激素对女性生殖道组织Hox基因表达的调控

同源框基因（Homeobox gene，Hox gene）是胚胎发育过程中编码对尿殖管、外生殖管分化发育有重要意义的一系列转录因子。该轴打开的时间及模式可决定副中肾管的发育过程，而激素是Hox基因正常的表达调控者。雌、孕激素及其受体可直接与Hox基因中雌激素受体和孕激素受体结合位点结合而调控Hox基因的表达；此外，孕激素还对内膜腺上皮Hox基因通过间质细胞介导起负调控作用；雄激素可通过雄激素受体介导机制调节Hox基因的表达；维生素D则通过与受体蛋白结合DNA结合蛋白在蛋白基因水平上起作用。     

错配修复基因启动子甲基化对食管癌发生的作用

目的探讨食管癌组织中错配修复基因1(hMLH1)启动子区甲基化状态及与食管癌发生、发展的关系。方法应用甲基化特异性PCR和免疫组织化学链霉菌抗亲生物素蛋白-过氧化物酶连接法(S—P法)，检测92例人食管癌组织中hMLH1启动子甲基化状态及蛋白表达。结果92例食管癌组织中hMLH1基因启动子区甲基化有30例，占32．6％。HMLH1基因启动子区甲基化与食管癌的临床病理无明显相关性；hMLH1基因蛋白表达阳性率为76．1％；hMLH1基因蛋白表达阴性的22例病例中，17例发生了甲基化(77．6％)；而70例hMLH1基因蛋白表达阳性者中，只有13例发生甲基化(18．6％)。结论食管癌组织中hMLH1基因启动子区甲基化与hMLH1基因蛋白表达缺失密切相关，是导致其错配修复功能缺陷的重要原因之一，hMLH1基因启动子区甲基化可能在食管癌的发生和发展过程中发挥重要作用。     

P53、P21^WAF/CIP1和Cyclin D1基因蛋白在沥青烟暴露小鼠肺组织中的表达

[目的]探讨沥青烟对小鼠肺组织形态及基因蛋白P53、P21^WAF/CIP1和Cyclin D1表达的影响。[方法]建立沥青烟亚急性染毒小鼠模型，将120只昆明种健康小鼠随机分为3组，即1个对照组和2个染毒组，染毒组进行不同浓度（55、165mg,／m^3）和不同时间（30、60d）染毒，光镜下观察肺组织形态改变，采用免疫组化S-P法，对P53、P21、Cyclin D1染色，观察P53、P21和Cyclin D1基因蛋白表达。[结果]不同浓度、不同时间染毒小鼠肺组织形态有不同程度改变，高浓度染毒组出现不典型增生。小鼠肺组织P53基因蛋白表现为低浓度染毒30d组，未见阳性表达；高浓度染毒60d组呈强阳性表达（P〈0．01）。P21^WAF/CIP1基因蛋白表达低浓度染毒30d呈阳性表达；高浓度染毒60d组表达明显下调（P〈0．01）。Cyclin D1基因蛋白表达同P53基因蛋白表达。[结论]随着染毒浓度和染毒时间的增加，肺组织增生逐渐明显，P53和Cyclin D1基因蛋白的表达呈上升趋势，P21^WAF/CIP1呈下降趋势。     

上海地区1株SARS-Cov N基因序列分析及表达

目的通过基因克隆、序列分析以及在大肠埃希菌中的表达和分离纯化，研究上海地区1株SARS-Cov N蛋白编码基因变异情况，为SARS-Cov N蛋白应用于检测SARS感染作基础。方法用RT-PCR法从患者血清样品中扩增获取SARS-Coy N蛋白编码基因，并重组于质粒pGEX-2T。双脱氧法双向测定N基因序列，与GenBank公布的89株SARS-Cov N基因序列比对分析；重组N蛋白编码基因在E.coli中表达，亲和层析法分离纯化表达产物。结果RT-PCR扩增获取SARS-Cov N基因1269bp，测定的核酸序列与GenBank中公布SARS-Cov N基因序列比对，变异位点数1～4bp，其中导致1～3个编码氨基酸突变。重组N基因的表达质粒pGEX-2T／SARS-Cov N转化大肠埃希菌JM109，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导，N基因在大肠埃希菌中高效表达，经亲和层析，得纯度〉90％的表达产物，表达的融合蛋白分子量为74000Da。结论上海地区1株SARS-Cov N蛋白编码基因与已公布的89株毒株核酸同源性为99．92％～99．68％，编码氨基酸同源性为99．8％～99．3％；该基因在E．coli中表达，经分离纯化得到高纯度表达产物，为进一步应用于SARS-Coy感染检测打下基础。     

