运动训练对大鼠肾上腺睫状神经营养因子表达的影响

目的研究大鼠游泳运动训练对大鼠肾上腺睫状神经营养因子(CNTF)表达的影响。方法成年SD大鼠分四组,除正常组外,三个负重组分别给予占体重1%、3%、5%负重,进行6周游泳训练,每天1h,取各组大鼠肾上腺,用RT-PCR研究CNTF mRNA水平变化。结果肾上腺能检测到CNTF mRNA表达,与正常组比较,轻度和中度负重组肾上腺CNTF mRNA表达明显增加(P<0.05)。结论轻、中度负重游泳训练明显增加肾上腺CNTF基因水平,提示CNTF可能与游泳负重导致机体的神经内分泌调节有关。     

运动训练对肾上腺神经生长因子表达的影响

目的调查长期游泳训练对大鼠肾上腺(NGF)表达的影响。方法成年SD大鼠分为无负重组,轻负重组(体重的1%),中负重组(3%)和中负重组(5%)四组。用水槽进行长期游泳训练6周,每天1h。6周后取肾上腺用RT-PCR检测NGF水平。结果各组肾上腺均能检测到NGF mRNA,中度负重组肾上腺NGF表达水平明显下调,与其它两组比差异有统计学意义(P<0.05)。结论重度负重游泳导致肾上腺NGF表达下调,提示NGF在长期游泳训练对大鼠肾上腺可能有其生物学作用。     

中、重度负重游泳运动训练对肾上腺Cyclin D1表达的影响

目的研究长期游泳训练后大鼠肾上腺Cyclin D1的表达变化。方法成年SD大鼠分为中度负重(占体重3%)和重度负重(占体重5%)游泳训练2组。大鼠在水槽内进行6周训练,每天1h。6周时,取肾上腺用RT-PCR检测Cyclin D1表达水平,用t检验进行统计分析。结果重度负重导致肾上腺Cyclin D1表达上调,与中度负重组比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论重度游泳训练明显上调肾上腺Cyclin D1水平,提示Cyclin D1在游泳训练的肾上腺发挥有作用。     

力竭游泳运动后大鼠伏核内NF-κB、cAMP的表达

目的:观察力竭游泳运动后大鼠伏核(NAc)内核转录因子-κB(NF-κB)和环腺苷酸(cAMP)的表达.方法:成年雄性SD大鼠随机分为对照组和力竭组.建立一周力竭游泳运动模型后,按0、4、8、12、16、20、24 h七个时间点,采用免疫印迹和免疫组织化学技术观察NF-κB在伏核内的表达变化,应用酶联免疫吸附技术检测伏...     

人CCR7真核表达载体构建及对HeLa细胞HLA-I表达的影响

目的: 构建人CCR7真核表达载体, 建立稳定转染CCR7的HeLa细胞株, 初步探讨肿瘤细胞表达HLA-I类分子表达改变及相关机制.方法: 从人脾脏cDNA扩增出CCR7, 装入pDsRed2-N1, 脂质体转染HeLa细胞.CCR7配体CCL21作用后, 流式细胞术(FCM)检测肿瘤细胞表达HLA-I的表达, 萤虫素酶报告基因系统检测NF-κB活化.结果: 经PCR、酶切和测序证实, 含CCR7真核表达载体成功构建.G418筛选后获得稳定表达CCR7蛋白的HeLa细胞.FCM证实HeLa细胞表达HLA-I类分子水平增高, 萤虫素酶报告基因系统证实NF-κB活化明显.结论: 成功构建人CCR7真核表达载体, CCR7促进肿瘤细胞表达HLA-I类分子, 诱导肿瘤细胞NF-κB活化.     

