小儿肾母细胞瘤中SOCS-1和SOCS-3的表达及其临床意义

目的 探讨小儿肾母细胞瘤中细胞因子信号转导抑制因子-1(SOCS-1)和细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)的表达,以及与小儿肾母细胞瘤不同病理类型之间的内在关系.方法 应用RT-PCR法及Western-Blot法测定10例小儿正常肾脏组织、30例小儿肾母细胞瘤及瘤旁组织中sOCS-1和SOCS-3的表达.结果 与正常小儿肾脏组织(mRNA表达:0.721±0.183、0.694±0.148,蛋白表达:0.746±0.168、0.652±0.183)相比,肾母细胞瘤组织中SOCS-1和SOCS-3 mRNA表达(0.156±0.027、0.103±0.021)及蛋白的表达(0.205±0.079、0.185±0.041)均明显降低(P＜0.01).在肿瘤不同病理类型之间SOCS-1和SOCS-3mRNA的表达(预后良好型:0.175±0.086、0.149±0.100,预后不良型:0.128±0.074、0.091±0.067)有差异(P＜0.05).瘤旁组织SOCS-1 和SOCS-3mRNA的表达(0.572±0.154、0.315±0.137)及蛋白的表达(0.628±0.183、0.439±0.137)与正常肾脏组织有差异(P＜0.05).结论 SOCS-1和SOCS-3的表达下降可能与小儿肾母细胞瘤的发生、发展密切相关,与病理分期也有一定联系.

Abstract：

Objective To investigate the expression levels of suppressor of cytokine signaling-1 and suppressor of cytokine signaling-3 in the Wilms' tumor and to study the inherent relationship between the different pathological types. Methods The expression levels of SOCS-1 and SOCS-3 were assessed by RT-PCR and Western-Blot in ten normal kidney tissues, thirty nephroblastoma specimens and adjacent tissues. Results Compared to the normal kidney tissues(mRNA expressions: 0.721±0.183、0.694±0.148,protein expressions:0.746±0.168、0.652±0.183), the expressions of mRNA (0.156±0.027、0.103±0.021)and protein(0.205±0.079、0.185±0.041)of the SOCS-1 and SOCS-3 in nephroblastoma were significantly lower (P＜0.01). There were statistically significant between mRNA expressions and the different pathological types(FH:0.175±0.086,0、149±0.100,UH:0. 128±0.074、0.091±0.067) (P＜0.05).The difference betweenneuroblastoma and the normal tissues in expressions of mRNA (0. 572 ± 0. 154、0. 315 ± 0. 137)and protein(0. 628± 0. 183、0. 439 ± 0. 137)of the SOCS-1 and SOCS-3 were statistically significant (P＜0. 05). Conclusions The low SOCS-1 and SOCS-3 expressions may have a role in the development and progress of nephroblastoma, and the different pathological types.     

小儿肾母细胞瘤转化生长因子β1的表达及临床意义

目的　探讨转化生长因子 β1与小儿肾母细胞瘤的临床分期、病理类型及转移和预后之间的内在联系。方法　采用免疫组织化学过氧化物酶法 (SABC法 ) ,对 31例肾母细胞瘤组织标本进行转化生长因子 β1表达的检测 ,并对 2 1例患儿进行了 2年以上的随访。结果　肾母细胞瘤组织中 ,转化生长因子 β1的总阳性表达率为 38.7% ( 12 /31)。其中 ,肿瘤的临床分期之间和病理类型之间转化生长因子 β1的阳性表达均有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,而且与肿瘤是否发生肺部转移密切相关 (P <0 .0 5 )。转化生长因子 β1表达阳性者 2年生存率为 2 5 .0 % ( 2 /8) ,而表达阴性者生存率则为 92 .3%( 12 /13) ,二者比较存在显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　小儿肾母细胞瘤组织中存在转化生长因子 β1的高表达 ,与肿瘤的临床分期、病理类型相关 ,而且与肿瘤细胞的侵袭能力及病程密切相关。转化生长因子 β1有可能成为肾母细胞瘤预后的重要指标之一。     

