外层致密纤维在Akap4基因缺陷致小鼠精子尾部多种形态异常中的作用

目的：探讨外层致密纤维(outer dense fobres，ODF)在Akap4基因缺陷引起小鼠精子尾部多种形态异常中 的作用。方法：通过基因编辑技术构建Akap4基因缺陷小鼠模型。实验分为2组：成年Akap4基因缺陷雄鼠为实验组 (n=7)，成年野生型雄鼠为对照组(n=7)，比较2组小鼠的体重和睾丸重量；采用计算机辅助精液分析(computer aided sperm analysis，CASA)检测精子活动力，改良巴氏染色(modifi ed pap staining)检测精子形态学，扫描及透射电镜观察精 子超微结构，免疫荧光检测精子尾部蛋白表达及定位，睾丸切片HE及PAS染色检测睾丸生精功能，透射电镜观察曲 精细管超微结构。结果： Akap4基因缺陷小鼠精子总活动力为8.81%，明显低于野生型小鼠(P<0.01)，且无正常形态精 子，尾部缩短与尾部卷曲比例达91.18%，明显高于野生型小鼠(P<0.01)，睾丸重量、睾丸生精功能、精子数量2组比 较差异无统计学意义(P>0.01)； Akap4基因缺陷精子的纤维鞘纵柱缺失，横肋柱结构部分残留，主段的3和8号ODF排 列紊乱，与ODF2蛋白定位结果相符；睾丸中精子纤维鞘发育障碍，无正常纤维鞘结构形成，但未见异常膨大的精子 尾部。结论：Akap4基因缺陷使纤维鞘横肋发育不良，纵肋的缺失引起3和8号ODF分离，“9+2”微管结构紊乱，使 主段管腔异常膨大，导致小鼠精子尾部多种形态异常。     

基础理论

,印97,活动力不足精子的线粒体变化一形态学和计盈学研究/王晓冬…//中华物理医学杂志一1995,17(4),一231 作者通过电镜观察和体视学方法,研究活动力不足精子的线粒体变化。结果是运动力不足精子尾部中段存在较多胞质,线粒体排列方式呈现异常,线粒体内部的结构有退化现象。运动力不足的精子线粒体的体密度(Vv)、外膜面密度(Sv)和面数密度(N^)均小于对照组(P<0.05),线粒体的外膜比表面(Rsv)则大于对照组(P<0.01),而线粒体的平均体积(V)及平均外表面积(亏)和对照组比无差异(P>0.05)。结果提示线粒体在形态学和计量学方面发生了改变,这可能…     

长爪沙鼠精子的显微结构观察

目的　观察长爪沙鼠精子的形态和结构。方法　应用光学显微镜、透射电镜和扫描电镜进行观察。结果与结论　长爪沙鼠精子由头、颈、尾三部分组成 ,全长为 ( 15 6 3 2± 6 61) μm ,头长为 ( 10 4 3± 2 12 ) μm ,颈、尾部长为 ( 14 5 89± 5 14 ) μm ,具典型的啮齿类动物的精子形态 ;长爪沙鼠精子的尾部轴丝是 9+ 2模式 ,轴丝外围有 9条大小、形态不一的外周致密纤维 ,外周致密纤维从主段到末端逐渐变细 ,并在主段的近末端处分 4批终止 ;主段的纤维鞘具有腹侧纵柱、背侧纵柱、内嵴等结构。在精子尾部的末段 ,外层仍保留有纤维鞘的结构 ,但无外周致密纤维 ,轴丝仍然为 9+ 2模式     

肾阳虚证不育症患者精子超微结构的初步观察

目的研究肾阳虚证不育症患者精子超微结构形态特征。方法采集3例中医辨证为肾阳虚证不育症的精子标本,常规电镜制片后,透射电镜观察,并与2例正常健康男性的精子进行电镜对照。结果肾阳虚证不育症患者的精子异常主要表现为：无尾精子伴顶体脱落;凋亡精子;头部含有空泡精子;顶体脱落,颈部肿胀,头部不规则,线粒体大小不一精子;尖头精子;顶部异常,双层膜结构部分脱失,头部核内含空泡,颈部膨胀,线粒体大小不一,并畸形;顶体内含有包涵体精子;双头精子;无尾精子。结论肾阳虚证不育症患者精子存在顶体、头部、尾部线粒体、微管多种形态和结构异常,并可形成多形态的凋亡。     

