婴幼儿耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染状况和耐药基因的研究

目的了解感染婴幼儿的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)耐药性和耐药基因,明确检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)和甲氧西林耐药基因(mecA)的临床价值。方法用金黄色葡萄球菌乳胶凝集试验和梅里埃鉴定金黄色葡萄球菌,同时用纸片扩散法完成12种常用抗生素的药敏试验。对头孢西丁的结果,按当年CLSI标准执行,用于判断菌株甲氧西林的耐药性。采用PBP2检测试剂盒检测PBP2a蛋白,PCR检测mecA基因。结果 2007-2009年婴幼儿共检出245株金黄色葡萄球菌,其中MRSA检出率为17.6%(43/245)。MRSA对庆大霉素、复方新诺明、克林霉素、红霉素、氯霉素的耐药性均显著高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(P<0.05),其余抗生素的差异无统计学意义(P>0.05),43株MRSA的PBP2a蛋白和mecA基因的检测结果全为阳性,阳性率为100%。结论用头孢西丁(30μg)能有效地筛查MRSA,检测PBP2a蛋白和mecA基因均能正确地确认MRSA。且检测PBP2a蛋白方便快捷,特异性好,值得临床推广。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌不同菌株基因系列与耐药表型的关系

目的了解我院2015年1月1日至2015年12月31日临床分离的金黄色葡萄球菌中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MethicillinResistant Staphylococcus Aureus, MRSA)mecA基因的携带情况;了解不同菌株基因序列不同和耐药表型之间的关系,从而指导临床合理使用抗菌药物。方法采用全自动微生物分析系统VITEK 2-COMPACT对临床分离细菌进行鉴定和药敏试验;用检测苯唑西林的MIC的方法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。并用WHONET 5.6软件进行数据统计分析;随机选择MRSA50株,用PCR方法扩增MRSAmecA基因,并将mecA基因阳性的PCR扩增产物测序,进行多序列比对分析。结果 2015年1月至12月分离金黄色葡萄球菌260株,其中耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)140株,占53.8%(140/260),未检测到耐万古霉素的金黄色葡萄球菌。50株MRSA标本全部为mecA基因阳性,其中21例测序结果与GENBANK上的MRSAmecA基因组序列(NCBI序列号:NC-002952)分别进行比对,同源性均为99%～100%。四种不同耐药表型对应的菌株进行基因测序,多序列比对结果得出MRSAmecA基因组序列(NCBI序列号:NC-002952)的1332位点的碱基A的缺失,可能和磷霉素耐药有关,MRSA mecA基因组序列(NCBI序列号:NC-002952)的1801位点的缺失碱基G,可能和莫西沙星耐药有关。结论本院细菌耐药性比较严重,持续开展耐药监测,对合理使用抗菌药物和控制细菌耐药性十分重要。金黄色葡萄球菌基因的改变引起氨基酸的改变,从而引起菌株耐药表型的改变,对指导临床及时调整用药,合理使用抗生素具有非常重要的意义。     

两种葡萄球菌致医院感染的分布及耐药趋势

目的 :了解我院金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌所致感染的发病情况及耐药趋势 ,以便更好地采取控制措施。方法 :对我院 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 2年 12月送检的各类标本中分离的 2 19株葡萄球菌的分布及药敏结果进行分析。结果 :两种葡萄球菌所致感染的菌株分布以呼吸道最多见 ,其次为伤口 ;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)和耐甲氧西林表皮葡萄球菌 (MRSE)有逐年增加的趋势 ;两种葡萄球菌对阿米卡星耐药率 <10 % ,对利福平和环丙沙星耐药率 <5 0 % ,对其余抗生素均显示很高的耐药率 ;未发现对万古霉素的耐药株。结论 :葡萄球菌的耐药情况严重 ,MRSA和MRSE菌株的增多应引起高度重视 ,临床治疗必须根据药敏试验结果选择合适的抗生素。     

2008-2011年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药分析

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药趋势,指导临床合理应用抗菌药物.方法对2008-2011年间分离的金黄色葡萄球菌进行回顾性耐药性分析.结果4年中共培养出362株MRSA,MRSA对青霉素、苯唑西林、头孢西丁完全耐药; MRSA对左氧氟沙星、环丙沙星、红霉素、克林霉素耐药率>80%;对庆大霉素、四环素、利福平耐药率>40%;对万古霉素、替考拉宁、利奈唑烷完全敏感.结论应根据药敏试验结果选择抗茵药物,控制耐药菌株的播散和流行,治疗金黄色葡萄球菌感染时应筛查MRSA.     