肾母细胞瘤Th1/Th2类细胞因子的表达

目的：观察肾母细胞瘤患儿体内Th1/Th2类细胞因子的表达情况。方法：用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术,检测正常儿及肾母细胞瘤患儿外周血、肿瘤组织及瘤旁正常肾组织中Th1/Th2类细胞因子的基因表达。结果：肾母细胞瘤患儿外周血、肿瘤组织及瘤旁肾组织均出现明显的Th2类细胞因子偏移趋势。结论：肾母细胞瘤患儿体内Th2类细胞因子的强势表达,可能与肾母细胞瘤的发生发展有关。     

小儿肾母细胞瘤nm23基因蛋白表达的研究

目的探讨nm23基因蛋白在小儿肾母细胞瘤中的表达及其与肿瘤临床分期、组织结构型、淋巴结转移关系,为判断预后提供依据。方法应用免疫组织化学技术(S-P法)检测24例小儿肾母细胞瘤中nm23基因蛋白表达情况。结果在24例小儿肾母细胞瘤标本中,I、II期及无转移组nm23基因蛋白表达明显高于III期及转移组。nm23基因蛋白阳性表达与肿瘤转移抑制正相关,与肾母细胞瘤分期负相关(P<0.05)。结论检测小儿肾母细胞瘤中nm23基因蛋白表达水平,对评价肿瘤细胞生物学行为,预测肿瘤进展有重要意义。     

小儿肾母细胞瘤转化生长因子β1的表达及临床意义

目的探讨转化生长因子β1与小儿肾母细胞瘤的临床分期、病理类型及转移和预后之间的内在联系.方法采用免疫组织化学过氧化物酶法(SABC法),对31例肾母细胞瘤组织标本进行转化生长因子β1表达的检测,并对21例患儿进行了2年以上的随访.结果肾母细胞瘤组织中,转化生长因子β1的总阳性表达率为38.7%(12/31).其中,肿瘤的临床分期之间和病理类型之间转化生长因子β1的阳性表达均有统计学意义(P＜0.05),而且与肿瘤是否发生肺部转移密切相关(P＜0.05).转化生长因子β1表达阳性者2年生存率为25.0%(2/8),而表达阴性者生存率则为92.3%(12/13),二者比较存在显著性差异(P＜0.05).结论小儿肾母细胞瘤组织中存在转化生长因子β1的高表达,与肿瘤的临床分期、病理类型相关,而且与肿瘤细胞的侵袭能力及病程密切相关.转化生长因子β1有可能成为肾母细胞瘤预后的重要指标之一.     

信号转导子与转录激活子3和缺氧诱导因子-1α在神经母细胞瘤中的表达及其意义

目的检测信号转导子与转录激活子3(STAT3)与缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因在神经母细胞瘤(NB)中的表达,探讨STAT3 mRNA及HIF-1αmRNA的表达与NB的发生、发展及预后的关系。方法收集30例行手术切除的NB患儿的瘤体组织(研究组)及瘤旁组织(对照组)。其中预后不良型(UFH)20例,预后良好型(FH)10例。应用反转录PCR法,检测STAT3 mRNA、HIF-1αmRNA在瘤体组织及相应的瘤旁组织中的表达情况。结果 STAT3 mRNA水平在对照组、FH组和UFH组的表达分别为0.114±0.002、0.267±0.073、0.529±0.325,3组间比较差异有统计学意义(F=22.00,P=0.001);HIF-1αmRNA水平在对照组、FH组和UFH组的表达分别为0.519±0.251、0.673±0.124、0.779±0.145,3组间比较差异有统计学意义(F=111.82,P=0.001)。且FH组和UFH组STAT3 mRNA和HIF-1αmRNA表达水平分别与对照组比较差异均有统计学意义(Pa<0.05),FH组与UFH组比较差异亦有统计学意义(Pa<0.05)。研究组STAT3 mRNA、HIF-1αmRNA相对表达水平分别为0.530±0.051、0.489±0.032,二者表达呈正相关(r=0.497,P<0.05)。结论 STAT3与HIF-1α在NB中过量表达,NB患者预后较差,STAT3与HIF-1α可相互作用促进肿瘤的发生发展。PCR技术可检测NB中STAT3 mRNA及HIF-1αmRNA表达水平,判断其生物学行为,用于指导临床。     

