用聚氨酯泡沫塑料固定化具有青霉素酶化酶的大肠杆菌的研究

应用聚氨酯泡沫塑料做载体,固定大肠杆菌青霉素酰化酶,可用于青霉素G钾盐的水解制备6-氨基青霉烷酸。实验采用正交设计法,对制备聚氨酯泡沫固定化大肠杆菌的原料和菌体之间的配比,作了系统试验,获得较理想的配方。制成的固定化细胞与天然菌体相比,对热pH稳定性均有明显提高,可重复用于青霉素G钾盐的水解。     

固定化青霉素酶反应器流动注射碘量法快速测定青霉素

整个测量系统由沈阳电影反光镜广制造的ＬＺ－１０００型组合式流动注射分析（ＦＩＡ）仪与固定化青霉素酶反应器组成。测定原理同碘量滴定测量青霉素，实验表明：线性范围在０．０６～０．７５ｍｍｏｌ／Ｌ（取样４０μｌ），线性相关系数０．９９８。重现性：对０．１２、０．７５ｍｍｏｌ／Ｌ浓度的青霉素反复测定８次，平均值分别为０．６９０ｍｖ、３．８３８ｍｖ，标准差分别为０．００６６ｍｖ、０．０１６４ｍｖ，精密度分别０．８２％、０．３４％。测定条件影响：在青霉素浓度低于２·５ｍｍｏｌ／Ｌ时，磷酸盐浓度在０．０５～０．２５ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ在６．０～７．５，测定温度在８℃～３０℃对测定结果几乎没有影响。测定速率可达每小时１２０样。在室温（８～２０℃）下使用，每天测定４００样，使用３０天未见活力下降。４℃下保存近半年未见酶反应器活力下降。     

胰蛋白酶的固定化及其在玻璃酸制备中的应用

纸纤维为载体,对β－硫酸酯乙砜基苯胺为活化剂,以共价介联法固定化胰蛋白酶。在偶联反应ｐＨ８．０、酶量７．２６ｍｇ／ｍｌ的最佳固定化条件下,固定化酶活力达９３．３Ｕ／ｇ（湿纸纤维）,酶活回收率为５７．５％。固定化酶具有较高热稳定性和抗氯仿能力。采用固定化胰蛋白酶酶解工艺,所得玻璃酸成品符合质量标准,其酶解反应半衰期为４８０ｈ。     

利用多孔生物质载体颗粒固定化昆虫细胞生产生物纳米胶囊

由乙型肝炎表面抗原的L蛋白组成的L粒子是一个特异性基因和药物给药系统的候选。我们已经构建了稳定转染的昆虫细胞株用于生产L粒子。本研究进一步将这些细胞在摇瓶培养中成功固定于多孔生物质载体颗粒内，     

用海藻酸钠制备药物载体

用作药物载体的许多胶体粒子在血液中可被单核吞噬细胞体系（MPS），特别是肝内枯否氏细胞很快吞噬。这对MPS器官的靶向给药是有利的，但对其它部位的定向给药则是不利的。为了避免MPS过快地清除血液中的载药胶体粒子，人们对毫微粒（nanoparticles）或脂质体（liposomes）进行表面修饰，增强其亲水性，这样可以降低MPS对它们的识别能力，从而延长了在血液中的存在时间。然而，用生物降解材料聚烷基膀基丙烯酸酯制备的毫微粒，即使用亲水性高分子徐复后其在组织中的分布仍没有变化。这可能是毫微粒表面的修饰层不够稳定，这种粒子在体…     

壳聚糖多孔珠的制备及其作为亲和吸附剂载体的研究

以壳聚糖为材料，制备了机械强度较好，直径为０．５－１．５ｍｍ的壳聚糖多孔株，并以壳聚糖多孔珠为载体，胰蛋白酶配基，合成了亲和吸附剂，壳聚糖多孔珠的胰蛋白酶结合量为１００００Ｕ／ｇ干壳聚糖，最大吸附蛋白量为１８．７ｍｇ／ｇ干壳聚糖，由每克干壳聚糖制成的亲和吸附剂对ＵＴＩ的吸附容量为６４１０单位。     

