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1.
目的 探讨慢性丙型肝炎患者外周血中HCV特异性CD4+CD25+调节性T细胞的抑制活性以及外源性IL-2对CD4+CD25+Treg细胞抑制效应的影响.方法 采用免疫磁珠分选18例慢性丙型肝炎患者与15例正常人外周血中CD4+CD25+T细胞与CD4+CD25- T细胞,在此两种细胞共同培养体系中加入不同浓度外源性IL-2和IL-4,检测CD4+CD25+T细胞的抑制能力以及对HCV特异性CD4+T细胞的影响.结果 与正常对照相比,慢性丙型肝炎患者的CD4+CD25+Treg细胞的抑制增殖活性高 (P=0.034);CD4+CD25+ Treg细胞显著抑制HCV特异性CD4+T细胞的增殖;当IL-2浓度为2 000 U/ml时,能够显著改变CD4+CD25+ Treg细胞的低增殖能力,而且IL-2与IL-4的共同作用改变更明显,其中高浓度的IL-2能够阻断CD4+CD25+Treg细胞对CD4+CD25- T细胞的抑制功能.结论 慢性丙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+Treg细胞的抑制活性增强,高浓度IL-2可阻断CD4+CD25+Treg细胞的抑制效应. 相似文献
2.
大鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞的分离及功能鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究利用免疫磁珠分选法稳定分离正常大鼠脾脏CD4^+CD25^+调节性T细胞的方法。方法:采用免疫磁珠两步法分离大鼠脾组织CD4^+CD25^+T细胞。首先采用藻红蛋白(PE)标记的抗CD25抗体和抗PE多功能磁珠试剂盒阳性分选CD25^+T细胞,再用抗异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗体和抗IgG磁珠阳性分选获得CD4^+CD25^+T细胞。分离后的细胞经流式细胞仪检测分离纯度,台盼蓝染色检测细胞存活率,体外增殖实验检测其对CD4^+CD25^-T细胞的免疫抑制作用。结果:两次阳性分选后获得的CD4^+CD25^+T细胞纯度为(90.4±1.6)%,细胞存活率为(92.6±2.4)%。体外增殖实验表明,CD4^+CD25^+T细胞能明显抑制CD4^+CD25^-T细胞的增殖(P〈0.01)。结论:采用免疫磁珠法两次阳性分选,可稳定地获得纯度理想并有免疫抑制功能的大鼠CD4^+CD25^+T细胞。 相似文献
3.
CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)在自身免疫耐受、免疫自稳、肿瘤免疫中发挥着重要作用,它可以抑制自身抗原或者非自身抗原如肿瘤抗原引起的免疫反应.人们对Treg细胞的免疫抑制作用已进行了相关的研究和临床应用,最新研究表明其能够诱导肿瘤特异性抗原和局部的免疫反应.此综述将讨论Treg细胞的相关表面分子及其在肿瘤免疫逃逸机制、肿瘤免疫治疗中的研究进展. 相似文献
4.
CD^+4CD^+25Treg细胞(调节性T淋巴细胞)是一类特殊的T淋巴细胞群体,其能够识别自身抗原并抑制自身反应性细胞的免疫反应,是自身免疫耐受不可缺失的一环,同时也可在炎症情况下抑制效应性细胞过度活化,防止免疫反应过强而对机体造成损伤。在CD^+4CD^+25Treg细胞缺失或功能障碍情况下,将导致机体发生自身性疾病,而在细胞过度活化情况下,则机体发生肿瘤的概率大为增加。故研究CD^+4CD^+25去Treg细胞对于临床疾病的治疗具有重大意义。我们就以下几个方面进行综述。(1)CD^+4CD^+25 Treg细胞表面特异性分子标志;(2)CD^+4CD^+25 Treg细胞理想的分离扩增方法;(3)分析其维持免疫耐受可能的分子细胞机制;(4)CD^+4CD^+25 Treg细胞在自身免疫疾病治疗、肿瘤免疫、以及移植排斥的防治等临床疾方面的作用。 相似文献
5.
