脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶基因表达变化的实验研究

目的：探讨大鼠脊髓损伤后诱导型NOS（iNOS)基因表达变化规律。方法：参考Nystrom方法建立的大鼠脊髓压迫伤模型,用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法测定伤段脊髓组织iNOS mRNA的表达情况。结果：正常脊髓组织内未见iNOS mRNA表达,脊髓压迫伤后iNOS mRNA开始表达并逐渐增强,伤后24h达到高峰。结论：iNOS未参与脊髓组织正常生理调节,脊髓损伤后iNOS mRNA开始表达并逐渐增强,提示iNOS参与了继发性脊髓损伤过程。     

脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶基因表达变化的实验研究

目的　探讨大鼠脊髓损伤后诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）基因表达变化规律。方法参考Ｎｙｓｔｒｏｍ方法建立的大鼠脊髓压 迫伤模型,用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法测定伤段脊髓组织ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ的表达情况。结果正常脊髓组织内未 见ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ表达,脊髓压迫伤后ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ开始表达并逐渐增强,伤后２４ｈ达到高峰。结论ｉＮＯＳ未参与脊髓 组织正常生理调节,脊髓损伤后ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ开始表达并逐渐增强,提示ｉＮＯＳ参与了继发性脊髓损伤过程。     

一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶在继发性脊髓损伤中的作用

脊髓损伤（spinal cordinjury,SCI）是指各种原因引起的脊髓结构和功能的损害,造成损伤平面以下运动、感觉和自主神经功能障碍。脊髓损伤可分为外伤性和非外伤性脊髓损伤。随着现代化进程的加快,外伤性脊髓损伤的发病率、致残率显著上升,     

大鼠肝缺血预处理过程中诱导型一氧化氮合酶的转录及表达

目的 :研究大鼠肝脏缺血预处理 (IP)过程中肝脏诱导型一氧化氮合酶 (NOS2 )转录及表达的改变 ,以探讨大鼠肝脏IP过程中NO合成通路的作用及意义。方法 :131只SD大鼠随机分为缺血再灌注 (I/R)组 (5 2只 )、IP组 (4 1只 )及假手术 (S)组 (38只 ) ,术后 2h ,2 4h及 1周时检测血浆NO浓度及肝组织NOS2的转录及表达。结果 :①血浆NO浓度 :IP组在术后 2h ,2 4h ,1周时均升高 ,均显著高于S组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 1) ,于 2h及2 4h时均显著高于I/R组 (均P <0 .0 1) ;I/R组在 2h时显著低于S组 (P <0 .0 5 ) ,2 4h与S组无统计学差异 (P >0 .0 5 ) ,1周时显著高于S组 (P <0 .0 5 )。②肝脏NOS2的转录 :IP组在 2h及 2 4h时较I/R组显著增强 (均P <0 .0 5 ) ,1周后差异无显著性 (P >0 .0 5 )。③肝脏NOS2的表达 :在 2h及 2 4h时IP组均显著高于I/R组及S组 (均P<0 .0 5 ) ,I/R组与S组之间差异不显著 (P >0 .0 5 ) ;1周时 ,IP组及I/R组呈弱阳性表达 ,两组间差异不显著 (P >0 .0 5 ) ;S组NOS2显色呈阴性。结论 :大鼠肝脏IP过程中NOS2的转录及表达增强 ,其高转录与表达时相的提前可能与IP的早期保护效应有关。     

前列腺癌和前列腺增生症中诱导型一氧化氮合酶的表达

目的测定诱导型一氧化氮合酶在正常前列腺、前列腺增生症、前列腺癌三者中及前列腺癌不同病理分级、临床分期中的表达情况。方法应用链霉菌素抗生物蛋白一过氧化酶方法，分别用诱导型一氧化氮合酶多克隆抗体对正常前列腺、前列腺增生症、前列腺癌行免疫组织化学染色，采用免疫组织化学染色评分方法对诱导型一氧化氮合酶表达阳性切片行定性评分。结果诱导型一氧化氮合酶在正常前列腺几乎无表达，在前列腺增生症低表达，在前列腺癌高表达，三者差异具有显著性（P〈0．01）；但诱导型一氧化氮合酶在不同病理分级、临床分期前列腺癌中的表达强度差异无显著性（P〉0．05）。结论诱导型一氧化氮合酶在正常前列腺无表达、在前列腺增生症低表达、在前列腺癌高表达，表明其与前列腺增生症和前列腺癌的发生有关。     