精子尾部低渗肿胀率与男性不育的关系探讨

对１６３例不育男性和２６例生育男性做了精子尾部低渗肿胀率的测定，其结果表明，不育男性精子尾部低渗肿胀率显著低于生育男性。精子尾部低渗肿胀率与精子活动力、活动率呈显著正相关，与精子畸形率呈显著负相关。生殖道感染患者精子尾部低渗肿胀率显著低于非感染组。精子尾部低渗肿胀率与精子密度、精液量、ｐＨ、及液化时间无关。     

1351例男性不育症患者精子形态与病因学分析

目的研究男性不育症患者精子形态与病因学关系。方法了解1 351例男性不育症患者,由病毒、衣支原体、细菌、复合感染、不明原因5方面所致精子形态的头、体、尾部变化特征,找出不同病因导致精子形态相应变化的规律。结果精子是评价男性不育的重要指标,精液感染时分析:(1)精子存活率均低。(2)精子缺陷率高。(3)衣、支原体感染以头、体及混合型畸形为主;细菌感染时体、尾部畸形增多;复合感染时头、体、尾相对均衡;病毒感染时,头部畸形明显增多;不明原因以头、体及混合型畸形为主。(4)精子无活动力可能受病种毒性物质的影响。结论不同病因所致精子的形态有着不同的明显变化特征。     

精液白细胞症对不育症患者精液质量的影响

研究精液白细胞症对不育患者精液质量的影响。采用联苯胺过氧化物酶染色技术和精子尾部低涌肿胀实验，分别检测６７例男性不育症患者精液白细胞和精子尾部肿胀率。结果３１例为精液白细胞症患者。精液白细胞症患者精子活动率，活动力及精子尾部肿胀率显著低于精液白细胞正常组，畸形率高于正常组。     

精子核成熟度在诊断男性不育中的意义

目的 探讨精子核成熟度在男性不育中的价值.方法 40例精液标本,其中生育组20例,不育组20例.应用精子质量自动检测系统(CASA)检测精子活力及密度,用苯胺蓝染色法评价精子核成熟度,人工显微镜下分析精子形态.结果 不育组苯胺蓝染色阳性率明显高于生育组.形态异常的精子组中头部、体部、尾部、混合型畸形的精子苯胺蓝染色阳性率明显高于形态正常精子,活动力差的精子标本其苯胺蓝染色阳性率明显高于活动力正常精子.结论 苯胺蓝染色法可以检测精子核成熟度,在诊断由于精子核蛋白转型障碍引起的男性不育症中有一定的临床意义.     

精液白细胞与正常形态精子百分率的相关性分析

目的探讨精液白细胞和形态正常精子百分率的相关性。方法随机选取2014年4月—2015年8月来生殖中心进行就诊的男性800例,分析患者精液中的白细胞数量以及分析患者的精子形态,比较二者的相关性。结果正常形态精子百分率低于正常参考值的患者中有61.9%的白细胞数大于1×106,精子形态正常的患者有38.9%患者的白细胞数大于1×106,患者比例差异有统计学意义(P<0.05)。精子形态正常的患者(320例)和正常形态精子百分率低于正常参考值的患者(480例)相比,精子形态正常的比例远远大于正常形态精子百分率低于正常参考值的患者(P<0.05)。而正常形态精子百分率低于正常参考值的患者的头部异常、颈部和中间部分异常、尾部异常精子比例高于正常组(P<0.05)。正常形态精子百分率低于正常参考值的和正常形态的精子比例呈正相关;和大头精子百分率、锥形以及小头形态精子百分率呈负相关;和梨形以及其他形态的精子呈正相关。结论精液中的白细胞可以影响精子的参数,使得患者精液中的颈部或中部异常形态、头部和尾部异常形态的精子比例提升,具体机制有待进一步研究。     

飞行环境对飞行人员精子头部及尾部超微结构的影响

目的研究飞行环境对飞行人员精子头部及尾部超微结构的影响。方法利用WEILI-9000电脑精液自动分析仪和透射电镜对23例平均飞行1000h以上的歼击机、轰炸机、运输机飞行人员新鲜精液样本的精液常规及精子头、尾部超微结构进行观察。结果精液常规中,飞行人员精液量、液化时间、精子密度、a级精子活力正常;在电镜下飞行人员精子存在形态超微结构异常类型：①头部异常精子,包括尖头精子、头部含空泡精子;②顶体异常精子,包括顶体发育不良、缺失,顶体内形成包涵体精子;③尾部异常精子,尾部形态异常精子包括无尾精子、短尾精子,尾部结构异常精子包括线粒体缺失精子、尾部线粒体多种形态和结构异常。结论飞行环境对飞行人员精液常规无较大影响且具有可逆性,但可致精子顶体、头部、尾部线粒体微观结构异常。     