目的:探讨IL-2对CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)的增殖及功能的影响。方法:提取B6小鼠脾脏细胞,流式细胞仪分离CD4+CD25+Tregs,将新鲜分离的CD4+CD25+Tregs与抗CD3单克隆抗体、同种同系抗原递呈细胞(APCs)及外源性IL-2共同培养,测定其增殖活性;并检测体外扩增后的CD4+CD25+Tregs的免疫抑制活性及其Foxp3的表达。结果:与外源性IL-2共同培养的CD4+CD25+Tregs增殖程度强烈,与对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05);体外扩增的CD4+CD25+Tregs抑制CD4+CD25-T细胞增殖活性的能力与新鲜分离的CD4+CD25+Tregs相似(P〉0.05)。体外扩增的CD4+CD25+Tregs的Foxp3表达与新鲜分离的CD4+CD25+Tregs亦相似(P〉0.05)。结论:外源性IL-2能够消除CD4+CD25+Tregs的无反应状态,且体外扩增的CD4+CD25+Tregs保持了其抑制活性。 相似文献
6.
目的探讨原发性肝癌患者外周血Th17和CD4^+CD25^+调节性T细胞的表达水平及其相关性。方法选取2008年6月—2009年5月浙江大学医学院附属第一医院30例原发性肝癌患者和25名健康人群,采血并分离其外周血单个核细胞。利用流式细胞仪分别测定Th17和CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的表达,采用t检验分析两组的表达差异。同时,采用Spearman检验对原发性肝癌患者外周血中Th17和CD4^+CD25^+调节性T细胞的表达进行相关性分析。结果健康对照组外周血中Th17细胞为(2.10±0.87)%,CD4^+CD25^+调节性T细胞为(7.10±2.32)%,原发性肝癌组外周血中Th17细胞为(3.38±1.68)%,CD4^+CD25^+调节性T细胞为(11.78±5.62)%,两组差异具有统计学意义(t=3.640和4.162,P值均〈0.01)。原发性肝癌患者组外周血Th17细胞与CD4^+CD25^+Fosp3^+调节性T细胞表达呈正相关(r=0.821,P〈0.01)。结论原发性肝癌患者外周血Th17和CD4^+CD25^+Fosp3^+调节性T细胞表达水平较高,二者呈正相关。CD4^+CD25^+Fosp3^+调节性T细胞可能通过促进Th17细胞分化导致肿瘤的发生与发展。 相似文献
7.
目的分析成人特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)患者的临床病理特征及预后相关因素,为临床诊断提供思路。方法对2015年1月至2017年12月在昆明医科大学第二附属医院肾内科行肾脏穿刺活检确诊为IMN的83例患者的临床及病理资料进行回顾性分析,并以eGFR30 mL·min~(-1)·(1.73 m~2)~(-1)为随访终点,分析患者的随访资料。结果 83例IMN患者中,男性55例(66.26%),女性28例(33.73%);平均年龄(50.9±12.7)岁,≥30岁者占91.57%;病理类型中以Ⅰ、Ⅱ期为主,占83.13%。与女性患者相比,男性患者年龄偏大,血肌酐、24 h尿蛋白定量较高,肾小管间质损伤更重,肾小球滤过率及血清白蛋白较低(P0.05)。与非老年患者相比,老年患者的男性比例、24 h尿蛋白增加,肾功能明显下降,肾小管间质损伤明显加重(P0.05)。不同病理分期的IMN患者在临床表现方面无显著性差异(P0.05)。经过12~24个月随访,有12例患者进展至eGFR30 mL·min~(-1)·(1.73 m~2)~(-1),肾功能进展者较肾功能稳定者在平均动脉压、临床表现为肾病综合征的比例、eGFR、24 h尿蛋白定量及肾小管间质损害方面差异有统计学意义(P0.05)。结论老年、男性、高血压、大量蛋白尿的患者更易出现肾功能下降和肾小管间质损伤加重,且存在上述因素的IMN患者预后较差,故应尽早明确诊断,并给予个体化的干预治疗。 相似文献
8.
