survivin基因与胶质瘤研究进展

细胞凋亡受多个基因的调控 ,其中抑制凋亡的基因主要包括 bcl- 2基因家族和凋亡抑制蛋白 (IAP)基因家族 ,surv-ivin基因是 IAP家族新成员 ,在各种胶质瘤中高表达 ,并能强烈抑制胶质瘤细胞的凋亡。survivin在胶质瘤中的研究表明它是一种有效的判断胶质瘤患者预后的指标 ,并有望成为胶质瘤基因治疗的新靶点     

骨肉瘤组织survivin与 VEGF的表达及相关性

凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAP）是抑制细胞凋亡的重要成分,survivin是最近发现的一种IAP家族成员,其在成人正常组织中不表达而选择性表达于恶性肿瘤组织的特性,使抗细胞凋亡与肿瘤发生的关系更为接近。血管内皮细胞生长因子（vascular endothelium growth factor,VEGF）是已知肿瘤血管生成中最重要的诱发因子,     

As2O3对胰腺癌细胞株的抑制作用及其机制的初步探讨

目的：探讨三氧化二砷（arsenous oxide，As2O3）对胰腺癌PC2细胞的抑制作用及其作用机制。 方法： 用胰腺癌PC2细胞株进行培养传代，观察As2O3作用于细胞的不同时间，对细胞生长抑制情况；利用TUNEL染色检测胰腺癌细胞凋亡率；RT-PCR方法检测survivin基因的表达。 结果： ①随着药物对胰腺癌细胞作用时间的延长，细胞生存率明显降低，药物作用存在时间依赖性（P<0.05，P<0.01）。②TUNEL染色证实，As2O3对胰腺癌细胞的抑制作用是以促进细胞凋亡为主。③凋亡抑制因子survivin基因在胰腺癌细胞中表达；胰腺癌细胞经As2O3作用后，抑制survivin基因的表达（P<0.05）。 结论： As2O3可能通过抑制凋亡抑制因子survivin基因的表达，促进细胞凋亡，从而发挥抗肿瘤的作用。     

VEGF、survivin、bcl-2在膀胱移行细胞癌中的表达和意义

肿瘤血管形成过程复杂，其中血管内皮细胞生长因子（VEGF）发挥重要作用。膀胱移行细胞癌发生、发展受多种基因调控。survivin蛋白作为凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein，IAP）家族中的IAP蛋白，其结构独特，与多种肿瘤的恶性程度和预后密切相关。bcl-2基因具有抑制细胞凋亡和延长细胞存活的功能，它不加速细胞分裂、增殖，而是促进细胞生存。我们用免疫组化技术研究VEGF、survivin、bcl-2在膀胱移行细胞癌组织中表达，并分析其相关性，为膀胱移行细胞癌的诊断治疗及预后判断提供依据。[第一段]     

Survivin反义核酸对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

Survivin是凋亡抑制蛋白（IAP）家族的一个成员，具有强大的抗细胞凋亡功能，在几乎所有肿瘤组织中特异性表达，而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达。本研究针对Survivin mRNA序列设计了反义寡核甘酸，RT—PCR检测表明，该序列反义寡核苷酸可明显降低细胞中survivin基因的mRNA含量；Western印迹显示Survivin蛋白水平也被降低。MTT比色实验法检测结果说明人Survivin反义寡核苷酸抑制SMMC-7721细胞增殖，抑制率为43％，远高于无义寡核苷酸组和空白对照组。反义寡核苷酸还显著增强SMMC-7721细胞对于抗肿瘤药高三尖杉酯碱的敏感性，TUNEL法检测结果显示，在较低高三尖杉酯碱浓度下，反义寡核苷酸转染细胞的凋亡率明显高于其它对照组。本研究结果提示，survivin表达的靶向抑制有望应用于肿瘤的辅助治疗之中。     

survivin基因沉默对头颈鳞癌细胞凋亡的影响

目的探讨survivin基因沉默对人头颈鳞癌细胞PCI-37B调亡的影响。方法将survivin-SiRNA转入人头颈鳞癌细胞PCI-37B,采用流式细胞仪检测PCI-37B细胞凋亡。结果 survivin基因沉默能够使人头颈鳞癌细胞的凋亡率显著增高(<0.01),抑制survivin基因能够干扰细胞周期,使细胞在S期比例显著下降(<0.05)。结论survivin基因沉默能够诱导人头颈鳞癌PCI-37B细胞凋亡,抑制肿瘤生长。     

