晚期胃癌血清长链非编码RNA H19水平与含紫杉醇方案化疗敏感性的关系

目的 探讨晚期胃癌血清长链非编码RNA（lncRNA） H19水平与含紫杉醇方案化疗敏感性的关系。方法 收集本院2014年6月至2016年6月接受含紫杉醇方案化疗的73例晚期胃癌患者,收集其血清标本并采用实时定量PCR（QPCR）法检测H19水平,分析胃癌患者血清H19水平与临床病理特征（性别、年龄、ECOG评分、肿瘤部位、分化程度及病理类型）的关系,采用RECIST 1.1版评价近期疗效并随访无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）,分析胃癌患者血清H19水平与近期疗效及预后的关系。选取81例健康体检者的血清标本作对照。采用受试者工作特征曲线（ROC）评价血清H19水平在胃癌对紫杉醇方案化疗反应的预测价值。结果QPCR检测发现,73例胃癌患者的血清H19水平为3.022±0.210,高于81例健康体检者的1.193±0.082,差异有统计学意义（P<0.05）。血清 H19水平与性别、年龄、ECOG评分、肿瘤部位及病理类型均无关,但与分化程度有关,其中低分化者的H19水平为3.923±0.254,高于高、中分化的1.732±0.188,差异有统计学意义（P<0.05）。73例均完成2个周期以上的化疗,可评价近期疗效,化疗敏感27例的血清H19水平为1.683±0.166,低于化疗抵抗46例的3.809±0.256,差异有统计学意义（P<0.05）;ROC曲线分析显示血清H19水平在不同紫杉醇方案化疗反应胃癌预测中的曲线下面积为0.982（95%CI：0.966～0.998）。至随访截止日期,73例晚期胃癌患者的中位PFS为6.2个月,中位OS为10.6个月。以血清H19水平的中位值将患者分为高水平组（＞2.550）和低水平组（≤2.550）,其中低水平组的中位PFS为7.2个月,高于高水平组的5.3个月（P<0.05）;H19不同水平组中位OS的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 晚期胃癌血清H19水平升高,与含紫杉醇方案化疗敏感性及PFS均有关,其中低水平者的疗效较好且PFS较长。     

晚期胃癌患者血浆微小RNA-7及其临床意义分析

目的 探讨晚期胃癌血浆微小RNA-7（miR-7）水平及其临床意义。方法 收集本院2013年6月至2016年6月的75例晚期胃癌患者及同期73例健康体检者的血浆标本,采用荧光实时定量PCR（QPCR）技术检测其miR-7水平,分析胃癌患者血浆miR-7水平与临床病理特征的关系,根据随访资料分析胃癌患者血浆miR-7水平与预后的关系。结果 QPCR检测发现,75例胃癌患者的miR-7水平为（0.351±0.258）,低于73例健康体检者的（1.088±0.464）,差异有统计学意义（P＜0.05）。胃癌患者血浆miR-7水平与性别、年龄、ECOG评分、肿瘤部位及病理类型均无关,与分化程度有关,其中低分化者的miR-7水平为0.254±0.155,低于高、中分化者的0.514±0.313,差异有统计学意义（P＜0.05）。全组的中位无疾病进展期（PFS）和生存期（OS）分别为6.6个月和10.5个月。miR-7高表达组（＞0.351）的中位PFS为7.1个月,优于低表达组（≤0.351）的5.8个月（P＜0.05）,两组中位OS的差异无统计学意义（10.3个月 vs. 10.6个月,P＞0.05）。结论 晚期胃癌血浆miR-7水平降低,且低水平的分化程度较低,miR-7高水平的中位PFS较好,该指标在胃癌的诊断及预后评估上有较好价值。     

