透析对糖尿病肾衰竭病人外周血单个核细胞TGF—β1mRNA？…

①目的 探讨透析对糖尿病肾衰竭病人转化生长因子（ＴＧＦ－β）表达的影响。②方法 采用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）半定量技术，对糖尿病肾衰竭不同治疗组病人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的表达进行检测。③结果 糖尿病肾衰竭透析病人ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的表达明显高于对照组（ｔ＝１２．５３０，Ｐ〈０．０１），且血液透析病人ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的表达较腹膜透析病人高（ｔ＝２．１３４，     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠血清碱性成纤维细胞生长因子含量的变化

为探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在慢性低氧性肺动脉高压肺血管重建中的作用及机理，采用慢性低氧性肺动脉高压大鼠模型，用酶联免疫吸附法测定其血清ｂＦＧＦ含量，并用原位杂交法观察肺、心、脑、肾等器官ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达的变化。结果显示：低氧组血清ｂＦＧＦ含量（３５．９±２３．５ｐｇ．ｍｌ－１）明显高于对照组（６．３０±０．９７ｐｇ．ｍｌ－１，Ｐ＜０．００５）；低氧组肺小动脉ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达明显增强，而心、脑、肾ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达无变化。提示ｂＦＧＦ参与了慢性低氧性肺动脉高压肺小动脉重建的调控。     

转化生长因子—β1及其受体的表达与大鼠肝纤维化关系 …

探讨肝纤维化形成过程转化生长因子－β及其受体的表达对胶原合成的影响。方法：采用免疫组化和斑点杂交技术,观察实验性大鼠肝纤维化过程肝内ＴＧＦ－β１,ＴＧＦ－βＲⅡ和Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ及其蛋白表达的动态变化。结果随着肝纤维化程度的加重,肝内ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－βＲⅡ和Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ及其蛋白表达均明显增加,组间比较均有显著差异（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。ＴＧＦ－β１与Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲ     

IGF—1R mRNA在低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的表达

目的：探讨胰岛素样生长因子－１受体（ＩＧＦ－１Ｒ）ｍＲＮＡ在低氧大鼠肺小动脉壁的变化。方法：采用原位杂交方法检测低氧性肺动脉高压大鼠和正常大鼠肺小动脉壁ＩＧＦ－１Ｒ ｍＲＮＡ的表达,用图像分析技术检测肺小动脉的形态改变和半定量技术检测ＩＧＦ－１Ｒ ｍＲＮＡ的表达强度。结果：低氧性肺动脉高压在鼠肺小动脉管壁增厚、管腔狭窄,反映管壁增厚的两个指标ＭＴ％和ＭＡ％均显著高于正常对照组（Ｐ〈０．０５）。正常     

低氧对肺血管周细胞转化生长因子TGF-β1 mRNA及蛋白表达的影响

应用细胞培养、核酸分子原位杂交、免疫细胞化学、图像分析技术研究低氧对肺血管周细胞转化生长因子TGF－β1mRNA及蛋白表达的影响,探讨低氧条件下肺血管周细胞增殖、向平滑肌样细胞分化的机制。结果发现低氧（H）组周细胞内TGF－β1mRNA及蛋白表达量分别是常氧（N）组的1．35倍和1．23倍,差异均有显著意义（均为P＜0．01）。研究表明,低氧可促进脉血管周细胞TGF－β1mRNA及蛋白表达增高。TGF－β1表达增高可能是低氧诱导肺血管周细胞增殖、向平滑肌样细胞分化的机制之一。     

大鼠肾脏系膜细胞转染人TGF-β1基因可增强MMP-2表达

目的　研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ２）表达的影响。方法　采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将人ＴＧＦβ１基因转染培养的大鼠ＭｓＣ,经Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定其转染成功否;又分别应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．酶谱分析法检测阳性表达人ＴＧＦβ１的ＭｓＣＭＭＰ２ｍＲＮＡ、蛋白及酶活性变化。结果　成功获得稳定过表达人ＴＧＦβ１的大鼠ＭｓＣ克隆（ＭＴＧ１）,该细胞克隆的ＭＭＰ２ｍＲＮＡ．蛋白表达及其酶活性均获增强。结论　ＴＧＦβ１可增强ＭｓＣＭＭＰ２ｍＲＮＡ、蛋白表达,并提高其酶活性,这为进一步阐明ＴＧＦβ１在肾小球硬化发生机制中的作用提供了重要的实验手段和依据。     

