γ突触核蛋白在肝癌中表达的相关性研究

目的：分析γ突触核蛋白在原发性肝癌组织中表达水平及与患者临床病理特征的相关性，为原发性肝癌治疗以及延长患者生存期限提供临床依据。方法：选取2019年1月—2021年1月我院手术切除的20例原发性肝癌组织及10例癌旁组织标本为研究对象，通过免疫组织化学染色法检测γ突触核蛋白表达，并分析γ突触核蛋白与原发性肝癌患者临床特征的关系。随访至2022年8月，统计患者生存情况，通过Cox回归模型分析各病理参数及γ突触核蛋白对肝癌患者预后的影响。结果：肝癌组织中γ突触核蛋白表达阳性率为60.00%(12/20),癌旁组织中γ突触核蛋白表达阳性率为0.00%,二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。不同病灶直径、TNM分期以及有无肝外转移患者癌组织中γ突触核蛋白表达阳性率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。随访至2022年8月，20例患者中死亡11例，存活9例；其中γ突触核蛋白阳性患者死亡率为75.00%,高于阴性患者的25.00%(P<0.05)。多因素Cox模型结果显示，TNM分期、肝外转移、γ突触核蛋白阳性、有癌栓是影响原发性肝癌手术患者预后的影响因素(P<0.05...     

γ-突触核蛋白的克隆、表达及纯化

目的对γ-突触核蛋白(synuclein)基因进行克隆,并对其表达及纯化条件进行优化。方法根据GenBank中γ-突触核蛋白的基因序列,设计PCR引物,从人脑cDNA文库中扩增γ-突触核蛋白的编码DNA序列,将其克隆至pGEX-6p-1载体中,构建重组质粒,将测序正确的重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达;对培养温度、IPTG的用量、诱导时间等条件进行了优化;用SDS-PAGE和质谱分析表达的目标蛋白;用亲和层析、离子交换层析、凝胶过滤纯化目标蛋白。结果γ-突触核蛋白在大肠杆菌中高效、可溶性表达,经质谱鉴定及SDS-PAGE分析,表达产物为γ-突触核蛋白。经过纯化,得到纯度高达98%的γ-突触核蛋白。结论成功地在大肠杆菌中高效表达了γ-突触核蛋白,并建立了纯化工艺,得到高纯度的重组蛋白,为进一步研究γ-突触核蛋白的晶体结构、生物学活性及功能,探讨其在肿瘤中的发病机制奠定了基础。     

MTA1与KISS-1在胃癌中的表达及临床病理意义

目的:研究肿瘤转移相关基因1(MTA1)与肿瘤转移抑制基因KISS-1蛋白在胃癌的表达及临床意义。方法:采用免疫组化的方法检测20例胃正常组织和82例胃癌组织中MTA1和KISS-1的表达。结果:MTA1与KISS-1蛋白在胃癌组织中阳性表达率分别为52.44%和40.24%,在正常胃组织的阳性表达率分别为5.00%和90.00%;MTA1蛋白高表达与胃癌浸润深度、组织学分级、临床分期、淋巴结转移和远隔转移的发生比较差异有统计学意义(P<0.01);KISS-1蛋白低表达与胃癌浸润深度、临床分期、淋巴结转移和远隔转移的发生比较差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中MTA1与KISS-1蛋白表达呈负相关(γs=-0.364,P<0.01)。结论:MTA1蛋白水平高表达和KISS-1蛋白水平低表达与胃癌的浸润、转移密切相关,可作为诊断胃癌患者转移、复发和判断预后的参考指标,有望成为胃癌基因治疗新的靶点。     

CCNB2过表达对非小细胞肺癌不良预后的预测效果研究

探讨细胞周期蛋白B2（CCNB2）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及对预后的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应和免疫组织化学法测定CCNB2 mRNA 和蛋白在NSCLC 肿瘤组织及临近非肿瘤组织中的表达水平,分析其与患者临床病理特征的关系。结果肿瘤组织中CCNB2 mRNA 和蛋白表达量高于非肿瘤组织（p <0.05）,且其表达水平与肿瘤分化等级、直径、淋巴结转移、远处转移及临床分期呈正相关（p <0.05）,同时CCNB2 高表达是患者生存率预后不良的危险因素。结论肿瘤组织中CCNB2 高表达与NSCLC 不良预后密切相关。     