血浆microRNA-510水平与晚期胃癌含奥沙利铂化疗方案疗效的关系

目的 探讨血浆microRNA-510（miR-510）水平与胃癌含奥沙利铂化疗方案疗效的关系。方法 收集本院112例接受含奥沙利铂方案化疗的晚期胃癌患者外周血标本并采用实时定量PCR检测miR-510水平,采用RECIST 1.1版标准评价化疗2个周期后的近期疗效,以CR+PR为敏感组、SD+PD为不敏感组,分析化疗敏感情况与血浆miR-510水平的关系,分析不同血浆miR-510表达患者的远期生存情况。选取同期于本院行健康体检的94例外周血标本为对照。结果 胃癌患者的血浆miR-510水平为3.417±0.574,高于健康体检者的1.017±0.032,差异有统计学意义（P＜0.05）。血浆miR-510表达与胃癌TNM分期、分化程度、淋巴结转移及CEA水平有关（P＜0.05）;112例晚期胃癌患者经2个周期化疗后,获PR 48例、SD 37例、PD 27例,其中化疗敏感48例患者的血浆miR-510为2.362±0.534,低于化疗不敏感者的4.208±0.602,差异有统计学意义（P＜0.05）。全组患者的中位无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）分别为7.6个月和11.5个月。以血浆miR-510水平的中位数3.053为界值分为miR-510高水平组和低水平组,其中miR-510高水平组的中位PFS和OS分别为5.3个月和10.2个月,低于miR-510低水平组的8.4个月和12.4个月,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 胃癌患者血浆miR-510水平升高,且与含奥沙利铂方案的化疗敏感性有关,miR-510水平较高者的预后较差,对于预测晚期胃癌患者含奥沙利铂方案的效果及预后有一定价值。     

miRNA-154在星形细胞瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨星形细胞瘤组织和血清中微小RNA-154（miR-154）的表达及其临床意义。方法 收集2011年1月至2015年12月手术切除的星形细胞瘤组织76例和癌旁组织36例,采用荧光实时定量PCR（QPCR）法检测上述组织中miR-154的表达水平并比较星形细胞瘤组织及癌旁组织中的表达差异。同时检测49例星形细胞瘤患者术前血清miR-154表达水平,并与52例健康体检者的血清标本作比较;分析29例患者手术前后血清miR-154的表达变化。分析星形细胞瘤组织miR-154表达与临床病理特征（年龄、性别、肿瘤分级和KPS评分）的关系,根据随访资料分析不同miR-154表达患者的预后情况。结果 76例星形细胞瘤组织中miR-154的表达水平为0.254±0.170,低于36例癌旁组织的1.087±0.073,差异有统计学意义（P＜0.05）;49例星形细胞瘤患者术前血清miR-154的表达水平为0.256±0.180,低于52例健康体检者的1.065±0.350,差异有统计学意义（P＜0.05）;49例星形细胞瘤患者血清miR-154与组织miR-154表达呈正相关（r=0.552,P=0.000）;29例患者术前血清miR-154的表达水平为0.243±0.173,低于术后的0.339±0.159,差异有统计学意义（P＜0.05）。星形细胞瘤组织中miR-154表达与性别、年龄及KPS评分无关,但与肿瘤分级有关。全组中位总生存期（OS）为15.7个月,其中miR-154高表达组的中位OS为16.6个月,高于低表达组的11.3个月,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 miR-154在星形细胞瘤组织和血清中表达降低,与肿瘤分级有关,且miR-154高表达者的预后较好,可能与星形细胞瘤的发生、发展有关,对星形细胞瘤的诊断和预后评估有一定价值。     

TUBB3的表达对晚期胃癌紫杉类药物化疗疗效和预后的影响

  目的  检测晚期胃癌组织中β-微管蛋白Ⅲ(class Ⅲ β-tubulin,TUBB3)的表达,分析TUBB3的表达与紫杉类药物化疗疗效及患者预后的相关性。  方法  选取邵阳市中心医院2008年12月至2011年12月接受含多西他赛或紫杉醇为基础化疗的晚期胃癌患者49例,免疫组织化学检测胃癌组织中TUBB3蛋白的表达水平,分析TUBB3的表达与化疗疗效、无进展生存期(progressionfree survival,PFS)和总生存期(overall survival,OS)的关系。  结果  49例患者接受含多西他赛或紫杉醇为基础的化疗,有3例患者因组织标本太少被剔除,化疗疗效达完全缓解(complete response,CR)1例、部分缓解(partial response,PR)17例、稳定(stable disease,SD)22例、进展(progression disease,PD)6例,化疗总有效率(CR+PR)为39.13%(18/46),TUBB3低表达组有效率为54.17%,TUBB3高表达组有效率为22.73%,两者比较差异具有统计学意义(χ2=4.736,P=0.029)。TUBB3低表达组患者的中位PFS和OS分别为5.9个月和11.6个月,TUBB3高表达组患者的中位PFS和OS分别为3.9个月和7.9个月,TUBB3低表达组较高表达组的PFS和OS均延长,差异有统计学意义(PFS:P=0.032;OS:P=0.001)。单因素及多因素分析得出,TUBB3均为晚期胃癌的独立预后因素。  结论  晚期胃癌组织中TUBB3的表达与紫杉类药物化疗疗效及预后具有相关性,低表达组的化疗疗效及生存预后好于高表达组。可为临床上晚期胃癌个体化治疗的制定及判断预后提供参考。      