青铜峡地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测及耐药性分析

目的 调查青铜峡地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染情况及耐药状况,为临床治疗及预防MRSA菌株感染提供依据.方法 按<全国临床检验操作规程>培养分离菌种,对临床分离的金黄色葡萄球菌进行药敏试验的同时进行MRSA的检测,头孢西丁抑菌圈直径≤19mm为MRSA菌株.药敏试验采用K-B单片琼脂扩散法.结果 144例金黄色葡萄球菌中,MRSA 94例,占65.3%,其中医院感染69例,占73.4%(69/94),社区感染25例,占26.6%(25/94);MRSA菌对12种常规抗菌药物除万古霉素、呋喃妥英、利福平外均具有较高的耐药率.结论 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是造成医院感染的重要病原菌,并且多重耐药现象严重.     

院内外环境分离金黄色葡萄球菌的耐药性及毒素基因检测

目的检测医院及环境样中金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）耐药基因及毒素基因,了解其分布情况。方法采用多重聚合酶链反应（multiplex polymeras chain reaction,PCR）技术分别检测耐药基因mecA、femA与毒素基因TSST、PVL。结果 83株金黄色葡萄球菌,仅3株（3.61%）菌检出mecA基因,22株菌（26.50%）检出femA基因,15株菌（18.07%）同时检出mecA与femA基因。医院样本检出12株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）,3株甲氧西林耐药凝固酶阴性的金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant and coagulasenegative Staphylococcus aureus,MRCNS）。83株分离自医院及环境样本SA,2株分离自咽拭子的样本检出TSST基因,检出率4.54%（2/44）;1株分离自血液的样本检出PVL基因,检出率2.27%（1/44）,其余菌株未检出毒素基因。结论院内样本中,部分菌株携带mecA基因,环境样本未发现携带mecA菌株,两者存在差异。83株SA菌,毒素基因携带率较低。检测耐药、毒素基因携带率,为临床治疗及院内感染控制,食物中毒溯源提供依据。     

ICU中MRSA耐药基因检测及其PFGE分型

目的对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株进行分子分型,探讨ICU中MRSA医院感染的特点和流行规律。方法采用表型筛选和PCR扩增mecA基因方法鉴定MRSA菌株,脉冲场凝胶电泳方法(PFGE)进行分子分型。结果12株金黄色葡萄球菌表型筛选为MRSA,MRSA产生A型、B型、C型和D型4种耐药表型,优势耐药模式是A型(75.0%),MRSA对苯唑西林、阿莫西林/克拉维酸和氨苄西林/舒巴坦等10种抗生素产生100%耐药性,11株MRSA携带mecA基因,携带率为91.7%,PFGE指纹图谱分两型,分别为R1型和R2型,11株MRSA为R1型(91.7%),R1型各株间相似度为100%。结论ICU可存在MRSA爆发流行,MRSA产生多重耐药性(MDR),MRSA携带mecA基因可表现为MDR,PFGE分型是理想的分子流行病学溯源手段。     

金黄色葡萄球菌的耐药分析

目的:研究医院感染金黄色葡萄球菌(SA)的耐药现状,并指导临床合理用药。方法:从本院感染的标本中分离的129株金黄色葡萄球菌进行14种抗生素的药敏试验,然后进行分析。结果:129株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)有87株,占67.4%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)有42株,占32.6%;129株菌对万古霉素耐药率为0;MARS对利福平和多西环素的耐药率分别为16.1%和37.9%;余下11种抗生素的耐药率大于50%。结论:MSSA对大部分抗生素仍保持校好的敏感性,而MRSA表现为多重耐药性,万古霉素是最理想的药物,其耐药率为0。     

汕头地区36株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药情况分析

目的：了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA,36株）的耐药情况。方法：用聚合酶链反应扩增MRSA携带的mecA基因,并结合PBP2′胶乳凝集试验对临床分离的MRSA进行鉴定。微量肉汤稀释法测定16种抗菌药物对MRSA的最低抑菌浓度。结果：36株MRSA对β-内酰胺类抗生素,庆大霉素及氟喹诺酮类抗生素的耐药率均在80.0%以上,而对利福平的耐药率则较低（41.7%）。MRSA对半合成的四环素耐药率较低,对多西环素和米诺环素的耐药率分别为5.6%和0.0%,未检出万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌。结论：汕头地区分离的MRSA耐药情况严重。     

