p16基因甲基化与156例广西巴马壮族老人长寿的关系

目的探讨p16基因甲基化与人类长寿的关系。方法应用甲基化特异性PCR技术对巴马156例(年龄90～105岁,平均93.2岁,长寿组)健康壮族长寿老人和142例健康壮族成年人(年龄20～72岁,平均34.8岁,对照组)的p16基因甲基化状况进行分析,分析该基因甲基化在长寿组和对照组之间的差异及其与长寿的关系。结果长寿组p16基因甲基化明显低于对照组(P0.05)。结论巴马壮族长寿老人p16基因甲基化程度明显降低。     

广西巴马县壮族长寿老人HLA-DRB1基因的多态性

目的探讨人类白细胞抗原DRB1(HLA DRB1)基因与长寿的相关性。方法应用聚合酶链式反应序列特异引物(PCR SSP)对广西巴马县109名90岁以上壮族长寿老人(90～103岁)、56名80～89岁和71名当地健康、无血缘关系、生活习性相似、随机抽样的壮族成年人(23～70岁)进行HLA DRB1基因分型及相应等位基因频率的比较。结果在该研究群体中共检出13个HLA DRB1等位基因,最常见的等位基因是HLA DRB11501(长寿组、80岁组和对照组分别为26.61%、26.79%和26.06%),其次是HLA DRB11601/2(以上3组分别为14.22%、14.29%和16.20%)和HLA DRB11401/4(以上3组分别为11.93%、10.71%和11.97%);长寿组HLA DRB11201/2的频率与对照组比较有升高趋势,但无统计学意义;3组间其他相应等位基因频率的比较均无显著差异(P<0.05)。结论在巴马县壮族长寿人群的HLA DRB1座位上,没发现与其长寿明显相关的等位基因。     

巴马县壮族长寿老人白细胞抗原DQ基因的多态性研究

目的 通过对长寿老人人类白细胞抗原（ＨＬＡ）－ＤＱＡ１、ＤＱＢ１基因多态性的研究,探讨ＨＡＬ与长寿的关系。方法 应用聚合酶链反应－序列特异引物法（ＰＣＲ－ＳＳＰ）对巴马县１０９名９０岁以上长寿老人、５６名８０岁老年人及７１名健康、无血缘关系、随机抽样的当地成年人进行ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＤＱＢ１基因分型,受检者均为壮族。结果 （１）长寿组ＨＬＡ－ＤＱＡ１＾＊０１０２的频率明显高于对照组（分别为４３．３     

广西东兰县壮族长寿老人HLA-DQA1和HLA-DQB1基因的多态性

目的了解长寿老人的人类白细胞抗原DQA1、DQB1(HLADQA1、HLADQB1)基因多态性的特点,探讨HLA与长寿的相关性。方法应用聚合酶链式反应序列特异引物(PCRSSP)对东兰县150名90岁以上壮族长寿老人(90~105岁)和143名当地健康、无血缘关系、随机抽样的壮族成年人(20~76岁)进行HLADQA1和HLADQB1两座位的基因分型并进行相应等位基因频率的比较。结果①长寿组等位基因HLADQA10102的频率明显高于对照组(分别为4133%和2832%,P<005);②长寿组HLADQA10101及HLADQB10301的频率分别为367%和900%,明显低于对照组的1364%和2168%(P均<001)。③其余各相应等位基因频率之间的比较无显著差异(P值均>005)。相关分析显示,HLADQA10102与长寿呈正相关,而DQA10101及DQB10301呈负相关(OR分别为13083、02410及03296;P分别<005、001及001)。结论在东兰县壮族人群中,带有HLADQA10102等位基因的个体可能有利于长寿,而HLADQA10101和DQB10301则可能是长寿的不利因子。     

