琼脂糖等电聚焦法分离碱性磷酸酶同工酶在骨质疏松诊断中的应用

目的 探讨碱性磷酸酶(ALP)同工酶在骨质疏松诊断中的应用.方法 采用神经氨酸苷酶处理标本,用琼脂糖等电聚焦法(IEF)分离测定50例健康体检者和55例骨质疏松患者血清中的ALP同工酶.结果 经神经氨酸苷酶处理后,用琼脂糖IEF能分离肝和骨ALP.发现骨质疏松患者中31例有一等电点(pI)为6.8的区带,阳性率为56.4%.结论 改良的琼脂糖IEF法能分离ALP同工酶,pI 6.8的区带对骨质疏松的诊断具有一定的价值.     

琼脂糖电泳法分离血清碱性肝型和骨型同工酶方法的改进

目的：介绍一种琼脂糖电泳法分离血清碱性磷酸酶肝型和骨型同工酶的改进方法。方法：将血清用神经氨酸苷酶处理,在此基础上选用四种缓冲液配制成０．７％的凝胶,加入１％的ＴｒｉｔｏｎＸ－１００电泳,并进行荧光扫描。     

碱性磷酸酶同工酶在临床诊断中的应用

碱性磷酸酶 (ALP)定位于生物膜的基质小泡 ,是质膜标志酶。是使磷酸单酯在碱性 (p H9～ 1 0 )条件下分解 ,生成无机正磷酸的一组水解酶类。血清 ALP是来源于各组织 ALP同工酶的混合物。在临床上有意义的碱性磷酸酶有高分子碱性磷酸酶、Kasahara碱性磷酸酶同工酶、胎盘碱性磷酸酶同工酶等。1　高分子碱性磷酸酶　 (High-molecular-mass ALP、HMALP)　　 Price在梗阻性黄疸的病人体内发现了“快肝型” ALP,用聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,此区带位于起始处 ;用淀粉凝胶 ,此区带位于β-球蛋白处 ;用葡萄糖凝胶过滤层析收集到的 1 9S片段[1] …     

应用超薄层琼脂糖凝胶等电聚焦技术检测人细胞酸性磷酸酶表型

应用超薄层琼脂糖胶等聚信，随机检测武汉地区５１１例健康成人红细胞酸性磷酸酶表现型，结果ＥＡＰ－Ａ型２４例（４．７０％），ＥＡＰ－ＢＡ型１７３例（３３．８６％），ＥＡＰ－Ｂ型３１４例（６１．４５％），计算出基因频率ＥＡＰ＾ａ＝０．２１６，ＥＡＰ＾ｂ＝０．７８３８。经Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡公式检验Ｐ〈０．９９５，吻合度良好，频率分布与北京、西安、辽宁等地区对比差我显著性意义，室温保存６周痕Ｅ     

骨碱性磷酸酶同工酶在骨质疏松诊断中的应用

为了解骨碱性磷酸同工酶（ＢＡＰ）与老年性骨质疏松症的关系，我们用单光子骨密度仪测定骨密度，诊断了老年性骨质疏松症７５例，并检测了２４０例健康老年人，现报告如下。１材料和方法１．１仪器和试剂：骨密度仪ＳＲ２００由北京地矿研究所生产，美国Ｍｏｎａｒｃｈ２...     

碱性磷酸酶同工酶的动力学研究

本文从人肝、骨、小肠和胎盘组织中分别提取制备肝、骨、小肠和胎盘型碱性磷酸酶。并对这4种同工酶的动力学进行了系统研究。根据胎盘型碱性磷酸酶在56℃×2 h 活性不变的热稳定性,及其 Km 为4.09×10~(-5)mol/L、激活剂是1.2 mmol/LMg~(2+)和最适 pH10.5等的动力学参数,设计建立了一种以 Mg~(2+)作为激活剂的胎盘性碱性磷酸酶荧光测定法。本法的灵敏度比 Miggiano 的 EDTA抑制剂法提高约60倍,准确性达99.8±1.4%,特异性达98.3±1.5%,组内变异系数为1.7%;适于临床推广应用。     

应用超薄层琼脂糖凝胶等电聚焦技术检测人红细胞酸性磷酸酶表型

应用超薄层琼脂糖凝胶等电聚焦（ＵＬＡＧＩＦ），随机检测武汉地区５１１例健康成人红细胞酸性磷酸酶（ＥＡＰ）表现型，结果ＥＡＰ－Ａ型２４例（４．７０％），ＥＡＰ－ＢＡ型１７３例（３３．８６％），ＥＡＰ－Ｂ型３１４例（６１．４５％），计算出基因频率ＥＡＰａ＝０．２１６２，ＥＡＰｂ＝０．７８３８。经Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡公式检验Ｐ＞０．９９５，吻合度良好，频率分布与北京、西安、辽宁等地区对比差异无显著性意义，室温保存６周血痕ＥＡＰ分型无困难，为法医物证学提供了一项灵敏、可靠的检测方法。     

