光密度测定的稳定性以及有关参数的综合测定

光密度是生物医学特别是分子生物学实验样品中所要测定的基本参数之一。测定此参数的目的是想要知晓样品中某一形态结构上的阳性物质的相对含量及其密集程度，以及它的空间分布。通过几年来的研究实践，作者认为需考虑和注意如下几个问题。方法与结果所得数据的稳定性图象分析系统上直接测得的是灰度值。光密度是由灰度通过一定的关系转换过来的。但在测定灰度值时，常发觉有对同一样品连续测定若干次，每次所得数据不一样等情况，这是由于①刚开机时，机内温度、元器件性能等不稳定；②图象在被输入设备（例如摄象机）摄取时，其内常带有噪…     

图像分析系统中光度学参数--灰度与光密度的应用

目的 用图像分析系统测定细胞中某种物质的含量。方法 比较图像分析中光度测定法与光密度测定法。结果 图像分析中光度学参数与真正的光密度(某种物质的吸光度)本质上是不同的。结论 光度学参数中的光密度比灰度更能客观地反映细胞中某种物质的显色强度。     

薄层光密度法测定大鼠尿,粪中炎琥宁含量

用氯仿提取大鼠尿、粪标本中炎琥宁,并在硅胶F_(254)薄层板上点样。经氯仿—石油—乙醇—冰醋酸(6:3:0.5:0.5)展开。置薄层板于岛津双波长色谱扫描仪(CS-930型)内,以测定波长λ_=290nm,参比波长λ_R=360nm用反射吸收法进行锯齿描,测定大鼠尿、粪中炎琥宁含量。方法灵敏、准确、专属性好,为测定生物样品中炎琥宁含量提供了一个实用可行的方法     

大孔树脂预分离—薄层光密度法测定疏肝止痛片中芍药甙含量

本文采用大孔树脂GDX104预分离，结合TLC双波长扫描，测定疏肝止痛片中芍药甙的含量。经对样品测定及稳定性、加样回收率考查，该方法准确，稳定，结果可靠。     

薄层光密度法测定仙茅中仙茅甙的含量

本文报道用薄层光密度法测定仙茅中活性成分仙茅甙的含量。所用吸附剂为硅胶GF_(254),展开剂为氯仿-甲醇(4:1),样品以甲醇为溶剂用索氏提取器提取8h,提取液浓缩定容于2ml。采用岛津CS-930型双波长薄层扫描仪测定,测定波长282nm,参比波长340nm,反射法锯齿扫描,SX=3。加样平均回收率98.48％。并用此法对购自5个不同地区的仙茅进行了仙茅甙含量的测定比较,方法简便易行,结果稳定。     

大孔树脂预分离—薄层光密度法测定消炎灵软胶囊中芍药甙的含量

采用大孔树脂GDX104预分离，结合TLC双波长扫描法，测定了消炎灵软胶囊中芍药式的含量。经对样品测定及稳定性、加样回收率考查，该方法准确、稳定，结果可靠。     

OD450值与金黄色葡萄球菌活菌数目的相关性研究

目的探讨OD450值与金黄色葡萄球菌活菌数目的相关性。方法金黄色葡萄球菌单菌落在LB培养基中培养18h,初步稀释后检测菌液的OD450值;取OD450值在0.9-1.0之间的菌液进一步稀释检测OD450值;最后将菌液再稀释5×105倍后取0.5ml涂LB琼脂平板,金黄色葡萄球菌在LB琼脂平板上培养18h后计算菌落数目。结果 OD450值与金黄色葡萄球菌活菌数目呈线性相关,线性回归方程为Y=1.153 92X＋0.007 68,OD450值（X）,活菌数目（Y×108）/ml。结论用OD450值检测菌液中金黄色葡萄球菌活菌数目具有简便、准确和迅速的特点。     

高铝致老龄大鼠痴呆及其原理初探

目的 探讨高铝与老龄大鼠痴呆的关系及原理。方法 实验前用花生米和节拍器建立大鼠条件反射。再用含铝和铝加柠檬酸的溶液饲养大鼠4个月，从条件反射恢复的时间和数量反映各组大鼠痴呆发病率，测定血液中铝和MDA含量，测定脑中铝合量和海马区细胞凋亡指数，其凋亡指数以平均光密度值(OD)表示。结果 实验二组与一组相比，铝、MDA及OD值增加，条件反射恢复，数量减少，两组间有显著性差异P＜0．01。实验三组与二组相比，铝、MDA、OD值增加，条件反射恢复，数量进一步减少，与二组相比均有显著性差异P＜0．01。结论 柠檬酸能增加机体对铝的吸收，使体内铝进一步增加，高铝能促进铝在脑细胞内的沉积，促进体内MDA生成和脑细胞的凋亡，因而增加大鼠痴呆发生率。     

利用Excel进行直线回归分析

在化学分析测试中，经常要将被测物质的含量与相对应信号值绘制成标准回归曲线，再根据未知样品的相应值，来计算出被测成分的含量。我们运用Office中的Exce软件进行线性回归分析，快速简便，直观地可以看出标准曲线中各点的分布情况。     

