±2.22)分;12周分别为(30.75±1.26),(22.00±3.16),(17.75±2.21)分.各组关节软骨病理变化总积分、软骨细胞病理改变积分和软骨表层病理改变积分依次为模型组＞醋氨酚组＞补肾益气活血方组.组间比较差异均有显著或非常显著性意义.结论补肾益气活血方能延缓膝骨关节炎的病理过程,达到防治膝骨关节炎的作用.     

益智胶囊对多发梗死性痴呆患者智力的影响

背景已有实验表明益智胶囊可明显改善多发梗死性痴呆模型大鼠学习记忆能力,其对多发梗死性痴呆的疗效如何?对多发梗死性痴呆患者智力的改善是否有作用?目的观察益智胶囊治疗多发梗死性痴呆患者的疗效及对智力的影响,并与吡拉西坦药物进行比较.设计随机对照、双盲实验.单位青岛大学医学院附属医院特需保健科,青岛大学医学院脑血管病研究所.对象选择1999-10/2002-10青岛大学医学院附属医院特需保健科确诊为多发梗死性痴呆患者94例,男51例,女43例;年龄45～79岁.知情同意参加本实验.随机分为益智胶囊组47例和对照组47例.方法益智胶囊组用药益智胶囊成分为制何首乌14 g,人参4 g,石菖蒲8 g,远志6 g,水蛭10 g,淫羊藿10 g,知母6 g,川芎12 g,每粒胶囊含内容物0.228 g,相当于生药10 g.6粒/次,3次/d,口服.对照组用药吡拉西坦,0.9g/次,3次/d,口服.两组均治疗3个月.参照卫生部1995年制定发布的中药新药治疗痴呆的临床研究指导原则中的疗效判定标准评估疗效(显效症状、体征明显改善;证候积分减少≥70%;好转症状、体征均有好转;证候积分减少≥30%;无效症状、体征无明显改善,甚或加重;证候积分减少不足30%).智力测验使用中国修订的韦氏成人智力量表包括语言量表和操作量表两部分,共11个分测验.主要观察指标①两组患者治疗效果.②两组患者治疗前后言语智商、操作智商、全智商.结果参加实验94例,中途由于未按规定服药脱落12例,进入结果分析82例(益智胶囊组42例,对照组40例).①治疗效果益智胶囊组显效21例,有效14例,无效7例,总有效率达83%(35/42);对照组显效7例,有效15例,无效18例,总有效率55%(22/40).益智胶囊组总有效率明显高于对照组(Z=3.549,P＜0.001).②两组患者治疗前后言语智商、操作智商、全智商数据比较治疗前益智胶囊组和对照组基本一致(P＞0.05).治疗后益智胶囊组明显高于对照组[91.64±24.38,81.42±19.3288.28±20.63,73.18±18.04;89.83±22.4,74.62±20.20,(t=5.198～6.958,P＜0.001)].结论益智胶囊治疗多发梗死性痴呆有良好的疗效,在改善多发梗死性痴呆患者的智力方面优于吡拉西坦.     

人血浆β淀粉样蛋白42ELISA的建立及其临床初步应用

目的建立人血浆中β淀粉样蛋白42（Aβ42）酶联免疫吸附试验（ELISA）,并初步观察其对诊断阿尔茨海默病（AD）的应用价值。方法用鼠抗Aβ42片段（1～28氨基酸残基）单克隆抗体包被微孔板,用生物素标记的兔抗Aβ42片段（40～42氨基酸残基）为标记抗体,应用生物素-亲和素系统（ABS）进行放大,采用棋盘滴定方法确定最佳实验条件,用Aβ42标准品建立ELISA标准曲线,分别检测不同痴呆程度AD患者及健康人血浆中Aβ水平。结果本研究建立的方法测定范围为20—500pg／mL,最低检出量20pg／mL,批内和批间变异系数（c叻分别为3．8％和7．9％。轻度AD患者血浆中AB42水平为（146．4±9．7）pg／mL,明显高于健康对照组[（95．I±7．2）pg／mL],中晚期AD患者血浆Aβ42浓度明显下降[（99．4±17．6）pg／mL],其水平降至与健康对照组差异无统计学意义。结论建立的人血浆Aβ42ELISA可作为AD早期诊断的有效方法,可在临床推广应用。     

人参、天麻等复方总提取物对血管性痴呆大鼠脑组织单胺递质含量的影响

背景:在血管性痴呆时,脑组织缺血、缺氧,能量消耗,神经元代谢异常,三磷酸腺苷生成减少,细胞内外离子环境的紊乱等导致突触结构破坏,可能引起单胺神经递质的释放异常。目的:观察参麻益智胶囊干预的多发性脑梗塞引起的血管性痴呆动物模型脑组织单胺递质含量的变化,分析其对血管性痴呆的影响。设计:随机对照观察。单位:辽宁省基础医学研究所病生研究室。材料:Wistar种系大鼠96只,鼠龄为8～12个月,体质量为270～500g,雄雌各半。方法:实验于2001-04/07在辽宁中医学院职业技术学院病理生理研究室完成。将实验动物分为6组,每组大鼠16只,雄雌各半。其中5组采用Wistar大鼠颈内动脉注入凝血栓子的方法,制作出多发性脑梗塞引起的血管性痴呆动物模型,造模后随机分为参麻益智胶囊3.2g/kg,1.6g/kg,0.8g/kg剂量组(参麻益智胶囊由人参、天麻等总提取物组成,每克药粉含生药2.7g,由中国中医研究院西苑医院提供。),阳性药对照组,痴呆对照组;未造模动物为正常对照组。对参麻益智胶囊各剂量组分别施以相应剂量的参麻益智胶囊灌胃;阳性药对照组应用喜得镇甲磺酸双氢麦角毒碱片灌胃,剂量为lmg/kg;痴呆对照组和正常对照组应用同等剂量的生理盐水灌胃。各组动物在造模后l周开始给药,1次/d,连续给药6周。应用高效液相色谱法测定单胺类神经递质含量。主要观察指标:测定各组大鼠脑组织单胺类神经递质去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、吲哚乙酸、高香草酸和5-羟色胺的含量,并进行组间对比。结果:实验动物由于自身体质和环境改变等原因死亡9只,最后进入结果分析的实验动物为87只。痴呆对照组大鼠脑组织内去甲肾上腺素含量显著低于正常对照组大鼠[(0.40±0.23),(0.70±0.14)ng/g,t=2.712,P<0.01],而参麻益智胶囊3.2,1.6g/kg剂量组大鼠脑组织去甲肾上腺素含量明显高于痴呆对照组大鼠[(0.57±0.09),(0.58±0.19),(0.40±0.23)ng/g,t=2.211,P<0.05],尽管其含量仍然低于正常对照组大鼠。参麻益智胶囊0.8g/kg剂量组的去甲肾上腺素含量明显低于正常对照组[(0.48±0.23)g/kg,t=2.213,P<0.05],但仍略高于痴呆对照组和阳性药对照组大鼠[(0.41±0.19)ng/g]。其他神经递质间差异不明显。结论:痴呆大鼠脑组织去甲肾上腺素含量明显降低,而参麻益智胶囊具有升高痴呆大鼠脑组织去甲肾上腺素的作用。参麻益智胶囊治疗血管性痴呆可能与其提高脑组织内去甲肾上腺素的含量有关。