A型肉毒毒素降低大鼠胃平滑肌收缩及P物质含量

目的：在胃窦前壁注射A型肉毒毒素( BTX-A)后观察局部P物质（substance P）含量和分布的变化及其胃平滑肌收缩的变化，揭示两者之间的关系。 方法： 健康Wistar大鼠30只（普通级），体重260-300 g，雌雄不限。随机分为BTX-A组（B group）及对照组(A group)，在胃体前壁与幽门部交界线中点平滑肌内分别注射0.3 mL BTX-A (20 U/kg)，或0.9 % 氯化钠溶液0.3 mL； 记录胃肌电24 min后，切取局部胃前壁组织行放射免疫测定和免疫组化。结果： ① 放射免疫检测结果提示胃前壁组织中BTX-A组SP平均含量较对照组低28%（P＜0.01），免疫组化结果显示BTX-A组SP免疫反应阳性产物含量较对照组低11%（P＜0.05）；②注射BTX-A 12 min，24 min后， BTX-A组胃肌电的各项指标除24 min后峰电位发生率无显著差异(P＞0.05)外，其它均低于对照组（P＜0.05）。结论： BTX-A可以减少局部SP的含量，这种减少导致了胃肠平滑肌收缩功能的抑制。     

A型肉毒毒素治疗雷诺现象的研究进展

雷诺现象是一种常见的血管痉挛反应,现有药物和手术治疗的临床效果有限。A型肉毒毒素治疗雷诺现象具有一定有效性和安全性。它能舒张血管、缓解疼痛,具有较好的远期疗效,而不良反应轻微,如注射部位疼痛、瘀斑或一过性肌肉无力。近年来,该治疗的适用范围进一步扩展,有效的注射剂量和注射方法得以确定,治疗相关的不良反应得以减少。还需大样本随机双盲对照试验和动物实验研究为深入阐明其机制和疗效提供依据。     

从人源天然ScFv噬菌体抗体库中筛选A型肉毒毒素特异性抗体

目的:以不同形式的A型肉毒毒素或类毒素为靶抗原,对已经构建的人源天然ScFv噬菌体抗体库进行特异性抗体的筛选及特异性抗体的序列分析。方法:制备3种不同形式的A型肉毒毒素或类毒素,抗原梯度包被免疫管,对人源天然ScFv噬菌体抗体库进行筛选,经过3轮"吸附-洗脱-扩增"淘选富集,制备单克隆噬菌体抗体颗粒,用ELISA验证ScFv的结合活性,并对获得的阳性克隆进行基因序列分析。结果:用3种不同形式的抗原进行筛选,各挑180个克隆进行单克隆噬菌体抗体颗粒的ELISA分析,其中以A型肉毒类毒素筛选获得52个阳性克隆,阳性率为28.8%,随机挑取12个克隆测序,结果表明7个ScFv序列正确且各不相同;以纯化后A型肉毒神经毒素(BONT/A)筛选获得18个阳性克隆,阳性率为10%,测序结果表明获得的14个ScFv序列正确且各不不同;以原核表达的A型肉毒毒素重链C段筛选获得122个阳性克隆,阳性率为68%,随机挑取55个克隆测序,结果表明30个正确的ScFv序列中14个系列完全相同,16个序列各不相同;结论:应用固相筛选的方法,从人源天然ScFv噬菌体抗体库可以获得肉毒毒素特异性抗体,为抗肉毒毒素马血清的更新替换提供了研究依据与应用基础。     

A型肉毒毒素联合醋酸曲安奈德治疗增生性瘢痕的临床体会

<正>增生性瘢痕是整形外科常见病种,常发生于深II度烧伤或者外伤后因各种原因延迟愈合的创面。临床表现为明显高出皮面,颜色暗红或深紫,质地硬,局部常伴有灼痛和瘙痒感,往往持续数月或数年才逐渐发生退变[1]。Gassner等[2]于2006年率先将A型肉毒毒素(BNT-A)用于额部瘢痕防治,发现BNT-A能有效减轻局部瘢痕增生,使手术获得更加美容效果。我院2013年1月至2014年1月对38例增生性瘢痕患者在保     