诱导型一氧化氮合酶与胶质瘤

一氧化氮(nitri oxide,NO)是人体内一种生物活性分子.近年的研究表明,它与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关.肿瘤组织中的NO主要由诱导型一氧化氮合酶(iducible nitric oxide synthase,iNOS)催化合成,本文仅就iNOS与脑胶质瘤的关系作一综述.     

骨癌痛小鼠脊髓水平CREB转录共激活因子1表达的变化

目的 探讨骨癌痛小鼠脊髓水平CREB转录共激活因子1（CRTC1）表达的变化.方法 采用随机数字表法,46只C3H/HeJ雄性小鼠随机分为假手术组（Sham组,n=23）和肿瘤组（Tumor组,n=23）,Tumor组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔接种溶于α-MEM的NCTC2472纤维肉瘤细胞,建立骨癌痛模型,Sham组小鼠接种不含肿瘤细胞的α-MEM.两组在术前1d、术后4d、7d、10 d、14 d、21 d检测痛行为学,并于相应时间点痛行为学检测后,分别随机选取3只小鼠处死,取脊髓L3-L5节段,采用Western Blot法检测CRTC1的蛋白表达水平.结果 与Sham组比较,Tumor组接种后各时间点机械缩足阈值[（1.35±0.14）g,（1.10±0.28）g,（0.78±0.25）g,（0.47±0.16）g,（0.34±0.16）g]明显降低（P＜0.05）,自发抬足次数[（3.12±0.74）次,（6.02±0.67）次,（7.42±1.22）次,（10.82±0.98）次,（12.48±1.06）次]明显增加（P＜0.05）.与基础值相比,Sham组和Tumor组脊髓水平CRTC1的表达在术后4d升高（P＜0.05）;与基础值和Sham组相比,Tumor组脊髓水平CRTC1的表达在术后7d、10d、14d、21 d均升高（P＜0.05）.结论 骨癌痛小鼠脊髓水平CRTC1的蛋白表达上调,该变化可能参与了骨癌痛的发生和维持.     

重型脑挫裂伤患者伤后脑组织诱导型一氧化氮合酶表达的变化

目的:探讨重型脑挫裂伤后诱导型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)在脑组织中的表达变化及意义.方法:根据损伤后就诊时间将38例重型脑挫裂伤患者分为6组(0～6 h 7例,6～12 h 8例,12～24 h 9例,24～36 h 5例,36～72 h 6例,72 h以上3例),以4例良性脑肿瘤患者手术切除的部分正常脑组织为对照组.尼氏染色法观察重型脑挫裂伤后神经细胞病理变化过程,RT-PCR检测iNOS mRNA的变化,免疫组织化学染色方法观察iNOS阳性细胞的表达变化.结果:尼氏法染色发现损伤区神经细胞减少;RT-PCR结果发现,与正常对照组相比,重型脑挫裂伤后0～6 h创伤区周围iNOS mRNA表达量开始上升,12～24 h达到高峰,随后渐下降,72 h以后仍有表达;免疫组化结果发现iNOS阳性细胞表达增加在伤后12～24 h达到高峰;相关性分析结果显示iNOS mRNA相对灰度值与iNOS阳性细胞数呈高度正相关(r=0.956,P=0.003).结论:重型脑挫裂伤损伤区及周边皮质iNOS的表达增加,iNOS mRNA的表达与iNOS阳性细胞数呈正相关.     