目的:观察白细胞介素-37(IL-37)在健康人外周血 CD4+CD25+调节性 T细胞(Treg)中的表达情况。方法:采用免疫磁性分离法分离人外周血 CD4+CD25+Treg,流式细胞技术分析其分离纯度,观察刺激剂组(每1×105个 CD4+CD25+Treg细胞加入20μl Dynabeads(R) Human Treg Expander)、非刺激剂组、空白对照组(单纯10%FCS-RPMI 1640培养)CD4+CD25+Treg细胞增殖活性及其差异。分别采用 Western blot和免疫荧光共聚焦技术检测 IL-37的表达水平与定位改变。结果:MACS分离人外周血 CD4+CD25+Treg 细胞纯度为93%,台盼蓝染色细胞活性为98%。与非刺激剂组和空白对照组相比,刺激剂组 CD4+CD25+Treg 增殖活性随时间延长而逐渐增加;非刺激剂组与空白对照组其增殖活性差异无显著性。Western blot 结果显示,正常CD4+CD25+Treg细胞表达 IL-37,在刺激剂作用下随作用时间延长 IL-37表达量增加。免疫荧光显微镜和免疫荧光共聚焦图像显示,刺激72 h后 IL-37在 CD4+CD25+Treg细胞内明显表达,并且在细胞质中表达丰富,近胞膜处表达密度较高。结论:IL-37在健康人外周血 CD4+CD25+Treg 细胞中表达,当受到有效刺激后 IL-37表达明显上升。 相似文献
9.
目的研究胰头癌患者外周血中CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)比例及其在手术前、后的变化趋势。方法采用流式细胞仪检测胰头癌患者及正常对照组外周血中CD4^+CD25^+调节性T细胞的数量,同时监测CD4^+/CD8^+比值,并进行手术前、后的比较。结果胰头癌患者术前外周血中CD4^+CD25^+和CD4+CD25highTreg所占比例较正常对照组高(P〈0.05),术后则出现不同程度下降,以术后第3天下降最明显(P〈0.01,P〈0.05);胰头癌患者术后CA19-9水平低于术前,以术后第14天下降明显(P〈0.05)。CD4+CD25highTreg与CA19-9的变化趋势大致相同。胰头癌患者术前CD4^+/CD8^+比值比正常对照组低(P〈0.05),手术后进一步降低,于手术后第7天达最低(P〈0.05)。结论胰十二指肠切除术可能有助于机体抗肿瘤免疫的恢复,胰头癌患者围手术期可作为免疫干预的重要窗口期,CD4^+CD25^+调节性T细胞可作为免疫干预的靶点。 相似文献
10.
目的观察肾移植患者外周血中CD4^+CD25^+调节性T细胞水平的变化,探讨其在诊断移植肾急性排斥反应中的作用。方法采用流式细胞仪检测26例肾移植患者及30例正常对照组外周血中CD4^+CD25^+调节性T细胞水平。结果①慢性肾衰竭患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞水平与对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。②非排斥组移植后1、2、4、8周CD4^+CD25^+调节性T细胞水平明显高于移植前(P〈0.01)。③急性排斥组排斥反应主要发生在术后第7~21d,其CD4^+CD25^+调节性T细胞水平明显低于同期的非排斥组(P〈0.01)。结论CD4^+CD25^+调节性T细胞水平的测定可以作为肾移植患者移植后急性排斥反应诊断和预测预后的重要指标。 相似文献
11.
目的:观察肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-8样分子2(TIPE2)在CD4<'+>CD25<'+>调节性T细胞(CD4<'+>CD25<'+>Treg)中的表达.方法:免疫磁珠法分离正常BALB/C小鼠脾脏CD4<'+>CD25<'+>Tregs,流式细胞术鉴定CD4<'+>CD25<'+>Treg的纯度.激光共聚焦荧光法检... 相似文献
12.
目的探讨调节性T细胞(Treg)与关节置换假体植入的关系及临床意义。方法 2009年1月至2009年6月将人工髋关节置换手术患者及同期无假体植入的关节镜手术患者分为两组,用流式细胞仪检测术前及术后3 d外周血Treg水平并进行统计学分析。结果关节置换组术前外周血中Treg的水平为(2.99±1.33),术后为(4.66±1.96),两者比较差异有统计学意义(P0.01);非假体植入组术前为(3.36±1.61),术后为(3.47±1.83),两者比较差异无统计学意义(P0.05);术后关节置换组与非假体植入组对比,两组间Treg水平的差异有统计学意义(P0.01)。结论假体植入体内可使患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平显著升高,提示关节置换假体感染引起的免疫反应与单纯组织感染时的免疫反应不同,T细胞能否成为假体感染的病情进展及疗效评估的指标有待进一步研究。 相似文献
13.