大鼠实验性肝癌碱性磷酸酶及其同工酶的研究

本文以0.05％的2-Fluorenylacetamide(N-2-氟基乙酰胺)(2FAA)制成大鼠肝癌模型,进行肝癌组织及血清中碱性磷酸酶(ALP)及其同Ⅰ酶的生化研究,结果表明喂养2FAA后肝组织及血清中ALP均明显升高,且两者ALP的升高呈正相关。ALP组织化学染色显示正常肝组织中仅有少许部位阳性,而在卵圆细胞及肝癌细胞中ALP明显增多。同工酶研究显示卵圆细胞,肝癌细胞及鼠胎肝细胞中均可见胎盘型ALP,表明卵圆细胞为癌前期病变。测定血清及组织中ALP活力尤其是胎盘型ALP的酶组织化学染色有利于大鼠肝癌模型的早期诊断。     

血清耐热碱性磷酸酶的测定在正常孕妇与高危孕妇中的应用

探讨血清耐热碱性磷酸酶（HSAP）在正常孕妇与高危孕妇中的应用。方法采用放射免疫的方法对153例孕妇进行血清耐热碱性磷酸酶的测定，同时均行胎心监护。结果孕周＜41周与41周≤孕周＜42周的正常孕妇的血清HSAP水平无差异，但后者的平均值略低于前者，妊娠高血压综合症、胎儿宫内发育迟缓（IUGR）、合并胎盘钙化的胎儿宫内窘迫血清HSAP降低，单纯服心羊水异常的胎儿宫内窘迫患者血清HSAP与正常孕妇无差异，服监监测胎盘功能不似血清HSAP直接，阳性率低。结论测定血清HSAP可以反映胎盘功能，对高危妊娠的监测及胞儿领后的估计有一定临床参考价值。     

2143例0～12岁儿童血清碱性磷酸酶结果探讨

目的探讨2143例0～12岁儿童血清碱性磷酸酶(ALP)的结果。方法应用SIEMENS Dimension RxL Max全自动生化分析仪检测2143例来本院体检的0～12岁儿童血清ALP,对所得的数据进行统计学处理。结果儿童血清ALP值在3～岁、9～岁和10～岁组男女性别间差异有统计学意义(P<0.05),其余组男女性别间差异均无统计学意义。儿童血清ALP值在1～岁、10～岁、11～12岁年龄组间差异有统计学意义(P<0.05),而其他年龄组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 0～12岁儿童血清ALP水平显著高于成人。儿童时期血清ALP水平与其年龄和性别相关,应根据不同性别、年龄的儿童相应的发育情况给予不同的参考范围。     

238例恶性淋巴瘤患者中性粒细胞碱性磷酸酶染色结果分析

目的了解中性粒细胞碱性磷酸酶(ALP) 染色在淋巴瘤方面的应用是否具有其检测意义。方法将恶性淋巴瘤骨髓未侵犯189例、骨髓侵犯23例及淋巴瘤细胞白血病26例患者的新鲜干燥血片,用偶氮偶联法做ALP染色,将其结果进行分析并与40例正常人的ALP染色结果比较。结果恶性淋巴瘤患者随着病情的进展,其ALP积分逐渐增高,积分>250分的出现率在正常对照、恶性淋巴瘤骨髓未侵犯和骨髓侵犯及淋巴瘤细胞白血病组分别为0%、4.8%、39.1%、53.9%,具有统计学差异。结论随着恶性淋巴瘤的病情进展,其ALP活性可逐渐增高,提示ALP活性的增高,可间接反映恶性淋巴瘤病情的活跃及进展程度,此项化学染色结果对恶性淋巴瘤临床分期及预后的判断具有一定的参考意义。     

碱性磷酸酶在脓毒症中的临床意义

碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)是Suzuki等在1907年首先发现的,生理作用是非特异性水解磷酸单酯键,最适pH值为8.6￣10.3,因此称为碱性磷酸酶,临床上长期用作诊断肝、胆和骨组织疾病的实验室参数之一[1,2]。近年来研究发现,ALP在脓毒症患者发病机制和治疗方面有新的作用。本文就此方面的研究进行综述。     

