ERK抑制对乳腺癌细胞(MCF-7)PCAF的影响和意义

目的:研究ERK抑制在雌激素对乳腺癌细胞MCF-7促细胞周期转化、抗凋亡过程中核受体辅激活因子PCAF及野生型p53蛋白的表达、转录水平变化,探讨ERK通过PCAF对雌激素受体信号通路的作用和机理.方法:以雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7为研究对象,实验分组为17β一雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)处理组、17β-E2+ERK抑制剂PD98059处理组和细胞对照组.流式细胞术检测细胞凋亡、细胞周期;Westernblot检测P-ERK1/2、PCAF和野生型P53蛋白水平;RT-PCR检测野生型PCAFmRNA、p53mRNA水平.结果:应用ERK磷酸化抑制剂PD98059后,能抑制17β-E2抗MCF-7细胞凋亡的作用,使细胞早期凋亡率增加,其差异具有统计学意义(P<0.05);能抑制17β-E2促进MCF-7细胞周期转化作用,使G1期细胞增加,s期和G2期细胞减少,其差异具有显著统计学意义(P<0.01);PCAF和P-ERK1/2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),PCAFmRNA转录水平差异无统计学意义(P>0.05);野生型P53蛋白表达和p53mRNA转录水平升高(P<0.01).结论:ERK在17β-E2抗乳腺癌细胞MCF-7凋亡、促细胞周期转化中的作用与PCAF增强雌激素受体信号及野生型p53蛋白表达和基因转录水平改变有关.     

p16基因抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖的体外和体内实验研究

目的 :探讨p16基因对乳腺癌的治疗作用 ,为乳腺癌 p16的基因治疗提供实验依据。 方法 :构建p16的逆转录病毒载体 pLMSN ,包装成病毒后 ,体外转导p16基因纯合性缺失的乳腺癌细胞株MCF 7,Westernblot证明该基因在转导后的MCF 7细胞中有表达 ,用活细胞计数、流式细胞仪、形态观察等方法来检测 p16表达在体外对MCF 7细胞生物学行为的影响。进行SCID鼠体内成瘤实验和逆转录病毒直接注射SCID鼠乳腺癌模型的治疗性实验来观察 p16对乳腺癌细胞的体内抑制作用。 结果 :外源性 p16在MCF 7细胞中表达后 ,体外细胞发生形态改变 ,生长明显慢于对照细胞 ,流式细胞计数显示G1期细胞增多 ,细胞在SCID鼠体内成瘤性下降 ,p16逆转录病毒直接注射有使SCID鼠乳腺肿瘤缩小的趋势。结论 :p16逆转录病毒对p16基因纯合性缺失的乳腺癌有一定治疗意义     

细胞外调节蛋白激酶介导的脂蛋白（a）促血管平滑肌细胞迁移作用

目的:研究细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)在脂蛋白(a)[Lp(a)]诱导的人血管平滑肌细胞(VSMC)迁移及细胞骨架构建中的作用.方法:用不同浓度的ERK激酶抑制剂PD98059抑制人VSMC内ERK的活化,再用Lp(a)诱导处理后的细胞,Western blot检测P-ERK的表达,激光共聚焦显微镜观察细胞骨架构建变化,迁移试验观察VSMC迁移数量的变化.结果:Western blot检测显示PD98059的终浓度在10 μmol/L时,P-ERK表达无明显变化(P>0.05),从20～40 μmol/L,随其终浓度的逐渐升高,P-ERK的表达逐渐降低(P<0.01),达到40 μmol/L后,其抑制作用达到高峰.PD98059预处理人VSMC,Lp(a)诱导20 min后,细胞内未见明显的张力纤维、粘着斑及丝状伪足.对照组VSMC迁移细胞数为(78.87±7.43)个,PD98059处理组为(49.20±6.47)个, PD98059处理组较正常对照组明显减少(P<0.01).结论:Lp(a)诱导的VSMC细胞骨架构建及细胞迁移依赖于ERK的活化.     