目的:了解肾移植患者术后外周血中CD4 CD25 调节性T细胞的比例和瘦素水平的变化及其临床意义,探讨CD4 CD25 调节性T细胞与瘦素水平的相关性。方法:应用放射免疫方法检肾移植患者及健康对照者外周血中瘦素的水平,流式细胞术检测外周血中CD4 CD25 调节性T细胞占CD4 T细胞的比例。结果:移植近期组(1年)与对照组患者血浆中瘦素浓度比较无差异,但移植远期组的瘦素浓度(2.5年)高于对照组和移植近期组。且外周血中CD4 CD25 调节性T细胞的比例与瘦素呈显著负相关(r=-0.83,P<0.01)。结论:肾移植术后的远期高瘦素血症可能对CD4 CD25 调节性T细胞具有负性调节作用,也许不利于移植耐受的维持。 相似文献
14.
目的 观察CD4+ CD25+调节T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)细胞在脓毒症大鼠炎性免疫反应中的作用.方法 110只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、脓毒症(CLP)组,采用改良的盲肠结扎穿孔术(CLP)制作大鼠脓毒症模型.采用流式细胞术检测CD14+单核细胞表面人类白细胞抗原-DR基因(HLA-DR)表达率、Treg细胞及TH17细胞比例;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-17炎性因子蛋白表达.结果 与假手术组比较:(1)伴随着脓毒症病情的发展,大鼠出现明显的免疫抑制,CD14+单核细胞HLA-DR表达率<30%,IL-10/TNF-α比值(27.41 ±7.04比6.63 ±2.60)明显增高(P<0.01).(2)术后96 h脓毒症大鼠Treg细胞[(11.91±3.88)%比(6.57±2.60)%,P<0.01]和Th17细胞[(5.14±0.29)%比(2.85±0.07)%,P<0.01]表达明显增高.(3)术后96 h脓毒症组前炎性细胞因子IL-6[(42.31±15.89) ng/L比(6.32 ±3.18) ng/L,P<0.01]、IL-10[(69.89 ±20.78) ng/L比(13.58±5.37) ng/L,P<0.01]、TNF-α[(5.03±3.10) ng/L比(2.77±1.10) ng/L,P<0.01]、TGF-β[(4.99±2.01) ng/L比(1.88±1.07) ng/L,P<0.01]、IL-17[(92.77±11.64) ng/L比(7.58±2.30) ng/L,P<0.01]表达明显增高.结论 伴随着脓毒症病情的发展,大鼠出现明显的免疫抑制;在大鼠脓毒症的发生发展中,Treg细胞介导的免疫抑制及Th17细胞介导免疫激活反应同时存在;脓毒症细胞因子微环境变化可能是导致Treg细胞/Th17细胞失衡的原因之一. 相似文献
15.
目的 研究CD4+CD25+调节性T细胞在诱导自发性肝脏免疫耐受中的作用.方法 向受体和供体注射抗CD25抗体(PC61)后进行小鼠原位肝脏移植,观测其生存时间.术后20~30 d切取移植肝脏行HE染色,同时观察CD4+CD25+T细胞对CD4+T细胞和CD8+T细胞功能的影响.结果 去除受体而不是供体小鼠的CD4+CD25+T细胞可以导致肝移植排斥反应.而且,去除CD4+CD25+T细胞使移植物的白细胞浸润明显增多,组织损伤加重.同时,去除CD4+CD25+T细胞导致CD4+T细胞的增殖活性和CD8+T细胞的细胞毒活性明显增强.结论 受体来源的CD4+CD25+调节性T细胞在小鼠肝脏移植免疫耐受诱导中起重要作用.Abstract: Objective To examine the contribution of CD4+ CD25+ regulatory T cells to liver transplant tolerance. Methods After injection of anti-CD25 monoclonal antibody (mAb, PC61), mouse orthotopic liver transplantation was performed and survivals were determined. The paraffin-embedded sections of hepatic allografts were cut and stained with hematoxylin and eosin (HE). Furthermore, the effect of CD4+ CD25+ regulatory T cells on proliferative response of CD4+ T cells and cytotoxicity of CD8+ T cells was examined by depleting these regulatory T cells. Results Depletion of these cells in the recipients but not in the donors before liver transplantation caused rejection. Histological analyses of hepatic allografts with PC61 treatment showed extensive leukocyte infiltration and tissue destruction, whereas those in the control group showed minimal changes. Moreover, elimination of CD4+CD25+ T cells resulted in the enhancement of both proliferative response of CD4+ T cells and cytotoxicity of CD8+ T cells against donor-type alloantigen. Conclusions These results suggest that CD4+CD25+ regulatory T cells were important for tolerance induction to hepatic allografts. 相似文献