力竭运动后大鼠海马NF-κB、BDNF的表达变化

目的:观察力竭运动后大鼠海马NF-κB、BDNF在不同时间点的表达变化,探讨中枢神经系统的损伤及修复机制。方法:雄性SD大鼠70只,随机分为对照组(n=10)和力竭组(n=60)。力竭组进行6周力竭游泳训练后,选择0、4、8、12、16、24 h等不同时间点取脑,采用免疫组织化学和Western Blot技术观察海马内NF-κB、BDNF的表达变化。结果:(1)Western Blot结果显示:与对照组相比,力竭组海马内NF-κB含量在4 h开始升高(P<0.05),8 h达峰值(P<0.05),12～16 h开始回落(P<0.05),24 h恢复到正常水平(P>0.05)。力竭组海马内BDNF含量12 h及16 h组与对照组比较,BDNF的表达明显升高(P<0.05);(2)免疫组织化学结果显示:与对照组相比,力竭训练后0 h组大鼠海马内NF-κB表达以胞浆表达为主,4 h组核内表达逐渐增多(P<0.05),8 h组达高峰(P<0.05),12～24 h组核内表达逐渐减少(P>0.05)。海马内BDNF免疫阳性神经元则在力竭后24 h内持续表达且高于对照组(P<0.05),并于12 h达峰值(P<0.05),其余力竭各组之间差异无显著性(P>0.05)。结论:(1)大鼠力竭游泳运动可以活化海马内NF-κB信号转导系统,后者可能与运动性脑缺血再灌注时的神经细胞凋亡密切相关;(2)力竭运动可能通过诱导海马内BDNF的表达上调,对抗力竭运动性脑损伤,对神经元起到保护作用。     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠脑IGF-1、NF-κB表达及神经细胞凋亡的影响

目的： 观察和探讨灵芝孢子粉对戊四氮（PTZ）致痫大鼠脑胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、核转录因子-κB（NF-κB）蛋白表达及神经细胞凋亡的影响。方法： 用亚惊厥剂量的PTZ复制大鼠慢性癫痫模型，用药组以灵芝孢子粉灌胃，记录癫痫发作的潜伏期及持续时间，采用免疫组织化学和TUNEL法分别检测脑IGF-1、NF-κB/P65的免疫反应性和神经细胞凋亡情况。结果： 大鼠海马和皮质区每高倍视野（×400）下平均凋亡细胞数模型组（18.80±2.13、16.87±2.00）明显多于对照组（0.97±0.52、0.58±0.25），IGF-1、 NF-κB/P65蛋白表达模型组明显高于对照组（均P<0.01）；在造模第17、21、25 d时用药组较模型组癫痫发作的潜伏期有所延长（分别为P<0.05，P<0.05，P<0.01），海马和皮质区凋亡细胞数用药组（12.30±2.46、10.48±1.33）明显少于模型组，NF-κB/P65蛋白表达用药组低于模型组，而IGF-1的免疫反应性用药组明显强于模型组。结论： IGF-1、NF-κB 及神经细胞凋亡均可能参与了PTZ致痫的发生发展过程,灵芝孢子粉能明显抑制NF-κB蛋白的表达，增强IGF-1的免疫反应性，可能是其对癫痫所致神经细胞凋亡有明显抑制，从而对神经细胞起保护作用的机制之一。     

蜂胶对急性肺损伤大鼠肺组织中NF-KB活性及CD54表达的影响

目的观察蜂胶对急性肺损伤(ALI)肺组织中细胞间粘附分子-1(CD54)表达和NF-kBp65活化的影响.方法40只Wistar大鼠分为正常组、肺损伤组、地塞米松组、蜂胶水提组和蜂胶醇提组,脂多糖加油酸两次打击复制ALI模型,观察ALI病理形态,分别用SABC法和SP法测定肺组织中CD54表达和NF-kBp65活性.结果蜂胶水提液和醇提液均能缓解中性粒细胞的升高,明显减轻肺炎性病变的程度,抑制CD54的表达及NF-κBp65的活化.结论在ALI肺组织中CD54表达增强和NF-κB p65的活化参与了ALI的发病过程,蜂胶可抑制CD54表达和NF-κB p65的活化,从而减轻肺组织损伤程度.     

力竭游泳运动后大鼠杏仁体NF-κB、IL-1β的表达

目的:探讨力竭运动后中枢神经系统内核转录因子(NF-κB)信号通路的活化和调控机制及与其下游靶基因产物IL-1β介导的炎症反应之间的相互关系。方法:健康雄性SD大鼠70只随机分为对照组(n=10)和力竭组(n=60)。力竭组进行1周力竭游泳训练后,选择即刻、4、8、12、16、24h等不同时间点取脑,经Western-Blot半定量分析研究运动后杏仁体内NF-κB的含量变化规律;免疫组织化学SABC染色法观察IL-1β在杏仁体神经元内的表达变化。结果:NF-κB在力竭4h开始激活(P0.05),至8h达到高峰(P0.05),12～16h开始回落(P0.05),24h恢复到正常对照水平(P0.05);IL-1β免疫阳性神经元的数目在24h内持续且高于对照(P0.05),12h达峰值(P0.05),其余各组之间差异无显著性(P0.05)。结论:NF-κB信号系统和IL-1β参与了脑内的炎症反应。     