细胞外信号调节蛋白激酶1在缺氧后脑损伤中的表达模式

目的通过了解细胞外信号调节蛋白激酶1(ERK-1)在缺氧脑损伤大鼠脑中的表达,了解其参与缺氧脑损伤的过程。方法 48只3 d龄新生SD大鼠,随机分成2组:对照组和缺氧组,每组各24只,缺氧组SD大鼠置于自制密闭容器中,充以含8%氧气的氧氮混合气体,时间为90 min,对照组SD大鼠不进行处理。分别于造模后6个时间点——1、3、7、14、21 d和28 d后留取两组SD大鼠脑组织,采用Western blot检测ERK-1总蛋白在脑组织中的表达情况。结果缺氧组大鼠脑组织ERK-1呈现动态表达;变化规律:在缺氧早期(缺氧后1~7 d),ERK-1总蛋白的表达均有降低的趋势,缺氧后第14天开始其表达具有升高的趋势,缺氧后第21天和第28天ERK-1表达量又有所下降,差异无统计学意义(P>0.05)。结论缺氧造成新生大鼠脑损伤时,ERK-1总蛋白的表达谱没有明显变化的趋势,提示在早产儿缺氧性脑损伤时ERK-1并不通过剂量的变化对缺氧后脑组织损伤进行调节。     

乙酰化酶抑制剂Garcinol对雌激素促乳腺癌细胞MCF-7增殖的作用与机制

目的 研究乙酰化酶抑制剂Garcinol对雌激素促乳腺癌细胞MCF-7增殖、细胞周期转化及凋亡抑制的影响及机制。 方法 应用CCK-8法检测Garcinol 对17β-雌二醇（17β-E₂）促MCF-7细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况;细胞免疫荧光检测NF-κB/p65核转运情况;RT-PCR检测cyclin D1、Bcl-2、Bcl-x_L mRNA水平;蛋白质印迹分析检测乙酰化（ac）-H3、ac-H4、NF-κB/ac-p65、cyclin D1、Bcl-2、Bcl-x_L 蛋白的表达水平。 结果 Garcinol能抑制17β-E₂促细胞增殖作用,使细胞周期阻滞于G₀/G₁期,细胞凋亡率增加（P<0.01）;17β-E₂促进MCF-7细胞ac-H3、ac-H4、NF-κB/ac-p65表达水平（P<0.01,P<0.05,P<0.01）,Garcinol能抑制17β-E₂对ac-H3、NF-κB/ac-p65的表达促进作用（P<0.01）,对ac-H4影响无统计学意义;17β-E₂促进NF-κB/p65核转运相应受到Garcinol抑制（P<0.01）;17β-E₂促进cyclin D1、Bcl-2、Bcl-x_L的 mRNA转录和蛋白表达水平的作用受到Garcinol抑制（P<0.05）。 结论 17β-E₂促MCF-7细胞增殖和凋亡抑制作用与组蛋白和非组蛋白NF-κB/p65乙酰化水平增高有关,乙酰化酶抑制剂Garcinol 通过降低乙酰化水平对雌激素促乳腺癌细胞增殖具有明显抑制作用,降低NF-κB通路的ac-p65蛋白水平,从而下调cyclin D1、Bcl-2、Bcl-x_L可能是其重要机制。     

细胞外信号调节蛋白激酶在梗阻性肾组织中的表达及其意义

目的 探讨细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）在梗阻性肾病的分子发病机制中作用。方法 应用免疫组化方法检测ERK和增殖细胞核抗原（PCNA）在47份梗阻性肾组织中表达，并分析ERK表达与梗阻肾纤维化之间相关关系。结果 梗阻肾的肾小管和间质中ERK表达均高于正常的，但仅间质中两者表达差异有显著性（P〈0．05）。间质中ERK表达与梗阻肾纤雏化程度密切正相关（P〈0．05），而肾小管中两者相关差异无显著性（P〉0．05）。梗阻肾的肾小管和间质中ERK强表达者的PCNA指数均分别显著高于ERK弱表达者（P〈0．01）。结论 ERK活性增强促进细胞增殖增多、从而参与梗阻挂肾病的发病过程，尤其在肾纤维化过程中起着重要作用。     

FAK在雌激素诱导MCF-10A乳腺上皮细胞转化中的表达及其意义

目的观察17-β雌二醇(E2)诱导雌激素受体(ER)阴性乳腺上皮细胞MCF-10A转化及伴随的局部黏着斑激酶(FAK)表达变化,探讨FAK在细胞转化中的生物标记意义。方法以ER阴性MCF-10A细胞为研究模型,E2连续刺激模型细胞5周(共传11代)建立转化细胞模型,采用蛋白印迹法检测蛋白表达变化、软琼脂集落形成实验检测非贴壁依赖集落形成、伤口愈合实验检测细胞迁移及细胞胎盼蓝染色计数观察细胞生长。结果 E2连续刺激MCF-10A细胞5周后,细胞生长速度明显增快、接触抑制性消失,细胞迁移显著增快,同时在软琼脂基质中形成集落。在E2诱导细胞转化早期即出现FAK蛋白表达增强及蛋白剪切,但乳腺癌标记分子周期蛋白E表达无明显变化。结论 E2诱导ER阴性MCF-10A乳腺上皮细胞转化中始终伴随FAK表达变化,提示FAK可能成为预测ER阴性乳腺细胞转化的早期生物标记物。     