乳腺癌耐药蛋白表达与晚期非小细胞肺癌铂类为主的化疗疗效及预后的关系

目的探讨乳腺癌耐药蛋白（BCRP）表达与晚期非小细胞肺癌（NSCLC）以铂类为主的化疗疗效及预后的关系。方法回顾性分析本院初治的B或期NSCLC患者86例,应用免疫组化方法检测每位患者肿瘤标本中的BCRP表达水平,应用SPSS 16.0进行统计分析,探讨BCRP表达水平与化疗疗效、无进展生存期（PFS）以及总生存期（OS）的关系。结果BCRP表达阴性患者的化疗有效率为44.0%,而表达阳性的患者为19.4%,两者之间差异有统计学意义（P=0.017）。BCRP表达阴性患者的PFS及OS较表达阳性的患者长,并且差异有统计学意义（P值分别为0.000和0.000）。多因素分析表明BCRP是独立影响PFS及OS的指标。结论BCRP表达水平与晚期NSCLC以铂类为主的化疗疗效及预后密切相关,对于进一步研究晚期NSCLC耐药机制,制定个体化治疗方案,延长患者生存期具有重要意义。     

胃癌细胞色素氧化酶CYP3A4基因多态性与含紫杉醇方案化疗敏感性的研究

目的 探讨胃癌细胞色素氧化酶CYP3A4基因多态性与含紫杉醇方案化疗敏感性的关系。方法 采用变性高效液相色谱技术（DHPLC）和基因测序技术检测53例晚期胃癌患者外周血中CYP3A4基因的突变情况,观察并评价含紫杉醇化疗方案的疗效与CYP3A4基因多态性的关系。结果 DHPLC检测显示,53例胃癌患者中CYP3A4基因单峰者（野生型）32例,双峰者（突变型）21例;测序结果显示,CYP3A4基因第10号外显子第27位C缺失突变。野生型组有效率（RR）为40.6％,疾病控制率（DCR）为84.4％;突变型组RR为33.3％,DCR为85.7％,两组RR和DCR的差异均无统计学意义（P＞0.05）。53例胃癌患者的中位无进展生存时间（PFS）为6.5个月（95％CI：3.576～9.424个月）,中位总生存时间（OS）为11.0个月（95％CI：6.955～15.045个月）。CYP3A4野生型与突变型患者中位PFS（7.0个月vs.7.0个月）和OS（10.0个月 vs.14.0个月）的差异均无统计学意义（P＞0.05）。使用含铂方案患者CYP3A4基因野生型和突变型中位PFS的差异无统计学意义（P＞0.05）,使用非含铂方案中位PFS的差异有统计学意义（P=0.024）,含铂与非含铂方案中位OS的差异均无统计学意义（P＞0.05）。采用3药联合与两药联合方案患者的中位PFS和OS均与CYP3A4基因多态性无关。野生型与突变型患者不良反应均较轻,以1～2级为主,常见不良反应包括食欲减退、恶心呕吐和白细胞减少。结论 CYP3A4基因第10号外显子第27位C缺失突变,CYP3A4基因突变型晚期胃癌患者使用含紫杉醇方案有延长OS的趋势。     

