HCV单片段抗原EIA与常规EIA检测丙型肝炎病毒抗体的比较

目的比较国产重组HCV单片段抗原酶免疫(EIA)检测试剂与国产第三代HCV常规抗体(EIA)检测试剂的敏感性和特异性。方法利用基因工程技术重组表达的HCV单片段(HCV-C、NS、NS4、NS)EIA检测试剂和常规EIA试剂检测国家第三代抗-HCV血清考核盘(40份阳性和40份阴性血清样品)及20份不符血样，对检测结果进行统计分析。结果HCV单片段EIA检测试剂总符合率100％，常规试剂为96．2％。结论HCV抗体单片段试剂可作为对HCV常规EIA试剂检测不符血样的确认试剂。     

丙型肝炎病毒不同编码区重组抗原在抗体检测中的应用

目的　探讨丙型肝炎病毒 (HCV)不同编码区重组蛋白片段的免疫反应性及其在抗体检测中的应用。方法　分别以 4种HCV单片段抗原 (C、NS3、NS4或NS5 )检测抗 HCV抗体阳性血清 ;以 4种单片段抗原的混合物 (MIX)检测抗 HCV抗体阳性血清、大学生体检血清和抗 HCV抗体阴性质控血清。结果　 90份抗 HCV抗体阳性血清中共有 75份可与一种或多种单片段抗原反应 ,阳性率分别为 70 .0 % (C)、6 1.1% (NS3)、5 2 .2 % (NS4 )、4 4 .4 % (NS5 ) ,其中仅与C、NS3、NS4和NS5一种抗原发生反应的分别有 8份、1份、2份和 3份血清标本 ;90份抗 HCV阳性血清经MIX抗原检测 ,阳性率为 83.3% (75 / 90 ) ;10 0份大学生血清和39份阴性质控血清经混合抗原检测均阴性。结论　HCV不同编码区重组蛋白片段有不同的免疫反应性 ,在发展抗 HCV抗体诊断试剂时 ,应采用各种不同编码区的混合抗原。     

HCV分片段抗原EIA与重组免疫印迹法分析检测HCV抗体的比较研究

【目的】探讨国产丙型肝炎病毒(HCV)分片段抗体试剂的敏感性和特异性,为丙型肝炎的早期诊断和替代昂贵的进口重组免疫印迹法确认试剂(HCV RIBA3.0)提供实验依据。【方法】用HCV分片段抗体试剂检测经确认的标本中HCV-C、NS3、NS4、NS5抗体并与HCV RIBA3.0比较。【结果】82份样品中80份判定为阳性,阳性率为97.56%,2份判定为可疑,为2.4%,40份阴性样品中有2份判定可疑,为5.00%。【结论】国产分片段抗体检测试剂检测HCV抗体,与美国第三代RIBA3.0试剂的检测符合率基本一致,有低价高效的临床实用价值。     

蛋白芯片检测丙型肝炎病毒分片段抗体

目的 用蛋白芯片的方法检测丙型肝炎病毒（HCV）分片段抗体。方法 利用生物芯片技术和化学发光技术将高度纯化的抗原HCV Core、NS3、NS4、NS5以特定微阵列固定在固相载体上,用化学发光免疫法检测抗HCV Core、抗HCV NS3、抗HCV NS4和抗HCV NS5。结果 174份血清中HCV抗体阳性87份,HCV抗体阴性87份,其中献血员33份,非丙型肝炎的其他肝病患者39份,非肝病者15份。87例雅培公司的AxSYM（微粒子发光）检测抗HCV阳性患者中,蛋白芯片检出阳性85份,阳性率为97．70％;在174份标本中,蛋白芯片检出阳性标本88份,其中抗HCV阳性87份,阳性率98．86％;抗HCV NS3检出49份,阳性率为55．68％;抗HCV NS4检出68份,阳性率为77．27％;抗HCV NS5检出37份,阳性率为42．05％;抗HCV Core检出69份,阳性率为78．41％。结论 蛋白芯片显示较高的敏感性和特异性,具有临床实用价值。     

