胸腺素β4对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的影响

目的：观察胸腺素β4对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血脑屏障的影响,并探讨其作用机制。方法将72只SD大鼠随机分为假手术组、对照组、胸腺素β4组各24只。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞局灶性脑缺血再灌注模型,再灌注24 h后,采用干湿重法测定缺血脑组织含水量,通过检测伊文蓝渗透到缺血侧脑组织的含量观察血脑屏障的通透性,应用RT-PCR法检测缺血脑组织紧密连接蛋白5（ Claudin-5）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9） mRNA表达。结果脑缺血再灌注损伤24 h后,与假手术组比较,对照组缺血侧脑含水量、伊文蓝含量、MMP-9 mRNA表达明显增加,Claudin-5 mRNA表达显著减少（ P均＜0．01）;与对照组比较,胸腺素β4组缺血侧脑组织含水量、缺血侧伊文蓝含量、MMP-9 mRNA明显降低,Claudin-5 mRNA表达明显升高（P均＜0．01）。结论胸腺素β4对大鼠脑缺血再灌注损伤后的血脑屏障具有保护作用,其作用机制可能是通过促进Claudin-5 mRNA表达和抑制MMP-9 mRNA表达实现的。     

亚低温对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制

目的探索亚低温对脑缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)组、模型组、I/R+亚低温组、I/R+rt-PA组、I/R+亚低温+rt-PA组,每组各6只。通过构建大鼠的缺血再灌注模型,进行神经功能半定量缺损评分;大鼠血脑屏障渗透实验,比较各组血脑屏障保护作用的差异;免疫组化检测大鼠脑组织中t-PA和组织型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的表达;Western blot检测p-MEK1/2和p-ERK1/2的表达。结果两个亚低温处理大鼠模型组神经损伤情况均低于模型组(P0. 05);亚低温治疗可以降低血脑屏障的通透性; rt-PA组和I/R+rt-PA组大鼠脑组织中t-PA和PAI-1的表达量明显增加,其余各组表达量均较低; rt-PA组和I/R+rt-PA组的p-MEK1/2和p-ERK1/2表达量显著增加,而亚低温处理后可明显降低p-MEK1/2和p-ERK1/2表达量。结论亚低温对脑缺血再灌注损伤的保护作用与降低血脑屏障的通透性、降低大鼠脑组织缺血再灌注后t-PA和PAI-1的表达以及降低p-MEK1/2和p-ERK1/2含量有关。     

亚低温对大鼠急性局灶性脑缺血后脑组织内热休克蛋白70表达的影响

目的探讨亚低温对大鼠急性局灶性脑缺血后脑组织内热休克蛋白(Hsp70)表达的影响及意义。方法将64只W istar大鼠随机分为亚低温组及对照组,各组再分为4个亚组,每亚组8只,参照改良的Longa栓线法构建大鼠局灶性脑缺血模型,亚低温组大鼠给予亚低温治疗,而对照组不作亚低温处理。分别于缺血后3h,24h,48h,72h将大鼠处死,用免疫细胞化学技术检测半暗带Hsp70,进行定量分析。结果再灌注3h大鼠脑内即可见Hsp70蛋白表达,随后表达逐渐增加,均在再灌注24h达到峰值,再灌注48h,72h表达逐渐降低,在梗死灶周围的“半暗带”区大脑皮质以及对损伤比较敏感的海马、尾状核和丘脑的部分区域表达最强。但亚低温组Hsp70的表达在各时间点均较对照组强,与对照组同时段比较差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论亚低温使大鼠急性局灶性脑缺血后脑组织内Hsp70表达增加,具有脑保护作用。     

亚低温对大鼠局灶性脑缺血再灌注后凋亡相关蛋白表达的影响及保护作用

目的通过检测丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)及Caspase-9蛋白的表达,探讨亚低温对局灶性脑缺血再灌注(IR)后神经元存活的影响。方法用Longa线拴法制作局灶性脑IR模型,将40只SD大鼠随机分成正常组、假手术组、常温组和亚低温组,常温组和亚低温组均缺血8 h,再灌注4 h、24 h、72 h、1 w(n=4)与相应时间点处死,亚低温组于脑缺血后12~15 min实施病灶侧亚低温持续4 h。免疫组化法检测AKT及Caspase-9蛋白的表达。结果不同缺血再灌注时间点,亚低温组比常温组缺血侧半暗带AKT表达水平显著增高(P0.05),Caspase-9显著降低(P0.05)。结论亚低温通过促进缺血半暗带脑组织AKT表达,抑制Caspase-9表达,从而抑制神经元凋亡,减少神经元损害。     

