雄黄抑制宫颈癌细胞株增殖和诱导凋亡的体外研究

目的:体外研究中药雄黄主要成分As4S4对子宫颈癌细胞株Hela细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法:以As4S4不同浓度(7.5、15、30、60mg/L),分12h,24h,36h,48h,60h处理Hela细胞,用光镜观察细胞变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率;用DNA梯状电泳(DNA ladder)检测凋亡的发生。结果:不同浓度(7.5、15、306、0 mg/L)的As4S4处理的Hela细胞,细胞增殖受到抑制,作用呈明显的时效和量效关系,差异有非常显著性(P<0.01);As4S4诱导Hela细胞的凋亡率为(8.13±1.13)%~(62.36±4.42)%,与对照组比较(2.84±1.88)%,差异有极显著性(P<0.01),并呈浓度依赖性;DNA ladder呈梯状条带。结论:雄黄体外对宫颈癌细胞株Hela细胞具有增殖抑制和促进凋亡作用。     

姜黄素诱导人肝癌细胞株Bel-7402凋亡

目的 探讨姜黄素对人肝癌Bel-7402细胞的增殖抑制、诱导凋亡及其分子作用机制.方法 用姜黄素10 μmol/L体外处理Bel-7402细胞48 h.采用MTT比色法检测细胞生长的抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测Bcl-2和Bax mRNA表达.结果 10 μmol/L姜黄素处理细胞48 h后呈现时间和剂量依赖性细胞增殖抑制作用;细胞凋亡率随着姜黄素浓度的增加而逐步增高,Bax mRNA表达上调,而Bcl-2 mRNA表达降低.结论 姜黄素对Bel-7402细胞有显著的增殖抑制及诱导凋亡作用,其作用机制可能与上调Bax基因的表达及下调Bcl-2基因的表达有关.     

姜黄素对胃癌BGC-823细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

目的探讨姜黄素对胃癌BGC-823细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用MTT法检测姜黄素对胃癌BGC-823细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测姜黄素对胃癌BGC-823细胞凋亡的影响;Hoechst 33258荧光核染色法观察姜黄素对胃癌BGC-823细胞的形态学改变的影响。结果姜黄素80μmol·L-1和160μmol·L-1剂量在24、48和72 h均可显著抑制胃癌BGC-823细胞对MTT的摄取能力(P0.05或P0.01),并呈现一定的时间依耐性;姜黄素20μmol·L-1和40μmol·L-1剂量在短时间内对胃癌BGC-823细胞摄取MTT的能力无显著作用,但随作用时间的增长,也表现出显著的抑制作用(P0.05);流式细胞术和Hoechst 33258荧光核染色法结果表明姜黄素40、80和160μmol·L-1剂量均可显著提高胃癌BGC-823细胞的凋亡率(P0.05或P0.01)。结论姜黄素可能通过介导胃癌BGC-823细胞凋亡而发挥其抑制肿瘤细胞增殖的作用。     

姜黄素对HL-60细胞的增殖抑制与凋亡诱导的影响

目的研究姜黄素对人原髓细胞白血病HL-60细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用,探讨其诱导细胞凋亡的机理。方法应用MTT比色法、细胞荧光染色法和Western blotting检测姜黄素对HL-60细胞的增殖抑制、凋亡诱导以及对HL-60细胞表达Bcl-2、Caspase9和c-myc的影响。结果姜黄素对HL-60细胞的增殖抑制与剂量相关(P<0.05);经姜黄素作用后HL-60细胞的形态差异明显,表现凋亡的特征性变化,而且姜黄素作用后HL-60细胞的Bcl-2和原癌基因c-myc的表达量低于对照组(P<0.05),而Caspase9的表达量则明显高于对照组(P<0.05)。结论姜黄素可有效抑制体外培养的HL-60细胞增殖,其诱导HL-60细胞凋亡的途径可能通过线粒体介导。     

