骨片吸收陷窝光镜计数法定量测定破骨细胞功能

目的 研究定量检测体外培养破骨细胞（ＯＣ）骨吸收功能。方法 应用改良Ｆｅｎｔｏｎ等的方法，由１ｄ龄ＳＤ大鼠四肢长骨分离ＯＣ并中于牛皮质骨骨片上连续培养，超声去除细胞后，骨片经１％甲苯胺蓝色３～４ｍｉｎ光镜下对整片吸收陷窝观察并计数，根据骨片上陷窝的数目定量ＯＣ的骨吸收功能。结果 骨片吸收陷窝经甲苯胺蓝染色后光镜下可清晰识别，并为扫描电镜（ＳＥＭ）所证实，甲苯胺蓝染色－光镜观察技术对骨片吸收陷窝计数     

组织块法与传统破骨细胞培养方法对骨吸收功能的比较研究

目的：比较组织块法与传统破骨细胞培养方法对破骨细胞骨吸收功能的影响。方法：用组织块法与传统破骨细胞培养方法进行破骨细胞培养,抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP）染色鉴定破骨细胞,超声去除骨片上细胞后,骨片经1%甲苯胺蓝染色,光镜下观察骨片上吸收陷窝。根据骨片上陷窝数目、面积以及深度定量比较两组破骨细胞骨吸收功能。结果：吸收陷窝经甲苯胺蓝染色后光镜下可清晰识别,组织块法在骨片上的吸收陷窝数目比传统法明显少,而且骨片上陷窝面积及深度也比传统法小而浅（P〈0.05）。结论：组织块法培养的破骨细胞无论从数量上还是从功能上均没有传统法培养的好。数量大的成骨细胞对共培养破骨细胞骨吸收功能起到负面作用。     

体外培养破骨细胞功能的定量评定

目的 建立适用于体外药理学研究的破骨细胞骨吸收功能的定量评定方法。方法 机械分离法获得破骨细胞,接种于象牙薄片底物上,分别于培养１ｄ、３ｄ、５ｄ、７ｄ取出象牙薄片各４张,采用光镜和扫描电镜观察骨陷窝数量的变化;对随机拍摄的陷窝照片进行计算机形态计量分析,测算陷窝的面积和浓度。结果 骨吸收陷窝计数光镜法和扫描电镜法具有良好的相关性,ｒ＝０．９９９８,Ｐ〈０．００１。随着培养时间的延长,陷窝数量逐渐增     

骨巨细胞瘤中的多核巨细胞体外骨吸收研究

目的：比较破骨细胞与骨巨细胞瘤中多核巨细胞的特点，明确后者的性质和来源。方法：用倒置相差显微镜观察体外培养的多核巨细胞的一般形态及降钙素对它的影响；用骨片与多核巨细胞共同培养法观察多核巨细胞的体外骨吸收功能，用扫描电镜观察骨吸收陷窝，Ｇｏｍｏｒｉ染色观察多核巨细胞的酸性磷酸酶活性。结果：倒置相差显微镜下可见多核巨细胞胞核较多（２０个以上），胞浆周边不规则，有伪足样突起；胞浆内可见较多大小不等的空泡；降钙素（１００μｇ·Ｌ－１）可抑制多核巨细胞的伪足样运动；多核巨细胞与灭活的骨片共同培养时可见骨吸收陷窝形成，扫描电镜下可见吸收陷窝底面有原纤维；Ｇｏｍｏｒｉ染色时可见多核巨细胞的酸性磷酸酶呈阳性。结论：证实了多核巨细胞具有破骨细胞的形态特征与骨吸收功能，可能来源于骨髓的破骨细胞前体细胞     

白细胞介素1刺激破骨细胞性骨吸收作用的实验研究

目的：了解白细胞介素1β（IL－1β）在破骨细胞性骨吸收中的刺激作用及其相应的作用机制。方法：分别将新生大鼠破骨细胞单独以及和成骨细胞联合接种于预置象牙片的培养板中。24h后培养液中加入不同浓度的IL－1β。继续培养48h,然后取出象牙片,超声处理后行甲苯胺蓝染色,光镜下观察骨吸收陷窝的数目并计算其部面积。结果：IL－1β能够明显增加坡骨细胞和成骨细胞联合培养组象牙片上吸收陷窝的数目和面前,且刺激作用呈剂量依赖性,但对单独培养的破骨细胞无明显刺激作用。结论：IL－1β的刺激骨吸收作用由成骨细胞所介导,而非直接作用于破骨细胞。     

