小儿肺热咳喘口服液对甲型H1N1流感病毒感染小鼠的影响

目的:观察小儿肺热咳喘口服液对甲型H1N1流感病毒感染小鼠的影响。方法:以甲型H1N1流感病毒滴鼻感染ICR小鼠造成肺炎模型,造模同时开始ig小儿肺热咳喘口服液20,10,5 mL.kg-1,以达菲为阳性对照,观察肺部炎症、计算肺指数,死亡率和生命延长率,酶联免疫法检测血清中细胞因子的含量。结果:小儿肺热咳喘口服液治疗性给药后能明显降低流感病毒FM1株和PR8株感染后小鼠的肺指数、降低死亡率、延长平均存活天数,而对小鼠血清中的细胞因子含量没有明显影响。结论:小儿肺热咳喘口服液对甲型H1N1流感病毒感染小鼠造成的病毒性肺炎具有明显的治疗作用。     

抗病毒口服液防治甲型流感病毒感染的药效学研究

目的:观察抗病毒口服液对体内外感染甲型H1N1流感病毒模型的防治作用.方法:体内实验采用甲型H1N1流感病毒FM1及PR8株经滴鼻感染的70只ICR小鼠来制备肺炎模型,随机分为正常组,模型组,利巴韦林组,双黄连组,抗病毒口服液2倍量、1倍量、1/2倍量组,每组10只.经预防给药后,计算各组小鼠肺指数;经治疗给药后计算各组小鼠死亡率和平均存活时间.体外采用甲型H1N1流感病毒及H3N2病毒感染MDCK细胞致细胞病变CPE模型,经治疗给药后,计算半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC50)及治疗指数(therapeutic index,TI).结果:体内实验中,抗病毒口服液各剂量组与模型组、正常组比较,能明显降低流感病毒感染后小鼠肺指数,降低死亡率,延长平均存活时间(P<0.05).体外感染实验中,抗病毒口服液给药后可明显降低病毒感染后细胞的病变情况.结论:抗病毒口服液对甲型H1N1流感病毒体内外感染有较好的治疗和预防作用.     

基于microRNAs的石荠苧总黄酮抗流感病毒性肺炎作用机制研究

目的从微小核糖核酸(micro RNAs,mi RNAs)角度研究石荠苧总黄酮抗流感病毒性肺炎作用机制。方法设立对照组、模型组和石荠苧总黄酮组,将甲型流感病毒小鼠肺适应株A/PR/8/34经鼻滴入模型组和石荠苧总黄酮组小鼠,建立小鼠流感病毒感染性肺炎模型,观察比较石荠苧总黄酮对流感病毒感染小鼠肺指数和血清白细胞介素-6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)水平的影响;采用高通量测序法和荧光定量PCR法,检测各组小鼠肺组织中mi RNAs的表达丰度差异;采用miranda、mirbase、targetscan 3个数据库预测差异mi RNAs的靶基因,并通过KEGG分析靶基因的相关功能;采用蛋白印迹法验证相关蛋白的表达。结果与模型组相比,石荠苧总黄酮可显著抑制流感病毒感染引起的小鼠肺指数和血清中细胞因子增加,调节异常表达的mi RNAs水平趋于正常;KEGG分析这些mi RNAs所调控的靶基因主要富集于JAK-STAT、TLR3等信号通路;Western blotting证实石荠苧总黄酮可调整感染小鼠异常表达的靶蛋白水平。结论石荠苧总黄酮可通过调控小鼠体内mi RNAs的表达发挥抗流感病毒性肺炎作用。     

小儿肺热咳喘口服液防治甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠的研究

目的:评价小儿肺热咳喘口服液对免疫低下小鼠感染甲型H1N1流感病毒的防治作用。方法:ICR小鼠sc环磷酰胺造成免疫低下,以甲型H1N1流感病毒滴鼻感染造成肺炎模型,造模同时及造模前ig 20,10,5 mL·kg-1小儿肺热咳喘口服液4 d后观察肺部炎症、计算肺指数,死亡率和生命延长率,Real-time RT-PCR法检测肺组织中病毒载量,酶联免疫法检测血清中免疫因子的含量。结果:小儿肺热咳喘口服液治疗性给药或预防性给药后能明显降低流感病毒FM1株和PR8株感染后免疫低下小鼠的肺指数、降低死亡率、延长平均存活天数、显著降低小鼠肺组织中的病毒载量,明显升高小鼠血清中CD4/CD8的比值。结论:小儿肺热咳喘口服液对甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠造成的病毒性肺炎具有明显的防治作用。     

喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒FM1株致小鼠肺炎的影响

目的:评价喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒FM1株致小鼠肺炎模型的药效作用。方法:将ICR小鼠随机分为正常组、模型组、达菲组(27.5 mg·kg~(-1)·d~(-1))、喘可治注射液组(1.5 m L·kg~(-1)·d~(-1))。除正常组外,其余各组采用甲型H1N1流感病毒FM1株滴鼻感染ICR小鼠造成病毒性肺炎模型,分别进行死亡保护实验、治疗性给药实验和预防性给药实验。死亡保护实验中每组20只小鼠,以2倍半数致死量(LD_(50))流感病毒液滴鼻感染,感染后当天开始给药,每天1次,连续4 d,观察感染后14 d内动物的死亡情况,并计算死亡率、死亡保护率;治疗性给药实验中每组10只小鼠,以0.8倍LD_(50)流感病毒液滴鼻感染,感染后当天开始给药,每天1次,连续4 d,于实验第5天处死小鼠,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肺组织中白细胞介素-8(IL-8)含量及脑组织内发热介质前列腺素E_2(PGE_2),精氨酸加压素(AVP)的含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织内相对病毒载量;预防性给药实验中每组10只小鼠,分组当天开始给药,每天1次,连续5 d,末次给药1 h后,除正常组外,其余各组以0.8倍LD_(50)流感病毒滴鼻感染ICR小鼠,感染后第4天称重后处死小鼠,计算各组肺指数、脾指数、胸腺指数及肺指数抑制率,Real-time PCR检测肺组织内相对病毒载量。结果:与正常组比较,模型组小鼠IL-8,PGE2含量,肺指数及肺组织内流感病毒株病毒载量均显著升高(P0.01);与模型组比较,治疗性给予喘可治注射液可明显降低感染后小鼠的死亡率、肺组织内IL-8含量、脑组织内PGE_2含量及肺组织中流感病毒病毒载量(P0.05,P0.01);预防性给予喘可治注射液可显著提高感染小鼠的胸腺指数(P0.01),明显降低感染小鼠肺指数及肺组织中流感病毒病毒载量(P0.05);两种给药方式均可明显减轻支气管、血管周围及肺泡间质等组织炎性细胞浸润,减少管腔内红细胞渗出。结论:喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒感染所致病毒性肺炎小鼠模型有较好的治疗和预防作用,其作用机制可能与减轻炎症反应和抑制病毒复制有关。     

银翘散对呼吸道黏膜免疫功能低下合并甲型流感病毒感染模型小鼠的影响

目的观察银翘散对呼吸道黏膜免疫功能低下合并流感病毒感染模型小鼠的影响,并探讨其作用机制。方法复制寒冷刺激致小鼠上呼吸道黏膜免疫功能低下模型,采用甲型流感病毒鼠肺适应株A/PR/8/34(H1N1)通过鼻腔接种方式感染模型小鼠,将小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药(利巴韦林)组及银翘散组,各给药组给予相应药物灌胃,观察各组小鼠死亡率、生命延长率、平均存活时间及肺指数。结果与模型组比较,阳性药组、银翘散组小鼠死亡率明显降低(P0.05,P0.01),存活时间延长;阳性药组、银翘散组小鼠肺指数明显降低(P0.05,P0.01),肺指数抑制率分别为35.5%、24.6%。结论银翘散通过上调模型小鼠上呼吸道局部黏膜免疫功能,达到防治上呼吸道感染的作用。     

金振口服液抗甲型H1N1流感病毒作用实验研究

目的 观察金振口服液对甲型H1N1流感病毒抑制作用.方法 采用体外抗病毒实验,观察金振口服液对流感病毒的抑制作用;采用体内实验,以流感病毒感染小鼠,观察小鼠生存时间、死亡率及肺组织病变程度.结果 金振口服液体外对甲型H1N1流感病毒有一定抑制作用,体内则能明显延长感染小鼠的生存时间,显著降低肺湿质量(P＜0.05、0.01),减轻肺组织病变程度.结论 金振口服液体内外均有一定的抗甲型H1N1流感病毒作用.     