长春地区17，000献血员初复检抗HCV阳性标本中不同功能区抗体的状况及试剂改进的建议

[目的] 对献血员初检和复检抗HCV阳性及可疑血液标本同步进行不同功能区抗体状况的分析研究，以期发现问题和为今后的改进提供依据。[方法] 用两种国产抗HCVEIA检测试剂和一种进口试剂对长春地区17，000献血员进行筛选，检测出80份阳性样品，再用抗HCV单片段旁证试剂检测、同步分析四种抗体的反应强度和分布状况。[结果] HCV-Core、NS3、NS4、NS5均为阳性的26份，HCV-C^ NS3^ NS4^ 的11份，HCV-C^ NS3^ NS5^ 的9份，HCV-C^ NS3^ 的10份，HCV-C^ NS4^ 的3份，HCV-NS3^ NS5^ 的1份，HCV-NS4^ NS5^ 的1份，而Core^ ，NS3^ ，NS4^ 单独阳性分别为10、8、1。[结论] 根据抗HCV不同功能区抗体的分布状况，提示抗HCV检测试剂中两种国产试剂均可能存在着个别的漏检现象，主要是NS3抗体；建议国产试剂尚需提高和改进HCV非结构区抗原，尤其是NS3抗原，同时也应改进NS4抗原。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的临床评价

[目的]对研制的丙型肝炎病毒核心抗原（HCV—cAg）ELISA检测试剂进行临床特异性及敏感性评价。[方法]制备抗HCV-核心区（Core）抗原四株单克隆抗体，研制出双抗体夹心检测HCV～core抗原酶联免疫检测（ELISA）试剂。三家临床单位收集抗HCV阴性样品3040份，HBsAg阳性100份，抗HIV阳性40份，从10万份抗-HCV筛查出临界样品28人份。[结果]3040份阴性样品检测有3份HCV—cAg阳性，3份经HCVPCR检测有1份阳性，100份HBsAg阳性，40份抗HIV阳性样本检测均为阴性，在10万份抗HCV抗体筛查样品中，选择28份抗-HCV检测临界样品进行HCV—cAg检测，有4份阳性，4份HCV—cAg阳性样品中有3份HCV—RNA检测阳性。[结论]研制的双抗体夹心HCV-核心抗原ELISA试剂具有很好的特异性和灵敏度。     

部分ELISA抗-HCV阴性和阳性血清丙肝抗体分片段检测分析

目的　探讨ELISA抗 HCV检测的血液丙肝不同基因抗体的反应性和血液HCV感染的具体情况。方法留取本站抗 HCV阴性血清 1 6 8份、阳性血清 80份、可疑血清 6 2份 ,分别进行丙肝分片段检测 ,检测阳性的血清再进行HCVRT PCR检测。结果　 1 6 8份阴性血清、80份阳性血清及 6 2份可疑血清中不同基因抗体的阳性数分别为 3份、76份和 2 4份 ,HCVRT PCR的阳性结果分别为 0份、5 7份和 1 1份 ,两个以上片段检测结果阳性的血清与RT PCR结果高度符合 ,单独C区和NS3阳性的血清仍有一半以上RT PCR结果阳性 ,1例NS5阳性的血清RT PCR检测阳性。结论　HCV C和NS3抗体是抗 HCV阳性的主要血清标志 ,但NS4和NS5抗体在抗 HCV检测中也具有重要意义     

抗HCV酶免筛检试剂的区域性评定研究

[目的]对分片段试剂作出应用效果评价。[方法]对62份4个国内厂家筛检出的抗HCV初步阳性血清，应用4家国产试剂，2家进口试剂，一种分片段试剂，分别进行测定。分片段试剂阳性及分片段试剂阴性而至少其他二种试剂阳性血清，用RT—PCR方法进行测定。[结果]62份标本RT—PCR方法确认阴性34份，确认阳性28份。几个国产厂家检出阳性12—14份，分片段试剂25份，进口厂家22份。[结论]国产厂家检出率低，假阳性率偏高，而进口第三代试剂质量较好。分片断试剂作为一种旁证试剂用于临床诊断试剂有一定的应用价值。     