肾母细胞瘤中CyclinD1蛋白的表达及其意义

目的探讨CyclinD1蛋白在肾母细胞瘤中表达及其意义。方法将28例肾母细胞瘤和19例瘤旁肾组织制作组织芯片,并用免疫组织化学方法检测其中CyclinD1蛋白及p53蛋白的表达。结果CyclinD1和p53蛋白在肾母细胞瘤和瘤旁肾组织标本中的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05),在肾母细胞瘤不同分化程度组差异亦有统计学意义(P<0.05)。CyclinD1蛋白表达与p53蛋白表达呈正相关(P<0.05)。结论CyclinD1及p53可作为判断肾母细胞瘤分化程度的标志物,CyclinD1蛋白异常表达及p53突变可能在肾母细胞瘤发生中发挥重要作用。     

端粒酶在肾母细胞瘤的表达及其临床意义

采用端粒重复序列扩增法检测小儿肾母细胞瘤、正常肾以及胚胎肾组织的端粒酶表达 ,并与肿瘤临床生物学特征对比研究 ,以探讨端粒酶在肾母细胞瘤发生、发展中的作用及其表达的临床意义。材料与方法收集我科 1996～ 1998年间手术切除肾母细胞瘤组织标本 14例 ,其中上皮型 4例、间质型 2例、胚基型 5例、混和型 3例。瘤旁正常肾组织 6例。所有的瘤组织及瘤旁肾组织都经术后病理验证。胚胎肾组织 4例 ,由本院节育病房堕胎后提供。全部标本取材后立即置入- 80℃冰箱冷冻保存。端粒酶活性测定试剂盒 (ＴＲＡＰｅｚｅｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｄｅｔｅ…     

小儿肾母细胞瘤血管内皮生长因子的表达及临床意义

目的探讨血管内皮生长因子与小儿肾母细胞瘤的临床分期、病理类型及转移和预后之间的内在联系.方法采用免疫组织化学过氧化物酶法(SABC法),对31例肾母细胞瘤组织标本进行血管内皮生长因子表达的检测,并对21例患儿进行了2年以上的随访.结果肾母细胞瘤组织中,血管内皮生长因子的总阳性表达率为67.74%(21/31).其中,肿瘤的临床分期之间和病理类型之间血管内皮生长因子的阳性表达均无统计学意义(P＞0.05),而与肿瘤是否发生肺部转移密切相关(P＜0.05).血管内皮生长因子表达阳性2年生存率为27.27%(3/11),而阴性表达者生存率则为80.0%(8/10),二者比较存在显著性差异(P＜0.05).结论小儿肾母细胞瘤组织中存在血管内皮生长因子的高表达,与肿瘤的临床分期、病理类型无关,而与肿瘤细胞的侵袭能力密切相关.其有可能成为肾母细胞瘤预后的重要指标之一.     

肾母细胞瘤VEGF及其受体Flk-1的表达及其临床意义

目的 探讨肾母细胞瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Flk-1)的表达和肿瘤微血管密度(MVD)的临床意义.方法 应用免疫组织化学(SABC)法检测33例肾母细胞瘤、瘤旁组织和6例正常肾组织中VEGF、Flk-1表达和MVD计数.观察并分析三个指标之间的相关性,同时分析其临床意义.结果 33例肿瘤组织VEGF阳性表达率81.8%,Flk-1阳性表达率69.7%,瘤旁组织VEGF阳性表达率9.1%,Flk-1阳性表达率6.1%,6例正常肾组织VEGF及Flk-1均为阴性表达,三者之问差异具有统计学意义.肿瘤组织MVD值29.7±12.4,瘤旁组织MVD值10.3±9.6,正常肾组织MVD值9.8±2.3.肿瘤组织的血管密度与后二者比较差异具有统计学意义.VEGF表达与Flk-1、MVD计数正相关,Flk-1与MVD表达正相关,VEGF、Flk-1表达在不同临床分期,及转归之问均具有显著性差异.结论 肾母细胞瘤中VEGF及其受体Flk-1呈高表达,血管生成增多,VEGF、Flk-1表达与MVD密切相关,提示VEGF及其受体Flk-1参与肾母细胞瘤的血管形成过程,促进血管生成,与预后相关.     