小儿清瘟解热颗粒体内外抗病毒作用及其机制分析

目的:观察小儿清瘟解热颗粒对甲型H1N1流感病毒感染小鼠的影响。观察小儿清瘟解热颗粒体外抗病毒作用。方法:ICR小鼠随机分为7组,分别为正常组、模型组、利巴韦林组(82.5 mg·kg-1),小儿感冒宁合剂组,小儿清瘟解热颗粒高、中、低剂量组(12.8,6.4,3.2 g·kg-1),每组10~12只,体内抗病毒方面,以甲型H1N1流感病毒滴鼻感染ICR小鼠造成肺炎模型,造模同时开始给予小儿清瘟解热颗粒12.8,6.4,3.2 g·kg-1ig,以利巴韦林为阳性药,观察肺部炎症,计算肺指数,死亡率和生命延长率,酶联免疫法检测血清中细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),一氧化氮(NO),γ干扰素(IFN-γ)的含量;体外抗病毒方面,采用CEP法观察病毒致细胞病变情况。结果:与模型组比较,小儿清瘟解热颗粒治疗性给药后能明显降低流感病毒FM1株感染后小鼠的肺指数,降低死亡率,延长平均存活天数;小儿清瘟解热颗粒中、低剂量组可明显升高感染小鼠血清中IFN-γ,NO含量(P0.05,P0.01)。体外抗病毒方面,小儿清瘟解热颗粒可明显抑制甲型H1N1流感病毒(FM1株,PR8株,brisbane/59/2007株),甲型H3N2型流感病毒(brisbane/10/2009株),乙型流感病毒(江西修水/32/2009株),副流感病毒1型(PIV-1),柯萨奇病毒B族2型(Cox B4)致细胞的病变作用。结论:小儿清瘟解热颗粒对甲型流感病毒感染小鼠造成的病毒性肺炎具有明显的治疗作用,对体外多种病毒也有一定程度的抑制作用。     

清解防感颗粒对流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠的死亡保护及肺脏保护作用

目的:研究清解防感颗粒抗流感病毒的作用。方法:采用亚洲甲型鼠肺适应株(A/PR8/H1N1)滴鼻感染小鼠制作小鼠病毒性肺炎模型,观察药物延长感染小鼠生命的作用以及光学显微镜下观察小鼠肺组织的病变程度并评分,计算小鼠肺指数,比较组间肺指数的变化趋势及评分差异。结果:清解防感颗粒8g/kg、4g/kg剂量组可显著延长感染小鼠生命、降低死亡率,降低感染小鼠的肺指数,明显增加体重并降低小鼠肺部病变指数。结论:清解防感颗粒对小鼠感染流感病毒PR8有明显的死亡保护及肺脏保护作用。     

喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠肺炎的影响

目的:观察喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠肺炎模型的预防和治疗作用。方法:采用腹腔注射环磷酰胺联合甲型H1N1流感病毒FM1株滴鼻感染ICR小鼠造成免疫低下小鼠肺炎模型,分别经治疗性给药4 d和预防性给药5 d后,取各组小鼠肺组织称重,计算肺指数、肺指数抑制率, RT-PCR法检测各组小鼠肺组织中相对病毒载量。结果:采用甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠后,肺指数明显增高,脾、胸腺指数降低,三者与环磷酰胺对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01)。治疗性给予喘可治注射液4d后,小鼠肺指数有所降低,与模型对照组比较差异无统计学意义(P0.05);脾指数和胸腺指数均升高,其中脾指数与模型对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。预防性给予喘可治注射液5 d,肺指数明显降低,与模型对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01);小鼠肺组织中FM1株流感病毒病毒载量也明显降低,与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05),病毒载量抑制率可达58.68%。结论:喘可治注射液对流感病毒感染免疫低下小鼠肺炎模型有较好的防治作用。     

众生丸在小鼠体内抗H5N1亚型禽流感病毒的实验研究

目的：研究众生丸在小鼠体内对禽流感病毒H5N1亚型的抑制作用。方法：以达菲为阳性对照,观察众生丸对小鼠流感病毒性肺炎的抑制作用和对染毒小鼠的死亡保护作用,从而判定其抗流感病毒作用。结果：与病毒对照组相比较,众生丸可降低禽流感病毒性肺炎小鼠肺指数,调节T淋巴细胞亚群,降低小鼠血清中TNF-α含量,促进IFN-γ和IL—10产生,减轻肺间质、肺泡内炎症;众生丸低剂量组对H5N1亚型禽流感病毒所致小鼠的死亡有降低作用,并延长生存时间。结论：众生丸对H5N1禽流感病毒感染小鼠所致肺病变具有抑制作用。     

