酶联免疫吸附试验诊断布鲁氏菌病的研究

Carlesson 氏应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定牛种布氏菌抗体获得较好结果。ELISA 陆续用于人畜布氏菌病的诊断。目前,大多数作者认为,ELISA,检测布氏菌抗体,具有方法简便、快速、特异及灵敏等优点。但也有资料表明,本试验在检测抗体敏感性上还不及试管凝集试验。此外,关于 ELISA 检测布氏菌抗体类型以及对布氏菌病患者的诊断标准等,这在布氏菌病(简称布病)防治工作上仍是尚未解决的课     

双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测布氏菌抗原的实验研究

目的建立检测布氏菌抗原特异、敏感和快速的试验方法。方法在制备高滴度布氏菌抗体辣根过氧化物酶结合物及其冻干制品基础上，建立检测布氏菌抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(DAbS-ELISA)，包括常规DAbS—ELISA及快速DAbS-ELISA。用建立的两种DAbS-ELISA法对布氏菌菌体抗原及可溶性抗原进行有关其特异性及敏感性对比观察；同时对模拟的这些抗原污染的饮用水标本进行对比观察。结果常规DAbS—ELISA检测布氏菌544A、16M、133OS及104M的菌体抗原以及布氏菌16M可溶性抗原的敏感性分别为0．22万菌／ml、120万菌／ml、190万菌／ml、2万菌／ml和0．012μg／ml；用快速DAbS—ELISA法的敏感性分别为22万菌／ml、120万菌／ml、1900万菌／ml、20万菌／ml和1．2μg／ml；同时用这两种DAbS—ELISA检测上述抗原污染的饮用水标本其敏感性分别为0．22万菌／ml、1900万菌／ml、20万菌／ml和0．012μg／ml；以及22万菌／ml、120万菌／ml、1900万菌／ml、200万菌／ml和1．2μg／ml。而且这两种DAbS—ELISA法检测不含布氏菌抗原的所有对照均为阴性反应。结论双抗体夹心酶联免疫吸附试验是检测布氏菌抗原的特异、敏感、快速和适用的试验方法。     

用酶联免疫吸附试验(ELISA)检查血清抗体 鉴别布氏菌病感染菌种的研究(续报)

我们以前报导了用ELISA检查血清抗体鉴别布氏菌病感染菌种的方法。并对其流行病学价值作了粗略的评价。考虑到试验的数据尚少和布氏菌种各生物型之间抗原交叉的     

建立双抗原夹心酶免疫试验对人畜布鲁氏菌抗体检测的研究

目的为人畜布鲁氏菌病(布病)的血清学诊断、监测及流行病学调查提供特异、敏感、快速的试验方法。方法在制备高滴度的布鲁氏菌(布氏菌)抗原及其抗原辣根过氧化物酶结合物基础上。建立了检测人畜布氏菌抗体的双抗原夹心酶免疫试验(DAgS-EIA),包括常规双抗原夹心酶联免疫吸附试验(DAgS-ELISA)、双抗原夹心酶免疫斑点试验(DAgS-DIEA)以及快速双抗原夹心ELISA(快速DAgS-ELISA),并对影响本试验的主要因素因素进行了试验。结果制备了高滴度的布氏菌抗原及其抗原酶结合物和冻干制品。并在此基础上,建立了常规DAgS-ELISA及DAgS-DIEA以及快速DAgS-ELISA检测人畜布氏菌抗体方法。经对115份布病患者血清检测结果,阳性率以DAgS-ELISA为最高(61.7%),其余依次为RBPT(58.1%)I、-ELISA(55.6%)、DAgS-DIEA(53.7%)、及SAT(44.2%)且用DAgS-EIA检测布氏菌感染羊、牛、猪及实验动物家兔、豚鼠和小鼠均为强阳性反应,而对正常人、羊、牛、猪及实验动物血清均为阴性反应。结论双抗原夹心酶免疫试验检测人畜血清布氏菌抗体,不仅特异、敏感、快速、简便而且仅需制备单一的布氏菌抗原酶结合物就可对人及各类动物血清布氏菌抗体进行检测。     

酶联免疫吸附双抗原夹心法检测人畜布氏菌抗体的研究

目的 为人畜布氏菌病血清学诊断、监测及流行病学调查提供实用和简便的一种酶免疫试验技术。方法 在制备高滴度布氏菌抗原辣根过氧化物酶结合物及其冻干制品基础上，应用酶联免疫吸附双抗原夹心法即双抗原夹心酶联免疫吸附试验（DAgS－ELISA）、试管凝集试验（SAT）及虎红平板凝集试验（RBPT）对从山西省布氏菌病疫区收集的布氏菌病患、布氏菌感染羊、牛、猪以及健康人、羊、牛、猪共计290份血清进行对比检测。结果 上述3种试验对健康人、羊、牛、猪共计140份血清检查均为阴性反应，用DAgS-ELISA对布氏菌感染人、羊、牛、猪共计150份血清检查，其阳性率分别为91．4％、74．6％、66．7％及66．7％，从总体而言，检查的特异性及敏感性，以DAgS-ELISA优于SAT及RBPT。结论 双抗原夹心酶联免疫吸附试验检测人畜布氏菌抗体，不仅特异、敏感、简便，而且制备一种布氏菌抗原酶结合物及其冻干制品，可用于人及各种动物布氏菌抗体的检测，值得推广应用。     