薄层光密度法测定中成药戊己丸中的有效成分

本文以硅胶GF_(254)为吸附剂,应用计算机技术选择正丁醇-水-冰乙酸(70∶20∶10)的最佳配比,展开、分离了戊己丸中各有效成分,用双波长薄层扫描仪进行含量测定,对有效成分小檗碱,巴马亭和芍药甙的测定条件、稳定性、标准曲线及与分离有关的色谱参数作了研究并进行了样品分析。本法测定的回收率均在95%以上,变异系数小于5%。     

薄层光密度扫描法定量测定麦迪霉素两种组分

研究了麦迪霉素中两种主要成分的薄层光密度测定方法。选用０．３ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ的０．７５％ＣＭＣ－Ｎａ溶液调和制板，以９０％甲醇－乙酸乙酯－环己烷（１０：４５：４５）为展开剂，用ＣＳ－９３０薄层扫描仪对样品进行了定量分析。麦迪霉素两种主要成分ＳＦ－８３７和ＬｅｕｃｏｍｙｃｉｎＡ６的回收率分别为１００．５％和９９．７％（ｎ＝６），ＲＳＤ分别为２．３％和１．９％。     

大鼠背侧海马生长抑素在青霉素致痫中的作用

目的 观察大鼠海马内生长抑素在癫痫中的作用。方法 １４肽生长抑素（ＳＳ－１４）或半胱胺微量注入侧海马，在大鼠感觉运动皮质记录脑电功率，应用推挽灌注结合放免法测定青霉素致痫后背侧海马内生长抑素免疫反应物质（ＳＬＩ）含量的变化。结果 致痫后０．５ｈ ＳＬＩ含量显著增加，可持续４ｈ。ＳＬＩ含量的上升程度与致痫后感觉运动区脑电相对功率增加呈正相关。单侧背海马内注入ＳＳ－１４ ０．０３ｍｍｏｌ使大鼠感觉运动     

比色法测定不同产地傣药肾茶中主要酚类物质含量

目的：优选合适的显色体系,建立傣药肾茶中主要酚类物质的含量测定方法,对不同产地样品进行含量测定。方法以迷迭香酸为对照品、亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠为显色剂、检测波长为500 nm、采用比色法测定19个不同产地样品的主要酚类物质含量。结果迷迭香酸在8.792~17.584μg/ml范围内线性关系良好（r2=0.9993）,平均加样回收率为100.73%,相对标准偏差（RSD）为0.85%。不同产地样品中主要酚类物质的质量分数为1.16%~3.49%。结论该方法简单、准确、重复性好,适合傣药肾茶中主要酚类物质的含量测定。结果显示不同产地样品中以云南产肾茶中主要酚类物质含量相对较高。     

氨基酸分析仪法批量测定小鼠皮质和海马中氨基酸类神经递质和牛磺酸的含量

目的：建立一种简单、准确可靠、可批量检测小鼠皮质和海马内氨基酸类神 分析方法。 方法：采用 A300 氨基酸分析仪，使用 10% 磺基水杨酸进行蛋白沉淀，锂盐试剂为流动相，茚三酮显 色，检测波长为 570 nm，对该方法的分离效果、线性范围、检出限及定量限、日内精密度和回收率、日间精密度进 行测定；选择同日龄的 SPF 级 KM 小鼠分为雌雄两组，每组断头处死 3 只，每只均于冰上分离出皮质和海马，经 匀浆、离心、蛋白沉淀、稀释、过膜等过程制成小鼠脑组织游离氨基酸样品，分别测定雌雄小鼠皮质和海马内天冬 氨酸（aspartic acid，Asp）、谷氨酸（glutamic acid，Glu）、甘氨酸（glycine，Gly）、 γ - 氨基丁酸（gamma-aminobutyric acid，GABA）4 种氨基酸类神经递质的含量和牛磺酸（taurine，Tau）的含量。 结果：标准样品、雌雄小鼠皮质样品 和海马样品中的 5 种目标氨基酸分离度好，在 8~400 μmol·L -1 的浓度范围内，线性良好（R ≥0.999），检测限为 1.29~1.86 μmol·L-1 ，定量限为 4.29~6.20 μmol·L-1 ，日内精密度良好（标准样品相对标准偏差 (relative standard deviation，RSD)<2.23%，脑组织样品 RSD<2.76%），脑组织样品的加标回收率为 91.52%~102.51%，采用绘制标 样峰面积曲线的方法准确获取样品中的 5 种氨基酸含量，实验用雌雄小鼠之间未发现明显统计学差异（P>0.05）。 结论：该方法简便、准确可靠，适用于小鼠皮质和海马组织中游离氨基酸含量的批量检测。     