谷氨酰胺下调大鼠肝细胞诱导型一氧化氮合酶的表达

目的 利用原代培养的大鼠肝细胞,观察谷氨酰胺(Gln)在体外对白细胞介素-1β(IL-1β)刺激下一氧化氮合酶(iNOS)过度表达的影响.方法 原位胶原酶灌注法获取原代大鼠肝细胞,分别用生理盐水、IL-1β(1 nmol/L)以及IL-1β(1 nmol/L)联合不同浓度的Gln(2、5、10 mmol/L)刺激24 h,留取细胞和堵养液,采用生化法测定培养液一氧化氮(NO)的水平,采用实时定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法及蛋白质印迹法检测肝细胞内iNOS信使RNA和蛋白质水平,采用电泳迁移率转变试验检测肝细胞核内核因子κB(NF-κB)的活性.结果 IL-1β刺激后培养液NO的平均浓度为72.7 μmol/L明显高于生理盐水组41.7 μmol/L,肝细胞iNOS蛋白和mRNA水平分别增加了35%和90%,同时给予Gln能够抑制iNOS的过度活化减少NO的产生,并且这种抑制作用随着Gln浓度的增加而增强;IL-1β刺激后肝细胞核内NF-κB的结合活性增强约50%,Gln对NF-κB的活化没有抑制作用,在5、10 mmol/L浓度时反而对NF-κB有进一步的激活.结论 谷氨酰胺能够下调肝细胞在炎症应激诱导下iNOS基因的过度表达,减少NO的产生,这一作用不是通过NF-κB信号通路实现的.     

不同胃黏膜病变组织中诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达

目的:检测胃癌、癌前病变及慢性炎症胃黏膜组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达情况,探讨iNOS与胃癌发生发展的关系.方法:采用原位分子杂交法对35例慢性浅表性胃炎、24例慢性萎缩性胃炎伴肠化生、21例不典型增生及65例胃癌组织中iNOS mRNA表达进行检测.结果:iNOS mRNA在胃癌组织细胞中的表达...     

口腔癌中诱导型一氧化氮合酶表达与微血管密度的关系

目的 :研究口腔癌组织中诱导型一氧化氮合酶 ( i NO S)表达与口腔癌组织微血管密度 ( M VD)、淋巴结转移的关系。方法 :采用免疫组化 SP法检测 4 1例口腔癌石蜡切片中 i NO S的表达 (以 9例正常口腔粘膜作对照 )和MVD(选用 CD34标记 )。结果 :口腔癌细胞 i N OS阳性表达的病例 2 6例 ,占 6 3.4 1% ,其中淋巴结阴性组 i NO S阳性率为 4 2 .90 % ,阳性组 i N OS阳性率为 85.0 0 % ,差异有显著性 ( P<0 .0 1) ,9例正常口腔粘膜 i NOS表达均为阴性 ;口腔癌 MV D和淋巴结转移呈正相关 ( rs=0 .51,P <0 .0 1) ;在 i N OS表达 ( - )～ ( +++)各组中 MV D值分别为 2 9.6 6 7± 6 .94 5、34 .833± 4 .579、4 6 .357± 6 .6 87、54 .16 7± 5.56 5,组间差异有显著性 ( P<0 .0 0 1)。结论 :口腔癌细胞存在 i N OS高表达 ,其表达水平与区域淋巴转移有关 ;口腔癌组织 MV D与区域淋巴转移密切相关 ;口腔癌细胞 i NO S表达水平与肿瘤 MV D有关。     

慢性肝病患者血清一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶水平检测

目的检测慢性肝病患者血清一氧化氮（NO）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）水平,分析作为肝细胞损伤程度分级的辅助指标。方法采用硝酸还原酶法、分光光度法与自动生化仪化学法测定60例正常对照组、35例慢性轻度乙肝、38例慢性中度乙肝、26例慢性重度乙肝、30例肝炎肝硬化和39例原发性肝癌患者血清中NO、iNOS的含量及肝功能指标,并进行相关分析。结果慢性重度乙肝组血清NO、iNOS水平〉慢性中度乙肝组〉肝炎肝硬化组〉原发性肝癌组〉慢性轻度乙肝组〉正常对照组。慢性轻度乙肝组NO、iNOS水平与ALT、ALP正相关（P〈0.05）、慢性中度乙肝组与STB、SDB、ALP正相关（P〈0.05）,与ALT呈显著正相关（P〈0.01）、慢性重度乙肝组与STB、SDB、ALP、ALT呈显著正相关（P〈0.01）,与ALB呈负相关（P〈0.05）;肝炎肝硬化组及原发性肝癌组与STB、SDB、ALP呈显著正相关（P〈0.01）,与TBA、ALT正相关（P〈0.05）,与ALB显著负相关（P〈0.01）。结论血清NO、iNOS水平在慢性肝炎由轻度发展到中度、重度乃至肝硬化、肝癌过程中的不同阶段存在显著差异,与肝功能指标存在相关性,可作为辅助性指标,结合其他肝功能指标作为肝细胞损伤程度的血清学分级。     