不同负重游泳训练对大鼠肾上腺BDNF和trkB表达的影响

目的 探讨不同负重游泳训练对肾上腺BDNF及受体TrkB表达的影响.方法 成年SD大鼠分三组即轻负重组(体重的1％),中负重组(3％)和中负重组(5％).用水槽进行游泳训练.最后用水迷宫记录大鼠游泳轨迹,测定游泳速度,同时用RT-PCR检测肾上腺BDNF及TrkB水平.结果 中负重组游泳速度较其它两组有加快,肾上腺BDNF表达没有发生改变,而TrkB在中负重组已明显下调,与其它两组比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 负重游泳后中度负重导致肾上腺TrkB表达下调,但对BDNF表达没有明显影响.     

槲皮素对脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织NF-κB表达的影响

目的观察槲皮素对脓毒症相关急性肺损伤(ALI)大鼠的炎症信号转导通路NF-κB p65的影响。方法选用健康雄性Wistar大鼠36只,随机均分为4组:对照组、脂多糖(LPS)组、槲皮素低剂量组(30mg/kg),槲皮索高剂量组(50mg/kg),用LPS 10mg/kg溶于生理盐水2ml腹腔内注射,建立脓毒症ALI大鼠模型,对照组予等量生理盐水2ml腹腔注射,治疗组于造模前30min腹复腔注射槲皮素,所有实验动物于造模后24h应用10%水合氯醛4ml/kg腹腔注射进行麻醉,并处死。所有大鼠取肺组织进行苏木素-伊红(HE)染色,观察病理学改变并进行病理评分且对比,应用免疫组化及Western blot检测NF-κB p65在肺组织的表达。结果与对照组相比,LPS组的肺损伤明显,病理评分明显增加(P0.05);较LPS组,槲皮素治疗组肺组织HE病理染色明显改善,病理评分显著下降(P0.05),但两个治疗组之间病理评分无统计学差异。与对照组比较,LPS组的免疫组化及Western blot检测的NF-κB p65含量明显增高(P0.05),而槲皮素治疗组比LPS组NF-κB p65含量明显下降(P0.05),但两治疗组比较无明显差异。结论槲皮素对脓毒症ALI大鼠的肺脏保护作用可能与其抑制NF-κB p65的表达相关。     

小鼠肝癌淋巴道转移细胞系中NF-κB基因的表达及意义

目的 探讨NF-κB基因表达在小鼠肝癌淋巴道转移细胞系中的表达及意义.方法 采用RQ-PCR方法检测NF-κB基因在肝癌淋巴道低转移潜能的小鼠肝癌细胞系Hca-P和高转移潜能的小鼠肝癌细胞系Hca-F中的表达水平.结果 NF-κB基因在Hca-P和Hca-F细胞系基因表达分别为(1.41±0.48)×10~(-3)、(2.95±0.22)×10~(-3),Hca-P和 Hca-F之间,NF-κB基因表达差异有统计学意义 (P<0.01),其随转移潜能的增高,表达水平增加.结论 NF-κB基因表达水平增高与肝癌淋巴道侵袭转移相关.     

辛伐他汀对高血压大鼠主动脉NF-κB和MCP-1表达的影响

目的研究他汀类药物对核因子κB(NF -κB)、单核细胞趋化蛋白 -1(MCP -1)在自发性高血压大鼠 (SHR)大血管中表达的影响 ,探讨其预防动脉粥样硬化 (AS)的可能机制。方法20只12周龄雄性SHR随机分为SHR组和辛伐他汀 (simvastatin)组,simvastatin组用simvastatin5mg/kg·d灌胃8周 ,另取10只同龄雄性京都种Wistar大鼠为WKY组 ,免疫组化测各组主动脉NF -κB、MCP-1的表达 ,ELISA测血清MCP-1含量。结果SHR组主动脉组织中NF-κB、MCP-1表达及血清MCP-1含量显著增加 (P<0.01) ,且MCP -1表达与NF -κB活化正相关(r=0.728,P<0.01) ;simvastatin组NF -κB、MCP -1表达和血清MCP -1含量显著降低 (P<0.01)。SHR组及simvastatin组之间血压及血清总胆固醇、总甘油三脂水平无明显差异(P>0.05)。结论他汀类药物可能独立于降脂外部分通过抑制NF-κB的活化来调控MCP-1表达而抗AS。     

