44例人脑胶质瘤P53基因突变的研究

用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及ＤＮＡ直接测序研究了４４例人脑胶质瘤。发现１３例有Ｐ５３基因突变。３３例星形细胞瘤１２例有Ｐ５３基因突变。１１例非星形细胞瘤１例有Ｐ５３基因突变。ＤＮＡ直接测序证实所有突变均在Ｐ５３基因第５～８外显子，发现了一些新的突变位点，并发现在３例胶质母细胞瘤中存在Ｐ５３基因的多个位点的突变。该结果提示在大多数非星形细胞胶质瘤并不涉及Ｐ５３基因突变，Ｐ５３基因突变对星形细胞瘤的诊断有重要价值。特别是多位点的Ｐ５３基因突变可做为星形细胞瘤进展到胶质母细胞瘤的基因标志。     

脑胶质瘤P53,PKC,VEGF的表达及与预后关系

目的 了解脑胶质瘤中Ｐ５３、ＰＫＣ、ＶＥＧＦ阳性表达与脑胶质瘤分级和预后的关系。方法 采用免疫组化ＳＡＢＣ法观察Ｐ５３、ＰＫＣ、ＶＥＧＦ在脑胶质瘤中的表达；同时，随访了解患者生存情况。结果Ｐ５３、ＰＫＣ、ＶＥＧＦ在ＢＧ、ＭＧ、ＨＭＧ三组中都有不同程度的表达，而且，随着病理分级的增加，其表达率也逐渐增加，但各组间缺乏统计学差异，三者表达在脑胶质瘤中的意义有待进一步宗病例的分析。Ｐ５３、ＰＫＣ、ＶＥＧ     

脑肿瘤中P53基因突变与突变型P53蛋白表达的研究

采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）法对４１例脑肿瘤进行Ｐ５３基因突变的检测，并与抗突变型Ｐ５３蛋白单抗的免疫组化染色结果相对照，结果显示脑肿瘤中Ｐ５３基因突变率为３４．１％（１４／４１），胶质瘤为２８％（１０／３６）。Ｐ５３基因突变与突变型Ｐ５３蛋白表达具有高度一致性，且二者均与脑肿瘤的分化程度有关。Ｐ５３基因突变及蛋白的表达不仅出现在高恶度胶质瘤及转移癌，而且可出现在低恶度胶质瘤中，表明Ｐ５３基因的突变在脑瘤的发生、发展过程中起重要作用。     

p53,CerbB—2和PCNA在脑胶质瘤中表达的意义及其 …

目的 研究７６例脑质瘤的ｐ５３ＣｅｒｂＢ－２和ＰＣＮＡ表达意义及其相关性。方法 应用ＳＰ微波免疫组化技术和统计学分析。结果 （１）在７６例脑胶质瘤组织中；ｐ５３，ＣｅｒｂＢ－２和ＰＣＮＡ的阳性表达率分别是４４．７４％（３４／７６），３４．２１％（２６／７６）和８０．２６％（６１／７６）。（２）ｐ５３的表达强度与胶质瘤的组织学类型和恶性程度呈显著正相关（Ｐ〈０．０１）。（３）ｐ５３ＣｅｒｂＢ－２和Ｐ     

脑星形胶质细胞瘤组织P21^WAF1／CIP1mRNA的表达与p53？…

目的：探讨脑星形胶质细胞瘤组织Ｐ２１＾ＷＡＦ１／ＣＩＰ２ｍＲＮＡ的表达与ｐ５３基因突变的关系及其意义。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对３８例新鲜脑星形胶质细胞瘤组织中上述两种基因进行研究。结果：ｐ５３基因在脑星形胶质细胞瘤组织中的突变率为２８．９％（１１／３８），且在Ⅲ、Ⅳ级肿瘤突变率显著高于Ⅰ～Ⅱ级者（Ｐ〈０．０５）；Ｐ２１＾ＷＡＦ１／ＣＩＰ１ｍＲＮＡ在Ⅲ，Ⅳ级中的表达显著低于Ⅰ～     