恶性间皮瘤p16蛋白表达的研究

目的研究恶性间皮瘤与ｐ１６蛋白表达的关系。方法利用微波煮沸脱交联ＳＰ法，对３４例恶性间皮瘤病理标本进行了ｐ１６蛋白表达的研究。结果ｐ１６蛋白阳性表达率５３％（１８／３４），４７％（１６／３４）的病例细胞内缺乏ｐ１６蛋白的表达。多数存在ｐ１６蛋白表达的病例没有发现ｐ５３基因的点突变；反之，存在ｐ５３基因的点突变的病例多数都没有ｐ１６蛋白的表达。ｐ１６蛋白表达与ｐ５３基因点突变之间呈明显的负相关关系。结论恶性间皮瘤可能同时存在ｐ５３和ｐ１６基因的异常，肿瘤组织细胞内缺乏ｐ１６蛋白的表达可能与ｐ１６基因的纯合缺失有关。     

GFP-MOMP融合蛋白在真核细胞中的表达与鉴定

目的 构建GFP-MOMP融合蛋白真核表达重组质粒pEGFP／MOMP，利用脂质体体外转染Heb细胞，观察MOIMP在真核细胞中的表达。方法 PCR法从D型Ct基因组中扩增MOMP全长基因，克隆至pEGFP真核表达载体的相应位点，进行序列分析和酶切鉴定后，脂质体介导重组体pEGFP／MOMP转染Heb细胞，荧光显微镜、Western blot鉴定MOMP基因的表达。结果 PCR扩增得到约1．2kb的特异性MOMID基因片段；成功的构建真核表达重组体pEGFP／MOMP；重组质粒pEGFP／MOMP在HeLa表达出约71kDa大小的融合蛋白。结论 GFP-MOMP能够在体外真核细胞中表达，为进一步研究该蛋白的生物学功能及核酸疫苗的制备提供实验依据。     

羟基磷灰石经氯磷酸二钠表面改性对成骨细胞的影响

目的研究经氯磷酸二钠表面改性的羟基磷灰石对成骨细胞生长、贴附、蛋白合成方面及骨吸收功能调节方面的影响。方法将成骨细胞分别复合羟基磷灰石与氯磷酸二钠复合制成氯磷酸二钠－羟基磷灰石表面，扫描电镜进行细胞形态学观察，通过MTT法和碱性磷酸酶活力检测考察表面改性对成骨细胞生长、增殖和活性影响；同时应用荧光定量PCR比较两组材料表面成骨细胞OPG和RANKL基因表达，考察表面改性对成骨细胞骨吸收功能调节方面的影响。结果扫描电镜显示成骨细胞生长和增殖良好，无形态学异常；统计学检验（P〉0．05），MTT检测和ALP活性两组之间各时间点均没有统计学差异；基因检测发现成骨细胞OPG基因表达组间有显著差异，P〈0．05；RANKL基因表达组间无明显差异，P〉0．05。结论氯磷酸二钠复合在羟基磷灰石表面对成骨细胞在材料表面的生长、增殖和蛋白合成功能没有显著影响；但是表面改性可促进成骨细胞OPG基因表达，这可能是氯磷酸二钠影响成骨细胞的破骨细胞调节功能的机理之一。     