肺结核感染金黄色葡萄球菌的基因分型及耐药研究

目的通过对肺结核患者分离出的金黄色葡萄球菌进行基因谱型和药敏检测研究,了解肺结核并发金黄色葡萄球菌的院内流行状况。方法对,晦床分离出的30株金黄色葡萄球菌进行药敏试验和SCCmec基因盒的多重PCR检测。结果药敏结果显示30株金黄色葡萄球菌对青霉素和甲氧西林的耐药率最高。甲氧西林的耐药率达到62．8％。MecA阳性菌株SCCmec的分型显示均为Ⅱ型或Ⅲ型,且所占比例相近,未见Ⅰ型和Ⅳ型。结论肺结核患者并发金黄色葡萄球菌耐药性普遍,MecA基因介导的MRSA在分离菌株分型以Ⅱ型或Ⅲ型为主。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测及耐药性分析

目的 分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的临床感染现状及耐药性.方法 采用美国MicroScan全自动细菌分析仪鉴定细菌种类,并用纸片扩散法进行药敏试验.结论 2006～2007年共分离出金黄色葡萄球菌270株,其中,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)174株,检出率为64.4%.所有的分离株对万古霉素都敏感;MRSA对 红霉素、克林霉素、庆大霉素、复方磺胺、利福平和左旋氧氟沙星的耐药率分别为94.8%、71.8%、67.8%、85.1%、15.5%和48.9%.结论MRSA的分离率显著增高,耐药性严重,临床细菌室应高度重视MRSA的检测.     

金黄色葡萄球菌临床分离株肠毒素基因的调查分析

摘要：目的检测临床分离的金黄色葡萄球菌（SA）肠毒素基因,了解肠毒素基因的携带情况与SA耐药的关系。方法采用聚合
酶链反应检测SA mecA基因和肠毒素基因,了解肠毒素基因在SA中分布的状况,并对其进行耐药性分析。结果67株甲氧西
林耐药的SA（MRSA）和57株甲氧西林敏感的SA（MSSA）肠毒素基因携带率（100% vs 83.5%）无明显差异（χ2=0.203,P>0.05）。
肠毒素基因检出率为93.5%（116株）,其中SEA、SEB、SEC、SED和SEF的检出率分别为90.5%、6.9%、61.3%、5.2%和25.9%,未
检测出SEE基因。同时检出2种及2种以上的肠毒素基因的菌株有78株（67.2%）,以携带SEA+SEC、SEA+SEF和SEA+SEC+
SEF基因为主,检出率分别为33.6%、7.8%和13.8%。与携带一种肠毒素基因的菌株耐药率相比,携带多种肠毒素基因的菌株耐
药率呈上升趋势,其中携带SEA+SEC+SEF的菌株对复方新诺明的耐药率为75.0%,高于单独携带SEA（28.6%）、SEA+SEC
（38.7%）的耐药率,具有统计学差异（P<0.05）。携带SEA+SEC+SEF、SEA+SEF、SEA的菌株对阿米卡星耐药率分别为75.0%、
77.0%和21.5%,前两者与携带SEA的菌株相比有显著差异（P<0.05）。结论临床分离的SA中携带多种肠毒素基因的菌株在耐
药率上高于只携带一种肠毒素基因的菌株,提示肠毒素在SA耐药中起重要作用。
     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测及其耐药性研究

目的 分析耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）检测方法及其耐药性。方法 采用头孢西丁、苯唑西林纸片法和PCR3种方法检测2005年安徽地区12家医院临床分离133株金黄色葡萄球菌中MRSA菌株;琼脂稀释法测定金黄色葡萄球菌对17种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）。结果头孢西丁、苯唑西林纸片法及PCR法对MRSA检出率分别为52．63％、54、13％、51．87％,3种方法对MRSA检出率差异无显著性。以PCR法检出mec—A基因为判断MRSA的金标准,头孢西丁纸片法灵敏度为100％、特异度为98．44％、符合率为99、24％,r（正确诊断指数）=0．9844。苯唑西林纸片法的灵敏度为98．55％、特异度为93、75％、符合率为96．24％,r=0．923。除了青霉素-G、氨苄西林、替考拉宁、万古霉素以外,其余抗生素的耐药率,MRSA组均明显高于MSSA组（P〈0．01）。结论 头孢西丁纸片法是筛选和确认MRSA菌株的一种可靠、简便的方法;MRSA为多重耐药菌株,临床应加强检测。     

儿科住院患者标本中分离葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性

目的了解儿科住院患者标本中分离出的葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,检测红霉素诱导克林霉素耐药的发生情况。方法使用纸片扩散法测定葡萄球菌对红霉素和克林霉素的耐药性,使用D-试验方法检测红霉素诱导克林霉素耐药表型。结果585株葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌(SA)406株,其中甲氧西林敏感的SA(MSSA)387株,甲氧西林耐药的SA(MRSA)19株;凝固酶阴性的葡萄球菌(CNS)179株,其中甲氧西林敏感的CNS(MSCNS)20株,甲氧西林耐药的CNS(MRCNS)159株。红霉素、克林霉素均敏感的葡萄球菌117株(20.0%),红霉素和克林霉素均耐药的葡萄球菌282株(48.2%);红霉素耐药、克林霉素敏感的葡萄球菌186株(31.8%),其中D-试验阳性占82.3%(153/186)。MSSA,MRSA,MSCNS和MRCNS中表现为诱导克林霉素耐药分别为92.2%(94/102),50.0%(1/2),77.8%(7/9)和69.9%(51/73)。结论在儿科住院患者标本分离的对红霉素耐药、克林霉素敏感的葡萄球菌中,对克林霉素诱导耐药率高,对该类菌株应采用D-试验检测,以指导临床合理使用抗生素。     