细胞凋亡抑制蛋白:肿瘤治疗的障碍与靶点

细胞凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP)主要通过结合并抑制细胞凋亡执行分子caspase蛋白家族而抑制细胞凋亡。肿瘤细胞高表达IAP是其获得抗凋亡特性的原因之一,成为肿瘤传统治疗(放疗,化疗等)的障碍。但特异的在肿瘤细胞内高表达而在正常细胞特别是高分化细胞中低表达或无表达也为肿瘤治疗提供了新靶点。干涉IAP分子在肿瘤细胞内的表达或功能已被作为肿瘤传统治疗方法的辅助治疗方法来研究。     

凋亡抑制蛋白LIVIN的研究与应用（文献综述）

凋亡抑制蛋白（IAP）家族首先由Crook等发现，是一类新的独立于B型淋巴瘤细胞因子2（Bcl-2）家族的抗凋亡蛋白。细胞凋亡是由多种因子介导的细胞主动死亡的过程，对机体或组织维持内环境的稳定和生物体的生长发育、生命周期、衰老死亡都有着重要的作用。凋亡抑制也是肿瘤发生的重要机制，凋亡通路的紊乱、促进凋亡因子的抑制、凋亡抑制因子过表达以及凋亡基因的表达失控都会导致肿瘤的发生、发展。而且，凋亡紊乱还导致肿瘤细胞对化疗药物的抵抗，在肿瘤的治疗过程中如何促进肿瘤细胞凋亡已经引起了人们极大的研究兴趣。     

Perifosine通过抑制PI3K/Akt途径调节人胶质瘤U251细胞增殖、凋亡与自噬

 目的: 探讨Akt激酶抑制剂perifosine对人胶质瘤U251细胞凋亡、细胞周期和自噬的影响,确定perifosine诱导的细胞自噬与其促进胶质瘤细胞凋亡的相关性。方法: Perifosine处理U251细胞后,采用MTT法检测细胞活力;流式细胞术分析perifosine对U251细胞周期的影响;Annexin V-FITC/PI双标法检测perifosine对胶质瘤细胞凋亡的作用;免疫印迹法检测细胞内P21、P27和cyclin B1等细胞周期调控相关蛋白以及caspase-9、PARP等细胞凋亡相关蛋白的表达水平;通过观察细胞内自噬标志分子LC3-Ⅱ的分布与表达来确定perifosine对自噬的诱导作用。结果: Perifosine剂量依赖性地抑制U251细胞活力,能够通过抑制cyclin B1的表达而阻滞胶质瘤细胞周期于G₂期。Perifosine促进了U251细胞内caspase-9和PARP的剪切,抑制survivin表达,从而诱导胶质瘤细胞发生凋亡。同时,perifosine与自噬抑制剂氯喹联用后,U251细胞凋亡数量明显增加。结论: Perifosine能够抑制U251细胞的增殖,同时诱导细胞发生凋亡与自噬,抑制自噬促进了perifosine诱导的胶质瘤细胞凋亡。     

Survivin siRNA对人肺腺癌细胞株AGZY增殖及凋亡的影响

目的 探讨靶向survivin基因特异性siRNA对人肺腺癌细胞株AGZY的凋亡、增殖影响以及对其相关机制的探讨.方法 采用RNAi技术靶向干扰AGZY细胞survivin基因的表达,分空白组、转染试剂组、阴性对照组、转染组,用RT-PCR检测各组survivin基因的表达,绘制细胞生长曲线,Hoechst染色检测各组细胞凋亡情况,Western印迹检测各组蛋白survivin、caspase-3、caspase-8、cyclinB1、cyclinD1的变化.结果 Survivin特异性siRNA可在mRNA及蛋白水平有效下调survivin的表达,转染组与其他3组比较差异有统计学意义(F=1785.25,F=38.67,P＜0.05);survivin表达抑制后,与其他3组比较,转染组AGZY细胞数明显减少(F=14999.46,P＜0.05),且转染组细胞出现典型的凋亡改变;与其他3组相比较,survivin特异性siRNA转染组cyclinB1、cyclinD1表达下调(F=109.674,F=313.102,P＜0.05),caspase-3、caspase-8表达上调(F=101.60,F=782.504,P＜0.05).结论 Survivin基因特异性siRNA可以有效下调survivin的表达;survivin表达下降可促进细胞凋亡,抑制细胞增殖;细胞增殖受抑制可能与cyclinB1、cyclinD1表达下降有关,细胞凋亡增加可能与caspase-3、caspase-8表达上调有关.     