诱导型一氧化氮合酶在喉癌中的表达及其临床意义

目的:观察诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthases,iNOS)在喉癌组织中的表达,探讨iNOS在喉癌侵袭转移中的作用。方法:应用免疫组织化学S-P法检测66例喉癌组织及其癌旁正常组织中iNOS的表达情况,并分析其表达与喉癌患者临床分期、病理分级、淋巴结转移等方面的关系。结果:iNOS在喉癌组织中表达率为81.82%,高于癌旁正常组织的6.06%(P<0.05)。不同临床分期、临床分型喉癌患者的iNOS表达率差异有统计学意义(P<0.05),而在年龄、病理分级以及淋巴结转移方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论:iNOS可能是喉癌侵袭转移机制中的重要肿瘤标志物,在喉癌的淋巴结转移中具有一定作用,对于喉癌淋巴结转移的判断具有重要意义。     

诱导型一氧化氮合酶和内皮型一氧化氮合酶在胃癌中的表达关系及临床意义

目的 检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在小鼠正常胃组织及原位移植人胃癌组织SGC-7901中的表达情况,探讨严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠胃癌不同阶段时iNOS和eNOS含量变化的相关性研究及临床意义.方法 采用苏木精-伊红染色法进行检测.结果 可见eNOS和iNOS在10只正常胃组...     

诱导型一氧化氮合酶在血管瘤组织中定位与表达的研究

目的:探讨不同时期婴幼儿血管瘤的生物学行为与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)之间的关系.方法:根据Mulliken的病理生物学特征分为血管瘤增殖期、消退期以及血管畸形.采用免疫组化的染色方法进行检测.结果:血管瘤各不同时期的iNOS显色程度不同,血管瘤增殖早期与其它各期比较有差异(P＜0.05),所有血管病变的组织中均有iNOS阳性显色,血管瘤比血管畸形显色程度深,两者比较有显著性差异(P＜0.01).结论:不同时期血管瘤、血管畸形与iNOS的表达有相关性.不同时期血管瘤的病变不仅与肿瘤组织内NO/iNOS浓度有关,而且与作用时间有关.     

诱导型一氧化氮合酶在膀胱移行细胞癌中表达的临床意义

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS)在膀胱移行细胞癌中表达及与临床病理特征的关系。方法 应用兔抗入iNOS多克隆抗体对60例膀胱移行细胞癌和10名正常人膀胱粘膜进行免疫组化染色,观察iNOS的表达情况。结果 膀胱移行细胞癌中阳性表达率为63．3％（38／60）,10名正常人膀胱粘膜中无阳性表达。iNOS在肿瘤中表达与患者年龄、性别、肿瘤分级无关（P＞0．05）;但浸润型肿瘤iNOS表达显著高于表浅型（P＜0．01）,有淋巴结转移的肿瘤组iNOS表达高于无淋巴结转移组（P＜0．05）。结论 iNOS在膀胱移行细胞癌中可能促进了肿瘤的浸润和转移,iNOS对膀胱移行细胞癌预后判断和基因治疗具有重要理论意义。     

电离辐射诱导新生大鼠大脑皮质诱导型一氧化氮合酶的表达

目的：研究诱导型一氧化氮合酶在电离辐射导致的神经细胞凋亡中的作用。方法;以单剂量２．０Ｇｙγ射线照射出生后０ｄ的Ｗｉｓｔａｒ大鼠,用ＡＢＣ法检测照射后第０．５,１,２,４,６,８,１２,２４,４８小时大脑皮质内ｉＮＯＳ的表达。结果;照射组各时间点均有不同程度的ｉＮＯＳ表达,第６小时达峰值。各对照组未见ｉＮＯＳ表达。