骨碱性磷酸酶检测在婴幼儿佝偻病诊断中的作用

目的:探讨骨碱性磷酸酶 (BAL P)检测在婴幼儿佝偻病诊断中的价值。 方法 :选择临床资料、病史、症状、体征、X线及血生化 (钙、磷、碱性磷酸酶 )检查和小儿 BAL P测定结果完整者 4 6 0例 ,对综合资料进行分析。 结果 :和田地区婴幼儿 BAL P界值点以 >2 0 0 U/ L 为宜。佝偻病占 4 6 .3% (2 13/ 4 6 0 ) ,以活动期为主 ,佝偻病血BAL P的检出率为 87.8% ,单纯钙的检出率为 11.2 % ,磷检出率为 13.1% ,碱性磷酸酶检出率为 6 3.4 % ,与患儿临床症状、体征的符合率达 89%以上 ,与 X线检查结果的符合率达 78.9%。 结论 :BAL P测定操作简单 ,病人痛苦小 ,特异性强 ,灵敏度高 ,所用设备简单 ,能快速得出检验结果。 BAL P的高低与婴幼儿佝偻病的严重程度呈正相关 ,依靠单纯 BAL P检测结果便可诊断佝偻病 ,值得在临床上推广应用     

基因工程耐热碱性磷酸酯酶的表达与分离纯化

目的　获得可用于探针的非放射性标记的耐热碱性磷酸酯酶。方法　把耐热碱性磷酸酯酶的基因克隆入质粒pJLA5 0 3上 ,在E .coliMph44中表达。表达的酶用聚乙烯亚胺沉淀核酸 ,热变性 ,硫酸铵沉淀 ,层析等方法纯化。结果　经表达纯化后每克细菌可获得 1.5mg的酶 ,酶的纯度为 90 % ,比活为 78.4U/mg。结论　耐热碱性磷酸酯酶可在E .coliMph44中表达 ,表达的酶可用热变性和其它蛋白质纯化方法来纯化。     

骨碱性磷酸酶检测在维生素D缺乏性佝偻病诊断与疗效评估中的价值

目的:探讨骨碱性磷酸酶(以下简称BALP)在维生素D缺乏性佝偻病诊断及疗效评估中的价值。方法:应用酶联免疫法原理测定治疗组末梢血BALP,同时摄双腕X线照片,对照组测定血钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP),将两组阳性率进行比较。结果:治疗组BALP异常值检出率(≥200U/L)占52.9%,远高于对照组Ca、P、ALP异常值检出率,经统计学处理差异有显著性。在267例BALP>250U/L(阳性结果)中,有佝偻病临床表现246例(92.1%),符合佝偻病X线表现238例(89.1%)。在BALP>250U/L组中符合佝偻病诊断的比BALP200～250U/L组高,经统计学处理差异有显著性。结论:BALP对佝偻病的检测比Ca、P、ALP要敏感,以BALP>250U/L作为诊断佝偻病标准与佝偻病临床表现和腕关节X线照片有较高的符合率。对BALP检出异常值(≥200U/L)建议早期干预和治疗,1～3个月治疗后复查BALP作为疗效评估在临床收到较好效果,值得推广。     

碱性磷酸酶(ALP)试剂对血清镁测定的影响

目的 探讨在使用日立7060A型全自动生化分析仪时,碱性磷酸酶试剂对镁离子测定的影响情况及解决办法.方法 采用不同的测试方式、两种剂型、两种含镁离子浓度的碱磷酶试剂来研讨对两种方法检测血清镁的影响情况.结果 含镁浓度越高的ALP试剂对血清镁测定影响越大,对两种方法测定血清镁的影响程度不一样.结论 可使用不含或少含镁离子的ALP试剂、清洗试剂针、设置合理的通道和选择适当测定方法来消除或减少ALP试剂对血清镁测定的影响.     

乳鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性检测方法初探

目的探讨乳鼠成骨细胞碱性磷酸酶活性的检测方法,为研究骨代谢异常及骨质疏松症等骨病提供简便可靠的检测手段.方法采用经体外培养的乳鼠成骨细胞,制备上清液、裂解液和冻融液样本,分别用二乙醇胺、2-乙基氨基乙醇、2-氨基-2-甲基-1-丙醇3种不同缓冲液的试剂方法,测定其碱性磷酸酶活性,并作比较分析.结果使用二乙醇胺缓冲液的试剂方法,对3种标本的测定值都最高,与各组比较分析,差异均有显著性(P＜0.01),且变异系数最小,其他两种方法的测定结果无明显差异(P＞0.05).用3种不同缓冲液试剂方法检测3种不同方法制备的标本,均以裂解液中碱性磷酸酶活性最高,冻融液次之,上清液最低,分析结果,差异均有显著性(P＜0.01).结论用二乙醇胺缓冲液的试剂方法,测定体外培养乳鼠成骨细胞裂解液碱性磷酸酶的活性,效果较为理想.