应用免疫荧光技术检查布鲁氏菌抗原及其抗体的初步观察

应用间接免疫荧光试验检测了病人及实验动物血清中布氏菌及其抗体。在每毫升含有5×10~2个布氏菌的菌悬液,荧光抗体法即可检出,它也能检查感染动物的各种材料(如肝、牌、淋巴结)。根据布氏菌在细菌侵袭的细胞内形成菌团的特点,经荧光抗体染色很容易发现。为了抑制组织自身荧光,应用Evans蓝复染。本文还对荧光抗体试验的敏感性及特异性与细菌分离和凝集试验进行了比较。     

应用荧光抗体检查布氏菌的实验观察

据文献报道,应用荧光抗体染色检查病料中的布氏菌,是一种特异、简便和快速的方法。本试验用布氏菌104M苗免疫家兔,制备了高效价的布氏菌荧光抗体。用布氏菌苗接种豚鼠和小白鼠第七天     

97株布氏菌种型分布特点探讨

张掖地区布氏菌病(简称布病)曾于1964—1980年广范流行,成为我国重病区之一。在防治过程中曾分离布氏菌97株,现经整理分析,其种型分布特点如下: 菌株来源本文整理的97株布氏菌菌株系1964—1980年在     

公主岭市2002～2004年人间布氏菌病血清学监测结果

对公主岭市 2 0 0 2～ 2 0 0 4年布氏菌病暴发点的病人、周围人群及暴发点发生一年后回顾性调查人群和全市 32个乡镇部分牛、羊养殖户养殖人员进行血清学检测 ,共收集血清 837份 ,阳性 6 2份 ,阳性率 7.4 %。在 6 2例阳性患者中 ,布氏菌病平板试验均阳性 ,布氏菌病试管试验有 2例出现前滞现象 ,即滴度为 1∶2 5～ 1∶5 0时抗原抗体不发生凝集反映 ,当滴度 >1∶10 0时出现凝集反应 ,提示在布氏菌病试管试验时应适当提高稀释倍数 ,增高阳性检出率。 1例患者的流行病学、临床表现均符合布氏菌病 ,试管试验阴性 ,但布氏菌病平板试验凝集时间大约…     

快速纤维素试纸试验

2003年西班牙学者Casao等观察了快速纤维素试纸(d ipstick)试验用于检测布氏菌特异性抗体IgM的临床应用以及与病程(期)的关系,收集了125份血清样本,其中包括26份病程在2年以上的病人血清,分别做Coomb's、SAT、DTT-SAT、d ipstick试验,检测布氏菌特异性IgM抗体。在诊断中,d ipst     

牛种布氏菌与0∶9型小肠结肠炎耶氏菌的鉴别

牛种布氏菌与0∶9型小肠结肠炎耶氏菌(以下简称耶氏菌)的交叉反应,已为许多学者所证实,曾经使用过各种方法包括凝集试验、补体结合试验、抗球蛋白试验、间接血凝试验、2—ME 试验、免疫荧光技术、ELISA 和放射免疫等,企图加以鉴别,均未获得满意的简单方法。本文在研究这两种菌抗原差异性的基础上,提出一个鉴别这两种菌感染血清抗体的简单方法,一般的实验室都可采用。     

三种不同布氏菌抗原应用与免疫酶斑点试验诊断布病的比较研究

本研究用牛种布氏菌抗原、LPS抗原和超声波抗原分别做免疫酶斑点试验,比较三种不同抗原对检测慢性布病患者、兔和牛血清中的布氏菌抗体。结果表明,全菌抗原比另二种抗原更敏感。     

酶联免疫吸附试验诊断布氏菌病的研究进展

ELISA在布氏菌病(以下简称布病)诊断上的应用,首先是Carlsson(1976)用来测定牛的布病血清抗体,当时获得了较好的结果。在国内郭恒昌等(1982)首次用ELISA测定了人布病抗体,以后这方面的报道越来越多。近年来     

布氏菌胶体金免疫层析快速检测板使用效果评价

目的对布氏菌胶体金免疫层析快速检测板(CG IRST)的使用效果进行评价,为布氏菌病防治提供一种新的、快速、简易、准确的好方法。方法我们用布氏菌纯蛋白衍化物做为该检测板的包被抗原,用金标记prote in A,利用间接法检测人和不同动物血液样品中的抗布氏菌抗体。待测样品中的抗布氏菌抗体与检测板上的金标记prote in A结合后沿着特殊纤维素膜移动,与膜上的固相抗原结合形成肉眼可见的红色线条。结果本检测板只与有抗布氏菌抗体的样品有特异性反应,与正常人、兔和小鼠的样品以及有抗结核抗体的样品无交叉反应。布氏菌CG IRST与布氏菌SAT比较,从被检测的部份已知样品看,两法的阳性符合率为100%。结论用布氏菌CG IRST检测血样中的布氏菌抗体,灵敏、快速、简便、特异性好,无需仪器设备,对基层单位开展布病监测,不失为一种有效的好方法,应有良好的应用前景。     