一种检测A型肉毒毒素的高灵敏度酶联免疫吸附法

目的:建立检测A型肉毒毒素的酶联免疫吸附法.方法:利用重组A型肉毒毒素重链羧基端片段作为免疫原和B淋巴细胞杂交瘤技术,获得了56株高亲和力的抗A型肉毒毒素单克隆抗体(mAb),建立了检测A型肉毒毒素的双mAb夹心酶联免疫吸附法(ELISA).结果:该方法理论检测下限达到了8.34 pg/mL,检测天然A型肉毒毒素制剂时其实际检测下限可达0.78 LD50/mL,与其他型别的肉毒毒素均未见交叉反应.通过测定基质中的回收率,发现基质中的相关的蛋白对检测具有较大的影响.结论:该方法具有灵敏度高,特异性好,使用方便等优点,具有较高的的实用价值.     

A型肉毒毒素双抗夹心ELISA检测方法的建立

目的：建立A型肉毒毒素双抗夹心ELISA检测方法。方法：以高亲和力人源抗体ML01作为捕获抗体,以小鼠腹水诱生法制备的鼠源抗体BAS46为检测抗体,HRP标记的羊抗鼠IgG为二抗,建立A型肉毒毒素双抗夹心ELISA检测方法,并评价其灵敏度、重复性、检测线性范围和加样回收率等。结果：A型肉毒毒素双抗夹心ELISA检测法的灵敏度为2.56 pg/ml,变异系数为3.183%～12.030%,线性范围为0.244～62.500 ng/ml,回收率为90%～110%。结论：成功建立了A型肉毒毒素双抗体夹心ELISA检测方法,该方法快速、有效。     

猫下食管括约肌对A型肉毒毒素的反应

目的： 应用A型肉毒毒素（BTA）局部注射于猫下食管括约肌（LES）,通过LES测压、局部乙酰胆碱（Ach）含量和乙酰胆碱酯酶（AchE）活性测定以及光镜、透射电镜观察,研究BTA对LES的作用机制,为临床BTA治疗贲门失弛缓症提供科学依据。方法：在胃镜下对BTA组（10只猫）LES分4点注射BTA,对照组（10只猫）注射生理盐水,分别于注射前、注射后1周测定LES的压力。处死猫后取LES,测定LES中Ach的含量和AchE活性;将LES作超薄切片,按Karnovsky-Roots法做AchE染色,在光镜和电镜下观察AchE阳性神经末梢和Ach囊泡的超微结构。结果：（1）BTA组LES压力（9.93±1.06） mmHg显著低于对照组（28.17±3.55) mmHg,P<0.01。（2）BTA组LES Ach含量(75.48±4.67) mg/g组织和AchE活性(38.20±2.17) 103 U/g组织均显著低于对照组,分别为(93.03±4.65) mg/g组织、(69.88±6.73) 103 U/g组织,均P<0.01。（3）在光镜下发现,运动终板色泽变淡,数目减少;在电镜下发现,神经末梢内含Ach的囊泡明显减少,末梢内AchE阳性反应物也明显减少。结论：猫LES局部注射BTA后,可引起LES压力明显下降,其机制可能为BTA破坏局部胆碱能神经末梢运动终板中的囊泡,导致局部Ach含量和AchE活性明显降低。     

A型肉毒毒素可抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖和胶原蛋白的合成

背景：A型肉毒毒素伤口周围局部注射可以减少瘢痕的形成,而且对瘢痕的增生挛缩有抑制作用,可以促进瘢痕的萎缩变平。 目的：观察A型肉毒毒素对人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖和胶原蛋白合成的影响。 方法：体外分离、培养人增生性瘢痕成纤维细胞,取对数生长期的细胞接种培养,使用稀释浓度为0.1 U/L A型肉毒素DMEM细胞培养基对细胞的生长过程进行干扰,对照组以含胎牛血清的DMEM培养基培养。 结果与结论：细胞接种第1~15天,对照组可见梭形的增生性瘢痕成纤维细胞分裂增殖,局部融合成细胞单层,细胞生长旺盛,细胞排列呈现高度一致性。A型肉毒毒素组细胞增殖速度慢,细胞数量少,细胞排列方向散乱,A型肉毒毒素组细胞数为对照组细胞数的79.3%,A型肉毒毒素实验组胶原蛋白合成量为正常对照组的48.4%,差异有显著性意义(P < 0.05)。提示A型肉毒毒素可以抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖以及胶原蛋白的合成。      