肾母细胞瘤血小板衍化内皮细胞生长因子mRNA的表达及其临床意义

目的探讨小儿肾母细胞瘤中血小板衍化内皮细胞生长因子（PD-ECGF）mRNA的表达及其临床意义。方法用逆转录多聚酶链反应（RTPCR）方法检测30例肾母细胞瘤组织、8例瘤旁、4例无瘤肾组织的PD-ECGF mRNA的表达情况，并分析PD-ECGF mRNA的表达与肾母细胞瘤的病理分型、临床分期、转移及预后之间的关系。结果所有标本均有不同程度的PD-ECGF mRNA的表达，表达程度呈肿瘤组织、瘤旁组织、无瘤组织依次降低。肿瘤组织是瘤旁组织的1．22倍（t=0．855，P〉0．05）；瘤旁组织是无瘤对照组的2．07倍（t=2．65，P〈0．05）；肿瘤组织是无瘤对照组的2．53倍（t=2．05，P〈0．05）。在肾母细胞瘤组织中PD-ECGF mRNA的表达与病理分型无关（F=0．691，P〉0．05），与临床分期也无关（F=0．05，P〉0．05），但有转移者的PD-ECGFmRNA的表达高于无转移者。全部病例获得随访，平均随访50,2个月（17～75个月），术中已发现转移和术后转移复发共18例，死亡7例。所有转移、复发患儿的PD-ECGF mRNA水平是无转移、复发患儿的1．72倍（t=2．2766，P〈0．05）；是无瘤对照组的2．9倍（t=2．608，P〈0．05）。用PD-ECGF mRNA的表达预测肾母细胞瘤转移、复发及死亡的敏感性为83．3％，特异性80．0％。结论PD-ECGF mRNA在肾母细胞瘤组织中呈高表达，与其预后密切相关。提示PD-ECGF mRNA的表达对判断肾母细胞瘤预后有一定的意义。     

肾母细胞瘤RASSF1A基因启动子区甲基化研究

目的了解肾母细胞瘤RASSF1A基因启动子区甲基化情况。方法手术获取9例肾母细胞瘤及瘤旁残留肾组织,提取DNA后用亚硫酸氢钠处理,巢式PCR扩增RASSF1A基因启动子区DNA片段,测序,检测启动子区甲基化情况。结果发现1例16个CpG岛位点中有10个存在甲基化(10/16),相应瘤旁残留肾组织无甲基化(0/16);在另1例瘤组织中检测到12个CpG岛位点存在甲基化(12/16),但仅有8个CpG岛位点与上例相同,另外4个位点不同。结论肾母细胞瘤中RASSF1A基因启动子区存在甲基化,与瘤旁残留肾组织甲基化情况有差别。     

The expression and clinical significance of PRL-3 in Wilms tumor in children

目的 探讨促肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)在小儿肾母细胞瘤、瘤旁组织中的表达,及其与肾母细胞瘤临床分期、病理类型、复发及化疗的关系.方法 用逆转录聚合酶链反应法、免疫组化S-P法从基因和蛋白水平检测39例肾母细胞瘤及30例瘤旁组织中PRL-3的表达,并对其与临床分期、病理类型、复发及化疗等进行相关性分析.结果 本组共检测肾母细胞瘤39例,其中30例为新鲜标本,9例为病理科存档石蜡标本;新鲜瘤旁组织30例.肿瘤复发者再次切除获得新鲜复发瘤标本3例.检测结果:PRL-3 mRNA在肾母细胞瘤组织中的表达明显高于瘤旁组织(f=5.16,P＜0.05),且随临床分期的增高其表达逐渐上升,经Spearman相关分析PRL-3 mRNA表达与临床分期呈正相关(r's=0.857,P＜0.05);肿瘤组织恶性程度越高阳性表达率越高(P2tail=0.0049＜0.05);复发的肿瘤组织及其原发瘤均为阳性表达;术前经过化疗的组织表达明显低于未经化疗者( P2tail=0.0348＜0.05);在蛋白水平的检测也得到了与上述一致的结果.结论 PRL-3基因和蛋白在肾母细胞瘤中明显表达,且与肾母细胞瘤的临床分期、恶性程度及是否复发密切相关,提示PRL-3 mRNA和蛋白检测不但有助于对肾母细胞瘤临床分期、恶性程度的判断及复发可能性的预测,还可为术后治疗方案的制定提供有力的依据.     