用离子交换树脂为载体固定化青霉素酰化酶制备6-氨基青霉烷酸的研究

6-氨基青霉烷酸(6-APA)是半合成抗生素的母核。在 6-APA的氨基上引入不同侧链,可获得高效、广谱、服用方便的各种半合成抗生素。目前6APA的制备方法有化学法和固定化酶法。固定化酶法是将青霉素酰化酶固定在水不溶性载体上,直接用于裂解青霉素G生成6-APA。1973年英、美、西欧等国已应用固定化酶生产6-APA。本研究以大孔离子交换树脂为载体使青霉素酰化酶固定化。大孔离子交换树脂具有大孔径、高比表面积、高交换率、耐磨性好等优点。本文报导初步研究结果。 材料与方法     

用病毒做载体制备菌苗

美国洛克菲勒大学及俄勒冈州立大学的研究人员已成功地将链球菌的蛋白片段转化至牛痘病毒,为发展防御链球菌咽炎及其他细菌感染菌苗奠定了基础。该实验是在由洛克菲勒大学的Frischetti和俄勒冈州立大学的Hruby转移完整的细菌表面M蛋白的早期工作的基础上进行的。 M蛋白共有30多个血清型,但是M蛋白的一个部分在至少30个血清型中相同。研究人员鉴别出该片段,将其转移至牛痘病毒。用所得菌苗免疫的小鼠成功地抵御2个血清型链球菌的感染。进一步的实验将决定该菌苗激发的抗体是否与组织产生交叉反应。     

用微载体制备脊髓灰质炎疫苗

加拿大蒙特利尔市雅民-法比埃研究所已经取得用微载体生产高滴度Salk Ⅰ型脊髓灰质炎疫苗的专利权.该项技术由麻省理工学院应用生物学教授Thilly的实验室提供.Thilly说,他们已能使目前使用的脊髓灰质炎疫苗单位增加100倍,并已能常     

固定化超氧化物歧化酶的制备

目的 研究固定化超氧化物歧化酶(SOD)的制备方法。方法 分别以不同方法对铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)进行固定并比较其活力,对固定化方法进行相应的考察和优化。结果 以壳聚糖为载体,戊二醛交联法制备固定化SOD酶,酶活力和酶活回收率均较理想,固定化过程中的pH在6.0-8.2范围内,对固定化效果无明显影响;优化条件下制备的固定化铜锌超氧化物歧化酶,所得壳聚糖酶粉活力可达141 U·g-1,酶活回收率大于60％。结论 壳聚糖-戊二醛交联法可用于固定化超氧化物歧化酶粉的制备。     

以聚丙烯腈纤维为载体制备工业用固定化PGA的基本条件

以聚丙烯腈纤维为载体 ,共价结合制备工业生产应用的固定化青霉素酰化酶。经过测定 ,获得了制备固定化酶的基本条件 :对部分酸水解聚丙烯腈纤维进行霍夫曼重排反应溶液中的次氯酸钠浓度为 4%～ 16 % (v/v) ;用含戊二醛的溶液对经过霍夫曼重排反应的水解纤维进行活化反应溶液的pH为 6 5～ 8 5 ,最适 pH7 0 ;活化反应时间为 10min ;活化纤维中醛基含量为 12 5 0 μmol/g以上 ;酶与活化纤维连接反应溶液的最适pH值为 6 5～ 7 0 ;反应时间为 10min。在酶与活化纤维的连接反应溶液中加入竞争性抑制剂 苯乙酸 ,对酶活力具有保护作用 ,能提高酶活力的固定化效率。在酶与活化纤维的连接反应溶液中剩余的游离酶经吸附、洗涤和浓缩后 ,可以再用于制备固定化酶。变性固定化酶经再生活化后作为载体固定化新的酶液 ,也能制备出较好的固定化酶。     

光交联树脂预聚体——制备固定化酶的新载体

固定化酶已广泛应用于酶工程领域。采用聚合物做载体包埋酶、微生物细胞和细胞器已有多种方法,但由于现有方法并不完善,目前仍继续致力于寻找制备凝胶的新材料和新技术。如千畑等以x-鹿角菜胶(x-carrageenan)作为凝胶形成的起始物质已受到重视。最近,福井等又报道了光交联树脂预聚体制备固定化酶的新方法,此法优点:(1)能选择符合要求的预聚体,如适宜的链长、含有恰当的亲水或疏水性的阳离子或阴离子等,以固定生物催化剂;(2)在非常温和的条件下,制成固定化酶凝胶制品。本文对光交联预聚体的种类、特性和固定化方法作一概要介绍。     