金纳多对脑缺血再灌注损伤大鼠MMP-9活性和血脑屏障通透性的影响

目的探讨金纳多对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将成模大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、金钠多治疗组,各组按缺血再灌注6、12、24 h三个时间点分为3个亚组,每组10只。用RT-PCR方法测定损伤侧脑组织中MMP-9活性变化,用伊文思蓝方法测定同侧脑组织血脑屏障通透性。结果 (1)随缺血再灌注时间延长,MMP-9含量、EB含量开始逐渐增加,各组之间表达差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)金纳多治疗组MMP-9活性及EB含量各个时间点明显低于缺血再灌注组(P<0.05)。结论金纳多通过抑制脑缺血再灌注大鼠MMP-9的活性,减轻血脑屏障通透性,可能是其发挥脑保护作用的机制之一。     

高血糖大鼠局部脑缺血再灌注损伤及拜阿司匹灵的干预作用

目的探讨预防性应用拜阿司匹灵对高血糖条件下SD大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的脑保护作用。方法 36只SD大鼠随机分为对照组与拜阿司匹灵组,两组均建立高血糖模型及SD大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型。分别于光镜下观察脑组织病理形态、进行神经功能缺损评分以及免疫组化方法测定bcl-2的表达。结果相同再灌注时间点相比较:拜阿司匹灵组对照组变性、坏死的神经元减少,空泡化改变减轻,组织间水肿减轻;神经功能缺损评分值减小(P均<0.05);缺血区表达bcl-2表达增加(P均<0.01)。结论预防性应用拜阿司匹灵能减轻高血糖条件下的局灶性脑缺血再灌注损伤,减轻神经功能缺损症状,使损伤脑区bcl-2表达上调,减轻神经细胞变性、坏死及组织水肿。     

姜黄素对脑缺血再灌注损伤大鼠MMP-2活性和血脑屏障通透性的影响

目的探讨姜黄素降低脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性及减轻脑水肿的作用及机制。方法将90只SD大鼠随机分为假手术组(n=30)、缺血再灌注组(n=30)、姜黄素治疗组(n=30)。以线栓法制备局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型,腹腔注射姜黄素,各组于脑缺血再灌注后24 h、48 h、96 h用免疫组织化学方法观察损伤侧脑组织基质金属蛋白酶(MMP)-2活性及层黏连蛋白表达的变化。比色法测定损伤侧脑组织含有伊文思蓝(EB)的量,动态观察该侧血脑屏障通透性变化。结果随着缺血再灌注时间逐渐延长,MMP-2表达能力、EB含量均逐渐增加,48 h达峰,层黏连蛋白的表达逐渐下降,各组之间表达具有统计学差异(P0.05);姜黄素治疗组MMP-2表达、EB含量在各个时间点明显低于缺血再灌注组,同时层黏连蛋白的表达增加(P0.05)。结论姜黄素可抑制脑缺血再灌注损伤大鼠MMP-2的表达,增加层黏连蛋白的表达,降低血脑屏障通透性,从而减轻脑水肿。     

右美托咪啶联合异丙酚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的 观察右美托咪啶联合异丙酚预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响,并探讨其可能的机制.方法 将90只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、异丙酚组（P组）、右美托咪啶组（D组）和异丙酚联合右美托咪啶组（PD组）,每组18只.除S组外,余组均采用夹闭单侧颈总动脉联合低血压法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型;夹闭单侧颈总动脉前20 min,P组输注异丙酚,D组输注右美托咪啶,PD组输注异丙酚和右美托咪啶.再灌注后6、12、24 h,行神经功能缺陷评分（NDS评分）;处死后制备脑组织匀浆或切片,采用黄嘌呤氧化酶法检测SOD,硫代巴比妥酸法检测MDA,ELISA法检测TNF-α和IL-Iβ,免疫组化法检测Caspase-3,Western blot法检测AKT.结果 各组大鼠各时点NDS评分和脑组织MDA、TNF-α、IL-1β水平、Caspase-3表达比较,S组低于其余各组,P组和D组均高于PD组、低于I/R组,P均＜0.05.各组大鼠脑组织SOD表达比较,S组高于其余各组,P组和D组均低于PD组、高于I/R组,P均＜0.05.各组大鼠脑组织AKT表达比较,I/R组低于其余各组,P组和D组均低于PD组、高于S组,P均＜0.05.结论 右美托咪啶联合异丙酚预处理可通过降低大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织MDA、TNF-α和IL-1β水平和Caspase-3表达,增加SOD和AKT表达,从而减轻局灶性脑缺血再灌注损伤.     