结直肠癌中FcγRⅡ和VEGF-A的表达与临床意义

目的:探讨免疫球蛋白G Fc段低亲和力受体Ⅱ (FcγRⅡ) 和表皮生长因子A (VEGF-A)在结直肠癌,发生发展中的作用机制?方法:采用实时荧光定量PCR法,检测FcγRⅡ?VEGF-A基因在56例大肠癌组织和相应切缘正常组织中的表达,分析FcγRⅡ和VEGF-A与患者临床病理特征之间的关系,以及FcγRⅡ与VEGF-A的相关性?结果:FcγRⅡ基因表达在大肠癌组织中较正常组织低,其表达与大肠癌患者的浸润深度和TNM分期相关(均P < 0.05)?VEGF-A基因表达在大肠癌组织中较正常组织高,其表达与大肠癌患者的年龄?肿瘤大小?浸润深度和TNM分期相关(均P < 0.05)?肠癌患者FcγRⅡ基因的表达与VEGF-A呈负相关(r = -0.104, P = 0.002)?结论:FcγRⅡ基因与肠癌的侵袭转移等密切相关,其高表达提示较好的预后,推测可能是通过调控VEGF-A的表达而发挥作用?FcγRⅡ基因有望成为肿瘤免疫治疗的新途径?     

血小板衍化内皮细胞生长因子在肾细胞癌中的表达及其预后意义

目的 探讨血小板衍化内皮细胞生长因子(PD-ECGF)在肾细胞癌中的表达及其预后意义.方法 采用免疫组化EnVision两步法检测2002年6月至2006年12月76例肾细胞癌患者肿瘤组织中PD-ECGF的表达水平,并分析其与肾细胞癌患者临床病理特征及预后的关系.结果 76例肾癌患者肿瘤组织中PD-ECGF高表达41例,低表达35例.PD-ECGF表达水平与肿瘤分期及组织学分级呈正相关.PD-ECGF高表达患者5年总生存率(60.98％)显著低于PD-ECFG低表达患者(94.29％,P=0.000).单因素分析显示肿瘤分期、淋巴结转移、远处转移、组织学分级及PD-ECGF表达水平均与肾癌患者5年生存率密切相关,Cox比例风险模型多因素分析显示肿瘤分期、组织学分级及PD-ECGF表达水平为影响肾癌患者预后的独立危险因素(OR=17.971、9.702、6.790,95％CI:3.010～107.290、1.835 ～ 51.305、1.156 ～ 39.894).结论 PD-ECGF在肾细胞癌的发生、发展中可能起重要作用,PD-ECGF高表达可能与肾细胞癌的预后有关.     

上皮细胞黏附分子在胃癌组织中的表达及其与预后的关系

目的 探讨上皮细胞黏附分子（EPCAM）在胃癌组织中的表达及其与胃癌浸润转移及预后的关系,以及EPCAM作为胃癌早期诊断、预后判断和治疗靶点的临床价值。方法 应用免疫组织化学法检测436 例胃癌组织及92例癌旁非肿瘤胃黏膜组织中EPCAM 的表达情况,分析并探讨EPCAM 的表达与临床病理参数及预后的关系。结果 在92 例非肿瘤胃黏膜组织中,50例（54.3%）EPCAM 蛋白为阴性表达,42例（45.7%）呈弱阳性表达。在436 例胃癌组织中,EPCAM 蛋白高表达179 例（41.1%）,低表达257 例（58.9%）,主要在细胞包膜表达。EPCAM 蛋白的表达强度与肿瘤部位、肿瘤大小、Lauren 分型、浸润深度、淋巴结分期、TNM 分期、淋巴结转移和远处转移密切相关（均P＜0.01）,而与患者性别、分化程度、组织学类型无关（均P ＞0.05）。EPCAM 高表达患者的5 年生存率（57.2%）明显低于EPCAM 低表达胃癌患者的5 年生存率（17.3%,P＜0.05）。I、II 和III 期EPCAM高表达胃癌患者的5年生存率明显低于EPCAM 低表达患者的5年生存率（P＜0.05）;IV 期EPCAM 高表达和低表达胃癌患者的5年生存率无统计学差异。EPCAM 表达、远处转移和TNM 分期（均P＜0.05）是胃癌的独立预后因素。结论 EPCAM 在胃癌中高表达,且其表达与淋巴结转移、远处转移、肿瘤的TNM 分期显著相关,提示EPCAM 可以作为胃癌的早期诊断的筛查指标以及治疗的靶点之一。     