罗非昔布对大鼠结肠肿瘤细胞外信号调节蛋白激酶表达的影响

目的　研究选择性COX 2抑制剂罗非昔布对大鼠结肠肿瘤的防治作用及对肿瘤组织细胞外信号调节蛋白激酶(ERK/pERK)表达的影响。方法　利用二甲肼(DMH)诱导Wister大鼠结直肠肿瘤发生;用5mg/kg罗非昔布给大鼠灌胃,观察药物对大鼠结直肠肿瘤的预防和治疗作用及对肿瘤组织ERK/pERK表达的影响。结果　DMH能诱发大鼠结直肠腺瘤及腺癌,2 2周末,罗非昔布预防组腺瘤发生率为5 0 %,对照组腺瘤发生率为10 0 %;罗非昔布预防组及对照组大鼠平均每只腺瘤数分别为1 . 66±0 . 5 7与2 83±1 16,二者有显著差异(P <0 . 0 5 )。2 4周末,罗非昔布预防组腺癌发生率为5 0 %,对照组发生率为83 . 3 %;预防组及对照组腺癌分别为1 . 3 3±0 . 5 8与2 . 40±0 . 89,二者有显著差异(P <0 . 0 5 )。大鼠结直肠肿瘤组织pERK水平较正常结肠组织明显升高,腺瘤和腺癌组织pERK的表达无明显差异;罗非昔布作用组pERK表达明显下调。结论　罗非昔布不仅能预防化学致癌剂诱发大鼠结直肠腺瘤发生,还能减少腺癌发生;这种作用可能部分通过抑制结直肠肿瘤pERK表达实现。     

阿尔茨海默病大鼠海马细胞外调节蛋白激酶的变化

目的:探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)与阿尔茨海默病(AD)发病机制的关系.方法:应用穹窿海马伞切断AD大鼠模型,分别用同位素方法和蛋白质印迹检测ERK的水平.结果:同位素方法检测穹窿海马伞切断AD大鼠海马ERK的活性,发现手术组手术侧为(13.46±3.23)pmol·mg-1·min-1,明显高于正常对照组(10.80±1.50)pmol·mg-1·min-1、假手术组(10.74±1.62)pmol·mg-1·min-1和手术组非手术侧(10.79±2.23)pmol·mg-1·min-1;Western blot显示ERK水平在手术组高于正常对照组.结论:穹窿海马伞切断AD大鼠海马ERK升高,说明ERK信号转导途径在AD发病早期有改变.     

GP73通过p53信号通路调节乳腺癌细胞MCF-7的增殖和凋亡

目的 探讨高尔基蛋白73(GP73)对乳腺癌细胞MCF-7的增殖、凋亡的影响及相关机制.方法 利用干扰及过表达GP73质粒转染乳腺癌细胞MCF-7,并利用CCK-8检测处理后细胞的增殖能力,利用流式细胞术方法检测处理组细胞的凋亡水平,利用qRT-PCR和Western印迹法测定GP73和p53 mRNA和蛋白的表达.采用qRT-PCR测定20例临床乳腺癌和癌旁组织中GP73和p53的mRNA水平,并分析乳腺癌组织中GP73和p53的mRNA水平的相关性.结果 过表达GP73后MCF-7较对照组增殖能力上升(P＜0.05),凋亡水平下降(P＜0.05);干扰GP73后MCF-7增殖能力下降(P＜0.05),凋亡率升高.同时过表达GP73和p53的乳腺癌细胞较单独过表达GP73的MCF-7细胞的增殖能力下降,凋亡水平上升.乳腺癌组织中GP73和p53 mRNA表达也呈负相关(r=-0.528,P＜0.01).结论 GP73可能通过p53信号通路调节乳腺癌细胞MCF-7的增殖和凋亡.     