血清AFP 阳性晚期胃癌患者的临床分析

目的:探讨血清甲胎蛋白（alpha-fetoprotein ,AFP）阳性且无法行手术治疗的晚期胃癌患者的临床病理特征、化疗疗效和临床预后。方法:回顾性分析江苏省肿瘤医院2012年12月至2014年12月收治的无法行手术治疗的136 例晚期胃癌患者,分析血清AFP 与晚期胃癌患者的临床病理特征与化疗、生存及预后的关系。结果:本组患者中血清AFP 阳性胃癌（AFP-producing gastric cancer ,AFPGC）患者为18.4%（25/ 136）。 血清AFP 阳性患者与阴性者相比,更易出现淋巴结以外的脏器转移（80.0% vs . 55.9% ,P =0.026）,尤其易出现肝转移（56.0% vs . 19.8% ,P < 0.001）。 血清AFP 阳性组化疗有效率高（40.0% vs . 33.3%）,而血清AFP 阴性组疾病控制率更高（79.3% vs . 68.0%）,两者差异均无统计学意义。血清AFP 阴性组患者无进展生存时间（progression-free survival ,PFS）更长（6.6 个月vs . 5.0 个月）,1 年生存率更高（72.5% vs . 57.9%）,但差异无统计学意义。血清AFP 阴性组患者中位总生存时间（overall survival,OS）更长（18.0 个月vs . 12.6 个月,P = 0.022）。 经Cox 多因素危险度分析,AFP 表达并非胃癌患者的独立危险因素（P = 0.061）。 血清AFP 阳性组患者OS≥ 12个月,3 药联合化疗为紫杉类联合氟尿嘧啶类和铂类治疗比率明显较OS< 12个月的患者高（P = 0.020）。 结论:晚期胃癌患者较早期患者血清AFP 阳性率更高,血清AFP 阳性者易出现淋巴结外的其它脏器转移,尤其是肝转移,生存期短,3 药联合化疗方案能延长生存期。      

胃癌患者血清中miR-133a 水平及其与病理特征的相关性

目的：探讨血清中miR-133a 水平对胃癌的诊断价值及其与病理特征的相关性。方法：取2010 年3 月至2011 年4 月于南京医科大学附属常州市第二附属医院胃肠外科住院的胃癌手术患者94 例（胃癌组）,其中男64 例、女30 例,年龄32~82 岁,平均（61.72±8.59）岁;取30 例健康体检者作为对照组。实时荧光定量PCR法检测两组血清中miR-133a 水平,应用SPSS 22.0 和Graphpad 5.0 统计软件进行统计学分析。结果：胃癌患者血清中miR-133a 水平明显低于正常对照组（1.95±1.51 vs 4.47±0.56,P<0.01）。患者miR-133a 水平与其年龄、性别、肿瘤大小无明显相关性（P>0.05）,与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（均P<0.05）。受试者工作特征曲线（ROC）分析结果显示,miR-133a 在预测胃癌发生和淋巴结转移时具有较好的敏感性和特异性[ROC曲线下面积（AUC）分别为0.883(95% CI：0.8257~0.9402)和0.984（95% CI：0.9633~1.005）,均P<0.01]。miR-133a 高表达组患者5 年生存率显著高于miR-133a 低表达组（40.49% vs 19.37%,P<0.05）。结论：胃癌患者血清miR-133a 表达水平改变与胃癌的发生发展、临床病理特征及临床预后密切相关,miR-133a可能成为胃癌诊断及预后判断的液体活检标志物。     