NF-κB抑制剂对THP-1粘附及MMP-9表达影响的实验研究

前单核细胞 THP- 1分化是一个复杂的过程 ,这一过程包含了复杂的细胞内信号传导及许多因子的活化及大量蛋白的表达。基质金属蛋白酶 - 9(Motrix Metalloproteinase- 9,MMP- 9)主要降解基底膜中的 和 型胶原 ,在血管增生及肿瘤浸润转移过程中起重要的作用。为探讨核转录因子 κB(nuclear factor kappaB,NF- κB)在 THP- 1粘附及 MMP- 9表达中的作用 ,我们应用 NF- κB抑制剂 PDTC(Pyrollidine Dithiocarba-mate二硫碳吡咯烷 ,应用共聚焦显微镜、流式细胞术观测了其对 THP- 1粘附及 MMP- 9表达的影响。结果表现 :PDTC可明显的抑制 THP- 1的粘附及 MMP- 9的表达。表明 NF- κB在细胞粘附及 MMP- 9的表达中起重要的作用。     

ox-LDL对巨噬细胞内皮脂肪酶表达的影响

目的: 探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对鼠源RAW264.7巨噬细胞内皮脂肪酶(EL)表达的影响。方法: 用ox-LDL(0~100 mg/L)孵育RAW264.7细胞24 h使其活化,或者用PDTC (NF-κB抑制剂)预孵育RAW264.7细胞30 min再与ox-LDL(50 mg/L)共同孵育24 h;应用Western blotting 检测EL和NF-κB p65的表达。结果: ox-LDL孵育RAW264.7细胞明显增加EL表达(P<0.05);ox-LDL(50 mg/L)孵育RAW264.7细胞15~30 min可激活NF-κB,用NF-κB 抑制剂PDTC处理后则明显抑制ox-LDL诱导的EL表达增加(P<0.05)。结论: ox-LDL可明显增加RAW264.7细胞EL的表达,可能与NF-κB活化有关。     

NF-κB在大鼠急性肺损伤模型肺组织中的表达及N-乙酰半胱氨酸的影响

目的 :检测NF κB在LPS诱导的急性肺损伤 (ALI)肺组织中的表达 ,以及N 乙酰半胱氨酸 (NAC)对ALI的抑制作用。方法 :采用免疫组化染色 (ABC法 )和Westernblot,检测NF κB在急性肺损伤大鼠气道和肺组织中的表达 ,以及NAC干预后活性NF κB表达的变化。结果 :正常对照组大鼠气道黏膜上皮和肺间质中 ,仅见少量散在的NF κB核阳性细胞 ;而LPS诱导ALI后 ,气道黏膜、肺间质、肺泡腔及血管内皮细胞中NF κB核阳性的细胞明显增多 (P <0 .0 1)。NF κB核阳性反应细胞主要为气道黏膜上皮细胞、浸润的炎症细胞、肺泡上皮细胞和血管内皮细胞。NAC治疗组NF κB核阳性细胞较LPS诱导的ALI组及对照组均明显减少 (P <0 .0 1)。Westernblot的结果显示 ,LPS诱导的ALI后不同时间点 ,NF κB的表达不同 ,于急性肺损伤 3h达高峰。各时间点NF κB的表达均较正常对照组高。结论 :LPS诱发的大鼠急性肺损伤的气道和肺组织内NF κB的表达增加 ,肺组织内的多数细胞参与了NF κB的激活。NAC可通过抑制NF κB的激活减轻急性肺损伤的炎症程度     

NF-κB在不同时期糖尿病大鼠肝中的表达

目的研究NF-κB在糖尿病大鼠肝中的表达。方法取不同时期糖尿病大鼠的肝组织,石蜡切片,免疫组化染色,光镜观察。结果NF-κB在糖尿病肝脏组织中表达增高,且随着病程的延长而增加。结论NF-κB在糖尿病的发生发展及其并发症中起了一定作用。