疼痛模型大鼠下丘脑和脊髓P物质的含量变化

目的疼痛模型大鼠下丘脑和脊髓P物质（substance P，SP）的含量变化。方法左足跖皮下注射5％甲醛50μl建立大鼠疼痛模型，将动物随机分成空白对照组，生理盐水对照组和疼痛模型组，采用放射免疫分析法测定股动脉血、下丘脑和脊髓中SP的含量。结果疼痛模型组雄性S-D大鼠血浆中及下丘脑和脊髓SP含量分别与空白对照组、生理盐水对照组差别有统计学意义（P〈0．05）；而空白对照组与生理盐水对照组差别无统计学意义（P〉0．05）。结论皮下注射5％甲醛可致疼痛症状产生；提示皮下注射甲醛所致疼痛可通过下丘脑和脊髓组织中的SP释放增加，所致无菌性炎症反应而引起疼痛症状。     

A型肉毒毒素在整形美容方面及其临床拓展应用的进展

近年来,随着对A型肉毒毒素基础研究和临床研究的深入,其在临床上应用范围也越来越广泛.A型肉毒毒素在医学美容整形方面应用最为广泛,此外,国内外还将A型肉毒毒素用于涉及皮肤科疾病、雷诺现象、疼痛性疾病、泌尿系统疾病、眼科疾病以及脑血管系统疾病等50余种病症的治疗,被誉为"20世纪90年代神经药物的一大进展".     

牙周炎对慢性细菌性前列腺炎大鼠前列腺的影响

目的研究牙周炎对慢性细菌性前列腺炎大鼠前列腺的影响。方法 80只SD大鼠随机分为4周组及8周组,每组40只,再将4周组和8周组分别随机分为空白对照组(N组)、慢性细菌性前列腺炎组(CBP组)、牙周炎组(PE组)和慢性细菌性前列腺炎合并牙周炎组(CBP+PE组),每组各10只。观察比较大鼠前列腺组织病理形态学改变、炎症评分、TNF-α、IL-1β的含量及牙周各项指标。结果在4周组中,PE组、CBP+PE组牙周各项指标高于N组、CBP组(P0.05),而PE组与CBP+PE组之间以及N组与CBP组之间牙周各项指标无明显差异(P0.05);CBP+PE组和CBP组前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β比N组和PE组均高(P0.05),而N组与PE组之间以及CBP+PE组与CBP组之间前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β无明显差异(P0.05)。在8周组中PE组、CBP+PE组牙周各项指标高于N组和CBP组(P0.05),而PE组与CBP+PE组之间以及N组与CBP组之间牙周各项指标无明显差异(P0.05);CBP+PE组、CBP组前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β较N组、PE组高(P0.05),而N组与PE组之间前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β无明显差异(P0.05),CBP+PE组前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β则较CBP组高(P0.05)。4周组和8周组比较,N组各项观察指标无明显差异;8周PE组牙周各项指标高于4周PE组(P0.05),前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β无明显差异(P0.05);8周CBP组前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β较4周CBP组降低(P0.05),而牙周各项指标无明显差异(P0.05);8周CBP+PE组与4周CBP+PE组比较前列腺组织病理、炎症评分、TNF-α、IL-1β较低(P0.05),但8周CBP+PE组牙周各项指标较4周组高(P0.05)。结论慢性细菌性前列腺炎较长时间合并牙周炎,在大鼠模型上能抑制大鼠慢性细菌性前列腺炎的自愈倾向使其保持在慢性炎症阶段。     

Effect of lamotrigin on the development of neurogenic pain syndrome in rats

Analgesic activity of a new anticonvulsive agent lamotrigin was studied on the model of neurogenic pain syndrome produced in rats by penicillin applied to the dorsal surface of the spinal cord and by dissection of the sciatic nerve. Lamotrigin was shown to have a profound analgesic activity. It can be used as an efficient prophylactic agent for prevention of chronic pain syndromes by suppression of the generators of pathologically enhanced excitation in the nociceptive structures which are the pathophysiological basis of the chronic pain syndromes. Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 125, No. 5, pp. 517–521, January, 1998.     