STR基因多态性与巴马地区老人长寿的关系

目的 探讨广西巴马长寿老人TH01等15个STR多态位点与长寿的关系.方法 调查巴马长寿区长寿老人167例(长寿组),非长寿区的长寿老人22例(对照1组),非长寿区无长寿家族史的健康对照者134例(对照2组).采用多色荧光标记的聚合酶链反应-短串联重复序列(PCR-STR)技术及自动测序法,检测各组人群TH01等15个STR位点等位基因分型.比较长寿组和各对照组等位基因及基因型频率的差异.结果 长寿组分别与各对照组相比频率有差异(P<0.05)的等位基因或基因型如下: TH01-A10、CSF1PO-A9、TH01A9-10频率低于对照1组;D19S433-A17、D7S820-A10、D7S820-A11频率高于对照2组, D7S820-A12/A13/A14三个等位基因、vWA-A17、D8S1179-A15、D5S818 A10-12低于对照2组.结论 巴马长寿群体有着自己特有的、异于其他地区长寿群体的STR等位基因分布.在巴马长寿人群中发现了TH01、CSF1PO、vWA、D19S433、D7S820、D5S818、D8S1179等位点等位基因的置换或突变可能与长寿或衰老的进程相关.     

p53基因多态性与鼻咽癌遗传易感性的关系

目的研究广西南宁鼻咽癌患者p53基因遗传多态性与鼻咽癌发生的关系。方法采用病例-对照研究方法,以200例鼻咽癌患者、200例对照人群为研究对象。选取p53基因SNP rs117562731位点作为遗传标记,用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和测序方法检测rs117562731位点基因型频率和等位基因频率,比较两组不同基因型与鼻咽癌易感性的关系。结果通过对rs117562731位点多态基因型检测分型发现,在鼻咽癌组和对照组CC、CT、TT基因型频率分别为80.0%、17.0%、3.0%和93.0%、5.5%、1.5%。rs117562731位点等位基因及基因型频率在鼻咽癌组与对照组间分布有显著性差异(P0.05)。结论 p53基因SNP rs117562731位点多态性与鼻咽癌之间存在显著的相关性。     

广西巴马地区壮族长寿人群转化生长因子-β1基因的多态性

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因的多态性与人类长寿的相关性。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术,检测198例广西巴马地区健康壮族长寿老人和177例巴马地区健康壮族成年人TGF-β1基因的G-800A、C-509T、T+869C、G+915C多态位点,并比较两组人群TGF-β1基因的相应基因型频率和等位基因频率。结果研究对象中均未检测出G-800A、G+915C多态位点,G-800A位点的基因型均为-800GG,G+915C位点的基因型均为+915GG。C-509T和T+869C两位点均存在多态性。长寿组的等位基因-509C和+869T的频率均明显高于对照组(分别为27.78%和20.90%,P=0.029;35.10%和27.97%,P=0.036)。长寿组基因型为-509CT和+869TT的频率均明显高于对照组(分别为37.37%和24.29%,P=0.006;20.20%和10.17%,P=0.007),可能为长寿的有利因素(OR分别为1.86和2.24);而-509TT的频率明显低于对照组(分别为53.54%和67.23%,P=0.007),可能是长寿的不利因素(OR=0.56)。在G-800A、C-509T、T+869C、G+915C多态位点基因型组合中,长寿组和对照组出现频率最高的均为GG-TT-CC-GG,但无显著性差异(分别为45.45%和52.54%,P=0.170);长寿组GG-CT-TT-GG的频率明显高于对照组(分别为11.11%和1.13%,P=0.000),是长寿的有利因素(OR=10.94)。结论在巴马人群中,TGF-β1基因内带有-509CT和+869TT基因型的个体可能有利于长寿,而-509TT基因型可能是长寿的不利因子。     

巴马地区长寿老人载脂蛋白E基因多态性与血压关系的研究

目的研究广西巴马地区长寿老人载脂蛋白E(apoE)基因多态性的分布及其与血压的关系。方法用限制性酶切片段长度多态性分析方法进行apoE基因分型。将广西巴马地区112例90岁以上长寿老人分为正常组(65例)和高血压组(47例),比较两组基因型、基因频率的分布特征。结果巴马长寿老人发生高血压者占41.96%;apoEε3/3分布的百分率最大,其次是ε2/3,而ε4/4最少;apoEε3/4和ε4频率比较,高血压组明显高于正常组(P<0.05),ε4基因携带者高血压发生率明显高于其他基因携带者。结论apoE基因多态性与巴马长寿老人高血压发生有关联;较低的apoEε4基因频率可能是巴马长寿老人高血压发病较低的原因之一。     