藏药十八味诃子利尿丸对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨十八味诃子利尿丸对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用。方法 SD大鼠随机等量分为藏药、西药、模型及假手术组,预处理10 d。采用加长栓线改良Zea Longa线栓法建立局灶性脑缺血/再灌注动物模型,神经功能缺陷评分;断头取脑观测脑组织含水量、梗死灶面积、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量,观察海马CA1区组织病理学改变。结果十八味诃子利尿丸可显著降低神经功能缺陷评分、梗死灶面积及MDA含量,提高SOD活性,差异有统计学意义(P0.05),可降低脑组织含水量但无统计学意义(P0.05);组织病理学显示,相比于模型组,藏药组海马CA1区神经元损伤较轻,存活数目较多,差异有统计学意义(P0.05)。结论十八味诃子利尿丸可对抗局灶性脑缺血/再灌注损伤,其机制与提高抗氧化能力关系密切。     

吲哚美辛预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后炎症反应的影响

目的探讨吲哚美辛预处理对大鼠脑缺血再灌注后脑组织白介素-1β(IL-1β)和C反应蛋白(CRP)表达的影响及作用机制。方法成年雄性SD大鼠共84只,随机分成3组,为假手术组、脑缺血再灌注模型组及吲哚美辛预处理组,每组有28只。大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型通过用改良Longa线栓法来制备。对每组动物于缺血2 h行再灌注,于再灌注6、12、24、48 h进行神经功能评分,并应用免疫组化法检测IL-1β及CRP的表达。结果与对照组相比,模型组大鼠局灶性脑缺血再灌注后缺血脑组织中IL-1β及CRP含量增加(P<0.05);与模型组相比,吲哚美辛预处理组IL-1β及CRP的含量减少(P<0.05),神经功能缺损评分降低(P<0.05)。结论吲哚美辛对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有脑保护作用,其作用机制可能与抑制脑内IL-1β及CRP的表达有关。     

局灶脑缺血再灌注脑温对抑制性氮基酸的影响

目的 研究轻度、亚低温对局灶脑缺血抑制性氨基酸的影响。方法 建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,诱导目标脑温,用HPLC荧光法检测脑组织GABA含量。结果 轻度高温组GABA短暂增高后下降,亚低温组GABA持续增高。结论 轻度高温使脑内GABA水平下调,在加重缺血神经元损伤方面起着不容忽视的作用：亚低温使GABA水平持续上调,在保护缺血神经元方面起重要作用。     

局部亚低温对大鼠局灶脑缺血再灌注后β淀粉样蛋白表达及梗死体积的影响

目的观察病变侧缺血至再灌注期亚低温（32～33℃）对大鼠局灶性脑缺血再灌注后梗死体积和β淀粉样蛋白（β—amyloid protein,Aβ）表达的影响。方法采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分为假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组,两个缺血组各分为5个亚组：分别于缺血后2、3、6、8、12h进行再灌注4h后处死,其中亚低温组于缺血后30min实施病灶侧脑部亚低温并持续至再灌注期。处死大鼠前进行神经功能缺陷评分,TTC染色及运用计算机图像分析技术观察各组大鼠脑梗死体积,采用免疫组织化学法检测Aβ表达,末端脱核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL）观察神经细胞凋亡情况。结果与常温缺血组比较,亚低温缺血组大鼠脑梗死体积明显减少,Aβ阳性细胞数量明显减少（P〈0．05）,凋亡的神经细胞明显减少（P〈0．05）。神经功能缺陷评分亚低温缺血组明显低于相应时间点常温缺血组（P〈0．05或P〈0．01）。结论病变侧亚低温对脑缺血有保护作用,其机制可能为亚低温抑制Aβ表达,进而抑制神经元凋亡,减少脑梗死体积,促进脑缺血后神经功能恢复。     

脑脉通对老龄大鼠脑缺血再灌注血-脑脊液屏障损伤的保护作用

目的研究脑脉通对老龄大鼠脑缺血再灌注（1／R）血-脑脊液屏障（BBB）损伤的保护作用。方法采用线栓法复制局灶性脑缺血模型，分为假手术组、模型组、脑脉通组、尼莫地平组，后3组又分为脑缺血（I）3h和I／R6、12、24h,3、6d时间点。观察脑组织含水量、病理变化、免疫球蛋白（IgG）表达。结果模型组脑组织含水量升高，IgG漏出增加，BBB通透性增加。脑脉通降低脑组织含水量（I／R24h、3d）、减少IgG漏出（I／R24h～6d）、降低BBB通透性。结论脑脉通改善I／R脑损伤作用显著，其机制可能与改善BBB通透性、降低脑水肿有关。     