Leptin功能之一：leptin与摄食,能耗及代谢

Ｌｅｐｔｉｎ蛋白是肥胖基因的表达产物，研究表明，ｌｅｐｔｉｎ对能量代谢本重有重要的调节功能；ｌｅｐｔｉｎ主要通过干预食物摄入、能量消耗及代谢等方面调节能量平衡及体重本文仅从以上三方面对ｌｅｐｔｉｎ的功能及其作用机制作一综述，     

沙眼衣原体60kDa外膜蛋白基因的克隆与表达

目的 克隆和表达沙眼衣原体60kDa外膜蛋白(Omp2)基因。方法 D型沙眼衣原体感染McCoy细胞后，抽提基因组DNA，经PCR扩增出omp2基因片段，与pUCm—T克隆载体连接，酶切纯化后克隆到原核表达载体pQE30，构建重组表达载体pQE30／omp2，PCR、酶切及测序鉴定。IPFG诱导表达，SDS—PAGE检测有无蛋白的表达。结果 (1)获得长约1650bp的PCR产物，酶切结果显示所构建的重组质粒已成功地克隆了omp2基因，序列分析结果与已知omp2序列相同；(2)SDS—PACE检测表达产物，在相对分子量60kDa处有表达条带；(3)诱导表达之菌体超声破碎后，目的蛋白主要以包涵体形式存在。结论 获得了Ct omp2基因片段，并在E．coli M15中成功表达。     

HCV重组基因在大肠杆菌中表达及应用

目的；探讨HCV重组基因在大肠肝菌中的表达条件及其表达蛋白抗原在HCV抗体检测中的应用。方法：将含有丙型肝炎病毒E基因、C基因和部分NS基因重组质粒的大肠杆菌以不同方式培养表达，对表达的蛋白抗原进行提取和纯化，并用间接ELISA和十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS－PAGE）对表达产物进行了初步检定。结果：表达产物中含有特异性的HCV抗原。对40份国家参比阴性血清检测符合率为97．5％，40份阳性参比血清中检出率为92．5％。     

MCM2蛋白在宫颈癌中的表达及意义

目的:探讨微小染色体维持蛋白2(MCM2)在宫颈上皮内瘤变、宫颈癌中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法:收集2008～2009年承德医学院附属医院经病理证实的20例高度宫颈上皮内瘤变(HSIL)、40例宫颈鳞癌、20例正常宫颈组织,应用S-P免疫组化方法检测以上组织标本中MCM2的表达情况。结果:MCM2的阳性表达指数从正常宫颈鳞状上皮、HSIL到宫颈鳞癌逐渐升高(P0.01),其在宫颈鳞癌中的阳性表达与肿瘤的分化程度及淋巴转移相关(P0.01;P0.05),而与患者的年龄、肿瘤的体积及临床分期无关。结论:MCM2能够反映宫颈鳞状上皮细胞增殖程度,可作为宫颈鳞癌新的肿瘤标记物应用于临床,以评估病变的恶性程度。     

Survivin在卵巢癌中的表达及其与诊疗、预后关系的研究

目的:观察正常卵巢、良性卵巢上皮性肿瘤、上皮交界性肿瘤、卵巢上皮性癌组织中凋亡抑制基因Survivin的表达,探讨Survivin的表达与卵巢上皮性癌诊疗、预后的关系。方法:用免疫组织化学法(SP法)检测32例正常卵巢、30例良性卵巢上皮性肿瘤、11例卵巢上皮交界性肿瘤、52例卵巢上皮性癌组织中Survivin的表达。结果:Survivin蛋白在卵巢上皮交界性肿瘤和卵巢上皮性癌组织中的表达率分别为63.6%、69.2%,明显高于卵巢上皮良性肿瘤及正常卵巢组织的表达率6.25%、30.0%(P<0.05)。卵巢上皮性癌组织中的Survivin表达率稍高于卵巢上皮交界性肿瘤,两者差异无显著性(P>0.05)。Sur-vivin蛋白的表达与肿瘤病理分级、淋巴结转移、腹水有无、临床分期及手术后残余肿瘤的大小相关(P<0.05)。结论:Survivin蛋白在卵巢癌的发生、发展中起一定作用,可以作为早期诊断、评价疗效、判定预后的重要指标。     