老鹳草素对破骨细胞体外骨吸收功能的影响

目的 观察老鹳草素(geraniin,Ge)对体外培养破骨细胞(OC)的形成及其骨吸收功能的影响.方法 由1日龄SD大鼠四肢长骨分离OC,和象牙骨片共同培养,或直接接种于培养板中,分别采用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)和甲苯胺蓝染色技术观察不同浓度的Ge对体外培养OC形成及OC性骨吸收功能的影响.结果 Ge呈浓度依赖性减少体外培养的TRAP染色阳性多核细胞即成熟破骨细胞(mature osteoclast,mOC)数目;与空白对照组比较,Ge各浓度组均使OC性骨吸收陷窝个数和面积减少、灰度变浅.结论 Ge减少体外培养OC的形成并抑制体外培养OC的骨吸收功能.     

应用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察体外培养破骨细胞的生存时间

抗酒石酸醚性磷酸酶（ＴＲＡＰ）是破骨细胞（ＯＣ）的标志酶，为ＯＣ所特有。本研究应用改良的ＶａｎＤｅＷｉｊｎｇａｅｒｔ和Ｍｏｓｔａｆａ方法对培养在骨片上的ＯＣ进行ＴＲＡＰ染色，成功地观察了体外培养ＯＣ的形态与生存时间。该方法简便、特异性高，能准确计数体外培养的ＯＣ数，所用底物为萘酚ＡＳ－ＢＩ，原料易获得，培养在骨片上的ＯＣ生存时间可长达２４０小时。     

应用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色观察体外培养破骨细胞的生…

抗酒石酸酸性磷酸酶（ＴＲＡＰ）是破骨细胞（ＯＣ）的标志酶，为ＯＣ所特有。本研究应用改良的ＶａｎＤｅＷｉｊｎｇａｅｒｔ和Ｍｏｓｔａｆａ方法对培育在骨片上的ＯＣ进行了ＴＲＡＰ染色，成功地观察了体外培养ＯＣ的形态与生存时间，该方法简便，特异性高，能准确计数体外培养的ＯＣ数，所用底物对萘酚ＡＳＢＩ，原料易获得，培养在骨片上的ＯＣ生存时间可长达２４０小时。     

钛合金颗粒存在下破骨细胞的体外诱导培养

目的 探讨钛合金颗粒存在下小鼠巨噬细胞体外诱导培养为成熟破骨细胞的方法.方法 获取小鼠骨髓巨噬细胞,采用巨噬细胞集落刺激因子依赖性前体细胞诱导法,于钛合金Ti-6Al-4V颗粒存在条件下进行诱导培养,培养后细胞行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,RT-PCR法检测破骨细胞特异性TRAP、CK、CR mRNA表达;采用相同方法于骨片上诱导培养细胞并观察骨吸收陷窝.结果 Ti-6Al-4V颗粒存在下培养第6天细胞开始出现融合,第9天出现多核巨细胞,TRAP染色阳性,细胞内有破骨细胞特异性TRAP、CK、CR mRNA表达;于骨片上诱导培养的细胞可形成骨吸收陷窝.结论 钛合金颗粒存在下,成功将小鼠骨髓巨噬细胞体外诱导培养为成熟破骨细胞.     

国产因卡磷酸钠对体外破骨细胞性骨吸收的作用

目的 研究国产因卡磷酸钠（ICD）对破骨细胞性骨吸收的作用。方法 采用破骨细胞与骨片的体外共培养法和显微摄片、显微光密度仪扫描及计算机图像分析技术。结果 ICD（0．5,5与50μmol/L）使体外破骨细胞性骨吸收陷窝数目呈剂量依赖性减少,中等浓度（5μmol/L）的抑制作用明显高于阳性对照药帕屈磷酸钠（APD）,两药均可使吸收陷窝表面积明显降低,而且ICD作用更明显。结论 ICD具有较强的直接抑制破骨细胞性骨吸收的作用,对骨质疏松症可能有一定的治疗作用。     

