急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达

背景：据作者查新检索,国内外有关急性白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因表达的报道罕见。目的：观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达及其意义。方法：50例急性淋巴细胞白血病患者,其中32例急性B淋巴细胞白血病,18例急性T淋巴细胞白血病。同期选择27例非恶性血液病患者作为对照。取肝素抗凝的骨髓液2～4mL,用Ficoll液分离骨髓单个核细胞,半定量反转录聚合酶链反应法检测TAp63的表达。结果与结论：50例急性淋巴细胞白血病患者有49例表达TAp63,急性淋巴细胞白血病组明显高于非恶性血液病组（P〈0.05）,急性B淋巴细胞白血病表达水平显著高于急性T淋巴细胞白血病（P〈0.05）。动态观察了5例初治急性淋巴细胞白血病化疗后不同阶段TAp63的表达变化,发现初治时TAp63表达,缓解后低表达或不表达,复发后又表达。结果表明TAp63在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的表达明显高于非恶性血液病患者,尤其在急性B淋巴细胞白血病患者中高表达。     

急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达

背景:据作者查新检索,国内外有关急性白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因表达的报道罕见.目的:观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达及其意义.方法:50例急性淋巴细胞白血病患者,其中32例急性B淋巴细胞白血病,18例急性T淋巴细胞白血病.同期选择27例非恶性血液病患者作为对照.取肝素抗凝的骨髓液2~4 mL,用Ficoll液分离骨髓单个核细胞,半定量反转录聚合酶链反应法检测TAp63的表达.结果与结论:50例急性淋巴细胞白血病患者有49例表达TAp63,急性淋巴细胞白血病组明显高于非恶性血液病组(P < 0.05),急性B淋巴细胞白血病表达水平显著高于急性T淋巴细胞白血病(P < 0.05).动态观察了5例初治急性淋巴细胞白血病化疗后不同阶段TAp63的表达变化,发现初治时TAp63表达,缓解后低表达或不表达,复发后又表达.结果表明TAp63在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的表达明显高于非恶性血液病患者,尤其在急性B淋巴细胞白血病患者中高表达.     

急性白血病病人骨髓细胞BAALC基因表达及意义

目的通过检测脑和急性白血病胞质（BAALC）mRNA在急性白血病（AL）病人表达,探讨其与AL病情进展及预后关系。方法应用逆转录聚合酶链反应技术,检测20例急性髓系白血病（AML）、8例急性淋巴细胞白血病（ALL）及11例特发性血小板减少性紫癜（ITP）、缺铁性贫血（IDA）等非恶性血液病病人（对照组）骨髓单个核细胞BAALC mRNA表达水平。结果初治组AL病人BAALC mRNA表达水平较对照组显著升高（F=8.59,q=5.62,P〈0.05）;经治疗获完全缓解后,与初治组比较,其表达水平显著下降,两组比较差异有显著性（q=3.99,P〈0.05）。BAALC mRNA表达水平与AL病人外周血白细胞计数及骨髓原始细胞比例无明显相关性（P〉0.05）。结论 BAALC mRNA表达与AL疾病进展及预后密切相关,可作为AL预后判断的有意义指标。     

Pim-3蛋白在急性白血病中的表达及意义

目的：探讨pim-3蛋白在急性白血病（AL）中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测30例急性髓细胞白血病（AML）和20例急性淋巴白血病（ALL）患者中pim-3蛋白的表达情况,同时选取15例非恶性血液病的患者作为对照,统计学分析各组间Pim-3蛋白的表达差异。结果Pim-3蛋白在急性白血病患者中的表达阳性率显著低于非恶性血液病患者,但在急性髓细胞白血病患者中和急性淋巴白血病患者中无统计学差异。结论Pim-3蛋白在急性白血病中的异常表达可能与白血病的发生、发展有关。     