肝硬变患者TGF—β1基因在外周血中表达及与PⅢP血清水平？…

目的：为验证肝纤维化动物模型和慢性肝病患者肝组织中,转化生长因子（ＴＧＦ－β１）的ｍＲＮＡ表达增强。作者分析肝硬变患者外周血ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ和血清中有活性的ＴＧＦ－β１蛋白及其结果与Ⅲ型前胶原Ｎ端肽血清水平间的关系。方法：肝硬变患者５０自愿者８人,取其外周血,分离单核细胞（ＰＢＭＣ）,提取ＲＮＡ,用巢式ＲＴＰＣＲ扩增ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ并测定血清中ＴＧＦ－β１和ＰⅢＰ的水平。结果：分析表明患者     

缺氧对肺动脉内皮细胞PDGF─A、─B链及其受体α、β亚基基因表达的影响

为了研究缺氧性肺动脉高压形成的机理，采用核酸分子杂交技术观察缺氧对肺动脉内皮细胞（ＰＡＥＣ）血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）－Ａ链、－Ｂ链及其受体α、β亚基基因表达的影响。结果表明低氧和无氧（２．５％Ｏ２和０％Ｏ２）１．５、３ｈＰＡＥＣ的ＰＤＧＦ－Ａ链ｍＲＮＡ表达显著增加（Ｐ＜０．０１，ｖｓ常氧组），而６～４８ｈＰＤＧＦ－Ａ链ｍＲＮＡ表达水平无明显改变。低氧和无氧１．５～４８ｈ均能显著地增加ＰＡＥＣ的ＰＤＧＦ－Ｂ链ｍＲ－ＮＡ表达（Ｐ＜０．０５）。常氧条件下ＰＡＥＣ均能低水平地表达ＰＤＧＦ－α亚基受体和β亚基受体，低氧和无氧则上调此两受体ｍＲＮＡ表达水平（Ｐ＜０．０５）。由此说明缺氧不仅能使ＰＡＥＣ“旁分泌”ＰＤＧＦ参与肺动脉平滑肌细胞增殖调节，也使ＰＡＥＣ通过“自分泌”ＰＤＧＤ及上调其膜上的ＰＤＧＦ受体基因表达，参与缺氧肺动脉内皮细胞自身功能调节，从而在缺氧性肺动脉高压肺血管收缩反应增强及肺血管结构改建中发挥重要作用。     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及TGF-β_1 mRNA的表达

目的：探讨增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１基因表达改变的相互关系及临床意义。方法：总ＲＮＡ抽提试剂盒抽提总ＲＮＡ,斑点杂交检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ稳态水平的改变。结果：Ｈ和Ｋ组织中ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ（１．１９７±０．２３７,１．２０４±０．２４３）表达均高于正常瘢痕和正常皮肤（０．３２７±０．０８１,０．３３１±０．０７８）,Ｐ＜０．０１;Ｋ选择性地Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强,而Ｈ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ表达均增强,导致ＫⅠ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ比值明显高于Ｈ（８．１６４±０．３００,１．６６６±０．２０１,Ｐ＜０．０１）。结论：Ｋ和Ｈ组织中胶原蛋白基因表达类型及强度不同,提示在Ｋ和Ｈ发生发展中具有不同的分子机理：ＴＧＦ－β１在增生性瘢痕疙瘩的发病机理中具有不同的分子机理;ＴＧＦ－β１在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的发病机理中具有一定作用。     

大鼠肾脏系膜细胞转染人TGF—β1基因可增强MMP—2表达

目的 研究转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）对培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）基质金属蛋白酶－２（ＭＭＰ－２）表达的影响。方法 采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将人ＴＧＦ－β１基因转染培养的大鼠ＭｓＣ,经Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定其转染成功否;又分别应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ．Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ,酶谱分析法检测阳性表达人ＴＧＦ－β１的ＭｓＣＭＭＰ－２ｍＲＮＡ蛋白及酶活性变化。结果成功获得稳定过     