广西巴马长寿人群PON1基因多态性与血脂水平的关系

目的探讨广西巴马长寿人群对氧磷酶-1(PON1)基因rs662位点多态性与血脂水平的关系。方法调查巴马长寿老人151例、无长寿家族史健康成年人198例(对照1组)及南丹无长寿家族史的健康成年人176例(对照2组),分析其PON1基因频率分布特点并比较各基因型人群血脂水平。结果长寿组与对照两组的基因型和等位基因频率差异显著(P0.05),长寿组与对照两组A等位基因频率分别为35.8%和23.0%;长寿组AG基因型的HDL水平高于GG的HDL水平,GG及G等位基因携带者的HDL水平高于对照1组,AG、GG及G等位基因携带者TG水平低于对照两组。结论长寿组与对照两组rs662位点基因型及等位基因频率分布存在差异;巴马长寿人群rs662位点多态性与血脂水平相关。     

河南安阳地区p53基因第72密码子多态性与HPV相关食管癌的研究

目的探讨河南安阳地区p53基因第72密码子多态性与人乳头瘤病毒(HPV)相关食管癌的关系.方法收集安阳肿瘤医院食管癌病例110例,用PCR方法检测HPV,PCR-RFLP方法分析p53基因第72密码子多态性,病例对比研究方法分析在食管癌病例中HPV感染与p53基因第72密码子多态性的关系.结果 PCR检测结果表明,河南安阳地区食管癌组织中HPV检出率为59.1%;HPV阳性者中,Arg/Arg基因型的频率是60.0%,HPV阴性者中仅为17.8%,两者有统计学显著性(P＜0.05).结论 p53基因第72密码子多态性可能是安阳地区HPV相关食管癌的易感因素之一,携带p53Arg/Arg基因型的个体更容易发生HPV相关的食管癌.     

广西巴马长寿人群ACE基因多态性与环境因素的交互作用

目的 探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因I/D多态性与环境因素在巴马地区长寿现象发生中的交互作用.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对广西巴马地区200例长寿老人(年龄90～110岁,长寿组)以及288例健康成年人(年龄48～89岁,对照组)的ACE基因进行基因分型.应用条件Logistic回归模型分析巴马长寿发生的环境及遗传因素,根据交互作用指标判断基因与环境的交互作用.结果 长寿区的环境因素及ACE基因的ID+DD基因型是巴马人长寿的促进因素,两者存在交互作用(OR=11.063,r=1.378).结论 ACE基因I/D多态性与环境因素在巴马地区长寿现象发生中存在一定的交互作用,其长寿现象的发生是遗传及环境因素共同作用的结果.     

肝细胞癌肿瘤抑制基因p53过度表达及点突变的研究

目的检测重庆地区肝细胞癌 p53突变发生率,并进一步探讨 p53突变与肝细胞癌临床病理及相关危险因素的关系.方法应用一种敏感的 ARF 免疫组化和 PCR、银染 PCR-SSCP 方法检测本地区38例肝细胞癌(HCC)组织中肿瘤抑制基因p53的过度表达及点突变.结果 16例有P53蛋白过度表达(41.2%),7例有 p53基因249位密码子点突变(18.4%),2例249位密码子外第7外显子点突变.9例 p53基因有突变的肝癌中8例 P53蛋白阳性,两者符合率为88.9%.p53基因蛋白过度表达和点突变与 HCC 分化和转移有关.本组 HCC p53基因突变率与该地区黄曲霉素(AFB1)含量及乙型肝炎病毒(HBV)感染分布一致.结论该结果提示 p53基因突变与 AFB1和 HBV 等环境因素的协同作用有关,其中 AFB1主要与 p53基因249位密码子特异型突变有关,而 HBV 可能在散发型突变中发挥重要作用.     

Changes in p53 and Waf1p21 expression and cell proliferation in esophageal carcinogenesis

AIM: To study the correlation between changes in p53 and Waf1p21 expression and cell proliferation, determined by proliferating cell nuclear antigen (PCNA), at different stages of human esophageal carcinogenesis.METHODS: Biopsied and resected esophageal tissues from a high risk population of esophageal cancer in northern China were used in this study. All specimens were fixed in 85% alcohol and processed for routine histology. The avidin biotin peroxidase complex (ABC) method was used to detect p53, Waf1p21 and PCNA.RESULTS: Strong nuclear staining of p53, Waf1p21 and PCNA was observed in normal esophageal epithelium and epithelia with different lesion severities. As the lesions progressed to dysplasia (DYS) and to esophageal squamous cell carcinoma (SCC), the Waf1p21 immunoreactivity percentage decreased. The number of Waf1p21-positive cells slightly increased from normal to basal cell hyperplasia (BCH), but did not further increase in DYS and SCC. The total number of Waf1p21-positive cells was lower than the number of p53-positive cells in normal and BCH esophageal epithelia and much lower in DYS and SCC. Waf1p21-positive cells were located in the third and fourth cell layers in half of the samples examined, which was 2-4 cell layers higher than the cells expressing PCNA and p53 in the same histological categories of normal, BCH and DYS.CONCLUSION: Low Waf1p21 levels at the DYS stage may be related to a functional loss of p53. Other mechanisms may also be responsible for the decreased Waf1p21 expression in DYS and SCC.     