Survivin反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞凋亡的诱导效应

目的：利用骨肉瘤OS-732细胞，探讨survivin反义寡核苷酸（ASODN）对survivin基因表达的影响及其诱导肿瘤细胞凋亡的效应。 方法: 设计合成特异性靶向survivin的ASODN，以不同浓度和时间对OS-732细胞进行转染，并设空白、正义（SODN）对照组进行比较。采用RT-PCR、Western blotting、免疫细胞化学技术检测各组OS-732细胞中survivin mRNA、蛋白表达状态，吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色法、流式细胞仪检测细胞凋亡水平和形态变化，MTT法检测细胞生长抑制情况，激酶活性测定法检测细胞中caspase-3活性程度。 结果: 转染ASODN各组OS-732细胞survivin mRNA和蛋白表达均明显弱于空白对照组、SODN组；细胞凋亡率（AI）显著增加，细胞生长相应受抑，caspase-3活性显著提高；上述效应在ASODN各组存在一定的时间浓度依赖性；而SODN各组与空白对照组间各项指标均无明显差异。 结论: ASODN能够特异性下调OS-732细胞中survivin基因表达，激活凋亡效应蛋白酶caspase-3，在诱导肿瘤细胞凋亡、抑制增殖中发挥重要作用。     

左炔诺孕酮下调survivin基因促进人子宫肌瘤细胞凋亡

目的探讨左炔诺孕酮(LNG)诱导人子宫肌瘤细胞(UtLMC)凋亡过程中survivin的表达变化。方法原代培养人子宫肌瘤细胞传代后,加入不同浓度LNG,以AO/EB双染法区分早、晚期凋亡细胞和坏死细胞;RT-PCR检测抑凋亡基因survivin mRNA的表达,Western blot测定survivin蛋白的表达。结果 10 mg/L LNG作用UtLMC后早期凋亡细胞多于阴性对照组,随着LNG剂量的增加,晚期凋亡细胞也逐渐增多,核浓聚、偏位,被染成桔红色;在10 mg/L以上LNG诱导的UtLMC凋亡中,survivin mRNA表达显著下降,蛋白表达由对照组的33.82±0.02下降至10.37±0.03(P<0.05)。结论一定浓度的左炔诺孕酮所诱导的人子宫肌瘤细胞凋亡,可能与抑制survivin抗凋亡活性相关。     

XIAP与肿瘤化疗耐药关系的研究进展

细胞凋亡程度的降低是肿瘤发生的主要机理，造成肿瘤对化疗药物耐药的主要原因是化疗药物介导的细胞凋亡指数的下降。凋亡抑制蛋白在抑制细胞凋亡中起非常重要的作用,XIAP是IAP家族中抑制细胞凋亡的最主要成员。本文总结了近年来对XIAP抗凋亡机制的研究及其在肿瘤化疗耐药方面的作用。     

沉默survivin基因表达对人宫颈癌hela细胞恶性行为的影响

目的 研究小于扰BNA(small interfering RNA,siRNA):抑制survivin基因的表达对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响.方法 根据survivin基因设计序列特异性的siRNA(survivin-siRNA).在脂质体介导下转染Hela细胞,Western blot方法检测survlvin蛋白...     