应用逆转录套式PCR检测血清丙型肝炎病毒RNA

应用逆转录套式PCR检测了经ELISA检测抗－HCV的86份血清，抗－HCV阳性血清66份，用PCR检测有37份是阳性，阳性符合率为56．1％，抗－HCV阴性血清20份，用PCR检测有8份是阳性，两种方法检测结果总符合率为57．0％。单项ALT升高、HB、HC和血液病患者HCV、RNA阳性率分别为37．5％，55．6％，62．5％和53．8％。用PCR检出HCV－RNA时间早于抗－HCV阳转时间，而且敏感性高于后者，是一种早期、灵敏及特异的HCV感染诊断方法。检测HCV－RNA有助于发现抗－HCV阴性的急、慢性丙型肝炎，根据HCV－RNA的连续检测，结合抗－HCV的消长状态，可用于丙型肝炎的预后判断和干扰素等药物疗效评价指标。     

丙型肝炎病毒非结构区 3(NS3)Ⅰ、Ⅱ型血清反应性的比较研究

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)非结构区3(NS3)Ⅰ型、Ⅱ型血清反应性.方法利用表达载体PBVIL1对HCV全长NS3区Ⅰ型、Ⅱ型抗原表位进行克隆表达,经纯化获得电泳纯的抗原.经酶联免疫吸附(ELISA)的方法检测丙型肝炎179份总抗体可疑阳性血清,再用NS3区Ⅰ、Ⅱ型抗原进行相应抗体检测.结果通过测定HCV-NS3区Ⅰ型、Ⅱ型抗体,179份HCV-NS3区1型阳性检出105份,HCV-NS3区Ⅱ型阳性检出95例.结论重组表达的HCV-NS3 Ⅰ型、Ⅱ型抗原对丙型肝炎病毒血清反应略有不同.二者具有一定的互补性.     

两种抗HCV试剂检测献血者结果不符追踪观察

目的 探讨两种抗HCV试剂检测结果不符标本在抗HCV分片段试剂不同区抗原的反应性，随访和跟踪该类人员在抗HCV和抗HCV分片段试剂中的反应变化。方法 利用抗HCV分片段试剂对国家抗HCV参考品及抗HCV试剂检测不符的标本进行测试，并对可跟踪的献血者在6个月后再进行抗HCV及抗HCV分片段试剂检测。结果 国家抗HCV参考品中，29份阳性标本均出现二片段或二片段以上阳性，阴性标本全部阴性；103份抗HCV试剂结果不符标本中有6例为二片段阳性，26例为单片段阳性，以NS3、C区为主；6个月后对可以跟踪的86例献血员进行检测，37例两种抗HCV试剂转阴，16例两种试剂均转为阳性，6例抗HCV分片段阴性者己转为一个或二个片段阳性。结论 对抗HCV试剂阳性结果不符标本同时应用HCV分片段试剂检测有利于降低HCV阳性血清漏检率，跟踪和复检有助于了解阳性结果不符标本在抗HCV及抗HCV分片段试剂中的反应变化，排除假阳性。     

TRUST和ELISA两种方法检测梅毒螺旋体抗体效能的比较

[目的]对TRUST法和ELISA法检测梅毒螺旋体抗体的效能进行比较。[方法]对8531例住院患者血清标本进行TRUST法和ELISA法梅毒抗体筛查试验，初筛阳性标本进行TPPA确认与分析。[结果]所有8531份标本中，TRUST法检测为阳性92份，阳性率为1．08％；ELISA法检测为阳性146份，阳性率为1．71％。两法阳性标本经TPPA确认，ELISA法的符合率为100％；TRUST法的阳性符合率为98．9％。ELISA阳性但TRUST阴性的55例标本经TPPA法确认全部为阳性。两种方法的阳性检出率差异具有显著性。[结论]在梅毒抗体筛查时ELISA法较TRUST法更具有临床价值。     

双抗原夹心ELISA检测抗HCV总抗体

目的建立检测抗HCV抗体的双抗原夹心ELISA法,评价其可行性。方法将与His或GST融合表达的HCV基因工程抗原,分别用作ELISA的包被和酶标记抗原,建立用于抗HCV总抗体检测的双抗原夹心ELISA。用此方法检测1 968份临床血清标本,并以间接ELISA(北京万泰试剂)与之对照;此外,用套式RT-PCR检测部分血清的HCV RNA。结果有1 761份血清2种ELISA检测均为阴性,有190份血清均为阳性,两种方法符合率为99.1%;有17份血清的检测结果不相符,间接法阳性而本法阴性的14份,其中HCV RT-PCR阳性1份;本法阳性而间接ELISA阴性的3份,其中RT-PCR阳性2份。双抗原夹心ELISA与间接ELISA的敏感性分别为99.48%、98.96%,特异性分别为99.94%、99.27%。结论新研制的检测抗HCV总抗体的双抗原夹心ELISA具有较高的敏感性和特异性,值得作进一步的深入研究。     