乳腺癌Survivin表达意义及苦参临床疗效分析

目的:探讨乳腺癌（breast cancer，BC）Survivin表达与以紫杉醇为主的化疗疗效之间的关系，并进一步研究复方苦参注射液对化疗疗效的影响。方法:筛选119例乳腺癌患者，通过回顾性分析，依据既往用药情况分为:含紫杉醇化疗组（A组）和化疗联合复方苦参注射液组（B组）。应用免疫组化法检测患者肿瘤组织中Survivin表达水平，再分为阳性表达组和阴性表达组。分别以χ2检验和Kaplan-Meier方法分析有效率和生存时间的差异。结果:A组阴性表达患者化疗有效率为83.3%，明显高于阳性表达组（P=0.031）；且PFS、OS均较阳性组延长，但仅PFS差异具有统计学意义（P=0.046）。B组阳性表达与阴性表达者在化疗有效率、PFS、OS方面均无明显差异。两组之间比较发现:联合苦参B组阳性表达患者有效率较单纯化疗A组阳性表达者有明显升高趋势(P=0.026)。阳性表达者PFS在联合苦参后由12.761月提高到16.197月，具有统计学差异（P=0.027）。OS由30.789月提高到36.570月，但差异并没有统计学意义（P>0.05）。结论:对Survivin表达水平的检测有望成为乳腺癌含紫杉醇化疗方案的预测指标，且针对Survivin高表达患者联合复方苦参注射液可能提高化疗的有效率，甚至延长PFS。     

复发转移性乳腺癌患者血浆miRNA表达水平与临床病理特征、化疗疗效及预后关系的研究

目的：探讨血浆中miR-16、miR-34a、miR-200a、miR-375、miR-451化疗前、后表达水平的变化与乳腺癌临床病理特征、化疗疗效及预后之间的关系。方法选取复发转移性乳腺癌患者79例,采用GenEx ver-sion6软件、Normfinder软件和Genorm软件确定本实验的内对照,采用实时荧光定量PCR法检测患者化疗前及化疗2个周期时的血浆miRNA表达水平,并分析化疗前、后表达水平与患者临床病理特征、化疗疗效及预后的关系。结果 miR-34a为相对表达最稳定的内对照。血浆miR-451高表达的患者激素受体（hormone receptor, HR）阳性率显著高于低表达者（P=0.031）,分别为84.2%和62.5%。血浆miR-200a化疗后表达变化与客观缓解率（objective response rate,ORR）显著相关（P=0.032）,miR-200a化疗后表达升高者的ORR显著高于降低者,分别为57.9%和29.3%。血浆miR-200a化疗后表达水平升高组的无进展生存时间（progression-free survival,PFS）与降低组相比,组间差异具有统计学意义（P=0.009）,分别为10.3个月和5.2个月。miR-16、miR-200a、miR-375和miR-451表达水平及化疗后变化对总生存时间（overall survival,OS）均无显著影响。结论血浆miRNA化疗前、后表达水平对复发转移性乳腺癌患者临床病理特征、化疗疗效及预后有一定的预测价值。     

胃癌中miR-146a和LIN52表达及其与化疗敏感性和预后的关系

目的:研究胃癌组织中微小RNA-146a（miR-146a）、LIN52的表达关系，并对其与患者化疗敏感性和预后的关系进行探讨。方法:选取2012年8月至2015年6月进行手术治疗的87例胃癌患者的癌组织标本为胃癌组，另选取距癌组织边缘＞5 cm的对应癌旁组织标本为癌旁组织组。采用qRT-PCR法检测miR-146a、LIN52 mRNA相对表达量，免疫组化法检测LIN52蛋白表达，采用MTT法检测胃癌细胞对5-FU、DDP、ADM、MMC敏感性，应用Pearson法对miR-146a与LIN52表达的相关性进行分析，采用Kaplan-Meier对胃癌患者3年的生存情况进行分析。结果:与癌旁组织组相比，胃癌组miR-146a表达水平降低（P<0.05），LIN52 mRNA表达水平升高（P<0.05），LIN52蛋白阳性表达率升高（P<0.05）；miR-146a、LIN52表达均与年龄、淋巴结转移、临床分期、组织分化程度、浸润深度相关（P<0.05）；药敏试验表明，miR-146a、LIN52表达情况与肿瘤细胞对5-FU、DDP的敏感性有关；Pearson法分析显示miR-146a与LIN52呈显著负相关（r=-0.898，P<0.05）；Kaplan-Meier法分析显示miR-146a高表达组3年内总生存率远高于低表达组（58.8% vs 18.9%）。LIN52阴性患者3年内总生存率远高于阳性患者（74.1% vs 16.7%）。结论:胃癌组miR-146a低表达，LIN52高表达，miR-146a、LIN52与胃癌细胞对化疗药物敏感性及预后相关，检测其表达对化疗药物的选择具有一定参考价值。     