儿童恶性脑胶质瘤P53与细胞增殖核抗原表达的预后价值

目的探讨Ｐ５３与细胞增殖核抗原（ＰＣＮＡ）在儿童恶性脑胶质瘤表达的预后价值。方法采用ＡＢＣ免疫组化方法对３３例儿童恶性脑胶质瘤Ｐ５３与ＰＣＮＡ表达进行回顾性研究。结果３３例儿童恶性脑胶质瘤中Ｐ５３表达阳性１５例（４５％），ＰＣＮＡ表达阳性２９例（８８％）。间变性星形细胞瘤、胶质母细胞瘤及髓母细胞瘤Ｐ５３蛋白表达的阳性比例分别为５／１２、９／１６、１／５，肿瘤Ｐ５３蛋白阴性者其细胞增殖活性均较阴性者高（Ｐ＜００５）；ＰＣＮＡ标记指数与肿瘤的恶性程度呈正相关（Ｐｅａｒｓｏｎ列联系数＝０．５６，Ｐ＜００１）。Ｐ５３或ＰＣＮＡ表达阳性者存活率分别显著低于Ｐ５３或ＰＣＮＡ表达阴性者（Ｐ＜００５，Ｐ＜００１）。结论Ｐ５３基因突变以及由此导致的细胞异常增殖与儿童恶性脑胶质瘤的发生和发展有关；ＰＣＮＡ能较好地反映胶质瘤的恶性程度，其表达检测对临床预后判定有重要参考价值。     

抑癌基因p16蛋白在脑胶质瘤中的缺失及意义

目的 研究ｐ１６蛋白的缺失率与脑胶质瘤性程度的关系。方法 应用ＳＰ免疫级化检测７２例人脑胶质瘤，４个人脑体外恶性胶质瘤细胞系及１０例正常脑组织中抑癌基因ｐ１６蛋白的表达，结果 正常脑组织、Ｉ级、ＩＩ级、ＩＩＩ级、ＩＶ级、ＣＬ中ｐ１６蛋白的缺失率分别为０．１０％，３１．８％，６３．２％，７１．４％，１００％，脑胶质瘤细胞系，高恶度脑胶质瘤（ＷＨＯ，ＩＩＩ级～ＩＶ级）与低恶度脑胶质瘤（ＷＨＯ，Ｉ级～Ｉ级）之间差异显（Ｐ〈０．０５），结论 ｐ１６蛋白的缺失率与脑胶质瘤的汪事分极和恶性程度密切相关，提示ｐ１６基因在脑胶质瘤的发生，发展过程中起重要作用。     

脑胶质瘤中c-myc基因扩增、H-ras及P53基因突变的检测

胶质瘤的发生是由于染色体及基因异常所致，对癌基因ｃ－ｍｙｃ、Ｈｒａｓ及抑癌基因Ｐ５３的检测，发现Ｈｒａｓ与胶质瘤的发生有关，而胶质瘤的恶性程度与ｃ－ｍｙｃ癌基因的扩增及抑癌基因Ｐ５３的突变有关。材料和方法２２例肿瘤标本均为手术切除的新鲜瘤组织，经...     