利用xMAP技术检测四种miRNA表达变化对早期肺癌的诊断价值

目的肺癌是目前世界范围内病死率最高的恶性肿瘤之一,对其进行早期诊断可以显著改善患者预后。肺癌的临床表现复杂多样,在病理学方面有明显的异质性,因此缺乏理想的早期诊断措施。近年来多项研究证实miRNA在肺癌的发生、发展过程中扮演着重要的角色,调控着肺癌的生长、侵袭和转移,并在肺癌的诊治和预后中有着重要的潜在应用价值。本研究旨在利用x MAP技术检测miRNA指标在肺癌组织中的表达变化,为肺癌早期诊断提供思路。方法利用39例手术取出的肺癌组织作为实验组和手术中取同期距癌切缘5 cm的邻近非肿瘤正常肺组织29例作对照,抽提组织RNA,用x MAP技术检测miR-let-7,miR-221,miR-372和miR-182在肺癌组织中的表达量变化。采用SPSS软件分析数据,相关性程度用Pearson法,2组间比较用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 miR-let-7和原发肿瘤分期呈负相关(P=0.034),和淋巴结转移分期呈负相关(P=0.028);miR-221和原发肿瘤分期呈负相关(P=0.271);miR-372和原发肿瘤分期呈正相关(P<0.05),和淋巴结转移分期呈正相关(P=0.372)。4种指标在肺癌组织中表达量明显比癌旁组织要高(P<0.05)。结论研究表明miRlet-7和miR-221低表达,miR-372高表达可能是肺癌发生发展的重要生物学标志。因此,通过联合检测多个miRNA指标在肺癌组织中的表达量,找出其可能作为肺癌早期诊断以及肿瘤发展程度的miRNA指标,对肺癌的早期诊断及预后具有重要价值。     

黏蛋白及其与卵巢上皮性肿瘤关系研究进展

卵巢上皮性癌严重危害妇女健康,其病死率居妇科恶性肿瘤之首。黏蛋白是一类高度糖基化、相对分子质量高的糖蛋白,分布于人上皮细胞表面,在卵巢上皮性肿瘤中表达水平明显上调,出现异常表达,其结构和功能发生改变,直接参与了肿瘤的浸润和转移,因而与卵巢肿瘤的发生、发展及预后相关。现就黏蛋白结构、生物学功能、在肿瘤组织中的表达情况,及其与卵巢上皮性肿瘤关系的研究进展做一综述。     

人附睾蛋白4在卵巢癌早期诊断及预后监测中的应用进展

卵巢癌是常见的妇科恶性肿瘤,早期无症状,一旦诊断多属晚期,病死率居妇科恶性肿瘤之首。因此,针对卵巢癌的高危因素做到早期诊断并采取一定的阻断措施,必将减少部分卵巢癌的发生与死亡。人附睾蛋白4是新近提出的肿瘤标志物,在卵巢肿瘤组织高表达,在癌旁组织不表达,特异性较CA125高,与卵巢癌的组织类型、分期、分级等存在相关性,在血液、尿液中均可检测到,对卵巢癌的早期诊断、复发和预后的监测有良好的辅助诊断效果。     

COX-2在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的研究膀胱移行细胞癌中COX-2表达及其与肿瘤临床分期、病理分级、复发和转移的关系。方法采用免疫组化技术检测40例膀胱移行细胞癌组织和12例正常膀胱黏膜组织中COX-2蛋白表达，并分析其与膀胱癌临床分期、病理分级、复发和转移的关系。结果膀胱移行细胞癌组织中COX-2蛋白表达增高，阳性率为77．5％；并随肿瘤分期、分级增高而增高，复发组高于无复发组，转移组高于未转移组。结论膀胱移行细胞癌组织中COX-2蛋白高表达，并与肿瘤临床分期、病理分级、复发和转移有关，对膀胱癌的诊断和判断预后有一定的意义。     

非小细胞肺癌中DAXX表达及临床意义

目的：探讨非小细胞肺癌组织中DAXX蛋白表达及其与临床病理参数和患者预后的关系。方法：采用组织芯片结合免疫组织化学方法,检测135例非小细胞肺癌患者癌组织及其癌旁组织中DAXX蛋白的表达情况,结合患者的临床病理参数以及相关随访资料进行统计学分析。结果：DAXX蛋白在非小细胞肺癌癌组织高表达108例（80.0%）,癌旁组织高表达30例（22.2%）,差异具有统计学意义（P＜0.05）,其表达水平与患者的组织病理学分级、TNM分期、原发肿瘤、淋巴结的转移、远处转移以及胸膜侵犯显著相关（P均＜0.05）,Kaplan-Meier统计分析显示DAXX高表达组患者生存时间明显短于低表达组（P＜0.05）,COX比例风险回归模型分析显示DAXX表达程度、TNM分期、淋巴结转移及远处转移为患者独立的预后因素。结论：DAXX蛋白表达与非小细胞肺癌的发生发展有关,其高表达提示患者预后不良。     