小儿先天性肾积水可溶性粘附分子的检测及意义

目的　检测中、重度小儿先天性肾积水血清可溶性细胞间粘附分子 1(sICAM 1)、可溶性血管间粘附分子 1(sVCAM 1)及尿液可溶性细胞间粘附分子 1(uICAM 1)和可溶性血管间粘附分子 1(uVCAM 1)的水平 ,并分析它们与中、重度小儿先天性肾积水的关系。方法　用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定中、重度小儿先天性肾积水以及正常儿童的血清及尿液中可溶性ICAM 1和VCAM 1的水平。结果　中、重度小儿先天性肾积水sICAM 1的水平分别为 717.39± 10 2 .33ng/ml、770 .4 5± 12 2 .92ng/ml,明显高于正常对照组5 94 .83± 10 7.99ng/ml,有显著性意义 (P <0 .0 1) ,中、重度积水组之间无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;sVCAM 1检测结果显示中、重度积水组分别为 4 34.16± 118.4 1ng/ml、4 5 6 .11± 137.2 7ng/ml,与正常对照组 35 0 .0 2± 10 0 .38ng/ml之间无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;uICAM 1和uVCAM 1检测结果显示疾病组与正常对照组之间无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;两种粘附分子的血清与尿液检测值之间无相关性。结论　中、重度小儿先天性肾积水sICAM 1的水平明显升高 ,提示sICAM 1在本病的病理发展过程中起重要作用 ,可作为中、重度肾积水导致肾功能损害的临床评价指标。     

SOCS-3在肥胖及糖尿病发病中的作用

SOCS-3是细胞因子信号传导抑制因子(SOCS)家族成员之一,作为JAK-STAT通路的负反馈抑制因子,一方面在瘦素抵抗所致的肥胖中起重要作用,并且在其他细胞因子刺激下调节脂代谢;另一方面SOCS-3作用于胰岛素与受体结合到最后靶分子过程中的多个环节,抑制胰岛素信号传导,导致胰岛素抵抗,从而引起2型糖尿病。但SOCS-3与1型糖尿病的关系尚不明确。     

哮喘小鼠肺组织GATA-3及Th2型细胞因子表达的意义

目的探讨Th2特异性转录因子GATA-3及Th2型细胞因子（IL-5、13）在支气管哮喘（哮喘）小鼠中的表达及意义。方法BALB/c小鼠16只随机分为对照组和模型组。卵清蛋白致敏制备哮喘模型。HE染色观察小鼠肺组织病理变化,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小鼠肺组织GATA-3 mRNA表达,酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠肺组织IL-5、-13蛋白的表达。结果HE染色示模型组支气管周围见大量炎性细胞浸润,而对照组则不明显。与对照组相比,模型组GATA-3 mRNA和IL-13蛋白表达量明显增加（Pa〈0.05）。结论哮喘小鼠肺部存在GATA-3高表达,GATA-3可直接调控IL-5、-13表达,参与哮喘呼吸道炎症的发生。     

肾母细胞瘤WT1基因研究进展

肾母细胞瘤,又称肾胚瘤、Wilms瘤,是小儿最常见的恶性肿瘤之一。肾母细胞瘤由后肾胚基及其类似肾母细胞瘤的成分发展而成,约75％的患儿发病年龄在5岁以下,平均发病年龄3.5岁,罕见于新生儿。肾母细胞瘤发生机制目前还不完全清楚,其假说包括“二次突变学说”（two hit model）和“肾源性剩余学说”（nephrogenic rest）。但任何一种假说单独解释肿瘤的发病机制都有其局限性。