Changes in intramuscular cytokine levels during masseter inflammation in male and female rats

The present study was conducted to examine cytokine profiles in the masseter muscle before and after complete Freund's adjuvant (CFA)-induced inflammation and possible sex differences in the cytokine levels. Age matched male and female Sprague Dawley rats were injected with CFA in the mid-region of the masseter muscle. Muscle tissue surrounding the injection site was extracted 6 h, 1, 3 and 7 days after the injection to measure TNF-α, IL-1β, IL-6 and IL-4 levels with Luminex multi-analyte profiling (xMAP) technology. The cytokine levels were compared to those obtained from naïve rats. CFA injection into the masseter muscle led to a significant time effect in the level of TNF-α compared to that of naïve rats. The pattern of changes in TNF-α level after CFA injection was significantly different between the male and female rats owing to the differences in basal levels. CFA injection induced significant time-dependent increases in the levels of IL-1β and IL-6 in the masseter muscle in both male and female rats. The level of IL-4 was slightly, but significantly, reduced in both sexes at 6 h and 3 days after CFA-induced inflammation. No significant sex differences were observed in the levels of IL-1β, IL-6 or IL-4. The results provided novel information about distinct cytokine profiles during CFA-induced muscle inflammation, and the basis for further pursuing contributions of each cytokine in pain processing and analgesic responses in both sexes.     

西洛司特对COPD患者炎症水平的调节作用

目的:探讨西洛司特对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血IL-4、IL-8、TNF-α的调节作用和临床疗效.方法:70例COPD稳定期患者随机分为治疗组和对照组,每组各35例,治疗组服用西洛司特片(葛兰素史克公司)15mg bid,对照组服用安慰剂1片bid,共6个月为一疗程.结果:治疗前,两组IL-4、IL-8、T...     

Digital image analysis of inflammation markers in colorectal mucosa by using a spatial visualization method

The aim of this study was to apply the spatial visualization method of digital images to quantitative analysis of pro-inflammatory cytokines IL-1, IL-6 and TNF-α in various segments of large bowel excised because of colitis ulcerosa in relation with selected clinical symptoms.     

大鼠开胸术后慢性疼痛的预测指标

目的观察疼痛时弥散性伤害抑制性控制(DNIC)的动态变化,对术前DNIC、术后急性疼痛能否作为术后慢性胸痛的预测指标进行初步研究。方法术前检测大鼠DNIC,建立开胸术后慢性疼痛模型,分组为空白组(n=10)、假手术组(n=10)、模型组(n=20),连续监测术后1、3、6、9、12、15、18和21 d的机械痛阈、冷痛阈及DNIC。结果模型组大鼠中,11只发展为慢性疼痛组(CPTP组),9只在经历急性疼痛后痛觉恢复正常(non-CPTP组)。与CPTP组比较,non-CPTP组术前DNIC减弱(P0.05),术后6 d切口附近机械痛阈值及冷痛阈值更低(P0.05)。与术前DNIC相比,模型组术后急性疼痛时期(术后3 d)DNIC减弱(P0.05),CPTP组术后21 d DNIC持续减弱(P0.05),而non-CPTP组DNIC恢复正常。结论术前DNIC及术后6 d急性疼痛程度是开胸术后慢性疼痛的两项危险因素;疼痛急性期,个体DNIC减弱,痛觉恢复正常时,个体DNIC水平也渐趋恢复正常。     