胸椎结核不同部位脓肿的形态分析

目的探讨胸椎结核不同部位脓肿的形态特点,为诊断、鉴别诊断及其治疗提供参考. 方法对1993～2002年我院收治的胸椎结核患者 215例作回顾性分析,总结其不同部位的脓肿形态. 结果胸椎结核有87%合并椎旁脓肿或流注脓肿,并且其形态、部位、大小和流注方向各异,各具其相应的临床意义. 结论脓肿是胸椎结核的一大临床症状和体征,其形态、大小和流注部位与胸椎的解剖结构、生理功能、周围组织和病情的轻重紧密相关;同时也是鉴别诊断的要点,正确了解它对疾病的诊断和指导治疗有着深远的意义.     

Survivin与妇科肿瘤关系的研究进展

Survivin是新近发现的一种凋亡抑制基因,其不仅具有凋亡抑制作用,而且对细胞分裂和血管形成起重要作用.Survivin在胚胎发育过程及人体的多数肿瘤组织中均有大量表达,但在大多数正常终末分化组织中无表达;在常见的妇科肿瘤组织中表达也有升高,且其在肿瘤组织中的表达与肿瘤的临床分期、组织学分级及预后有关,并与肿瘤耐药性相关,可望成为肿瘤治疗的基因靶.Survivin的作用机制目前仍不清楚,该文对其生物学作用及在常见妇科肿瘤中的表达情况作以综述.     

RhoC及PTEN在非小细胞肺癌中的表达及临床意义的探讨

目的 观察Ras同源性原癌基因C（RhoC）及张力蛋白同源的磷酸酶基因（PTEN）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达程度及其与临床病理学之间的关系,探索RhoC与PTEN在肺癌发生及演变过程中的作用机制及两者之间的关系,为非小细胞肺癌的发生机制提供理论基础,并为NSCLC的早期诊断提供新思路.方法 （1）试验分组：60例非小细胞肺癌标本及40例正常对照肺组织.（2）采用免疫组织化学方法检测RhoC及PTEN表达情况及其与临床病理学之间的关系. 结果 60例NSCLC组织中, RhoC蛋白阳性表达率分别为68.33%（41/60）,显著高于正常肺组织,RhoC在NSCLC组织中阳性表达率与吸烟史、年龄及组织学类型无关,而与癌组织的分化程度、临床分期密切相关.PTEN在非小细胞肺癌组织中的阳性率为36.70%,显著低于非肺癌组织的阳性率80.00%（P〈0.01） PTEN的表达与肺癌患者的细胞分化程度、TNM分期、肿瘤直径相关.RhoC和PTEN两者表达强度之间呈显著负相关（P〈0.01）.结论 （1）在非小细胞肺癌组织中RhoC的高表达与PTEN的低表达密切相关,可能参与了NSCLC的演进.（2）PTEN基因蛋白表达缺失在不同类型和不同分化程度的非小细胞肺癌发生、发展中存在重要意义,可作为判断肺癌生物学行为和患者预后的参考指标.     

复发性口腔溃疡免疫细胞的效应

复发性口腔溃疡是口腔科常见多发性疾病,与多种因素导致的自体免疫失衡有关。表现为免疫细胞活性和数量上的改变,特别是高表达或不正常表达CD4+、 CD8+细胞以及 CD4+/ CD8+的改变,并伴有多种细胞因子的变化,包括 IL-2 、IL-6、IL-8﹑IL-10、INF-γ 和TNF-α等多种细胞因子的异常表达以及相关细胞因子的基因突变导致的基因多态性。T淋巴细胞介导的细胞免疫在复发性口腔溃疡疾病的发生、发展过程中起重要作用。     