大鼠骨肉瘤细胞吸收骨质实验模型的建立与应用初探

采用液体闪烁计数、光镜、电镜等技术,分别研究骨肉瘤细胞-骨培养体系中的骨代谢和形态变化,建立了骨肉瘤细胞吸收骨质的体外实验模型,应用该模型证实了高浓度的羟乙二磷酸(P<0.01)、小鼠表皮生长因子(P<0.05)及骨肉瘤细胞培养基上清液(P<0.05)能促进骨质吸收;而低浓度羟乙二磷酸可保护骨质(P<0.05)。上述各组实验中,未见破骨细胞的增生性变化,但见骨肉瘤细胞的形态学变化,故认为骨肉瘤细胞可直接破坏骨质。     

联用三种方法确定根尖吸收根管工作长度研究

目的评价联合应用三种根测方法确定根尖吸收根管工作长度的准确性。方法选取68例患者,70颗慢性根尖周炎根尖吸收需拔除的患牙,共144个根管。随机分为二组,实验组(72个根管)联合应用电测法、放射法、纸尖法确定工作长度;对照组(72个根管)联合应用电测法、放射法确定工作长度。采用拔除患牙,在直视下,观察15#K锉为于根尖位置的方法评价。结果实验组的根管工作长度适长率为91.6%,对照组的根管工作长度适长率为75.0%。二组经χ2检验,差异有统计学意义(P<0.05)。结论联合应用电测法、放射法、纸尖法确定根尖吸收根管的工作长度可以增加测量的准确性。     

不同生长期平导对牙根吸收影响的比较研究

目的：比较不同生长期使用平导对牙根吸收影响。方法：选用90例经标准方丝弓矫治技术矫治的病例,每个患者在戴平导前、停戴平导时、停戴平导6个月时分别拍摄全口曲面断层片,分别测量下颌中切牙及侧切牙牙根等级,分析不同生长期牙根吸收情况及发生频率的分布情况。结果：男性及女性戴平导前不同生长期牙根吸收等级的差异无统计学意义（P〉0．05）,男性及女性停戴平导时、停戴平导6个月时牙根吸收等级的差异均有统计学意义（P〈0．05）,且16岁后比16岁前的牙根吸收比例要高。结论：不同生长期使用平导造成牙根吸收有区别。     

γ-干扰素对骨吸收及实体瘤骨转移的体外抑制作用

目的探讨体外实验中γ-干扰素(IFN-γ)对其他细胞因子引起的骨吸收及实体瘤骨转移病人外周血单个核细胞培养上清(PBMCs)促进的骨吸收的抑制作用。方法利用新生鼠头顶骨进行体外骨吸收实验,分别验证细胞因子白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)、IFN-γ、粒-巨噬细胞生长因子(GM-CSF)在体外对骨吸收的影响。检测8例实体瘤骨转移阴性及11例骨转移阳性病人PBMCs的骨吸收活性(BRA)。结果IL-1I、L-6、TNF、GM-CSF均可促进体外骨吸收,以IL-1作用最强。而上述因子联合培养,BRA明显增强。IFN-γ本身对骨吸收作用不明显,但能使IL-1及细胞因子联合培养引起的骨吸收减弱。IFN-γ可使实体瘤骨转移阳性病人PBMCs诱发的BRA增强明显降低(t=2.34,P<0.05)。结论IL-1I、L-6、TNF、GM-CSF在体外对骨吸收有促进作用;IFN-γ在体外可使部分细胞因子及实体瘤骨转移阳性病人PBMCs促进的骨吸收作用减弱,提示γ-干扰素可能存在抑制肿瘤转移作用。     

拔牙后牙槽窝立即植入羟基磷灰石微粒人工骨预防牙槽嵴吸收的临床观察

目的：研究羟基磷灰石微粒人工骨对拔牙后牙槽骨吸收的疗效及并发症。方法：60例患者拔牙后牙槽窝内立即植入羟基磷灰石微粒骨，术后1周，1个月，4个月分别复诊。进行临床及X线检查。结果：60例患者伤口均愈合良好。未见并发症；同术前相比，牙槽骨高度降低不明显。结论：羟基磷灰石微粒人工骨可有效地预防拔牙后牙槽骨的吸收，可为义齿修复及种植牙提供良好的条件。     