姜黄素抑制食管癌细胞增殖和诱导细胞的凋亡

目的 探讨姜黄素对人食管癌A549细胞增殖和细胞凋亡的影响.方法 MTT法测定不同浓度姜黄素对人食管癌A549细胞的增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡率.结果 在一定的浓度范围内,随着姜黄素浓度的增加,细胞增殖的抑制率显著增加,呈明显量-效关系(r＝0.992, P＜0.01);姜黄素对人食管癌A549细胞的凋亡率为(18.89±0.58)%,明显高于对照组的(4.25±0.19)%(P＜0.01).结论 姜黄素可抑制人食管癌A549细胞的增殖、诱导细胞的凋亡.     

姜黄素对人舌鳞癌Tca8113细胞株增殖抑制机制的研究

目的 探讨姜黄素(curcumin)对人舌癌Tca8113细胞株体外增殖及凋亡的调控作用.方法 选用人舌鳞癌Tca8113细胞系进行体外培养,以5-40μmol/L的姜黄素分别处理Tca8113细胞24～72h后,倒置显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞增殖,SABC免疫组化法检测细胞内核增殖抗原ki-67、癌基因蛋白p-21、细胞凋亡相关基因蛋白Bax表达水平.结果 curcumin对Tca8113细胞增殖有抑制作用,并随药物浓度升高和时间延长而增强,倒置显微镜观察可见细胞发生凋亡形态学改变的程度和浓度与时间呈正相关,免疫组织化学检测到核增殖抗原ki-67、p-21表达均下调,Bax表达增强.结论 姜黄素对Tca8113细胞的增殖具有明显抑制作用,并与浓度、时间有量效关系.通过上调凋亡基因蛋白Bax,下调ki-67、p-21蛋白的表达,诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一.     

姜黄素诱导肺癌细胞凋亡机制的研究进展

姜黄素作为一种传统中药,以其毒性低、耐受性好、药理作用广泛等特点日益受到广泛关注。其中抗肿瘤作用已被大量的动物实验及体外细胞实验研究所证实。对于不同组织、不同来源的肿瘤细胞,其发挥抗肿瘤作用的机制也不尽相同,本文就姜黄素诱导肺癌细胞凋亡的主要机制做一简要综述。     

镉诱导OK细胞凋亡

镉在人体的半衰期长达 2 0～ 3 0年 ,长期职业或环境接触可导致镉在人体组织的大量蓄积。镉在肾脏的蓄积 ,会影响肾近曲小管的功能 ,表现为低分子量蛋白质、氨基酸、钙、葡萄糖、尿酸、磷酸盐和酶等从尿中大量排出 ,以及肾近曲小管的酸化[1 ,2 ] 。这些损害已被大量研究所证实 ,同时开始从分子生物水平得到一定认识 ,镉致细胞凋亡就是其中一个方面。有研究表明镉在体外实验中可致人Ｔ细胞 (Ｔｃｅｌｌｌｉｎｅ) [3] 、猪肾细胞 (ＬＬＣ ＰＫ1ｃｅｌｌｓ) [4 ] 、转化人肾细胞 ( 2 93ｃｅｌｌｓ) [5] 发生凋亡 ,少量整体实验如大鼠肾近曲小管…     

姜黄素对尤文氏肉瘤RD-ES细胞的诱导凋亡研究

目的 探讨姜黄素对体外培养的人尤文氏肉瘤RD-ES细胞的影响. 方法 体外培养人尤文氏肉瘤RD-ES细胞,姜黄素组加入终浓度分别为1,10,100 mg.mL^-1的姜黄素处理RD-ES细胞,对照组不加姜黄素,24～72 h后观察细胞的形态变化,分别用噻唑蓝(MTT)法、原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色、逆转录 聚合酶链反应(RT-PCR)及图像分析技术检测各组细胞生长、凋亡发生、Bcl-2 基因表达水平的变化. 结果1,10,100 mg.mL^-1姜黄素组细胞生长抑制率分别为(11.8±2.0)%,(56.4±5.0)%,(67.6±6.0)%,24 h半数抑制浓度为10.74 mg.mL^-1;1,10,100 mg.mL^-1姜黄素作用于RD-ES细胞48 h,随着浓度的增强,细胞凋亡率增高;Bcl-2表达减少. 结论 姜黄素可诱导RD-ES细胞凋亡,并与Bcl-2有关.     