广西巴马长寿人群对氧磷酯酶-1基因多态性分析

目的探讨PON1基因Q192R位点在广西巴马地区不同人群中的频率及PON1基因多态性与巴马地区长寿现象的相关性。方法采用TaqMan探针实时荧光PCR技术对广西巴马长寿地区123例长寿老人(年龄90岁以上,长寿组)以及巴马长寿地区138例无长寿史的健康成年人(年龄24～87岁,对照1组)、巴马非长寿地区147例无长寿史的健康成年人(年龄48～89岁,对照2组)和南丹地区144例无长寿史的健康成年人(年龄21～83岁,对照3组)的PON1基因进行基因分型。结果长寿组与各对照组比较,等位基因和基因型分布差异存在统计学意义(P<0.05)。结论该多态性位点与地域有关,与巴马长寿地区的长寿现象是否有关还需进一步验证。     

Genetic analysis of p53 and RB1 tumor-suppressor genes in blast crisis of chronic myeloid leukemia

Summary We have investigated the involvement of the p53 and RB1 tumor-suppressor genes in 26 cases of chronic myeloid leukemia (CML) blast crisis, including 17 myeloid, eight lymphoid, and one megakaryoblastic crisis. The presence of p53 mutations in exons 5 through 9 was tested by the PCR-single-strand conformation polymorphism (SSCP) assay, followed by PCR-direct sequencing; in addition, loss of heterozygosity (LOH) at 17p13, the site of the p53 gene, was assayed by Southern blot. Given the variability of the mechanisms of inactivation of the RB1 gene in human tumors, a combination of Southern blot and mutational analysis by PCR-SSCP was used. p53 mutations were restricted to one case of myeloid blast crisis, showing a CGCTGC (ArgCys) mutation at codon 283; two additional cases displayed LOH at 17p13 in the absence of p53 mutations. No molecular lesions of the RB1 gene were detected in any of the cases analyzed. These data indicate that inactivation of p53 and RB1 is a rare event in the molecular pathogenesis of CML acute transformation.     

PTEN在HepG2细胞中诱导凋亡发生及上调p53表达

目的 研究肿瘤抑制基因PTEN对HepG2细胞凋亡及p53蛋白表达的影响,并探讨相关机制。方法 将携带有野生型PTEN基因及突变型G129E-PTEN,C124A-PTEN基因的真核表达载体转染HepG2细胞,利用western印迹杂交检测PTEN表达、蛋白激酶B(PKB/Akt)和焦点粘附激酶(FAK)的磷酸化状态,以及野生型p53蛋白表达水平的变化,并应用流式细胞仪,激光共聚焦技术检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果 与对照细胞相比,转染野生型PTEN和G129E-PTEN的HepG2细胞中磷酸化FAK(-65％,-65％)与磷酸化Akt(-93％,-35％)表达均存在不同程度的下调,而细胞凋亡率分别增加至19.8％±1.2％和9.2％±0.6％,并且p53蛋白表达上调( 120%,, 50％);然而转染C124A-PTEN的细胞中各项检测指标均无明显变化。 结论 PTEN依赖其蛋白磷酸酶活性抑制FAK的磷酸化;并主要通过脂质磷酸酶活性抑制Akt的磷酸化,并诱导HepG2细胞凋亡和p53蛋白表达上调。     