卵巢上皮性肿瘤中RIZ1基因表达缺陷的临床意义

目的:探讨抑癌基因RIZ1在卵巢上皮性肿瘤组织及卵巢癌细胞系中的表达及其表达变化与卵巢癌发生的关系。方法:以卵巢肿瘤组织及卵巢癌细胞系为研究对象。RT-PCR检测RIZ1 mRNA水平;蛋白印迹检测RIZ1蛋白表达。结果:卵巢癌组织、卵巢癌细胞系、良性肿瘤组织及正常卵巢组织中RIZ1 mRNA相对含量的平均值分别为0.42±0.16、0.34±0.12、0.68±0.12及1.17±0.08,RIZ1蛋白相对含量的平均值分别为0.48±0.11、0.38±0.08、0.82±0.11及1.56±0.14。卵巢癌组织、卵巢癌细胞系、良性卵巢肿瘤组织分别与正常卵巢组织比较,RIZ1基因的表达差异均有统计学意义(P<0.05);良性卵巢肿瘤组织与卵巢癌组织比较,RIZ1基因的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:RIZ1基因表达缺陷与上皮性卵巢癌的发生密切相关。     

BRG1在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义

目的：研究BRG1在人脑胶质瘤中的表达情况,并探讨其表达水平与胶质瘤的恶性程度及发生、发展的关系。方法：采用组织芯片及免疫组化技术,评估BRG1在120例良性胶质瘤组织（I~II级）、70例恶性胶质瘤组织（III–IV级）、8例正常脑组织和8例癌旁组织中的染色情况。结果：免疫组化结果显示：BRG1在正常脑组织中阳性表达率为25%（2/8）,在癌旁组织中阳性表达率为25%（2/8）,在良性胶质瘤组织中阳性表达率为80.8%（97/120）,在恶性胶质瘤组织中为82.9%（58/70）。在癌旁组织与良性胶质瘤之间、癌旁组织与恶性胶质瘤之间差异均有统计学意义（P=0.000）,但是在良性和恶性之间差异无统计学意义（P=0.847）。BRG1的表达与临床病理参数之间也没有相关性。结论：BRG1在人脑胶质瘤中的表达明显高于正常脑组织和癌旁组织,并与胶质瘤的发生具有一定的相关性。BRG1在胶质瘤的发生过程中可能有重要作用。     

nm23基因与肺癌的研究进展的影响

nm2 3 -H1是一种肿瘤转移抑制基因 ,其相关表达蛋白nm2 3 -H1 NDPK -A在某些癌症中与肿瘤转移潜能呈负相关。肺癌中nm2 3 -H1基因及其表达产物的研究已引起广泛关注。本文就近年来国内外nm2 3 -H1基因与肺癌的转移和预后关系的研究进展作一简要综述。     

原发性干燥综合征患者唾液腺组织ceRNA调控网络的构建

目的  通过生物信息学方法构建原发性干燥综合征(primary Sjögren’s syndrome, pSS)患者唾液腺组织中的竞争内源性RNA(competing endogenous RNA, ceRNA)调控网络并探讨其发病机制。方法  利用基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus, GEO)对pSS患者唾液腺组织中的信使RNA(messenger RNA, mRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA, lncRNA)表达谱作差异分析。通过miRcode数据库和3个miRNA数据库(TargetScan、miRDB和miRWalk)获取与pSS有关的靶微小RNA(microRNA, miRNA)和靶mRNA,构建lncRNA-miRNA-mRNA的ceRNA调控网络,对ceRNA网络中差异表达基因(differentially expressed mRNAs, DEmRNAs)进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)通路富集分析。结果  在ceRNA网络中有214个DEmRNAs。KEGG分析显示DEmRNAs的主要富集信号通路为丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路和腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)信号通路,DEmRNAs中10个枢纽(Hub)基因分别为JUN、CCND1、NRAS、DDX5、KAT2B、VEGFA、SIRT1、CLTA、MCM7和RPS6KA1。结论  本研究通过构建ceRNA调控网络,发现网络中DEmRNAs主要富集MAPK和AMPK信号通路, 为进一步深入探讨原发性干燥综合征的诊断和治疗提供了新的思路。