弱精子症患者精子中DKKL1的表达

目的探讨精子顶体相关基因（DKKL1）在弱精子症患者精子中的表达特征及临床意义。方法收集正常男性和弱精子症 患者精液,各取10 μL精液用全自动计算机辅助精液分析系统（CASA）对精液进行常规分析。为了避免白细胞和生精细胞对结 果的影响,剩余精液采用4个梯度的Percoll法离心分离和纯化精子。Trizol法提取精子RNA,实时荧光定量PCR从基因水平检 测DKKL1基因在正常人和弱精子症患者精子中的表达差异;最后采用Western blot方法从蛋白水平检测DKKL1蛋白在正常人 和弱精子症患者精子中的表达差异。结果精液常规分析结果显示,弱精子症和正常人两组之间的年龄、精液体积、精子浓度和 正常精子形态比例均没有统计学差异（P>0.05）。与正常对照组相比,弱精子症组PR 和PR+NP 精子的比例显著降低（P< 0.01）。实时荧光定量PCR结果显示,与正常对照组相比,DKKL1 mRNA在弱精子症患者精子中的表达量降低11.1倍。此外, Western blot结果显示,弱精子症组DKKL1蛋白的表达量与正常对照组相比,降低了2.4倍,差异具有统计学意义（P<0.01）,该 结果与实时荧光定量PCR结果一致。结论DKKL1在弱精子症患者精子中的表达水平明显下降,表明其与精子运动密切相关, 是导致弱精子症发生的原因之一。     

黄精赞育胶囊对弱精子症大鼠精子鞭毛超微结构的影响

目的探讨黄精赞育胶囊对弱精子症大鼠精子鞭毛超微结构的影响。方法采用雷公藤多甙制备大鼠弱精子症模型,通过透射电镜观察黄精赞育胶囊对精子尾部超微结构的影响。并采用生物发光法测定各组精子ATP含量。结果雷公藤多甙造模后,出现线粒体、外周致密纤维排列紊乱及缺失。黄精赞育胶囊不同剂量组治疗后上述损伤的细胞器均可得到不同程度的修复。黄精赞育组大、中剂量组治疗后精子ATP含量较模型组显著提高。结论黄精赞育胶囊提高精子运动能力与其修复损伤的线粒体及外周致密纤维有关。     

Differential analysis of two-dimensional gel electrophoresis profiles of spermatozoa protein in human normal motility sperm and idiopathic asthenospermia

Objective: To evaluate the application of two-dimensional electrophoresis in the research of differentially expressed proteins in the human asthenospermia. Methods: Two-dimensional gel electrophoresis was performed on 4 normal sperm samples from healthy men and 4 sperm samples from 4 asthenospermia patients. After silver staining, the differential expression proteins were analyzed by PDQuest 2D analysis software. Results: Six differential protein spots were identified. Four spots showed increased expression in the control gels compared with the patient gels. Conclusion: The protein profiles of differential expression between the normal spermatozoa and idiopathic asthenospermia were established and some differential proteins were found. The data of this study would establish the better fundament for further isolation and identification of differentially expressed proteins in human asthenospermia sperm.     

隐匿精子症和严重弱精子症的ICSI术前准备和疗效分析

目的总结运用卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术治疗隐匿精子症和严重弱精子症的诊治经验。方法283周期隐匿精子症及65周期严重弱精子症患者经药物治疗提高活动精子数量后再进入ICSI治疗周期,观察ICSI操作情况和受精、妊娠等治疗结果,并以52周期供精ICSI作为对照组。结果隐匿精子症和严重弱精子症两组分别有15周期和3周期因精子不足或卵子数量较多使用部分供精,其余均使用夫精完成ICSI操作治疗。隐匿精子症组的受精率与对照组比较有显著差异(77.4%vs85.1%,P=0.001),临床妊娠率无显著差异(40.7%vs38.8%,P=0.805);严重弱精子症组的受精率和临床妊娠率与对照组比较均无显著差异(81.2%vs85.1%,P=0.131;31.3%vs38.8%,P=0.404)。结论恰当的ICSI术前准备和熟练的ICSI操作技术能使隐匿精子症和严重弱精子症达到与正常精子相似或稍低的受精率和妊娠率。     

囊性纤维化跨膜转导调节因子表达率与人精子受精能力的关系

目的：研究人精子囊性纤维化跨膜转导调节因子（cystic fibrosis transmembrane conduc-tanceregulator,CFTR）表达率与精子受精能力间的关系。方法：运用间接免疫荧光法及蛋白印迹分析法研究CFTR在人精子上的表达及其在不同类型（生育组、不明原因性不育组及不育组）精子上的表达率情况。结果：通过间接免疫荧光法发现CFTR表达在人精子赤道板上,蛋白印迹分析进一步证实人精子中存在CFTR,分子量为170kD;采用间接免疫荧光技术,CFTR在生育组、不明原因性不育组及不育组（包括畸形精子症、弱精症、少精症）上的表达率有显著差异：CFTR在生育组精子上的表达率（88.13%±3.79%）远高于不明原因性不育组（52.93%±15.36%）及不育组（35.89%±20.41%）（P〈0.01）。结论：CFTR表达率下降与人精子受精能力降低有关。     