肿瘤抑制基因p53及p16与胃癌生物学行为的关系

目的探讨肿瘤抑制基因ｐ５３和ｐ１６异常与胃癌生物学行为的关系．方法采用免疫组化ＡＢＣ法检测５８例原发性胃癌（男３８例，女２０例，年龄３７岁～７６岁），Ｐ５３和Ｐ１６蛋白的表达变化．所有组织均新鲜取材，并迅速用８５０ｍｌ／Ｌ酒精固定，石蜡包埋，连续切片．结果受检组织中ｐ５３和ｐ１６阳性表达率分别为５１７％（３０／５８）和４８３％（２８／５８）．Ｐ５３蛋白在低分化胃癌（７００％）、进展期胃癌（５６９％）、淋巴结阳性胃癌（７４１％）中的表达率高于相应的高分化、早期、淋巴结阴性胃癌的表达率（２７３％，１４３％，３２３％）（Ｐ＜００５），且ｐ５３高表达多见于弥散型胃癌（同肠型胃癌比）、累及浆膜的胃癌也较局限于粘膜层的胃癌有更高的Ｐ５３蛋白表达（Ｐ＜００５）；Ｐ１６蛋白表达与胃癌大多数生物学行为无明显关系，但其在淋巴结阳性胃癌中的表达率（３３３％），低于淋巴结阴性胃癌中的表达率（６１３％）；相关性分析显示；ｐ５３阳性组织大多伴有Ｐ１６蛋白阳性表达（Ｐ＜００５）．结论Ｐ５３蛋白异常表达对胃癌生物学行为有广泛影响，Ｐ１６蛋白表达缺失可能是胃癌淋巴结转移的重要促发因素．     

Changes of p53 and Waf1p21 and cell proliferation in esophageal carcinogenesis

Ｃｈａｎｇｅｓｏｆｐ５３ａｎｄＷａｆ１ｐ２１ａｎｄｃｅｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｅｓｏｐｈａｇｅａｌｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓＷＡＮＧＬｉＤｏｎｇ１，ＹＡＮＧＷａｎＣａｉ１，ＺＨＯＵＱｉ１，ＸＩＮＧＹｉｎｇ１，ＪＩＡＹｕｎＹｉｎｇ２ａ...     

原发性胃癌p53基因突变

目的 p53基因是当前抑癌基因研究中的热点之一。迄今,有关 p53基因异常与胃癌临床病理学参数如大体类型、临床分期、组织分化程度,浸润深度及淋巴结转移之间的关系尚无定论。Tumura 报告p53基因改变主要发生于异倍体瘤,国内尚无报道。本实验目的主要是分析中国人原发性胃癌 p53基因突变与这些病理参数,包括 DNA 倍体之间的关系。方法用聚合酶链式反应—单构象多态分析(PCR—SSCP)技术对20例原发性胃癌 p53基因外显子5—8突变进行检测。结果 8例(40%)发生了突变,其中2例发生在外显子7,4例发生在外显子8。0至Ⅲ期均有突变存在。66.7%(6/9)的异倍体瘤检测到了p53突变,而二倍体瘤中只有18.2%(2/11)发生了 p53突变。结论 p53基因突变与胃癌临床病理参数如大体类型、分期、组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移之间无明显关系,而与胃癌 DNA 倍体改变有关。     

甘草酸对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化肝组织p53蛋白表达的影响

目的：探讨甘草酸对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化肝组织p53蛋白表达的影响。方法45只雄性SD大鼠随机均分为对照组、肝纤维化组和甘草酸干预组3组,每组各15只。肝纤维化组和甘草酸干预组构建四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,对照组大鼠注射等量的橄榄油。甘草酸干预组大鼠以0．2％甘草酸溶液予腹腔注射,3 ml／只,3次／周;对照组大鼠予等量双蒸水替代。3组于实验第1、4、8周各处死5只大鼠,取肝组织行HE染色检测纤维化情况,采用免疫组织化学和Western印迹定量分析检测p53蛋白在大鼠肝组织内的表达情况。采用单因素方差分析比较各组大鼠实验第1、4、8周p53蛋白表达量差异,进一步组间两两比较采用LSD-t检验。结果实验第1周,3组大鼠肝组织p53蛋白表达量差异无统计学意义;实验第4、8周,肝纤维化组大鼠肝组织中p53蛋白表达量均较对照组大鼠升高,而甘草酸干预组大鼠肝组织中p53蛋白表达量均较肝纤维化组大鼠降低,且差异均有统计学意义（实验第4周：t值分别为2．39、2．74;实验第8周：t值分别为1．58、7．79;P值均为0．000）。结论甘草酸可减缓肝纤维化进程,其分子机制可能与p53蛋白的表达下调有关。