大鼠蛛网膜下腔出血后脑组织P53基因表达与细胞损伤

目的　探索防治蛛网膜下腔出血（ Ｓ Ａ Ｈ）引起的脑血管痉挛（ Ｃ Ｖ Ｓ）的新途径。方法　利用大鼠 Ｓ Ａ Ｈ 模型，设立对照组、 Ｓ Ａ Ｈ 组、放线菌素酮治疗组（ Ｃ Ｈ Ｘ 组）。经 Ｄ Ｉ Ｇ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ 对不同时间大鼠脑组织 Ｐ５３基因进行检测。结果　对照组、 Ｃ Ｈ Ｘ 组 Ｐ５３基因表达相近， Ｓ Ａ Ｈ 组 Ｐ５３基因表达增高。显微镜下见 Ｃ Ｈ Ｘ 组病理形态学变化近似正常， Ｓ Ａ Ｈ 组神经细胞损伤严重。结论　大鼠 Ｓ Ａ Ｈ 后 Ｃ Ｖ Ｓ所致的脑缺血，脑组织 Ｐ５３基因表达明显增高。大鼠 Ｓ Ａ Ｈ 模型 Ｐ５３基因表达与脑神经元细胞损伤明显相关。放线菌素酮通过抑制 Ｐ５３基因表达从而抑制其诱导的损伤。     

P16基因改变与脑胶质瘤生物学特性相关性的研究

目的 研究Ｐ１６基因改变与脑胶质瘤恶性程度分级及肿瘤细胞增殖活性之间的关系。方法 检测４１例不同级别脑胶质瘤标本和７例正常脑组织Ｐ１６基因改变和ＰＣＮＡ蛋白表达情况。结果 实验组Ｐ１６基因缺失和突变２２例（５４％），ｍＲＮＡ和蛋白表达缺失分别为２３例（５６％）和２７例（６６％），三者改变非一对一关系。Ｐ１６基因改变和ＰＣＮＡ指数随脑胶质瘤恶性程度级别增高呈上升趋势（Ｐ〈０．０５）。Ｐ１６基因改变与     

脑胶质瘤P16基因分子病理研究

目的：检测１５例脑胶质瘤中Ｐ１６基因及蛋白的存在状况。方法：用复合ＰＣＲ和免疫组织化学技术检测１５例脑胶质瘤。结果：显示Ｐ１６基因与Ｐ１６蛋白丢失率均为６０．０％（９／１５）；Ｐ１６基因和蛋白丢失主要见于Ⅲ级（８５．７％）和Ⅳ级（１００％）脑胶质瘤。结论：本文结果间接提示Ｐ１６基因和蛋白的丢失可能与脑胶质瘤的发生和演化有关。     

脑肿瘤中P53蛋白的表达及Ki－67LI的相关性研究

利用突变型Ｐ５３蛋白的单抗及Ｋｉ－６７单抗对５０例冰冻标本进行检测，结果发现，脑肿瘤中突变型Ｐ５３蛋白的表达阳性率为４６％。低恶度胶质瘤、高恶度胶质瘤及转移癌中Ｐ５３蛋白表达的阳性率不同，分别为１８．２％、５３．８％及１００％。Ｐ５３蛋白表达阳性的肿瘤中高Ｋｉ－６７ＬＩ比例为７０％，其中位数及均数为１４．３％、２０．７６±１８．３（％），而无Ｐ５３蛋白表达的脑瘤中，ｋｉ－６７ＬＩ中位数及均数分别为１．３９及５．１９±９．０（％）。结果表明，突变型Ｐ５３蛋白的表达与脑肿瘤的组织类型，分化程度及细胞的增殖有关，而它的高表达又可能是肿瘤恶性表型或转移的标志之一。     

脑星形细胞瘤P~(53)抗癌基因突变的研究

目的研究Ｐ５３抗癌基因突变与脑星形细胞瘤恶性程度的关系。方法采用非同位素ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析法检测了３１例星形细胞瘤患者Ｐ５３抗癌基因的突变情况。结果（１）９例存在突变，突变区域分布于第５～８外显子中，以第６外显子突变率最高，第９外显子未测得突变病例。（２）２例存在多点突变，其中１例同时存在第５、６外显子突变，另１例同时存在第６、７外显子突变。（３）病理级别为Ⅰ、Ⅱ级组的突变率为０，Ⅲ级组的突变率为３６．４％，Ⅳ级组的突变率为５０％。Ⅲ、Ⅳ级组与Ⅰ、Ⅱ级组的突变率比较，均存在极显著差异（Ｐ＜０．０１）。结论Ｐ５３基因的突变和星形细胞瘤的恶性程度有关     