大鼠脑缺血后肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导物对脑水肿的影响

目的探讨肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导物(tumor necrosis factor-like weak jnducer of apoptosis,TWEAK)在大鼠脑缺血后对脑水肿的影响。方法 Wistar大鼠36只,随机分为正常对照组、假手术组及脑缺血6 h组、脑缺血12 h组、脑缺血1天组和脑缺血2天组,每组6只。线栓方法制成大鼠脑缺血再灌注模型,测定各组脑含水量及伊文思蓝(EB)含量,免疫组织化学法检测TWEAK的表达。结果脑缺血6 h组大鼠脑含水量及EB含量显著增加,脑缺血2天组达高峰,分别为(81.21±0.27)%,(10.36±1.84)μg/g,与正常对照组和假手术组比较,有统计学差异(P<0.01)。脑缺血6 h组大鼠TWEAK的表达明显增加.脑缺血2天组进一步增加为(56.8±1.5)个/mm~2,与正常对照组和假手术组比较,有统计学差异(P<0.01)。结论 TWEAK很可能参与大鼠脑缺血后血脑屏障的破坏,并在脑水肿形成中起重要作用。     

肌苷对脑缺血再灌流损伤神经功能恢复和NSE表达的影响

目的　观察大鼠脑缺血再灌流损伤脑组织神经元特异性烯醇化酶 (NSE)的变化规律及其意义 ;探讨肌苷对缺血性脑损伤的保护机制。方法　用成年 SD大鼠建立大脑中动脉缺血 (MCAO)再灌流模型 ,腹腔注射肌苷注射液 ,应用神经功能等级评分观察脑缺血再灌流后行为功能的恢复 ,免疫组化法检测脑缺血再灌流各时间点脑组织中 NSE的动态变化。结果　对照组脑缺血再灌流后 3d、7d、1 4 d功能恢复、等级评分减低 ;缺血侧 NSE的免疫阳性反应于脑缺血再灌流后 1 2 h明显增强并达高峰 ,随时间推移逐渐下降 ,至 1 4 d降至假手术组水平。治疗后神经功能评分在 7～1 4 d明显低于对照组 ,同时脑组织中 NSE蛋白表达水平较对照组显著升高。两组中皮层区 NSE的免疫阳性反应均高于纹状体区。结论　肌苷对缺血性脑损伤的功能恢复有一定的促进作用 ,其机制可能与增加脑组织中 NSE的表达有关     

中风康对局灶性脑缺血大鼠脑组织bFGFmRNA表达的影响

目的探讨中风康对局灶性脑缺血大鼠脑组织碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）mRNA表达的影响。方法采用线栓法复制局灶性脑缺血大鼠模型，采用RT-PCR技术于脑缺血6，12，24。48h动态观察局灶性腑缺血大鼠脑组织bFGFmRNA表达的变化。并在缺血24h以步长脑心通为对照。观察中风康对bFGFmRNA表达的影响。结果与假手术组比较，局灶性脑缺血6h，模型组脑组织bFGFmRNA表达量开始增加，至24h达到高峰（P〈0．01）；与模型组比较，脑缺血24h各治疗组脑组织bFGFmRNA表达量均有不同程度升高（P〈0．05或P〈0．01），以高剂量组升高最为显著（P〈0．01）。结论中风康可在转录水半提高脑梗死大鼠脑组织bFGFmRNA表达，有效减轻局灶性脑梗死引起的缺血性损伤。     

中风康对局灶性脑缺血大鼠脑组织ICAM-1影响的研究

目的探讨中风康对局灶性脑缺血大鼠脑组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)含量的影响.方法采用线栓法复制局灶性脑缺血大鼠模型,以步长脑心通为对照,于脑缺血6 h、12 h、24 h、48 h动态观察中风康对局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积和脑组织ICAM-1含量的变化.结果与假手术组比较,局灶性脑缺血6 h,模型组脑组织ICAM-1含量开始增加,至24 h达到高峰(P<0.01);与同时点模型组比较,各治疗组脑组织ICAM-1含量有不同程度降低,以高剂量组降低最为显著(P<0.01),与同时点模型组比较,各治疗组梗死灶体积亦有不同程度缩小(P<0.05～P<0.01).结论中风康可降低脑梗死大鼠脑组织ICAM-1含量,减少脑梗死体积,有效减轻局灶性脑梗死引起的缺血性损伤.     

尼莫地平、环磷酰胺、SOD联合治疗大鼠脑缺血再灌注损伤疗效分析

目的研究尼莫地平、环磷酰胺和超氧化物歧化酶（SOD）联合治疗对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法93只成年雄性Wistar大鼠随机分成：单药治疗组（A、B、组）、二联药物治疗组（D、E、F组）、三联药物治疗组（G组）及对照组（H组）。线栓法制作大鼠MCAO模型,再灌注前20 min、再灌注后12 h和36 h尾静脉给药。缺血4 h再灌注48 h后计算大鼠存活率、神经功能评分和脑梗死体积。结果与对照组相比,联合药物治疗组的大鼠存活率显著增加,神经功能缺损明显减少,脑梗死体积明显减少（P〈0.05或P〈0.01）。结论SOD、尼莫地平、环磷酰胺联合治疗抗脑缺血再灌注损伤效果显著,疗效优于两种药物联合治疗与单药治疗。