金黄色葡萄球菌耐药机制的研究

目的探讨金黄色葡萄球菌的耐药性及耐药机制。方法按NCCLS推荐的琼脂平皿对倍稀释法测定分离鉴定的198株金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药性（MIC值）;用Nitroeephin纸片法测定各菌株产酶情况,统计对苯唑西林不同耐药水平的金黄色葡萄球菌产酶率并分析其耐药水平和产酶率的相关关系;PCR测定各菌株含mecA基因情况。结果198株金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药率为64．65％;128株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）中,高耐菌株为118株（92．19oA）,低耐株为10株（7．81%）。敏感株产酶率为58．57％（41株）,高耐株产酶率53．39％（63株）,低耐株产酶率40．00％（4株）,苯唑西林敏感株与高耐株之间产β-内酰胺酶的差别有统计学意义,前者高于后者;含mecA基因的高耐株占95．76％（113／118）、低耐株占60．00％（6／10）、敏感株占10．00％（7／70）,高耐株与敏感株含mecA基因的差别有统计学意义,前者高于后者。结论金黄色葡萄球菌耐药机制主要是产β-内酰胺酶和mecA基因的表达。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的多重聚合酶链反应检测方法

目的 建立多重聚合酶链反应9multiplex poly-merase chain reaction,mt-PCR)快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。方法 对临床分离的63株金黄色葡萄球菌，采用mt-PCR快速检测MRSA的决定基因mec和辅助基因femA,用16SrRNA基因作内参照。结果 mt-PCR的预期扩增结果为耐药株出现3条扩增区带，敏感株只有femA基因和16SrRNA基因出现2条扩增区带。在63株金黄色葡萄球菌中，药敏法34.9%（22/63）耐药；mt-PCR增增mecA基因34.5%(23/63)阳性，femA基因和16SrRNA基因100%阳性；单引物PCR与mt-PCR两者阳性扩增符合率为100%。结论 采用多重聚合酶链反应，可在同一扩增体系内同时检出mecA基因，femA基因，对MRSA临床株的快速，及时检出，有效控制MRSA造成的感染，限制其传播等具有重要的现实意义。     

压电基因传感器阵列检测MRSA的实验研究

目的：探讨以压电传感阵列技术检测耐甲氧西林葡萄球菌的可行性。方法：收集临床64株葡萄球菌标本，对其耐药标志基因mecA基因和金黄色葡萄球菌特有基因femA增后应用压电传感器阵列进行检测，并以PCR电泳检测作参照，与目前采用的常规药物敏感试验进行对比分析。结果：传感器分析与PCR电泳分析结果完全一致，而此两种方法与常规培养加药敏法比较。结果略有差异。所有64株葡萄球菌中，2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的mecA为阴性，2株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA)的mecA为阳性，1株耐甲氧西林凝固酶性葡萄球菌（MRCNS）的mecA为阴性；2株甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）的mecA为阳性。结论：以压电传感阵列技术同时检测femA基因和mecA基因，既可鉴定出是否为金黄色葡萄球菌，又可判断其耐药类型，能为危重病人感染MRSA时的诊断和治疗提供依据。     

三重聚合酶链反应快速诊断耐甲氧西林葡萄球菌感染

目的建立一种能快速有效地对葡萄球菌感染进行病原体诊断的方法.方法利用三重聚合酶链反应技术(Triplex PCR)同时检测葡萄球菌特异性16S rRNA 基因、金黄色葡萄球菌特异性Sa442基因和编码青霉素结合蛋白(PBP2a)的mecA基因.结果 84株葡萄球菌的16S rRNA 基因100%阳性,其中33株金黄色葡萄球菌的Sa442基因100%阳性,mecA基因阳性率为78.8%.51株凝固酶阴性葡萄球菌的Sa442基因100%阴性,mecA基因阳性率为76.5%.30株其他临床常见菌16S rRNA、Sa442、mecA基因100%阴性.结论该技术具有简便、快速、特异性强等特点,是一种非常有效的耐甲氧西林葡萄球菌感染快速诊断方法.