以布氏菌免疫及感染豚鼠其血清抗体研究

本文用五种血清学方法对布氏菌接种后豚鼠血清中各类抗体进行了动态观察和分析。表明用 SAT、CAT、Coomb's 和 ELISA 检测 IgM 与用 CFT、ELISA 检测 IgG 其高峰期是不同的。并对五种方法敏感性及不同感染期检测的意义进行了讨论。     

用布氏菌乳环抗原的5种血清学试验检测人畜布氏菌抗体的研究

目的摸索建立用布氏菌乳环抗原的血清学试验,以用于人畜血清中布氏菌抗体的检测。方法在制备并标化布氏菌乳环抗原的基础上,用此抗原分别做PAT、SAT、CAT、CFT、及DAgS-ELISA,同时与这些试验的常规方法对部分布氏菌感染的人畜血清及正常血清进行对比检测。结果5种常规血清学试验即RBPT、SAT、CAT、CFT及DAgS-ELISA与用布氏菌乳环抗原的5种血清学试验即PAT、SAT、CAT、CFT及DAgS-ELISA对部分布氏菌感染人畜血清进行对比检测,其阳性率分别为91.5%(65/71)、83.3%(60/72)、58.2%(39/67)、46.4%(26/56)、81.9%(59/72)以及94.4%(67/71)、83.3%(60/72)、56.7%(38/67)、54.5%(30/55)、80.6%(58/72)。并且对两种抗原的试验所得阳性率进行显著性差异检验,差异均无显著性。(χ2分别为0.220、0.000、0.950、0.360、0.005,P>0.05)。其所测抗体的几何平均滴度(GMT)分别为1∶121、1∶23、1∶6和1∶19以及1∶109、1∶23、1∶10和1∶19。结论用布氏菌乳环抗原不仅适用做MRT对布氏菌感染奶特异性抗体的检测,而且可用此种抗原PAT、SAT、CAT、CFT及DAgS-ELISA对人畜血清布氏菌抗体的检测。     

布鲁氏杆菌与0∶9型耶尔森氏菌血清学交叉反应观察及其可疑病例的鉴别诊断

自 1996年开始 ,在我省部分地区布鲁氏杆菌病 (布氏菌病 )监测中发现试管凝集试验阳性 ,血清滴度甚至相当高 ,但却无临床症状的布氏菌病病人。为此 ,我们应用同源抗体滴度高于异源抗体滴度的理论 ,利用确诊布氏菌病患者血清 ,观察了布鲁氏杆菌与 0∶ 9型耶尔森氏菌 (以下简称 Y0∶ 9)的血清学交叉反应 ,再对人群布氏菌病“阳性”血清进行鉴别诊断 ,结果如下。1　材料与方法1.1　血清来源　患者阳性血清为1996年绥德县布氏菌病暴发流行时采集的确诊布氏菌病患者血清。疑似病例“阳性”血清为麟游、宜君两县监测中采集的阳性血清。1.2　抗原…     

免疫斑点法检测布氏菌病人血清中抗原的初步应用

免疫斑点试验是一种酶联免疫分析新技术,应用硝基纤维素纸结合蛋白质,比聚苯乙烯吸附牢固这一特点,来替代聚乙烯作固体载体,据报道,对实验动物绵羊布氏菌病的抗原检测,具有可靠性,特异性强,敏感性高等优点,但仍有操作烦杂,有非特异干优因素,目前用斑点——ELISA双抗夹心法检测病人血清抗原的报道甚少,作者以硝酸纤维膜(NC)作为载体,检测了36例布病患者及43例因S_2菌苗感染抗体阳性血清(同时作SAT和RBPT抗体测定为参考),结果如下。1 实验材料与方法 材料:硝酸纤维膜,直径0.4cm,北京化工学校附属工厂生产,包被抗体自制,以牛型104M布氏菌     

急性布鲁氏菌病治疗总结

布鲁氏杆菌是细胞内寄生菌,主要寄生于巨噬细胞内,少数巨噬细胞长期带菌,抗布氏菌药物和抗体不易进入细胞内,因此,布氏菌病治疗往往不彻底,易复发。国内几十年来治疗急性布氏菌病的基本方法是口服四环素,肌注链霉素。虽然布氏菌对四环素非常敏感(抑菌浓度为0.01—0.005微克/毫升),且四环素可少量地渗入细胞内,     

一株革兰氏阴性杆菌与布氏菌交叉凝集的血清学试验

在分离布氏菌过程中,对3个疑似布氏菌落,按布氏菌常规鉴定方法除镜下见菌体稍大于布氏菌外,与布氏菌的诊断血清有交叉凝集。为澄清该菌与布氏菌的交叉反应程度,将该菌做了初步鉴定,同时用该菌感染动物制备抗体,做了血清学交叉凝集试验,结果如下。