凋亡抑制蛋白在细胞凋亡中的调节作用

凋亡抑制蛋白(IAP)家族是至今发现的惟一一种内源性Caspase蛋白酶抑制剂,在细胞凋亡中发挥重要的调节作用。本文结合近年来的研究进展,综述了Caspase在凋亡中的作用、IAP家族蛋白分子的结构特征、抗凋亡作用机制以及IAPs抗凋亡作用的负调控。进一步认识细胞凋亡中复杂的调控机制,为寻找与凋亡紊乱相关的疾病治疗提供了重要靶向。     

抗IL-2受体γ链抗体抑制T细胞表达survivin的研究

目的 探讨体外封闭IL-27链抑制T细胞表达survivin的机制。方法 分离Balb／C、C57BL／6小鼠脾细胞进行双向混合淋巴细胞培养（MLR）及conA刺激试验。通过免疫细胞化学染色方法检测survivin表达及其规律。不同天数内加入抗γ公共链抗体，流式细胞术检测细胞凋亡（PEcy5-CD3，FTTE—Annexin-V）、细胞周期（PI）及CD25、survivin表达。结果 同种抗原及ConA刺激后脾细胞可检测到survivin、CD25表达。活化淋巴细胞表达survivin，加抗γ公共链抗体后，不能检测到survivin的表达，而CD3^＋ Annexin-V^＋细胞数增加，M期细胞数下降，凋亡细胞（前G1期）增加；但在MLR后第1～2天，抗γ公共链抗体加入并不能使凋亡细胞增加。结论 抗IL-2γ链抗体可诱导活化的T细胞凋亡，间接抑制活化的T细胞的survivin表达。     

三羟异黄酮诱导人肝癌细胞凋亡及对相关基因的影响

目的探讨三羟异黄酮(genistein)对人肝癌细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法将三羟异黄酮作用于体外培养的人肝癌细胞(SMMC-7721),MTT法检测增殖抑制率,光镜下观察凋亡细胞的形态,凝胶电泳分析DNA改变;通过免疫组化技术检测凋亡基因蛋白P53、survivin和caspase-3的表达。结果三羟异黄酮呈浓度和时间依赖性抑制人肝癌细胞的增殖。5mg/L、10mg/L和20mg/L三羟异黄酮作用48h对肝癌细胞的抑制率分别为9·86%、19·13%和25·64%。形态学显示,三羟异黄酮能诱导SMMC-7721细胞凋亡,细胞DNA电泳出现典型梯状条带;且凋亡相关基因蛋白survivin表达明显减少,而P53和caspase-3的表达增加。结论三羟异黄酮能诱导SMMC-7721细胞凋亡,其凋亡机制之一可能是下调survivin基因蛋白表达,增强P53和caspase-3的表达。     

bcl-2家族促凋亡成员——bak与肿瘤

bcl-2基因家族是一类细胞凋亡的相关基因，参与细胞凋亡的调控。bak作为该家族的成员，虽发现较晚，但因其显著的促凋亡作用，现在已受到越来越多的关注。本文就bak基因及其蛋白产物BAK与肿瘤之间的关系做一综述。     

Survivin特异性siRNA诱导胰腺癌细胞凋亡的研究

目的 观察survivin特异性siRNA对胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外构建Survivin特异性siRNA表达载体p-Survivin-siRNA,转染胰腺癌细胞株Panc-1细胞系,RT-PCR和Western印迹法检验其对胰腺癌细胞株Panc-1细胞的RNA干扰(RNAi)效果.采用MTT法分析其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期的影响.同时,采用Western印迹法检测半胱氨蛋白酶 3(caspase 3)的表达变化.结果 p-survivin-siRNA表达质粒高效而特异地剔降胰腺癌细胞株Panc-1细胞中survivin的表达,抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01),阻断胰腺癌细胞株Panc-1细胞在G1期.随着survivin基因被沉默,caspase 3表达升高(P<0.01).结论 靶向survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖,促进细胞凋亡.     

一种抗凋亡蛋白--存活素的研究

存活素(survivin)是一种新近发现的16.5 kD细胞内蛋白,属于抗细胞凋亡蛋白家族.在胚胎和各类肿瘤中均表达,但在除胸腺和睾丸以外的成人组织中未被发现.阐明survivin在细胞凋亡和增生中的分子机制及其作用,在抗癌治疗和抑制对机体有害的细胞凋亡方面具有重要意义.