反转录病毒介导的HSV-tk基因治疗大鼠脑胶质瘤的实验研究

目的：进行Ｃ６大鼠脑胶质瘤的基因治疗实验研究。方法：采用反转录病毒介导的基因转移和ＡＣＶ体内治疗方法进行研究。结果：构建了带有ＨＳＶ－ｔｋ基因的反转录病毒载体ＧＩＮａＴＫ，应用脂质体转移方法将ＧＩＮａＴＫ导入反转录病毒包装细胞ＰＡ３１７，成为产病毒细胞ＰＡ３１７ＴＫ，用带有ＨＳＶ－ｔｋ基因的复制缺陷型反转录病毒感染Ｃ６细胞，命名为Ｃ６ＴＫ细胞，对ＧＣＶ和ＡＣＶ的敏感性分别高于亲本４５０倍和１０倍；成功地建立了大鼠脑胶质瘤模型，并证实转染细胞Ｃ６ＴＫ的成瘤效应未改变，存活期约为１５天；而经ＡＣＶ治疗后，含有Ｃ６ＴＫ细胞的肿瘤生长明显被抑制，大鼠生存期延长为５７．８±８．０７天，尤其是采用ＰＡ３１７ＴＫ细胞混和治疗组和原位治疗组，肿瘤基本消失，大鼠生存期显著延长，混和治疗组存活１２０天以上，原位治疗组存活至７１．４±３６．１天。ｔ检验，Ｐ值均小于０．００１。结论：ＨＳＶ－ｔｋ／ＡＣＶ系统基因治疗大鼠脑胶质瘤疗效显著。     

P53及其下游靶基因与癫痫

Ｐ５３是一种抑癌基因，其编码产物野生型Ｐ５３蛋白是细胞生长的“监控器”。目前公认Ｐ５３的主要功能是整合细胞对各种危急状况的反应，其信息传递途径上游是各种危急状况的信息，下游是Ｐ５３蛋白的靶基因，Ｐ５３蛋白通过靶基因Ｐ２１ｗａｆ－１及Ｇａｄｄ４５调控Ｇ１关卡，也参加了Ｇ２／Ｍ关卡的调控；Ｐ５３通过上调靶基因Ｂａｘ及ＩＧＦ－ＢＰ－３，抑制Ｂｃｌ－２基因，调控凋亡。ｍｄｍ－２基因是Ｐ５３基因的负调控因子，通过与Ｐ５３基因形成反馈调节环来抑制Ｐ５３的功能。在多种癫痫模型中已经证实，癫痫发作后细胞死亡中存…     

脑星形胶质细胞瘤组织P21~(WAF1/CIP1)mRNA的表达与p53基因突变的关系

目的：探讨脑星形胶质细胞瘤组织Ｐ２１~(WAF1/CIP1) ｍＢＮＡ的表达与p~(53)基因突变的关系及其意义。方法：应用 ＲＴ－ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对３８ 例新鲜脑星形胶质细胞瘤组织中上述两种基因进行研究。结果：p~(53)基因在脑星形胶质细胞瘤组织中的突变率为２８．９％（１１／３８），且在Ⅲ、Ⅳ级肿瘤突变率显著高于Ⅰ～Ⅱ级者（Ｐ＜０.０５）；Ｐ２１~(WAF1/CIP1)ｍＲＮＡ在Ⅲ，Ⅳ级中的表达显著低于Ⅰ～Ⅱ级肿瘤组织（Ｐ＜０．０１）；１１例p~(53)基因突变组中，Ｐ２１~(WAF1/CIP1)ｍＲＮＡ表达阳性率明显低于２７例p~(53)基因未突变组（Ｐ＜０．０５）。结论：脑星形胶质细胞瘤组织中Ｐ２１~(WAF1/CIP1)ｍＲＮＡ的低表达可能与p~(53)基因突变有关。     