转化生长因子大黄酸对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白功能的影响

目的 对人肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白－１（ＧＬＵＴ１）进行鉴定。研究ＧＬＵＴ１的作用特点,ＴＧＦ－β１对其影响以及大黄酸的干预作用。方法 分别用ＲＴ－ＰＣＲ,免疫荧光染色,流式细胞仪和［＾３Ｈ］－２脱氧葡萄糖摄入率,对系膜细胞ＧＬＵＴ１ｍＲＮＡ表达,蛋白质分布和功能进行鉴定。观察不同浓度ＴＧＦ－β１在加或不加大黄酸的情况下对系膜细胞葡萄糖摄入以及ＧＬＵＴ１ｍＲＮＡ表达的影响。结果 人类肾小球系膜     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺内血管内皮生长因子表达的变化

为了解低氧对肺内血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因表达的影响及ＶＥＧＦ在肺动脉高压发生中的作用，以常压低氧建立大鼠肺动脉高压模型，采用Ｅｌｉｓａ法检测大鼠肺动脉血血清ＶＥＧＦ的含量改变，以体外转录并用ＤＩＧ－ＵＴＰ标记的ＶＥＧＦｃＲＮＡ探针进行肺组织原位杂交，检测大鼠肺内ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达的变化。结果发现：低氧３周后，大鼠形成明显的肺动脉高压；大鼠肺动脉血血清中ＶＥＧＦ含量在低氧３周组为４２０．３±７３．１ｐｇ／ｍｌ，明显高于对照组的３２２．２±５８．１ｐｇ／ｍｌ（Ｐ＜０．０１）；原位杂交显示，低氧大鼠肺小动脉管壁出现明显的ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达，说明低氧在引起肺动脉高压的同时可刺激肺小动脉管壁，使ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达增强，导致ＶＥＧＦ的合成和分泌增加，后者可能在低氧性肺动脉高压发生过程中起一定的作用。     

肾皮质细胞膜TGFβ受体在大鼠糖尿病发病中的作用

目的研究肾皮质细胞膜转化生长因子β（ＴＧＦβ）受体（ＴβＲ）在大鼠糖尿病发病中的作用。方法观察单侧肾切除后建立的糖尿病大鼠４周后血糖、血胰岛素、血肌酐水平、体重、肾重、肾组织蛋白含量及血浆、肾皮质、髓质ＡＣＥ活性的变化;利用ＲＴ－ＰＣＲ检测肾皮质中ＴβＲⅠ、ⅡｍＲＮＡ表达,Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交检测肾皮质细胞膜ＴβＲⅠ蛋白表达。结果同对照组相比,糖尿病大鼠尽管体重进行性下降,肾重和肾组织蛋白含量却明显增加,肾皮质中ＡＣＥ活性也明显增加。ＲＴ－ＰＣＲ检测肾皮质内ＴβＲⅠ、ⅡｍＲＮＡ表达分别增加１．１２和４．０倍;Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交显示肾皮质细胞膜ＴβＲⅠ蛋白表达增加１．１０倍。结论糖尿病大鼠肾皮质中ＴＧＦβＲ表达明显上调,可能是高糖和局部ＲＡＳ活性增加共同作用的结果。     

慢性低氧大鼠肺动脉内皮素mRNA的表达及定位

目的；探讨慢性低氧大鼠肺动脉内皮素－１基因表达及分布。方法；采用生物素标记ｃＤＮＡ探针，对Ｗｉｓｔａｒ大鼠肺动脉进行原位杂交。结果：低氧１周组及２周组大鼠大部分肺动脉内皮细胞ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达呈阳性信号，面对照组大鼠仅极少数性信号（Ｐ〈０．０１）；低氧１周组大鼠部分显示强阳性信号。低氧１周组及低氧２周组大鼠部分肺产滑肌细胞呈现ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达阳性信号，而对照组大鼠则无阳性信号表达（Ｐ〈０．０     