乳腺癌基质降解产物对MCF-7细胞系增殖和侵袭的影响

目的 观察乳腺癌基质降解产物(DECM)对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖和侵袭的影响,探讨DECM对肿瘤增殖和浸润的作用,及对MMP-7蛋白与SDF-1蛋白表达的影响.方法 采用胰酶消化法,分别分离来自人正常乳腺组织、乳腺癌旁组织及乳腺癌组织切取物中细胞和基质,提取基质成分,洗涤基质得到3种母液,分别为正常乳腺组织母液、癌旁组织母液、癌组织母液,再以Ⅳ型胶原酶消化基质,得到3种DECM,分别为乳腺组织DECM、癌旁组织DECM、癌组织DECM,分别用3种母液和3种DECM作用于人乳腺癌细胞株MCF-7,设置空白对照,通过MTT法、软琼脂克隆形成实验观察癌细胞增殖的变化,用Transwell实验观察细胞侵袭能力变化,通过Western Blot检测人乳腺癌细胞株MCF-7细胞中MMP-7和SDF-1蛋白的表达变化.结果 Ⅳ型胶原酶作用人乳腺不同组织来源的基质得到的DECM均可以使MCF-7细胞株增殖和侵袭能力增强,与空白组及相应母液组比较差异有显著性(P＜0.01);DECM可以上调MCF-7中MMP-7和SDF-1蛋白的表达,与空白组及相应母液组比较差异有显著性(P＜0.01).结论 DECM具有促进肿瘤细胞增殖及侵袭能力的生物学活性;该能力可能与上调肿瘤细胞MMP-7和SDF-1蛋白表达有关.     

胰岛素样生长因子结合蛋白7过表达对人乳腺癌细胞系-7增殖的影响及其机制研究

目的  探究过表达胰岛素样生长因子结合蛋白7（IGFBP7）对人乳腺癌细胞系-7（MCF-7）增殖的影响及其机制。方法  采用LipofectamineTM 2000将pIRES2-ZsGreen1-IGFBP7质粒或pIRES2-ZsGreen1空白质粒转染进MCF-7乳腺癌细胞,并用荧光显微镜鉴定细胞转染;实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）对转染48 h后IGFBP7蛋白进行定量;细胞凋亡实验检测转染24、48和72 h后各组细胞增殖情况;Western bolt检测转染48 h后各组细胞（蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白）（AKT/mTOR）信号通路相关蛋白的表达。结果  Real-time PCR的检测结果提示经过IGFBP7转染的细胞IGFBP7 mRNA表达水平明显升高;细胞凋亡实验结果发现,与空白处理组和空白质粒转染组比较,IGFBP7过表达组细胞增殖能力明显降低;Western bolt检测结果发现,AKT蛋白的磷酸化水平明显下降,且其下游的mTOR表达明显下降（P <0.05）。结论  IGFBP7过表达对MCF-7乳腺癌细胞的增殖具有抑制效果,可能是通过对AKT/mTOR信号通路的抑制达到对MCF-7的抑制。

     

雌激素促乳腺癌细胞MCF-7增殖中组蛋白乙酰化的作用及其意义

目的：研究组蛋白乙酰化水平改变在雌激素促乳腺癌细胞增殖中的作用及其意义。方法：以人乳腺癌细胞MCF-7为研究对象,应用CCK-8法检测17-β雌二醇（17β-estradiol,１７β-E2）对MCF-7细胞增殖影响,根据增殖率确定后续实验处理浓度;应用CCK-8法检测Garcinol 对17β-E2促MCF-7细胞增殖作用的影响,根据抑制率求取其中效抑制浓度;流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡情况;Western blot检测乙酰化H３（acetylated histone 3,ac-H3）、乙酰化H4（acetylated histone 4,ac-H4）、细胞周期蛋白１、B细胞淋巴瘤/白血病-２（B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2）、B细胞淋巴瘤/白血病-xl（B cell lymphoma/leukemia-xl,Bcl-xl）蛋白水平表达;RT-PCR检测CyclinD1 mRNA、Bcl-2 mRNA、Bcl-xl mRAN水平。结果：17β-E2的促MCF-7细胞增殖作用受到乙酰化酶抑制剂Garcinol抑制,使细胞周期转化阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率增加（P=0.000）;17β-E2促进MCF-7细胞ac-H3、ac-H4的表达（P=0.007、P=0.013）,促进CyclinD1、Bcl-2、Bcl-xl 蛋白表达（P=0.000、P=0.002、P=0.000）,Garcinol能抑制17β-E2对ac-H3的促进表达（P=0.006）,对ac-H4无显著影响（P=0.347）,17β-E2的促CyclinD1、Bcl-2、Bcl-xl表达亦受到Garcinol抑制（P=0.000、P=0.001、P=0.001）;相应可见,17β-E2促进CyclinD1、Bcl-2、Bcl-xl mRNA转录（P=0.007、P=0.044、P=0.007）,该作用受到Garcinol抑制（P=0.001、P=0.017、P=0.002）。结论：17β-E2促MCF-7细胞增殖、凋亡抑制作用与组蛋白乙酰化水平增高有关,Garcinol 对雌激素促乳腺癌细胞增殖具有抑制作用。     