姜黄素对人食管癌细胞株Eca-109增殖抑制和凋亡诱导的实验研究

目的 研究姜黄素对人食管癌细胞增殖抑制作用及对细胞周期的影响。方法 以四甲基偶氮唑蓝（MTT）试验测定细胞的生长抑制率，以流式细胞仪检测细胞周期分布。结果 姜黄素对细胞的生长有明显的抑制作用，且呈浓度依赖性。结论 姜黄素可抑制人食管癌细胞增殖。诱导失巢凋亡是其机制之一。     

葫芦素B纳米脂质载体对结肠癌和乳腺癌细胞抑制及凋亡作用的研究

目的：研究葫芦素B纳米脂质载体（CuB-NLC）对结肠癌Lovo细胞,乳腺癌MCF-7细胞的体外细胞毒性。方法：结肠癌Lovo细胞,乳腺癌MCF-7细胞常规复苏、培养及传代,取处于对数生长期的细胞用于实验。采用CCK-8法检测质量浓度为0、0.0625、0.25、1.00、4.00、16.0 mg/L的CuB-NLC对结肠癌Lovo细胞,乳腺癌MCF-7细胞的毒性,流式细胞仪检测结肠癌Lovo细胞,乳腺癌MCF-7细胞的细胞周期进程及Annexin V/PI双染法检测细胞的凋亡率。结果：与葫芦素B （CuB）相比CuB-NLC对结肠癌Lovo细胞,乳腺癌MCF-7细胞生长抑制作用明显增强（P＜0.05）,且这种抑制作用随药物浓度增加而增强。CuB组及CuB-NLC组作用于结肠癌Lovo细胞、乳腺癌MCF-7细胞48 h后,与NLC空白组及DMSO对照组相比较,CuB及CuB-NLC均能够引起结肠癌Lovo细胞、乳腺癌MCF-7细胞G2/M期阻滞,同时伴有G0/G1期细胞减少, CuB-NLC组的作用更加明显,有统计学差异（P＜0.05）。Annexin V/PI双染法检测结果表明,CuB-NLC能显著诱导结肠癌Lovo细胞,乳腺癌MCF-7细胞凋亡。结论：葫芦素B纳米脂质载体能够抑制结肠癌Lovo细胞,乳腺癌MCF-7细胞的增殖,诱导细胞凋亡。     

蛇葡萄素对人宫颈癌SiHa细胞增殖、周期及凋亡的影响

目的探究蛇葡萄素(ampelopsin,AMP)对人宫颈癌SiHa细胞增殖、周期、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法MTT法检测不同浓度(10、20、40、80、160、320μmol·L^-1)和不同干预时间(24、48、72 h)的AMP对SiHa细胞增殖抑制作用;Hoechst 33258法、Annexin-FITC/PI法检测AMP对SiHa细胞凋亡的影响;流式细胞术检测细胞周期变化;Rh-123法检测线粒体膜电位的变化;Western blot检测AMP对SiHa细胞中Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase-3蛋白表达的影响。结果AMP对SiHa细胞抑制率呈浓度和时间依赖性(P<0.05),最低IC 50值为40.33μmol·L^-1;随着AMP浓度的增加或作用时间的延长,细胞凋亡率逐渐增加(P<0.05);当AMP浓度为80μmol·L^-1时,细胞周期阻滞在G 2/M期,呈一定的时间依赖性;线粒体膜电位随AMP浓度上升而下降;Bax/Bcl-2和Cleaved-caspase-3表达水平均上调,呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。结论AMP明显抑制SiHa细胞的增殖,阻滞细胞周期于G 2/M期,可能通过线粒体途径诱导SiHa细胞凋亡。     