两种抗HCV试剂检测献血者结果不符追踪观察

目的探讨两种抗HCV试剂检测结果不符标本在抗HCV分片段试剂不同区抗原的反应性,随访和跟踪该类人员在抗HCV和抗HCV分片段试剂中的反应变化.方法利用抗HCV分片段试剂对国家抗HCV参考品及抗HCV试剂检测不符的标本进行测试,并对可跟踪的献血者在6个月后再进行抗HCV及抗HCV分片段试剂检测.结果国家抗HCV参考品中,29份阳性标本均出现二片段或二片段以上阳性,阴性标本全部阴性;103份抗HCV试剂结果不符标本中有6例为二片段阳性,26例为单片段阳性,以NS3、C区为主;6个月后对可以跟踪的86例献血员进行检测,37例两种抗HCV试剂转阴,16例两种试剂均转为阳性,6例抗HCV分片段阴性者己转为一个或二个片段阳性.结论对抗HCV试剂阳性结果不符标本同时应用HCV分片段试剂检测有利于降低HCV阳性血清漏检率,跟踪和复检有助于了解阳性结果不符标本在抗HCV及抗HCV分片段试剂中的反应变化,排除假阳性.     

抗-HCV分片段试剂在辅助诊断HCV感染中的应用

目的探讨抗HCV分片段试剂在辅助诊断HCV感染中的效果。方法收集常规初复检抗HCV不符的临界样本31份,用抗HCV分片段酶联免疫检测试剂进一步检测抗HCV C、NS3、NS4、NS5、膜高变区1(HVR1)抗体。结果31份初复检不符临界样本分片段检测结果为4份阳性(12.90%),10份不确定,即仅1个抗原片段阳性(32.26%),17份阴性(54.84%)。结论对抗HCV初、复检结果不符的临界样本,用抗HCV分片段酶联免疫检测试剂进一步作辅助检测,可降低假阳性,提高检测的特异性,具有一定的临床意义。     

蛋白芯片检测丙型肝炎病毒分片段抗体

目的用蛋白芯片的方法检测丙型肝炎病毒(HCV)分片段抗体。方法利用生物芯片技术和化学发光技术将高度纯化的抗原HCV Core、NS3、NS4、NS5以特定微阵列固定在固相载体上,用化学发光免疫法检测抗HCV Core、抗HCV NS3、抗HCV NS4和抗HCV NS5。结果174份血清中HCV抗体阳性87份,HCV抗体阴性87份,其中献血员33份,非丙型肝炎的其他肝病患者39份,非肝病者15份。87例雅培公司的AxSYM(微粒子发光)检测抗HCV阳性患者中,蛋白芯片检出阳性85份,阳性率为97.70%;在174份标本中,蛋白芯片检出阳性标本88份,其中抗HCV阳性87份,阳性率98.86%;抗HCV NS3检出49份,阳性率为55.68%;抗HCV NS4检出68份,阳性率为77.27%;抗HCV NS5检出37份,阳性率为42.05%;抗HCV Core检出69份,阳性率为78.41%。结论蛋白芯片显示较高的敏感性和特异性,具有临床实用价值。     

液态蛋白芯片技术在抗-HCV、抗-TP检测中的应用

目的建立液态蛋白芯片联合检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体和梅毒螺旋体(TP)抗体的方法,并采用已知标准品进行评估。方法 HCV和TP重组抗原分别包被在不同的羧基化珠子上,应用免疫间接法原理建立液态蛋白芯片检测抗-HCV和抗-TP的方法。利用建立的方法检测标准血清盘标本和已知结果的标本,并评估方法的敏感性和特异性。结果液态蛋白芯片法检测抗-HCV灵敏度达到1 NCU/ml,抗-TP灵敏度达到2 NCU/ml。在标准血清盘中,抗-HCV阳性符合率24/24,阴性符合率16/16;抗-TP阳性符合率19/23,有4份IgM阳性标本未检出,阴性符合率17/17。在收集的60份阳性标本、2 000份阴性标本中,抗-HCV阳性符合率100%,阴性符合率分别为99.5%。抗-TP阳性和阴性符合率均为100%。结论建立的液态蛋白芯片方法操作简便、快速,可同时检测抗-HCV和抗-TP。     