Inhibition of cell proliferation by siRNA targeting hPRLR in breast cancer MCF-7 cell line

Objective： To study the inhibition of proliferation of breast cancer by small interfering RNA（siRNA） targeting human prolactin （hPRLR） and the underlying mechanisms. Methods：The siRNA targeting hPRLR was chemically synthesized and transfected into MCF-7 cells, the expression of hPRLR was analyzed by real-time quantitive PCR, cell growth inhibition was measured with MTT assay, cell cycle of the transfected cells was examined by flow cytometry, meanwhile, expression of cyclin D1 was tested by semi-quantitative RT-PCR, Results：24 h after transfection with 100 nmol/L siRNA-PRLR, the expression of hPRLR mRNA was suppressed by 65%, cells in G1 phase increased, but cells in S phase decreased. Down regulated hPRLR expression exhibited significant inhibition in cell proliferation. And the expression of cyclin D 1 was down regulated. Conclusion：The results indicate that siRNA-hPRLR is a useful tool for silencing hPRLR expression and inhibiting cell proliferation in breast cancer MCF-7 cell line, and it may be a possible new approach for breast cancer gene therapy.     

阿司匹林和塞来昔布对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

目的：观察阿司匹林和塞来昔布及二者分别联合阿那曲唑对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响,探讨并比较阿司匹林和塞来昔布的抗肿瘤作用。方法：MTT法检测不同浓度的阿司匹林（2.5 、5.0和10.0 mmol•L^-1）和塞来昔布（30、60和120 μmol•L^-1）分别作用人乳腺癌细胞株MCF-7不同时间（24、48和72 h）的细胞增殖抑制率,以不含药物的培养液作为阴性对照组,以阿霉素作为阳性对照组。MTT法检测不同浓度阿那曲唑（0.5和1.0 mmol•L^-1及其分别联合不同浓度阿司匹林（2.5、5.0和10.0 mmol•L^-1）和塞来昔布（30、60和120 μmol•L^-1）作用于MCF-7细胞48 h的细胞增殖抑制率,以不含药物组为阴性对照组。结果：①阿司匹林各剂量组细胞增殖抑制率随药物浓度的增加、作用时间的延长而提高(P<0.01)。②塞来昔布各剂量组的细胞增殖抑制率随药物浓度的增加、作用时间的延长而升高(P<0.01)。③10 mmol•L^-1阿司匹林和120 μmol•L^-1塞来昔布单独作用72 h抑制率分别达68.88%和87.00％;阳性对照组阿霉素2.0 μmol•L^-1作用72h抑制率达86.30％。④0.5 μmol•L^-1阿那曲唑与阿司匹林联合各剂量组的抑制率均明显高于0.5 μmol•L^-1阿那曲唑单药组(P<0.05),0.5 μmol•L^-1阿那曲唑联合10.0 mmol•L^-1阿司匹林对MCF-7的抑制率明显高于0.5 μmol•L^-1阿那曲唑联合2.5、5.0 mmol•L^-1阿司匹林(P<0.05)。0.5 μ mol•L^-1阿那曲唑分别与60、120 μmol•L^-1塞来昔布联合组的抑制率明显高于0.5 μmol•L^-1阿那曲唑单药组及0.5 μmol•L^-1阿那曲唑与30 μmol•L^-1塞来昔布联合组的抑制率(P<0.05),0.5 μmol•L^-1阿那曲唑联合120 μmol•L^-1塞来昔布对MCF-7的抑制率明显高于0.5 μmol•L^-1阿那曲唑联合60 μmol•L^-1塞来昔布(P<0.05)。1.0 μmol•L^-1阿那曲唑分别联合10.0mol•L^-1阿司匹林、60和120 μmol•L^-1塞来昔布各组的抑制率明显高于1.0 μmol•L^-1阿那曲唑单药组(P<0.05),1.0 μmol•L^-1阿那曲     