IL-1α促进骨巨细胞瘤中破骨样细胞体外骨吸收研究

目的：比较骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞骨吸收的功能特点。方法：体外分离骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与骨片共同培养，观察ＩＬ１α（５０μｇ／Ｌ，１００μｇ／Ｌ）对多核巨细胞体外骨吸收的影响。结果：ＩＬ１α可使多核巨细胞骨吸收陷窝的数目和面积增加；其作用随剂量增加而增强；ＩＬ１α对多核巨细胞的促进作用具有长效性。结论：ＩＬ１α具有促进多核巨细胞体外骨吸收作用，说明多核巨细胞与破骨细胞在骨吸收功能方面有相似性。     

Value of D-Dimers in patients with acute aortic dissection

Objective: To evaluatel the value of D-dimers in patients with acute aortic dissection (AAD). Methods: This study consisted of 16 patients with AAD and 27 non-AAD patients. Serum D-dimets were measured by Sta-Liatest D-DI immunoturbidimetric assay. Results: D-dimer level was higher (P ＜ 0.001) in patients with AAD(7.91 ± 5.52 μg/ml) than that in non- AAD group(1.57±1.24 μg/ml). D-dimer was positive (＞0.4 μg/ml) in all patients with AAD and in 10 control group patients (37%). Among patients with acute AAD, D-dimers tended to be higher in Stanford A than in Stanford B (8.67 ± 4.31 μg/ml vs. 3.24±1.27 μg/ml, P ＜0.01). D-dimer values tended to be higher in more extended disease(3.84 ± 1.65 μg/ml, 8.57 ± 3.58 μg/ml and 11.87 ± 5.69 μg/ml in thoracic aorta, thoracic and abdominal aorta, thoracic and abdominal aorta and iliacal arteries, respectively, P ＜ 0.05 for both 8.57 ± 3.58 and 11.87 ± 5.69 vs. 3.84 ± 1.65 ). Including the control group into the analysis, we found a sensitivity of 100%, a negative predictive value of 100%, and a specificity of 66% and a positive predictive value of 64% for D-dimer in diagnosis of AAD in our patients with suspected AAD. Conclusion: D-dimer was elevated in patients with AAD. A negative D-dimer test result could be useful in excluding AAD.     

Research of combined liver-kidney transplantation model in rats

Objective： To set up a simple and reliable rat model of combined liver-kidney transplantation. Methods： SD rats served as both donors and recipients. 4℃ sodium lactate Ringer＇s was infused from portal veins to donated livers,and from abdominal aorta to donated kidneys, respectively. Anastomosis of the portal vein and the inferior vena cava （IVC） inferior to the right kidney between the graft and the recipient was performed by a double cuff method, then the superior hepatic vena cava with suture. A patch of donated renal artery was anastomosed to the recipient abdominal aorta. The urethra and bile duct were reconstructed with a simple inside bracket. Results： Among 65 cases of combined liver-kidney transplantation, the success rate in the late 40 cases was 77.5%. The function of the grafted liver and kidney remained normal. Conclusion： This rat model of combined liver-kidney transplantation can be established in common laboratory conditions with high success rate and meet the needs of renal transplantation experiment.     

BLOOD PRESSURE CHANGE WITH AGE IN SALT-SENSITIVE TEENAGERS

Objective To observe blood pressure change with age in salt-sensitive teenagers whose salt sensitivity were determined by repeated testing.Methods Salt sensitivity was determined through intravenous infusion of normal saline combined with volume-depletion by oral diuretic furosemide in 55 teenagers. After five years, salt sensitivity was re-examined and subject blood pressure was followed up. Blood pressure changes in salt-sensitive teenagers were compared to that of non-salt sensitive teenagers over five years.Results After 5 years, the repetition rate of salt sensitivity determined by intravenous saline loading is 92.7%. In teenagers with salt sensitivity on the baseline, both the systolic blood pressure increments and increment rates were much higher than non-salt sensitive teenagers (12.7±12.1 mmHg vs. 2.8±5.2 mmHg, P＜ 0.01; 12.2%± 12.0% vs. 2.5% ±4.4%, P＜ 0.001,respectively). There was a similar trend for diastolic blood pressure (8.4 ± 6.4 mmHg vs. 3.7 ± 6.4 mmHg, P = 0.052; 13.2% ±10.6 % vs. 6.8%± 10.1%, P = 0.053, respectively).Conclusions Salt sensitivity determined by intravenous saline loading showed good reproducibility. Blood pressure increments with age were much higher in salt-sensitive teenagers than non-salt sensitive teenagers, especially in terms of systolic blood pressure.