金粉蕨素体外诱导人宫颈癌HeLa 细胞凋亡的机制

目的：探讨金粉蕨素（ONY）体外诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其分子机制。方法体外培养人宫颈癌HeLa、CaSki、SiHa、ME180细胞,采用MTT法检测ONY对人宫颈癌HeLa、CaSki、SiHa、ME180细胞生长抑制率的影响;Hoechst33258染色检测ONY对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术（FCM）检测ONY对HeLa细胞凋亡率的影响;DNA琼脂糖电泳检测HeLa细胞凋亡的DNA条带;Western blot分析凋亡相关蛋白表达变化。结果 ONY对人宫颈癌HeLa、CaSki、SiHa、ME180细胞生长有较强的抑制作用,呈剂量和时间依赖性,以HeLa细胞对ONY最为敏感,作用24 h的IC50值为10.48μg·mL-1。经ONY作用于HeLa细胞24 h后,细胞出现典型的凋亡形态学改变,表现出典型的凋亡特征的亚二倍体峰,且呈剂量依赖性,同时出现典型的凋亡DNA条带;同时,cytochrome c、caspase-9和caspase-3蛋白表达增加,bcl-2蛋白表达下调,而bax蛋白表达不变, Bcl-2/Bax比值下调（P〈0.05）。结论 ONY可能通过调控线粒体途径相关蛋白抑制宫颈癌HeLa细胞增殖并诱导其凋亡。     

血红素氧化酶在软骨藻酸对细胞DNA损伤中的作用

目的　　研究血红素氧化酶 (hemeoxygenase ,HO)系统在软骨藻酸 (domoicacid ,DA)对H4细胞DNA损伤中的作用。方法　应用单细胞凝胶电泳法 (SCGE)分别测定 0、0 0 64、0 64和 6 4μmol/LDA单独及与HO系统的活性阻断剂ZnPP 9(10 - 5mol/L)联合作用于H4细胞 6、12、2 4和 48h后彗星拖尾细胞率及拖尾尾长。结果　彗星拖尾细胞率 :中剂量和高剂量组各时间点均比对照组高 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。中剂量 +阻断剂组各时间点均相应高于中剂量组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。彗星拖尾尾长 :中剂量组 12、2 4和 48h比对照组长 ,2 4、48h比低剂量组长 ,差异均有显著性 (P<0 0 5 )。高剂量组各时间点均比对照组、低剂量组和中剂量组长 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。高剂量 +阻断剂组和中剂量 +阻断剂组 2 4、48h分别高于高剂量和中剂量组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。尾长 时间作Regression分析 ,各剂量组r差异值均有显著性 (P <0 0 1)。结论　软骨藻酸能诱导H4细胞DNA损伤 ,HO系统对这种损伤有一定的保护作用。     

冬凌草甲素抑制人胃腺癌细胞生长和诱导凋亡作用研究

目的:研究冬凌草甲素对人胃腺癌BGC-823细胞的生长抑制和诱导凋亡的作用及其机制。方法:采用MTT、透射电镜、流式细胞仪等方法对经冬凌草甲素体外作用的BGC-823细胞进行观察和检测。结果:16、32、64μg·mL-1冬凌草甲素能显著抑制BGC-823细胞的生长,并呈浓度-时间依赖性。64μg·mL-1的冬凌草甲素作用24、48、72h的抑制率分别为68·5%、90·8%、94·7%。32μg·mL-1冬凌草甲素作用2h后,电镜下BGC-823细胞的线粒体和内质网增殖肿胀;作用8h后,线粒体和内质网空泡化,内部结构消失,细胞核染色质边集呈凋亡的典型改变;作用24h后,流式细胞仪检测BGC-823细胞G2/M期阻滞,凋亡率为37·8%。结论:冬凌草甲素对人胃腺癌BGC-823细胞具有生长抑制和诱导凋亡作用,生长抑制可能与G2/M细胞周期阻滞有关,诱导凋亡可能通过线粒体和(或)内质网途径起作用。     