HSP70表达与人脑胶质瘤恶性程度的关系

目的 探讨热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）表达与脑胶质瘤增殖及凋亡的关系。方法 利用免疫组化方法观察２８例脑胶质瘤患者手术标本的ＨＳＰ７０表达与肿瘤恶性程度的关系及阻断ＨＳＰ７０表达后对肿瘤细胞生长的影响。结果 ２５例有ＨＳＰ７０表达,表达强度与肿瘤与肿瘤恶性程度成正比。结论 人脑星形胶质瘤广泛存在ＨＳＰ７０过度表达,ＨＳＰ７０可以作为判断肿瘤恶性程度及预后的一个参考指标,并可作为肿瘤实验治疗的一个靶指标。     

胶质瘤患者抑癌基因RASSF1A启动子区甲基化研究

目的探讨RASSF1A抑癌基因在胶质瘤组织及脑正常组织中甲基化程度及与临床特征的关系。方法46例脑胶质瘤组织及6例脑正常组织采自手术患者。用甲基化特异性聚合酶链反应（MS—PCR）方法检测46例胶质瘤（其中包括星形细胞瘤19例，室管膜瘤16例，胶质母细胞瘤11例）及6例脑正常组织中RASSF1A基因甲基化状态。并对RASSF1甲基化发生率与临床各因素之间的关系进行分析。结果（1）46例脑胶质瘤组织DNA标本中RASSF1A基因甲基化发生率为65．2％（30／46）；6例脑正常组织中RASSF1A基因启动子未发生甲基化；RASSF1A在胶质瘤和脑正常组织之间发生甲基化率比较差异有显著性，（P=0．017，P〈0．05）。在46例脑胶质瘤中RASSF1A有30例发生甲基化，其中低级别组14例（14／26），高级别组16例（16／20），两组之间甲基化率比较无明显差异，（P〉0．05）。其中星形细胞瘤，室管膜瘤，胶质母细胞瘤甲基化发生频率分别为63．2％（12／19），68．8％（11／16），63．6％（7／11）。在各组之间甲基化发生率比较均无统计学意义，（P〉0．05）。②RASSF1A基因甲基化程度与脑胶质瘤病理分型、肿瘤大小之间无显著相关性。结论RASSF1A在胶质瘤中有甲基化发生，在脑正常组织中未发生甲基化，检测胶质瘤中RASSF1A基因启动子区甲基化情况对临床判断肿瘤发生发展有指导意义。     

逆转录病毒载体介导中国单疱毒TK基因转导脑胶质瘤细胞

研究载中国单疱病毒胸苷激基因逆转录病毒 且体和羟甲基无环鸟苷体外转染和杀伤脑胶质瘤效果，探索应用该系统基因治疗脑胶质瘤。方法：ＲＶ－ＨＳＶ－ＴＫｃ重组体病毒感染胶质瘤细胞，Ｇ４１８筛选转染阳性胶质瘤细胞克隆。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测抗Ｇ４１８胶质瘤细胞中的ＴＫｃ基因表达。     

WAF1在人脑胶质瘤中的定量检测及与肿瘤病理学相关性的研究

目的 探讨野生型Ｐ＾５３激活片段（ＷＡＦ１）在人脑胶质瘤中的表达及与肿瘤病理学的相关性。方法 用４６例胶质瘤组织及１２例脑外伤组织ＲＮＡ逆转录,然后用ＰＣＲ定量检测ＷＡＦ１ｍＲＮＡ。结果 及外伤ＷＡＦ１ｍＲＮＡ全部表达,用激光扫描仪检测的总面积及百分面积均大于胶质瘤,两者有显著性差异。胶质瘤ＷＡＦ１表达均在病理分级较低级别中。结论 ＷＡＦ１的有无表达及定量多少可以作为判断脑质瘤恶性程度及预后的一个