瓜蒌甘草颗粒对流感病毒肺炎小鼠保护作用研究

目的观察瓜蒌甘草颗粒对流感病毒肺炎小鼠的影响。方法以小鼠经鼻吸入流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株(FM1)复制小鼠病毒性肺炎模型,并用瓜蒌甘草颗粒进行治疗,设置利巴韦林对照组,观察其对病毒肺炎小鼠的死亡率、体重、肺指数及病毒血凝滴度的影响。结果瓜蒌甘草颗粒治疗组较模型组死亡率明显降低,平均生存天数明显延长,体重下降得到明显改善,肺指数和血凝滴度都明显降低。结论以清热化痰、解毒扶正为法的瓜蒌甘草颗粒治疗小鼠流感病毒肺炎疗效肯定。     

栀子提取物抗病毒试验研究

目的：观察栀子提取物ZG对小鼠流感病毒性肺炎模型的影响和体外对多种病毒致细胞病变作用的影响。方法：小鼠经滴鼻感染流感病毒造成肺炎模型,观察肺部炎症、死亡率和生命延长率,体外抗病毒试验采用CPE法,按Reed-Muench方法计算TC_O,TC_5O,IC_5O,TI。结果：栀子提取物ZG对流感病毒致小鼠肺部炎症有明显抑制作用,可明显降低流感病毒感染后小鼠的死亡率、延长存活时间,同时降低小鼠血清中NO含量；在体外对流感病毒等6种病毒引起的细胞病变有明显抑制作用。结论：栀子提取物ZG对流感病毒等6种病毒有明显抑制作用,其对小鼠流感病毒性肺炎的抑制作用与降低血清中NO含量有关。     

利巴韦林注射液与参麦注射液单用及联合应用对甲型H1N1流感小鼠重症肺炎的疗效研究

目的:观察利巴韦林注射液(利巴韦林)与参麦注射液(参麦)单用及联合应用干预甲型H1N1流感重症肺炎小鼠的疗效,探讨两药治疗小鼠甲型H1N1流感重症肺炎的最优方案。方法:C57BL/6小鼠72只随机分为4组,模型组、参麦组、利巴韦林组、利巴韦林联合参麦组,20μL 2×105TCID50病毒液滴鼻建立流感重症肺炎小鼠模型。利巴韦林于感染前12 h腹腔注射给药,参麦于感染后72 h腹腔注射给药,各药均1次/d,连续给药7 d。通过观察各组小鼠的存活率与体重、肺湿干比、肺组织病理等结果,评价利巴韦林、参麦两药单用及联合应用干预小鼠流感重症肺炎的疗效。结果:模型组小鼠全部死亡,肺组织病理显示,双肺弥漫性炎性反应细胞浸润,肺泡上皮细胞脱落、坏死,支气管上皮细胞变性,伴有水肿、瘀血、出血;利巴韦林组小鼠存活率为100%,肺湿干比明显降低(P0.01),但肺组织病理显示肺损伤严重,与模型组无异。参麦组小鼠存活率为10%,肺湿干比低于模型组(P0.05),肺部病理损伤严重。利巴韦林联合参麦组小鼠存活率、肺湿干比与利巴韦林组相似,但联合用药组小鼠感染第10 d后体重迅速恢复(P0.05),肺组织病理则显示肺脏轻度水肿,支气管、血管周围炎性细胞浸润较少,支气管上皮细胞变性、肺实变范围较小,与模型组小鼠相比肺损伤明显减轻。结论:利巴韦林与参麦联合应用对流感重症肺炎小鼠不仅具有明显的死亡保护作用,而且可减轻肺部病理损伤,促进感染小鼠恢复,缩短病程,二者联合应用疗效优于单独用药。     

黄连香薷饮抗流感病毒作用的拆方研究

目的：对古方黄连香薷饮进行拆方研究,筛选出抗甲型H1N1流感病毒作用的有效中药组合。方法：以甲型H1N1流感病毒滴鼻感染小鼠,建立小鼠病毒性肺炎模型,并以黄连香薷饮全方及拆方组合进行给药治疗,同时设立阳性对照组和正常对照组,计算各组小鼠的肺指数及肺指数抑制率,并观察小鼠肺组织病理变化。结果：与模型组比较,阳性对照组、香薷组、黄连-厚朴组及黄连香薷饮全方组小鼠的肺指数均显著降低,肺指数抑制率分别为31.43%、47.74%、47.74%和41.74%,且肺部病变明显减轻。结论：香薷单味药、黄连-厚朴药对和黄连香薷饮全方均具有显著的抗甲型H1N1流感病毒的作用。     