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Expression of CD39 by Human Peripheral Blood CD4+CD25+ T Cells Denotes a Regulatory Memory Phenotype
K. M. Dwyer D. Hanidziar P. Putheti P. A. Hill S. Pommey J. L. McRae A. Winterhalter G. Doherty S. Deaglio M. Koulmanda W. Gao S. C. Robson T. B. Strom 《American journal of transplantation》2010,10(11):2410-2420
We have shown that CD39 and CD73 are coexpressed on the surface of murine CD4+Foxp3+ regulatory T cells (Treg) and generate extracellular adenosine, contributing to Treg immunosuppressive activity. We now describe that CD39, independently of CD73, is expressed by a subset of blood‐derived human CD4+CD25+CD127lo Treg, defined by robust expression of Foxp3. A further distinct population of CD4+CD39+ T lymphocytes can be identified, which do not express CD25 and FoxP3 and exhibit the memory effector cellular phenotype. Differential expression of CD25 and CD39 on circulating CD4+ T cells distinguishes between Treg and pathogenic cellular populations that secrete proinflammatory cytokines such as IFNγ and IL‐17. These latter cell populations are increased, with a concomitant decrease in the CD4+CD25+CD39+ Tregs, in the peripheral blood of patients with renal allograft rejection. We conclude that the ectonucleotidase CD39 is a useful and dynamic lymphocytes surface marker that can be used to identify different peripheral blood T cell‐populations to allow tracking of these in health and disease, as in renal allograft rejection. 相似文献
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目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)对树突状细胞(DCs)免疫功能的抑制作用,探讨治疗CHB的新方法。方法采用密度梯度离心法获得CHB患者和健康对照组(NC组)外周血单个核细胞(PBMC);部分PBMC体外诱导培养获得DCs,部分PBMCs用特异性免疫磁珠分选获得CD4+CD25+Treg和CD4+CD25-T细胞;不同来源的DCs和正常对照组CD4+CD25-T细胞混合为反应细胞,将不同来源和不同比例的Treg分别加入到反应细胞中培养3 d,MTT法检测Treg抑制DCs的抑制指数(SI),并在培养DCs的不同时间加入Treg,应用流式细胞术检测DCs表面共刺激分子CD80和HLA-DR的表达。结果来源于CHB患者及NC组的Treg均可抑制DCs的免疫作用,来源于CHB患者Treg抑制DCs能力显著高于NC,差异具有统计学意义(P <0.01)。不同比例的Treg均可抑制DCs的免疫功能,随着Treg比例的增高抑制作用也越明显,抑制指数亦越高。在DCs培养的不同时间加入相同比例的Treg,发现Treg对DCs表面分子CD80、HLA-DR的表达均有抑制作用,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01),同时发现加入Treg的时间越早,DCs表面分子表达降低越明显。结论 CHB患者Treg可显著抑制DCs免疫功能且呈时间和量的依赖,抑制DCs表面分子CD80和HLA-DR表达,可能是Treg抑制DC免疫功能的机制之一。 相似文献
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尿毒症患者和肾移植受者外周血调节性T细胞表达的意义 总被引:1,自引:1,他引:0
目的探讨尿毒症患者和肾移植受者外周血CD4^+CD127^-调节性T细胞(CD4^+CD127^- Treg)的表达水平及意义。方法采用流式细胞术测定13例尿毒症患者(尿毒症组)、13例肾移植受者(肾移植组)和20例健康志愿者(对照组)外周血CD4^+CD127^- Treg和CD4^+CD25^+CD127^- Treg占CD4^+T细胞的比例。结果尿毒症组和肾移植组CD4^+细胞中CD4^+CD127^- Treg的比例明显低于对照组(P〈0.05,P〈0.01);肾移植组CD4^+CD25^+CD127^- Treg的比例明显低于对照组(P〈0.05)。结论尿毒症患者外周血CD4^+CD127^- Treg数量降低,免疫功能紊乱。肾移植受者外周血CD4^+CD127^- Treg和CD4^+CD25^+CD127^-Treg数量降低,免疫反应性增强。 相似文献