低密度脂蛋白对肾小珠系膜细胞,TGF—β和FN mRNA表达的影响

目的：观察低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭＳＣ）生长及转化生长因子β（ＴＧＦ－β）和纤维连接蛋白（ＦＮ）基因表达的影响。方法：体外培养的ＭＳＣ培养液中加入ＬＤＬ共同孵育,采用＾３Ｈ－ＴｄＲ渗入法检测ＭＳＣ增殖情况,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＴＧＦ－β ｍＲＮＡ、ＦＮ ｍＲＮＡ的表达,应用斑点杂交法检测抗ＴＧＦ－抗体对ＦＮ ｍＲＮＡ表达的影响。结果（１）ＬＤＬ刺激ＭＳ     

TGF—β1mRNA在主动型Heymann肾炎中的表达

探讨ＴＧＦ－β１ＲＮＡ在不同病变阶段的主动型Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎肾组织内的表达情况。方法：建立ＡＨＮ模型,用ＲＴ－ＰＣＲ法ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ在病变第４、６、８、１２周Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎大鼠肾组织内的表达。结果：自ＡＨＮ诱发后第４周开始,ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ即有表达,至第８周达最高峰,第１２周时表达有所下调。     

RT—PCR检测人烧伤愈合中TGF—β1的表达

目的 通过对烧伤愈合不同阶段人皮肤组织中转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）ｍＲＮＡ表达变化的研究,阐明ＴＧＦ０－β１对促进愈合的调节作用。方法 取入深Ⅱ度烧伤后５ｄ、７ｄ、１２ｄ手术切除的烧伤区组织,采用ＲＴ－ＰＣＲ后电泳扫措求积方法,检测各时相烧伤皮肤组织ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达量的变化。结果 人深Ⅱ度烧伤皮肤ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ在伤后７ｄ出现表达高峰,５ｄ与１２ｄ也有表达增强。结论 ＴＧＦβ１结烧伤     

转化生长因子β1基因转染人肝癌细胞及其对MMP—2,9表达 …

目的 通过对人肝癌细胞株（ＳＭＭＣ－７７２１）转染ＴＧＦ－β１基因,观察该细胞ＭＭＰ－２,９表达的变化。方法 用电穿孔法进行基因转染,并经Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ法作鉴定,后分别应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ法观察该细胞株表达ＭＭＰ－２,９ｍＲＮＡ和ＭＭＰ－２蛋白的变化。结果 经转染ＴＧＦ－β１基因的细胞株ＭＭＰ－２ ｍＲＮＡ和蛋白表达均高于对     

急性白血病患者血清及骨髓TGF—γ1及其Ⅰ,Ⅱ型受体水平 …

目的 探讨转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）及其Ⅰ、Ⅱ型受体（ＴＧＦＲ１,ＴＧＦＲ２）对白血病预后的意义,方法 采用ＳＡＢＣ免疫组织化学方法观察ＴＧＦ－β１及ＴＧＦＲ１,ＴＧＦＲ２在急性白血病患者的表达情况,。并用ＥＬＩＳＡ法测定白血病患者血清及骨髓ＴＧＦ－β１水平。结果 白血病细胞ＴＧＦ－β１表达水平与对照组比较差异无显著性（Ｐ〉０．０５）。初 患者的ＴＧＦＲ１及ＴＧＦＲ２表达水平非常显著低于对     

脑溢安对大鼠脑出血后神经生长因子和白细胞介素—1β表达 …

目的：观察脑出血后神经生长因子（ＮＧＦ）和白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）的表达及中药制剂脑溢安的干预作用。方法：用Ⅶ型胶原酶于脑内定位注射诱导大鼠脑出血模型,通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交与ＥＬＩＳＡ方法检测出血后脑内ＮＧＦ与ＩＬ－１βｍＲＮＡ及其蛋白的表达与含量。结果：大鼠脑出血后第１ｄＮＧＦ与ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达增加,第２ｄＮＧＦｍＲＮＡ下降至正常组水平,第４ｄ、７ｄ低于正常组水平;ＩＬ－１βｍＲ