艾灸抗小鼠流感病毒性肺炎的实验研究

目的观察艾灸对流感病毒所致小鼠病毒性肺炎的作用，为临床防治呼吸道病毒感染提供实验依据。方法用甲型流感病毒[FM]株感染小鼠，制作病毒性肺炎模型，观察艾灸、艾灸加病毒唑、单纯病毒唑和病毒对其肺指数以及死亡保护率、生命延长率的影响。结果艾灸疗法组和病毒唑＋艾灸疗法组小鼠肺指数显著低于病毒组（P＜0．05）；病毒唑组与病毒对照组比较，有显著的差异（P＜0．01）；艾灸疗法组和病毒唑＋艾灸疗法组与病毒唑组无明显差异（P＞．05）；艾灸疗法和病毒唑＋艾灸疗法组能明显提高感染小鼠的存活率和延长存活时间（P＜0．05），上述两种疗法与病毒唑治疗效果无统计学差异。结论艾灸疗法能有效保护流感病毒感染的小鼠肺组织以及其生命，提示艾灸疗法是治疗呼吸道病毒感染的有效方法之一。     

中西医结合治疗甲型H1N1病毒性肺炎37例临床体会

目的：探索甲型H1N1流感的中西医治疗优势与差距;方法：对37例甲型H1N1病毒性肺炎临床诊断病例,随机的抽取7例进行咽拭子病毒核酸检测确诊为甲型H1N1流感病毒性肺炎.临床诊断病例在给予西药预防继发性细菌感染、平喘对症治疗的同时,依据舌脉症象,分期辨证,给予中药汤剂口服治疗;临床确诊病例在给予西药预防继发性细菌感染,平喘对症治疗的同时,给予神经氨酸酶抑制剂奥司他韦抗病毒治疗.结果：确诊病例除1例因呼吸衰竭转重症监护室外,余6例均治愈,平均住院天数15天,临床诊断病例30例,除2例因呼吸衰竭转重症监护室外,余28例治愈出院,平均住院天数12.5天;结论：中西医结合对重症甲型H1N1病毒性肺炎进行分期辨证论治与单纯西药抗病毒对症治疗相比,其疗效无显著差异,住院天数明显缩短.     

针灸“肺俞”穴对病毒性肺炎小鼠肺指数及相关炎性因子的影响

目的:观察针灸"肺俞"穴对病毒性肺炎小鼠肺指数及其肺组织和血清中白介素(IL)-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平的影响,探讨针灸抑制病毒性肺炎的效应机制,为针灸介入小儿病毒性肺炎的防治提供实验依据。方法:健康KM小鼠采用流感病毒亚洲甲型鼠肺适应株滴鼻感染复制病毒性肺炎模型,造模后小鼠分为模型组、西药组、电针组和艾灸组,同时选健康KM小鼠作为正常对照组,每组10只。电针组及艾灸组电针及艾灸小鼠背部双侧"肺俞"穴,每日灸或针刺两次,共治疗1周;西药组腹腔注射炎琥宁,每日1次,治疗1周。计算各组小鼠肺指数,采用固相夹心法酶联免疫吸附实验检测小鼠肺组织及血清中IL-10、TNF-α水平,观察各组肺组织病理变化。结果:模型组肺指数及血清TNF-α、肺组织TNF-α及IL-10水平较正常组明显升高(P0.01)。西药组、电针组及艾灸组肺指数及血清TNF-α均较模型组降低(P0.01),电针组较西药组降低更明显(P0.05)。造模后血清IL-10较空白组变化不明显(P0.05),各组治疗后血清IL-10较模型组升高(P0.01)。各治疗组肺组织TNF-α及IL-10均较模型组降低(P0.05,P0.01)。正常组小鼠肺脏无充血水肿,模型组肺脏充血水肿明显,西药组、电针组和艾灸组小鼠肺脏轻度充血水肿。结论:针灸"肺俞"穴辅助治疗病毒性肺炎可能是通过抑制或调节相关炎性因子IL-10、TNF-α水平来发挥作用,同时通过进一步抑制TNF-α的过量产生而减轻病毒感染引起的免疫病理损害。