两种精子优选法对精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率的影响

目的：评价Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法对人精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率影响。方法：收集12例男性不育症患者精液样本,分别采用Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法(简称上游法)进行精子优选,应用伊红-Y染色分析优选前后精子活率和尾部低渗肿胀率,应用改良巴氏染色法分析优选前后精子形态。结果：①Percoll法和上游法优选后精子活率和尾部低渗肿胀率均明显高于优选前（P<0.01）,两种优选法间比较精子活率和尾部低渗肿胀率差异均无显著性（P>0.05）。Percoll法和上游法优选后B-G型精子尾部低渗肿胀率均明显高于优选前（P<0.01）,两种优选法间比较B-G型精子尾部低渗肿胀率差异均无显著性（P>0.05）。②Percoll密度梯度离心法和上游法优选后形态正常精子百分率均明显高于优选前（P<0.05）,上游法优选后形态正常精子百分率明显高于Percoll法优选后形态正常精子百分率（P<0.05）。上游法优选后锥型头、无定型头和颈/中段缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前（P<0.05）;Percoll法优选后锥型头、无定型头和尾部缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前（P<0.05）;上游法优选后无定型头、颈/中段缺陷和尾部缺陷形态异常精子百分率明显低于Percoll优选后（P<0.05）。结论：Percoll法和上游法优选后精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率较优选前明显改善, 此两种优选法均可广泛应用于生殖医学,其中上游法优于Percoll法。     

日本血吸虫尾蚴肌肉组织的超微结构及其生理功能

本文描述了日本血吸虫尾蚴体部和尾部肌肉组织超微结构特征及其分布。体部肌肉的超微结构为无纹肌,而尾部肌肉有如下特征:(1)肌原纤维具有横带;(2)线粒体大而多;(3)肌浆网位于致密体之间和 (4)未见糖原,可见溶酶体。形态的差异决定其生理机能的不同。     

Studies on the Relationship between Urokinase Plasminogen Activator(uPA)and Human Sperm Motility

Plasminogenactivators(PAs)arehighlyselectivetrypsin--likeserineproteaseabletoconverttheinactiveplasminogen,azymogenpresentinmostextracellularfluids,intoplasmin,alsoatrypsin--likeproteaseofbroadspecificity['].SeminalplasmalevelsofPAsinmenshowup60to100foldhigherthaninbloodplasma['].ThetwoknownPAs,urokinase--type(uPA)andtissue-type(iPA)aresecretedbyalargenumberofcellsandarethoughttoexhibitmultiplefunctionsinextracellularproteolysisaccompanyingtissueremodelingandcellmigration[']'Duetotheseprop…     

男性不育症患者精子形态结果分析

目的:对男性不育症患者异常精子形态结果进行统计分析,为临床提供诊断和治疗依据.方法:以2014年5月~2015年5月来我院生殖中心就诊的2180例患者为研究对象,采用改良巴氏染色法用西班牙SCA全自动精子质量分析系统进行精液常规分析和精子形态分析.根据精液分析的相关指标将对象按精子数量和精子活力两两分组即:少精子症组、精子正常数量组;弱精子症组、精子正常活力组;对各组结果进行统计学分析.结果:少精子症组和弱精症组中畸形精子的阳性率明显高于精子正常数量组和精子正常活力组.精子形态的畸形结构分类中,以头部异常为主,其次是颈部和尾部.颈部异常率,尾部异常率两组比较无统计学差异.少精子症组、弱精子症组与精子正常数量组、精子正常活力组的精子正常形态的百分率与其它组比较,有统计学意义.在精子头部尺寸分类中,以小头精子异常为主.头部形态分类中,以无定形头异常为主,其次是圆头异常.顶体区分类中,以空泡异常为主.少精子症组、弱精子症组与其它组比较;头部尺寸、顶体区有统计学意义,头部形态无统计学意义.结论:在不育症患者异常精子形态畸形结构分类中,精子形态异常以头部为主.精子头部尺寸异常分类中,以小头精子异常为主.头部形态异常分类中,以无定形头异常为主,其次是圆头异常.顶体区异常分类中,以空泡异常为主.少精子症、弱精子症患者子精子形态畸形率会明显升高.