HCV抗体检测临界值附近样本传播HCV风险的研究

目的用尽可能低的消耗，达到HCV感染早期诊断，尽量缩短ELISA HCV抗体检测的“窗口期”，防止和减少经输血传播丙型肝炎的风险。方法采集初次检测抗-HCV（S／CO）样本测定值／临界值0．40～0．99的样本310份，采用“HCV抗体分片段酶联免疫确认试剂盒”进行补充旁证检测，对检测阳性及可疑阳性样本再进行HCV—PCR和RIBA及HCV—cAg检测。结果310份样本共检出单片段阳性样本25份，2个片段以上阳性样本3份，共计28份。HCV—PCR阳性3份，HCV—cAg阳性4份，RIBA检测3个条带阳性2份，1个条带阳性22份。28份样本中，抗-HCV分片段、PCR、HCV—cAg以及RIBA共同阳性1份，HCV—cAg与PCR共同阳性2份，HCV—cAg和RIBA共同1份。结论加强对抗-HCV检测阴性高值样本的重视，尽量缩短ELISA—HCV抗体检测“窗口期”。     

免疫PCR方法检测乳腺癌患者血清抗P53蛋白抗体

[目的]建立血清抗p53蛋白抗体免疫聚合酶链反应（Immuno—polymerase chain reaction，免疫PCR）检测新方法，探讨乳腺癌患者血清中抗p53蛋白抗体与组织中p53蛋白表达之间的关系及临床意义，旨在为临床乳腺癌血清学诊断提供实用的新方法。[方法]用免疫PCR方法检测乳腺癌患者、非癌患者和正常人血清中的抗p53蛋白抗体，采用免疫组化（Immunohistochemistry，IHC）方法测定组织中的p53蛋白表达状况，进一步研究血清抗p53蛋白抗体与组织p53蛋白表达的相关性。[结果]1．以免疫PCR方法检测86份乳腺癌患者血清抗p53蛋白抗体阳性率为39．5％，40份非癌患者和120份正常人血清抗p53蛋白抗体均为阴性，乳腺癌患者血清抗p53蛋白抗体检出率明显高于非癌患者和正常人（P〈0．05），非癌患者与正常人之间无显著性差异（P〉0．05），免疫PCR方法检测血清抗p53蛋白抗体特异性为100％，敏感性为39．5％。2．53份p53蛋白阳性患者血清抗p53蛋白抗体阳性率为64．2％，显著高于p53蛋白阴性对照组（0％），血清抗p53蛋白抗体测定与p53蛋白表达密切相关P〈0．01）。[结论]血清抗p53蛋白抗体测定与组织p53蛋白表达相关。免疫PCR方法检测血清抗p53蛋白抗体与传统的免疫组化染色法相比较，取材更方便，创伤性小且检测方法简便易行，因此检测血清抗p53蛋白抗体是检测组织p53蛋白理想的替代工具。     

丙型肝炎病毒抗体（双抗原夹心）与HCV-IgM检测试剂性能对比研究

[目的]对研制的丙型肝炎病毒抗体（双抗原夹心）与HCV—IgM检测试剂进行对比，探门丙型肝炎病毒感染早期诊断意义。[方法]收集早期丙型肝炎病毒感染的样品43份，慢性丙肝患者27份，应用建立的丙型肝炎病毒抗体（双抗原夹心）及HCV—IgM检测试剂同时对比检测。[结果]建立的丙型肝炎病毒抗体（双抗原夹心）检测试剂与HCV—IgM对早期丙型肝炎病毒感染样品及慢性患者检出符合率均为100％，而间接抗HCV检测试剂在早期感染样品有1份检测阴性。[结论]建立的丙型肝炎病毒抗体（双抗原夹心）可同时检测抗HCV-IgG和IgM，抗HCVIgM在早期检测的抗体滴度高于慢性感染者。