膀胱移行细胞癌中P-gp170平均光密度值的表达

目的探讨P-gp170在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义。方法运用免疫组织化学S-P法检测9例正常膀胱粘膜组织和40例膀胱移行细胞癌组织中P-gp170的表达水平,利用图像分析技术测量阳性细胞的平均光密度值。结果膀胱移行细胞癌P-gp170的平均光密度值高于正常膀胱粘膜组织,差异有统计学意义（P〈0.05）;化疗后复发的移行细胞癌P-gp170的平均光密度值明显高于初发膀胱移行细胞（P〈0.05）。膀胱移行细胞癌组织中P-gp170的平均光密度值与病理分级有关（P〈0.05）,与TNM分期无关（P〉0.05）。结论P-gp170在膀胱移行细胞癌组织,特别在复发性移行细胞癌组织中高表达,可能与移行细胞癌化疗耐药性、发生及发展有关联,具有一定的临床意义。     

薄层光密度法测定石见穿中齐墩果酸的含量

本文报道石见穿中齐墩果酸的薄层光密度测定方法。用石油醚-苯-乙酸乙酯-冰醋酸(20:10:7:0.5)为展开剂,在硅胶G-CMC板上可以将齐墩果酸充分分离,10％H_2SO_4显色后,用岛津CS-930型薄层扫描仪进行定量测定。测定参数:双光束单波长(λ=530nm,反射法锯齿扫描,线性化仪CH=1,SX=3。石见穿中齐墩果酸含量为0.36％。     

HCV抗体临界值质控血清的制备及应用

为了减少或消除实验室室间误差 ,使质量标准的可靠性更强。收集抗 HCV EL ISA试剂盒内阳性对照品混合 ,测定OD值 ,将稀释好的血清分装。计算出 3 0个测定值 ( OD/ Cutoff)的平均值 ( x)为 1.9,标准差 ( s)为 1.3 0 2 ,变异系数为 7.0 %。如果检测点的 OD/ Cut off值落在 x± 2 s以外 ,则认为实验存在显著误差。建立一个外部质控以监测实验检测的重复性、稳定性及提示样品处于临界状态时的检测操作情况是十分必要的。     

急性应激诱导即时反应基因c-fos和c-jun的表达 Ⅰ:c-fos和c-jun表达的时效性

目的研究下丘脑和海马内c-fos和c-jun蛋白的表达与应激反应之间的时效关系。方法采用特异性抗体的原位免疫细胞化学方法，对游泳应激后不同时间点的大鼠下丘脑和海马内fos和jun蛋白阳性神经元的分布进行观察，用图像分析技术对大鼠下丘脑室旁核（PVN）、视上核（SON）和海马齿状回（DG）内的fos和jun阳性细胞的相对切面面积比和平均目标灰度进行分析。结果游泳应激结束后3h，室旁核和视上校及齿状区内可见密集深染的c-fos和c-jun阳性细胞，室旁核小细胞部，背内侧核等区域亦有疏密不一的阳性胞体。图像分析结果发现，游泳应激结束后3～8h内下丘脑PVN和SON及海马DG内fos和jun阳性胞体的相对切面面积比明显高于正常大鼠（P＜0.01），而平均目标灰度则显著降低（P＜0.01）。结论应激可以诱导下丘脑和海马等相关脑区c-fos和c-jun的表达，并且具有很强的时效关系。     

甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力检测方法的研究及应用

目的建立甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力检测方法。方法用双抗体夹心ELISA法检测试剂对甲型肝炎灭活疫苗及效力试验参比进行检测,以检测OD值为反应指标,用生物检定双平行线法的基本原理进行统计分析,计算待检疫苗对应于效力参比品的相对效力（R值）。结果样品HAAg含量与检测OD值之间具有高度的相关性,R2≥0.97,适用于建立双平行线检定方法;通过对3批样品3人次检测结果分析,验证了所建立方法的可靠性,回归、偏离平行、二次曲线、反二次曲线4个指标全部通过了验证;用所建立的体外相对效力试验检测法对32批次甲肝灭活疫苗进行检测,结果与小鼠体内效力检测结果具有良好一致性,均能反映疫苗相对效力,两种方法检测相对效力（R值）之间无明显差别（t=1.0354,P=0.3045）。结论所建立的甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力试验是一种灵敏、特异、方便、快捷的效力测定方法,可应用于甲型肝炎灭活疫苗效力检测。     

电针对实验性腹痛大鼠脚间核,黑质内P物质含量的影响

观察腹痛刺激及电针前后脚间核，黑质内Ｐ物质（ＳＰ）含量的变化。在实验性腹痛大鼠上应用免疫组化及方法，结合计算机图象处理，腹膜腔注射醋酸致痛后，脚间核吻外侧区（ＩＰＲＬ）内ＳＰ免疫阳性物质的含量明显减少（Ｐ〈０．０１）；而腹膜腔注射醋酸后再给予电针，ＩＰＲＬ内ＳＰ免疫阳性物质的含量明显增加（Ｐ〈０．０５）。痛刺激促进了ＳＰ从ＩＰＲＬ内释放，在脑内传递痛觉信息，电针可激活痛觉调制活动，抑制ＳＰ释放，出