Chfr基因在急性白血病骨髓细胞中表达的研究

为了探讨急性白血病（AL）患者骨髓细胞中有丝分裂早期检查点Chfr基因的表达及其意义，对46例初诊未治疗的AL患者骨髓单个核细胞，用RT—PCR和免疫组织化学的方法检测Chfr基因mRNA及蛋白的表达，并与正常人骨髓单个核细胞进行对照。结果表明：免疫组织化学和RT—PCR分析显示。28例急性髓细胞白血病（AML）中的15例，18例急性淋巴细胞白血病（ALL）中的13例骨髓单个核细胞Chfr基因mRNA和蛋白的表达与正常对照相比显著下降，同时Chfr基因表达异常病例染色体检查存在核型异常。结论：急性白血病骨髓细胞有丝分裂检查点Chfr基因表达受损，可能在白血病发病中具有重要作用。     

白介素12降低白血病和骨髓增生异常综合征患者外周血单个核细胞WT1基因的表达

有研究证实,白细胞介素12（IL-12）可以增强自然杀伤细胞的细胞毒性,还可以促进细胞毒T细胞对原代白血病细胞及白血病细胞株的细胞毒反应.此外,Wilms癌基因WT1 mRNA作为微小残留病变的标志已被广泛用于监测急性白血病（AL）和骨髓增生异常综合征（MDS）的疗效.为了研究IL-12能否降低AL和MDS患者外周血单个核细胞WT1基因的表达,分别收集了30例恶性血液病患者和5例健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMNC）进行体外培养,在培养体系中加入IL-12.培养前和培养后第3天,用竞争性RT-PCR方法分别测定各标本中WT1 mRNA的表达量.结果显示,在6例慢性粒细胞性白血病患者,WT1 mRNA由104.8降至104.2拷贝/微克总RNA;在12例MDS患者,WT1 mRNA由105.4降至104.8拷贝/微克总RNA;在5例完全缓解期AL患者,WT1 mRNA由105.0降至104.2拷贝/微克总RNA;但在7例未缓解的AL患者,WT1 mRNA的表达无变化.结论：IL-12可以显著降低大部分恶性血液病患者WT1 mRNA的表达水平,IL-12有望用于去除恶性血液病患者体内的微小残留病变.     

RYBP在急性白血病中的表达

目的:观察RYBP(Ring1 and YY1-binding protein)在急性白血病中的表达情况,初步探索其在急性白血病中的临床意义。方法:应用蛋白质免疫印迹(western blot)技术分别检测急性单核细胞白血病细胞株SHI-1、急性早幼粒白血病细胞株HL-60、慢性粒细胞白血病细胞株K562、51例初治急性白血病(AL)患者、23例急性白血病完全缓解(ALCR)患者和21例对照(非恶性血液病)患者骨髓单个核细胞中RYBP的表达情况。结果:SHI-1、HL-60及K562细胞株RYBP表达均为强阳性;21例阴性对照中RYBP表达均为阴性。AL组RYBP表达阳性率为73%,ALCR组阳性率为13%,AL组RYBP表达阳性率及表达量比ALCR组及对照组明显增高(P<0.05)。结论:RYBP在急性白血病细胞中表达水平异常增高,提示RYBP可能与急性白血病密切相关。     

磷酸化STAT5、FOXP3在急性白血病患者骨髓中的表达及意义

目的观察急性白血病患者骨髓中单个核细胞磷酸化STAT5及FOXP3的表达水平及其临床意义。方法采用蛋白磷酸化流式细胞术分别检测45例急性白血病患者（AL）[急性髓系白血病（AML）29例,急性淋巴细胞白血病（ALL）16例]及12名对照组骨髓单个核细胞磷酸化STAT5（P-STAT5）及FOXP3阳性细胞的百分率。结果 AL患者组骨髓单个核细胞PSTAT5表达（2.35±0.82）%较对照组（0.58±0.16）%增高,差异具有统计学意义（P〈0.05）;AL患者组FOXP3（3.98±1.17）%高于对照组（0.96±0.45）,差异具有统计学意义（P〈0.05）;AML组P-STAT5及FOXP3水平（2.51±0.91）%,（3.72±1.12）%和ALL组（2.27±0.78）%,（4.03±1.18）%比较无显著差异（P〉0.05）。AL患者P-STAT5及FOXP3表达水平显著正相关（r=0.81,P〈0.05）。结论磷酸化STAT5及Foxp3可能共同参与了急性白血病的发生过程,同时检测可以提供有临床意义的实验依据。     