紫杉醇对膀胱癌EJ细胞株增殖抑制及诱导凋亡的作用

目的:探讨紫杉醇体外抑制膀胱癌E J细胞株及诱导凋亡的作用。方法:体外培养膀胱癌E J细胞株,以不同浓度紫杉醇处理12~72h后,通过M TT法测定细胞生长抑制作用,采用电镜观察和DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果:紫杉醇能抑制E J细胞的生长,并在一定剂量和时间范围内呈现出明显的时间、浓度依赖关系。电镜下凋亡细胞体积缩小,染色质浓缩致密,并沿核膜分布形成花瓣形。电泳见出现典型的凋亡DNA梯形带。结论:紫杉醇能抑制膀胱癌E J细胞株的生长,诱导凋亡可能为其抗肿瘤作用机制之一。     

青蒿素对肿瘤细胞DNA的损伤作用

目的:研究青蒿素对肿瘤细胞DNA的损伤作用。方法:体外培养人白血病K562细胞,MTT法测定IC50,应用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测细胞核DNA的损伤。结果:青蒿素处理K562细胞IC50为1.5×10-5mol/L,1×10-5mol/L青蒿素处理细胞24h后可引起细胞核DNA的损伤。结论:青蒿素造成肿瘤细胞DNA的损伤,抑制肿瘤细胞生长。     

小檗碱诱导人急性T淋巴细胞白血病细胞凋亡的研究

目的探讨小檗碱诱导人急性T淋巴细胞白血病细胞(MOLT-4)凋亡的作用。 方法将处于对数生长期的MOLT-4细胞分为3组，A组加入小檗碱(10，100 mg·L^–1)，B组加入柔红霉素1 mg·L^-1，C组加入小檗碱＋柔红霉素，作用6 和24 h后，用MTT法检测细胞存活率；用流式细胞术、DNA电泳及光学显微镜观察小檗碱对MOLT-4细胞凋亡的影响。结果作用6，24 h后，A组(10 mg·L-¹)细胞存活率分别为81.80%，64.67%； B组为98.38%，38.46%，C组为68.35%，20.51%；C组与A、B组比较，在两个时间段差异均有显著性(P＜0.05)。小檗碱诱导MOLT-4细胞发生典型的细胞凋亡形态学变化，出现DNA规律性断裂，电泳呈典型的梯状条带变化。细胞周期分析提示小檗碱浓度在10，100 mg·L-1时作用24 h细胞凋亡率分别为5.83%，19.93%。结论小檗碱具有诱导白血病细胞凋亡的作用，且小檗碱可增强柔红霉素的抗肿瘤作用，为其临床应用提供了依据。     

地塞米松诱导体外培养星型胶质细胞凋亡机制的研究

目的:探讨地塞米松引起体外纯化培养的大鼠大脑皮质星型胶质细胞凋亡的机制。方法:不同浓度的地塞米松(浓度为10-5、10-4、10-3m o l/L)与纯化培养的大鼠大脑皮质星形胶质细胞共同孵育24小时后,用免疫细胞化学方法检测P 53、Bax及B cl-2在星型胶质细胞内的表达情况,表达的强弱用平均光密度表示。结果:P 53和Bax的表达随着地塞米松浓度的升高而增强,与对照组比较,各组均有极显著性差异(P<0.01),B cl-2的表达随着地塞米松浓度的升高先是增强而后减弱,与其他组比较10-3组有显著性差异(P<0.05)。结论:P 53和Bax的表达增强可能是大剂量地塞米松引起星型胶质细胞凋亡的主要因素。