miR-143对肾癌GRC-1细胞增殖与凋亡及其靶点HIF-1α的影响

目的 探讨miR-143对肾癌GRC-1细胞增殖凋亡及其靶点缺氧诱导因子1α（HIF-1α）的影响。方法 转染miR-143的模拟物于肾癌细胞株GRC-1细胞,采用实时定量PCR（qPCR）法检测转染的效果,根据实验将GRC-1细胞分为3组：未转染组、miR-143对照组和miR-143转染组,采用MTT法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;qPCR及Western blotting检测各组细胞的HIF-1α mRNA和蛋白水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-143与HIF-1α基因间的靶向关系。结果 miR-143转染组的miR-143水平高于未转染组和miR-143对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;与其余两组比较,miR-143转染组的增殖率降低而凋亡率升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;瞬时过表达miR-143可降低GRC-1细胞的HIF-1α mRNA和蛋白水平（P＜0.01）,双荧光素酶报告基因实验证明HIF-1α是miR-143的直接作用靶点。结论 miR-143可以调控肾癌GRC-1细胞的增殖凋亡,而HIF-1α是miR-143的直接靶点。     

胃癌转移相关miRNA的差异表达谱及miR-218的生物学分析

目的 探讨胃癌转移相关微小RNA（miRNA）的差异表达情况并进行miR-218的生物学分析。方法 采用实时荧光定量PCR（qPCR）及miRNA芯片法检测低转移潜能的胃癌细胞亚系（SGC7901-NM、MKN28-NM）与高转移潜能的胃癌细胞亚系（SGC7901-M、MKN28-M）间miRNA的差异表达。提取不同转移潜能胃癌细胞系和10例胃癌冰冻组织及相应的转移淋巴结中的总RNA,利用qPCR检测miR-218在不同细胞及组织中的表达情况。结果 对不同转移潜能的胃癌细胞亚系进行芯片检测发现,与SGC7901-NM细胞比较,SGC7901-M 细胞有47个分子表达下调,15个分子表达上调。与MKN28-NM细胞比较,MKN28-M细胞有41个分子表达下调,83个分子表达上调。在SGC7901-M及MKN28-M细胞中,34个分子表达均出现下降,11个分子表达均出现上升。对不同转移潜能的胃癌细胞亚系以及人永生化正常胃黏膜细胞系GES进行检测可以发现,4种不同转移潜能的胃癌细胞亚系中miR-218的表达均低于正常胃黏膜细胞系GES,差异有统计学意义（P＜0.05）,且在高转移潜能胃癌细胞亚系中miR-218的表达均低于低转移潜能胃癌细胞系,差异有统计学意义（P＜0.05）。胃癌转移淋巴结中miR-218的表达水平为0.23±0.02,低于胃癌原发灶的1.09±0.05,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 胃癌转移相关miRNA会出现差异表达情况,高转移潜能胃癌细胞中的miR-218表达水平上调可能与胃癌转移存在一定关系。     

长链非编码RNA MEG3 在胃癌中的表达及其与预后的关系

目的:研究长链非编码RNA （long non-coding RNA ,lncRNA）母系表达基因3（maternally expressed gene3,MEG3）在胃癌组织中的表达及其与预后的关系,并进一步探讨MEG3 与凋亡相关蛋白P 53、鼠双微基因2（murine double minute 2,MDM2）的相关性。方法:收集2012年9 月至2013年6 月青岛大学附属青岛市市立医院55例行手术治疗的胃癌切除标本（包括癌组织及对应的远端正常组织）,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测胃癌组织中MEG3 的表达,并分析其与临床病理参数的关系;应用免疫蛋白印迹法（Western blot）检测胃癌中P 53、MDM2 蛋白的表达水平,并分析其与MEG3 的相关性。结果:lncRNAMEG 3 在胃癌组织的相对表达水平（7.98± 0.19）低于所对应的正常组织（9.47± 0.18,P < 0.05）;在胃癌组织（r =-0.627,P < 0.001）及远端正常组织（r =-0.807 ,P < 0.001）中,P 53与MDM2 的表达呈负相关;P 53与MEG3 的表达呈正相关（r = 0.591,P < 0.05）,MDM2 与MEG3 的表达呈负相关（r =-0.346,P < 0.05）;MEG3 高表达者较低表达者中位生存期明显延长。结论:MEG3 在胃癌发生发展过程中起抑癌基因的作用;MEG3 与P 53、MDM2 在胃癌发生发展的生物学机制上有重要联系;检测MEG3 的表达水平对胃癌预后有潜在价值。      