恶性血液病患者骨髓AnnexinⅡ基因的表达

本研究探讨恶性血液病患者骨髓细胞annexinⅡ基因的表达水平及其在恶性血液病发生发展中的作用。用实时定量PCR方法检测了81例初治急性白血病患者、6例多发性骨髓瘤患者（MM）及20例缺铁性贫血患者（对照）骨髓annexinⅡmRNA的表达水平。结果显示：annexinⅡ在初治AML—M3患者骨髓中的表达显著高于其它类型恶性血液病患者和对照者,此外在初治AML—M5、AML—M4、MM患者骨髓中也有较高表达,而在初治AML—M,以及AML—M,患者中表达量与对照者相比无统计学差异。结论：annexinⅡ除在AML—M,中高表达外,在临床观察具有高度侵袭浸润能力的类型M5、M4、MM中也有较高表达,推测annexinⅡ可能通过增强恶性血液病细胞降解细胞外基质等机制参与恶性血液病侵袭、浸润过程。     

PRAME基因在急性白血病中的表达及临床意义

为了探讨PRAME基因在急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞（BMMNC）中的表达及与疗效关系，我们用半定量RT-PCR的方法检测AL患者BMMNC的PRAME水平。[第一段]     

白血病患者骨髓中CTGF、CYR61、VEGF-C、VEGFR-2mRNA、蛋白的表达及其临床相关性研究

本研究旨在探讨白血病患者骨髓单个核细胞中结缔组织生长因子（CTGF）、富含半胱氨酸蛋白61（CYR61）、血管内皮生长因子-c（VEGF—C）和血管内皮生长因子受体-2（VEGFR-2）mRNA及蛋白的表达水平以及它们在白血病发生、发展、浸润转移中的作用和临床意义。初发白血病100例患者,26例完全缓解后急性白血病患者,30例对照者纳入本研究。收集骨髓单个核细胞,应用realtimePCR和Westernblot分别检测白血病患者及对照者CTGF、CYR61、VEGF-C、VEGFR-2mRNA及蛋白的表达水平。结果表明,急性白血病患者骨髓中上述4种因子mRNA、蛋白水平明显高于对照组（P〈0．05）。急性白血病缓解后只有CTGFmRNA表达与对照组比较有差异（P〈0．05）,且CTGFmRNA表达在急性白血病不同骨髓增生中有统计学意义（P〈0．05）。CTGF蛋白表达在白血病不同染色体核型组有差异（P〈0．05）,CYR61和VEGF—C蛋白表达在急性白血病不同程度骨髓增生组中比较差异有统计学意义（P〈0．05）。CML组CTGF、CYR61、VEGF—CmRNA和蛋白表达高于对照组（P〈0．05）,CLL组CTGF和CYR61蛋白表达水平高于对照组。在性别、髓外浸润等因素分组比较中,上述4种因子mRNA和蛋白表达水平比较均无差异有统计学意义（P〉0．05）。在相关性分析中,白血病患者上述4种因子mRNA表达水平与骨髓原始细胞计数呈正相关（P〈0．05）,CTGF、CYR61、VEGF—C蛋白表达水平与其呈正相关（P〈0．05）。除了VEGFR-2与骨髓原始细胞计数无相关性外,这些因子的mRNA及蛋白表达水平与骨髓原始细胞计数呈正相关。结论：CYR61、CTGF、VEGF-C和VEGFR-2mRNA和蛋白表达在急慢性白血病中都有作用。在急性白血病（AML／ALL）中上述4种因子高表达,在CML中除了VEGFR-2外其他因子也高表达,多数因子的表达与骨髓原始细胞计数呈正相关。联合阻断这些相关的血管性因子可能对白血病靶向治疗有重要作用。     