COX-2在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的:检测37例骨肉瘤组织中COX-2的表达,分析其对骨肉瘤的临床诊断及预后的意义。方法:应用免疫组化方法对37例骨肉瘤组织中COX-2进行检测。结果:37例骨肉瘤组织中有32例COX-2表达阳性,其表达与骨肉瘤分期和有无转移相关(P<0.05),与肿瘤组织学类型无相关性。结论:COX-2与骨肉瘤的发生及预后存在一定的相关性,可为骨肉瘤的临床诊断和预后判断提供帮助。     

periostin在肿瘤发生进展中的作用研究

Periostin是一种分泌性的间质蛋白,研究发现Periostin蛋白在人类多种肿瘤组织中高表达,其表达水平与肿瘤的发生、转移及患者预后密切相关,periostin的表达水平与临床诊断及预后密切相关,有望成为肿瘤标志蛋白或肿瘤治疗靶标。     

胃癌PRL-3与Bmi-1 mRNA联合表达的定量分析及其意义

目的研究胃癌及对应癌旁组织中PRL-3(phosphatase of regenerating liver-3)及Bmi-1(B-cell-specific moloney murine leukemia virus insertion site 1)基因mRNA的表达水平及差异,分析其表达与临床病理特征的关系,探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR检测116例胃癌手术切除标本及相应癌旁组织中的PRL-3及Bmi-1 mRNA表达水平,分析其表达的差异;研究其表达水平与性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织分化程度、淋巴结转移、浸润深度等临床病理特征的关系及两者的相关性。结果 PRL-3、Bmi-1 mRNA在胃癌及癌旁组织中均可检出,胃癌组织中相对表达水平高于癌旁组织(P<0.01)。PRL-3及Bmi-1 mRNA在肿瘤患者中的相对表达水平均与肿瘤大小、TNM分期、有无淋巴结转移、浸润深度有关,与患者年龄、性别无关;PRL-3mRNA相对表达水平还与肿瘤组织分化程度有关,Bmi-1 mRNA与肿瘤组织分化程度无关。结论 PRL-3及Bmi-1 mRNA的高表达与胃癌的侵袭和发展相关,其联合检测结果可作为早期诊断胃癌、评估胃癌发展、了解胃癌转移及预后的分子水平参考指标。     

CCT亚基γ在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨CCT亚基γ在鼻咽癌组织中的表达及临床意义.方法:收集100例鼻咽癌组织(鼻咽癌组)和60例鼻咽黏膜慢性炎组织(鼻咽黏膜慢性炎组),实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CCT亚基γmRNA表达水平,免疫组化及免疫印迹检测组织标本中CCT亚基γ蛋白表达水平,单因素分析CCT亚基γ与鼻咽癌患者临床病理特征及预后的关系.结果:鼻咽癌组CCT亚基γmRNA表达水平、蛋白阳性表达率评分及蛋白水平均高于鼻咽黏膜慢性炎组(P<0.05).CCT亚基γ蛋白表达水平与鼻咽癌患者的TNM分期、复发有关(P<0.05),与年龄、性别、吸烟史、远处转移及病理分型无关(P>0.05).CCT亚基γ高表达水平患者的3年总生存率低于低表达水平患者(P<0.05).结论:CCT亚基γ在鼻咽癌组织高表达与鼻咽癌患者临床分期及复发密切相关,CCT亚基γ增高预示着患者预后不良.     

MiR-141在膀胱癌组织中的表达及与肿瘤分级的相关性研究

目的：探究微小RNA(micro RNA, MiR)-141在膀胱癌组织中的表达及与肿瘤分级的相关性。方法：选取2012年3月—2014年3月于南通大学附属医院确诊的80例膀胱癌患者的癌组织及癌旁正常组织,采用实时聚合酶链式反应(real time-polymerase chain reaction, RT-PCR)法检测膀胱癌组织及癌旁正常组织中MiR-141 mRNA相对表达量,分析MiR-141表达与膀胱癌患者临床病理特征及预后的相关性。结果：MiR-141 mRNA在膀胱癌组织相对表达量显著高于癌旁正常组织(P<0.05);不同性别、年龄的膀胱癌患者癌组织中MiR-141 mRNA相对表达量差异无统计学意义(P>0.05);肿瘤的不同分级、分期、肌层有无浸润、有无远处转移等,其癌组织中MiR-141 mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤分级、肿瘤分期、转移与否、组织中MiR-141表达量与膀胱癌患者5年生存率差异均有统计学意义(均P<0.05);肿瘤分级、肿瘤分期、转移与否、MiR-141表达水平是影响膀胱癌患者预后的独立危险因素(P<0.05);MiR-141低表达患者总生存率(overall survival, OS)、无进展生存率(progression free survival, PFS)显著高于MiR-141高表达患者(P<0.05)。结论：MiR-141在膀胱癌组织中呈高表达;MiR-141表达水平与膀胱癌患者肿瘤分级、肿瘤分期、是否转移及预后情况具有相关性,可为膀胱癌患者早期诊疗及预后评估提供参考依据。     