姜黄素治疗大鼠脑出血后血清IL-6、IL-1β、TNF-α变化的实验研究

目的 本研究旨在探索大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)用姜黄素治疗后血清IL-6、IL-1β、TNF-α变化情况,评价姜黄素在治疗脑出血中的抗炎价值,从而为临床应用姜黄素治疗脑出血提供科学的实验数据.方法 24只健康雄性成年SD大鼠,单纯随机分为术前正常对照组(A组),脑出血姜黄素治疗组(B组),脑出血空白对照组(C组),假手术组(D组),每组6只大鼠.立体定位下右侧基底节注射胶原酶法制备大鼠脑出血模型.于建模成功后6h、24h、48h、3d、5d、7d、14d,给各组大鼠尾静脉取血测IL-6、IL-1β、TNF-α.将B组与C组、D组的IL-6、IL-1β、TNF-α值行两样本t检验比较,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 B组的神经生物学评分较相应时期的C组低,较相应时期的D组高,差异有统计学意义.B组的血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平在术后6h即升高,3d达最高水平,随后开始逐渐恢复,且各个时期的血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平均较同时期C组低,较同时期的D组高,差异均有统计学意义.结果 姜黄素能加快大鼠脑出血后血清炎症因子的吸收,对大鼠脑出血有抗炎作用.     

神经外科手术后颅内感染早期脑脊液中IL-6、IL-8和TNF-α水平变化的意义

目的通过研究神经外科手术后颅内感染患者脑脊液中的IL-6、IL-8和TNF-α的水平变化,探讨其在术后颅内感染中的诊断价值。方法选取我院神经外科手术后颅内感染患者46例,非颅内感染患者34例,所有病例均于手术后1～7天内和7～14天取脑脊液进行IL-6、IL-8和TNF-α的检测,并进行统计分析。结果神经外科手术后颅内感染组患者1～7天内的脑脊液中IL-6、IL-8和TNF-α的含量显著高于非感染组患者,差异有统计学意义(P<0.05);颅内感染患者7～14天的脑脊液中IL-6、IL-8和TNF-a的含量虽高于非感染组患者,但差异没有统计学意义(P>0.05)。结论结合临床症状和有效的检查脑脊液中IL-6、IL-8和TNF-α水平,可明显提高神经外科术后颅内感染早期的诊断价值和准确性,值得临床推广。     

慢性前列腺炎患者治疗前后血清TNF-α、IL-6和IL-8检测的临床意义

目的：探讨了慢性前列腺炎患者治疗前后血清TNF-α、IL-6和IL-8水平的变化及意义。方法：应用放射免疫分析对42例慢性前列腺炎患者进行了血清TNF-α、IL-6和IL-8检测,并与35名正常健康人作比较。结果：慢性前列腺炎患者在治疗前血清TNF-α、IL-6和IL-8水平均非常显著地高于正常人组（P〈0.01）,经综合治疗后2周,除TNF-α水平与正常人比较无差异外,血清IL-6和IL-8水平与正常人比较仍有显著性差异（P〈0.05）。结论：血清TNF-α、IL-6和IL-8可能以不同的方式参与了慢性前列腺炎的发病,其检测对了解病情、指导治疗具有重要的临床价值。     

Subclinical inflammation in the preclinical phase of rheumatoid arthritis might contribute to articular joint damage

The first degree relatives of rheumatoid arthritis (RA) patients have a higher risk of developing RA, which is related to the expression of autoantibodies against citrullinated proteins (ACPA). Remarkably, prior to the onset of RA, cartilage damage is already initiated, whereas ACPA autoantibodies are already expressed. Here we show that both TNF-α and IL-6 are also increased prior to the onset of RA. Furthermore, when the levels of DKK1 and Sclerostin were evaluated in first degree relatives of RA patients, we found that the serum levels of TNF- α correlate with the expression levels of both DKK1 and Sclerostin. Interestingly, when the disease is already established, the correlation of TNF- α with DKK1 is lost in RA patients, whereas the correlation of Sclerostin with both TNF- α and IL-6 is further increased. Our data suggest a subclinical inflammation in patients at high risk of developing RA, which might lead to an increase in the levels of both DKK1 and Sclerostin, contributing to joint damage in the preclinical phase of the disease linked to the expression of ACPA autoantibodies.