急性白血病死亡相关蛋白激酶基因表达及启动子区甲基化状态研究简

本研究通过对急性白血病病人及体外肿瘤细胞株的DNA甲基化及基因表达的实验,探讨死亡相关蛋白激酶（death-associated protein kinase,DAPK）基因在急性白血病中的表达情况及其启动子区域甲基化的状态,并分析两者之间的相关程度.应用RT-PCR检测DAPK基因在白血病细胞及正常骨髓细胞中的表达;用巢式甲基化特异性PCR（n-MSP）法检测急性白血病患者及细胞株DAPK基因启动子甲基化状况;从第二轮巢式MSP扩增出的随机产物中挑选2个随机引物,交予专业机构克隆后进行序列分析.结果表明：DAPK基因在10例正常对照者骨髓标本中均有表达,DAPKmRNA在急性白血病病人骨髓标本中表达平均值为0.61 ±0.40,低于正常对照者,差异有显著性（P＜0.05）,其中52.94％（9/17例）的急性淋巴细胞白血病病人骨髓标本DAPKmRNA表达降低或缺失,急性髓系白血病病人数据为41.18％ （42/102）;细胞株U-937显示基因表达正常,HL-60表达缺失;102例急性髓系白血病病人骨髓标本中33例存在DAPK启动子区甲基化,甲基化率为32.4％（33/102）;17例急性淋巴细胞白血病病人骨髓标本中8例存在DAPK启动子区甲基化,甲基化率为47％ （8/17）;7例正常人骨髓标本DAPK启动子区均为非甲基化;细胞株U-937 DAPK启动子区非甲基化,HL-60 DAPK启动子区甲基化.ALL组与AML组患者骨髓细胞DAPKmRNA表达与其启动子甲基化均呈显著负相关（ALL组r=-0.855,P＜0.05;AML组r=-0.343,P＜0.05）,提示两者有密切的关联.结论：急性白血病患者中DAPK基因启动区甲基化与其mRNA的异常表达或失表达有关.     

急性白血病患者血浆锌含量变化与多药耐药关系的探讨

【目的】探讨急性白血病（AL）患者血浆锌含量变化与病情及临床疗效的关系。【方法】采用原子吸收分光光度法,检测52例AL患者血浆锌含量及免疫组化法检测化疗后33例AL患者骨髓单个核细胞p-糖蛋白的表达。【结果】①52例AL患者,其中初治未化疗19例血浆锌含量（2．62±1.12μg／mL）较正常对照组（4．28±1．68μg／mL）明显减低（P〈0．01）,化疗后病情缓解16例锌含量（4．66±2．18μg／mL）较难治／复发17例（3．34±0．93μg／mL）明显增高（P〈0．05）,缓解组血浆锌含量较初治未化疗组明显增高（P〈0．01）;②17例难治／复发AI。患者其中15例骨髓单个核细胞P-gP表达阳性细胞率与血浆锌含量呈明显的负相关（r=0．69,P〈0．01）。【结论】①AL患者血浆锌含量变化与病情及临床疗效有关。②AL患者血浆锌含量测定可作为判断病情、疗效及预后指标之一。锌可能参与AL多药耐药的发生。     

泛素相关蛋白1基因与肿瘤抑制基因p16在急性白血病中的表达研究

为了探讨泛素相关蛋白1(UBAP1)基因和肿瘤抑制基因(p16)在急性白血病中的表达水平及二者的相关性,采用实时荧光定量PCR技术检测68例急性白血病患者和22例对照者骨髓细胞中ubap1基因和p16基因的mRNA的表达水平。结果发现,在急性白血病中ubap1基因呈高表达,p16基因呈低表达,与对照组相比较有显著性差异(p0.01)。然而,进一步分组比较发现,ubap1基因仅在成人急性髓系白血病的M4和M5亚型中的表达有统计学意义(p0.05),p16基因除成人FAB分型的M1和M2亚型外,其余组差异均有统计学意义(p0.05);而ubap1基因和p16基因的mRNA表达水平在染色体预后分组间差异无统计学意义(p0.05)。ubap1基因和p16基因的表达水平在对照组中呈显著负相关(r=-0.827,p0.01),在病例组中无相关性(r=0.065,p0.05)。结论:ubap1基因高表达与p16基因低表达可能同时参与急性白血病的发病,其中ubap1基因高表达主要影响AML中M4和M5亚型的发病,这一发现为进一步探讨急性白血病发病机制及靶向治疗提供重要的理论依据。     