胃癌组织TGF-β对miR-200c/141表达影响的研究

目的 TGF-β能够诱导肿瘤细胞发生上皮间质转化,促进肿瘤发生侵袭转移.miR-200c/141能够抑制上皮间质转化的发生.但TGF-β在胃癌中的表达情况及其对miR-200c/141表达影响尚不清楚.本研究旨在探讨胃癌组织中TGF-β表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系,及对miR-200c和miR-141表达影响.方法 收集河北医科大学第四医院普外科2012-05-01-2013-01-01胃癌根治性手术切除标本64例,采用qRT-PCR技术检测TGF-β、miR-200c及miR-141在胃癌组织和配对癌旁非癌组织中的表达.分析TGF-β表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系及与miR-200c和miR-141水平的相关性.TGF-β处理胃癌细胞株SGC-7901,观察其对miR-200c和miR-141表达的影响.结果 TGF-β在胃癌组织中的表达上调率为66.67%,其在胃癌组织中的表达显著高于癌旁非癌组织[Median,Interquartile Range(2.50,2.43:0.84,0.42);P=0.005].miR-200a、miR-200b、miR-429、miR-200c和miR-141在胃癌组织中的表达下调率分别为53.13%、48.44%、50.00%、78.13%和76.19.miR-200c和miR-141在胃癌组织中的表达显著低于癌旁非癌组织,均P<0.001.miR-200c和miR-141的表达存在正相关关系,r=0.840,P<0.001.TGF-β表达水平与miR-200c和miR-141的表达水平呈显著负相关关系,均P<0.001.TGF-β能够诱导胃癌细胞株SGC-7901中miR-200c和miR-141表达显著降低.TGF-β的表达水平与淋巴结转移情况及脉管瘤栓情况存在显著相关性,与患者性别、年龄、组织学分级、TNM分期、肿瘤侵袭深度和肿瘤远处转移情况无相关性,均P>0.05.     

巨噬细胞外泌体源miR-223促进胃癌细胞对奥沙利铂的耐药研究

背景与目的：化疗耐药是导致胃癌患者预后不良的重要因素，阐明胃癌细胞化疗耐药的机制有助于为临床治疗提供新思路，具有重要的现实意义。探讨巨噬细胞外泌体源miR-223对胃癌细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响及作用机制。方法：将购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库/中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心的胃癌细胞与巨噬细胞及其来源外泌体共培养，检测miR-223的表达水平并观察其对奥沙利铂的化疗敏感性。采用荧光显微镜观察巨噬细胞是否通过外泌体传递miR-223至胃癌细胞。采用细胞计数试剂盒-8（cell counting kit-8，CCK-8）、细胞凋亡实验观察巨噬细胞外泌体源miR-223对胃癌细胞奥沙利铂化疗敏感性的影响。采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RTFQ-PCR）检测胃癌患者外周血外泌体源miR-223的表达水平，分析其与奥沙利铂耐药的关系。结果：巨噬细胞及其外泌体与胃癌细胞共培养后，胃癌细胞对奥沙利铂化疗的敏感性降低，半数抑制浓度（half inhibition concentration，IC ₅₀ ）明显升高；同时miR-223相对表达量明显增加。采用荧光显微镜观察发现，巨噬细胞通过外泌体传递miR-223至胃癌细胞。巨噬细胞外泌体源miR-223通过调控FBXW7增强胃癌细胞抗凋亡能力，促进其对奥沙利铂的耐药。奥沙利铂耐药胃癌患者外周血外泌体miR-223的表达水平显著升高。结论：巨噬细胞通过外泌体传递miR-223增强胃癌细胞对奥沙利铂的耐药，外周血外泌体源miR-223有望成为胃癌患者化疗耐药的监测指标。