卵巢癌患者血清及组织HGF测定和受体c Met的表达与预后关系的研究

目的：探讨血清肝细胞生长因子 (hepatocyte growth factor, HGF)在卵巢癌中的诊断价值和HGF及其受体c Met表达与其临床病理特征及预后的关系。方法：酶联免疫吸附法（ELISA）测定67例上皮性卵巢癌、25例良性上皮性肿瘤、30例健康对照者血清HGF含量;免疫组织化学法检测肿瘤组织中HGF及c Met蛋白表达。结果：①卵巢恶性上皮性肿瘤组术前血清HGF水平显著高于良性上皮性肿瘤组和正常对照组（P＜0.05）;②卵巢恶性上皮性肿瘤患者术前血清HGF水平与其临床分期、分化程度、淋巴结转移、术后残存灶的大小有关（P＜0.05）,与肿瘤组织学类型无关;③HGF与c Met在卵巢良恶性上皮性肿瘤组织间的表达有显著性差异;④卵巢恶性上皮性肿瘤组织中HGF表达与肿瘤的组织学类型无关,与临床分期、分化程度、淋巴结转移有关;c Met表达与组织学类型、临床分期无关,与分化程度及淋巴结转移有关。结论：HGF可用于卵巢恶性肿瘤诊断和术后随访的肿瘤标记物,与卵巢恶性上皮性肿瘤的发生、发展相关,HGF与c Met联合检测对于判断卵巢恶性上皮性肿瘤预后有重要意义。     

Survivin和PCAF在食管癌组织中的表达以及临床意义

目的:探讨Survivin和PCAF在食管癌中的表达及与临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫组织化学染色法检测90例食管癌组织和40例正常组织中Survivin和PCAF的蛋白表达水平,分析其与患者临床病理特征的关系及Survivin和PCAF在食管癌中表达的相关性。结果:Survivin阳性表达在癌组织中为73.33%,明显高于正常组织的5.00%(P0.05)。PCAF阴性表达在癌组织中为65.56%,高于在正常组织中的7.50%(P0.05)。Survivin蛋白高表达与患者性别、年龄和肿瘤大小均无关(P0.05),与TNM分期、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度和淋巴是否转移均有关(P0.05)。PCAF的阴性表达或低表达与患者性别、年龄、TNM分期、肿瘤浸润深度、肿瘤大小以及淋巴是否转移均无关(P0.05),与肿瘤的分化程度有关(P0.05)。Survivin和PCAF在食管癌中的表达呈负相关(r=0.113,P0.05)。结论:Survivin表达水平与肿瘤的分期、分化程度、浸润深度及淋巴转移均呈正相关,PCAF表达水平与肿瘤分化程度呈负相关。Survivin和PCAF在食管癌中的表达具有明显相关性,联合两者可能在食管癌的发生、发展、转移和预后等方面发挥协同作用。     

MMP-7在肾癌组织中的表达及其与浸润转移的关系

[摘要] 目的 探讨基质溶解素（MMP-7）的表达与肾癌的发生及浸润转移的关系。方法 采用实时荧光定量PCR技术检测肾癌组织及其正常肾脏组织中MMP-7的表达, PCR产物的定量方法采用比较Ct法,应用免疫组化法检测其蛋白水平的表达。结果 实时荧光定量PCR发现MMP-7平均模板量在癌组织中的表达明显高于其在正常肾脏组织的表达(P<0.01),且MMP-7在有淋巴结转移组中的表达水平明显高于其在无淋巴结转移的表达水平(P<0.01)。MMP-7蛋白在肾癌组织中的表达水平明显高于其在正常肾组织的表达水平（P<0.01）;肾癌MMP-7蛋白的表达与肿瘤的分期、肾包膜侵袭、淋巴结转移密切相关（P<0.05）。结论 MMP-7基因及蛋白的高表达与肾癌分化、浸润及淋巴转移有关,有望成为评判肾癌恶性程度、转移潜能及预后的新的有效指标。 [关键词] 肾肿瘤 MMP-7 实时荧光定量PCR 免疫组织化学 肿瘤侵润 肿瘤转移