EVI1 阳性急性髓细胞白血病临床及预后分析

目的分析EVIl（ectotropicviralintegrationsite1）基因在急性髓细胞白血病（AML）中的表达及意义。方法应用相对荧光定量PCR检测145例AML患者EVIl基因的表达,并观察其诱导缓解及生存情况。结果28例AML患者表达EV11基因,阳性表达率19．3％;AML各亚型间比较,M4、M5的EV11基因阳性率高于M1、M2（x2=16．47,P〈0．05）。EVIl阳性与阴性患者年龄、外周血白细胞、血红蛋白、血小板、骨髓原始幼稚细胞比例及完全缓解率等比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。但EV11阳性患者的1年内病死率明显高于EVIl阴性患者（x2=9．68,P〈0．05）。结论EVIl基因在AML的发病中起一定作用,可作为判断AML预后不良的一个指标。     

整合素蛋白连接激酶和蛋白激酶B在急性白血病中的表达及意义

本研究探讨整合素蛋白连接激酶（ILK）和蛋白激酶B（PKB／Akt）在不同类型和疾病阶段的急性白血病（AL）患者中的表达,研究ILK／Akt通路在AL发病中的可能作用。应用RT-PCR法检测不同类型初治、复发及完全缓解AL患者和正常对照者骨髓单个核细胞中ILK mRNA和AktmRNA的表达。结果表明,ILK和Akt在初治AL患者中的表达高于完全缓解组和正常对照组（P〈0．05）,在初治纽与复发组中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。ILK和Akt的表达在AL中呈正相关性。结论：ILK和Akt在AL中异常高表达,而ILK／Akt信号通路可能参与了AL的发生发展,有可能成为AL治疗的新靶点。     

急性白血病病人骨髓细胞胞苷脱氨酶基因表达的研究

本研究的目的是测定胞苷脱氨酶 (cytidinedeaminase ,CDD)在正常骨髓细胞和不同病期急性白血病 (AL)病人细胞内mRNA的表达水平 ,并探讨该酶与临床的关系。研究采用半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测83例AL病人 (初治 31例、复发难治 2 9例、缓解 2 3例 )和 15例正常人的骨髓细胞CDD表达 ,以CDD/ β actin大于或等于 0 5定为高表达。结果显示 ,CDD基因表达量在初治和难治复发病例中分别为 0 .4 90 5± 0 .2 85 11和 0 .4 96 9± 0 3180 2 ,高表达率分别为 4 8.3%和 5 1.7%;在完全缓解病例和正常人中分别为 0 .3338± 0 .2 3838和 0 .3193±0 15 390 ,高表达率分别为 13.3%和 15 .4 %;初治和难治复发病例的CDD基因表达量显著高于完全缓解病例和正常人 (P <0 .0 5 ) ,但初治与难治复发病例之间、完全缓解病例与正常人之间无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;难治复发病例中ALL的CDD表达量显著高于AML(0 .75 0 4± 0 .10 939vs 0 .4 336± 0 .3372 5 ;P <0 .0 5 ) ;初治 3例高表达中 2例缓解 ,1例未缓解 ,5例低表达全部缓解 ;难治复发 8例高表达中 3例缓解 ,5例未缓解 ,10例低表达中 4例缓解 ,6例未缓解 ,但未发现缓解率存在有显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :CDD在AL的不同病期表达水平不同 ,但CDD高表达可