固定化胰蛋白酶的制备

目的 制备一种高活力的固定化胰蛋白酶，通过优化其制备条件提高活力回收。方法 将壳聚糖敷涂在硅胶的表面制成载体，以戊二醛为交联剂，通过交联反应将胰蛋白酶固定至载体上制得。对固定化后的滤液做回收再利用实验。结果 优化后制得的固定化胰蛋白酶的活力单位(AU)高达6848．4U．g-1，活力回收(AR)为21．8％。回收再利用实验得到的固定化胰蛋白酶活力单位仍高达5907．20U.g-1。结论 制备的固定化胰蛋白酶活力单位高，活力回收也较高，有利于工业运用。     

用脱乙酰几丁质制备固定化青霉素酰化酶

以青霉素酰化酶基因工程菌为酶源,选用脱乙酰几丁质为载体,试用了4种固定化方法,从4个方面(pH、温度、盐浓度和结合酶量)摸索了固定化条件。结果在适宜条件下获得比活900U/g(干)(NIPAB法)的固定化青霉素酰化酶,回收率可达56%。并测定其酶学性质。     

利用无机载体固定化青霉素酰化酶的研究

以无机材料６２０１型担体作载体,进行青霉素酰化酶固定化的研究。考察了ＡＰＴＳ和戊二醛浓度、给酶量以ｐＨ等因素对固定化酶酶活的影响。结果表明,以６２０１型担体为载体制备得到的固定化酶具有较高的酶活回收,达４２．８％;操作稳定性良好;用其连续水解３０批青霉素Ｇ的钾盐溶液,酶活未见明显下降;该固定化酶与游离酶相比,可在较宽的ｐＨ范围保持高酶活。     

可溶性固定化木瓜蛋白酶的制备及性质研究

目的 制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶(PP)并研究其部分酶学性质.方法 将PP偶联在羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上,制备得到水溶性固定化PP,并测定游离和水溶性固定化PP最适作用pH、最适作用温度、Km值、热稳定性、酸碱稳定性、低温稳定性和回收稳定性.结果 最适作用pH分别为6.0、5.0,最适作用温度分别为60℃、70℃,Km值分别为2.53、3.07 mg·ml-1;可溶性固定化PP在60℃条件下,保温12 h,仍有62%的活性;在4℃条件下,30 d后活性保留达90%以上;在pH6时稳定性最好,pH4～7范围内也较稳定(相对活性＞80%).结论 可溶性固定化PP能够在大于pH5.5的溶液中完全溶解,最适作用pH范围变窄,最适作用温度和Km值升高;热和酸碱的稳定性均明显增强.     

青霉素酶电极的研制

探讨了青霉素酶电极的制备方法，以青霉素酶为敏感膜偶合玻璃电极制成青霉素酶电极，在０．１５￣１．５ｍ ｍｏｌ／Ｌ青霉素钠浓度范围内，该电极的动力学响应与青霉素钠浓度的对数呈良好的线性关系，相关系数为０．９９８８，对电极性能的影响因素如介质条件，温度、膜厚度等进行了考察，并试验了电极的有效活性期。测得平均回收率为９９．０％。     

青霉素酶电极的研制

最近几年应用计算机控制的发酵系统有了很快的发展,然而由于缺少检测关键代谢参数的合适传感器,因而限制了计算机对实时控制的应用。发酵过程中最重要的参数之一是产物积累的浓度及其速率。酶电极的引入为改进这方面的工作开辟了广阔的前景。 酶电极具有测定快速、反应特异性强、且可使测定连续化、自动化。从发展来看是研究发酵最佳化的一种很好的检测工具。酶电极的组成有两个主要部分:电化学传感器和固定在传感器敏感表面的酶膜。欲分析的底物被固定化酶转变为产物,而此产物可被化学传感器检测。     

金黄色葡萄球菌细胞结合青霉素酶的研究

本文研究了临床分离的致病性金黄色葡萄球菌的总青霉素酶(酶1)、细胞外青霉素酶(酶2)、细胞结合青霉素酶(酶3)以及细胞结合的胞外酶(酶4)。后三者分别是细菌生