塞来昔布联合多柔比星（ADM）对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

目的初步探讨塞来昔布联合多柔比星（ADM）对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖和凋亡的影响,及其可能机制。方法用不同浓度的塞来昔布溶液、ADM溶液及二者联合用药（简称3药）分别与MCF-7细胞共育24h、48h、72h后,MTT法测定其对细胞的抑制作用。分别用3药作用MCF-7细胞48h后,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。结果10mg／L多柔比星、50μmol／L塞来昔布溶液分别与MCF-7细胞共育24h后,对MCF一7细胞的生长均有明显抑制作用（P〈0．01）。联合用药组的抑制作用更为显著。流式细胞术检测发现,给药细胞48h后,G0／G1期细胞比例升高,S期和G2／M期比例下降,3个给药组细胞均形成明显的凋亡峰,实验组各组与对照组的凋亡率差异有统计学意义（P〈0．01）。结论①塞来昔布和多柔比星均有抑制乳腺癌MCF-7细胞的作用,并呈时间和剂量依赖性;②塞来昔布能诱导MCF-7细胞凋亡,可能与阻止细胞周期进展有关;③塞来昔布与多柔比星联合应用可起到协同抗肿瘤的作用。     

塞来昔布对乳腺癌细胞株MCF-7生长的影响

目的 检测乳腺癌细胞株MCF-7中COX-2的表达及其意义,观察选择性COX-2抑制剂塞来昔布对其生长的影响,寻求新的乳腺癌的治疗方法.方法 采用免疫组化、原位杂交的方法分别检测应用选择性COX-2抑制剂塞来昔布前、后.COX-2蛋白和mRNA的表达情况;采用MTT法研究塞来昔布对乳腺癌细胞株MCF-7生长的影响.结果 应用选择性COX-2抑制剂塞来昔布作用前、后,COX-2蛋白和mRNA在乳腺癌细胞株MCF-7细胞质中的表迭差异有显著性(P＜0.01);塞来昔布可明显抑制MCF-7细胞生长,且随药物浓度的增加和时间的延长,细胞凋亡数目逐渐增加,呈浓度和时间依赖性.结论 选择性COX-2抑制剂塞采昔布可抑制乳腺癌细胞增殖,并促进细胞凋亡,提示COX-2可作为乳腺癌治疗的新的分子靶点,塞来昔布可作为一种新的药物来治疗乳腺癌.     

泰索帝对人乳腺癌细胞株MCF-7的抑制效应研究

目的研究泰索帝对人乳腺癌细胞MCF-7的抑制效应。方法应用流式细胞仪和免疫荧光法观察MCF-7细胞经不同剂量泰索帝作用(24 h、48 h)后,细胞凋亡率、细胞周期、微管结构的变化。结果免疫荧光染色显示0.1、1.0μg/ml泰索帝作用48 h细胞凋亡最为明显(凋亡率为37.5%,37%),5.0μg/ml作用凋亡率较以上低浓度组有所下降(22%)。流式细胞仪测定表明,泰索帝作用使大量MCF-7细胞阻滞于G2/M期,48 h后阻滞作用有所减弱。微管蛋白抗体荧光示泰索帝促进细胞内微管聚合成束,随着泰索帝剂量的增加、时间的延长,微管的聚集越明显。结论本实验结果显示泰索帝对MCF-7人乳腺癌细胞增殖有抑制作用、促进肿瘤细胞凋亡,随着剂量的增加,作用时间的延长,坏死可能成为肿瘤的主要死亡形式。     

地塞米松对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖及细胞周期的影响

目的:观察不同浓度的地塞米松(Dex) 对人乳腺癌细胞系(MCF-7) 细胞增殖、细胞周期分布及P21/WAF1表达的影响.方法:以不同浓度Dex(10-10～10-6 mol/L)处理细胞,采用活细胞计数法观察细胞增殖情况;测定碱性磷酸酶(AKP)活性;通过流式细胞仪技术,测定Dex作用后其细胞周期分布;通过蛋白印迹分析的方法检测Dex对p21/WAF1表达的影响.结果:Dex对MCF-7细胞的增殖有明显抑制作用, 10-7mol/L Dex作用5 d后活细胞计数为对照组的70%,细胞在G0/G1期停滞; Dex还可使MCF-7 细胞AKP活性增高,这种作用具有时间和剂量依赖性;Dex对p21/WAF1表达无明显影响.结论:Dex对MCF-7细胞有明显的增殖抑制作用,细胞在G0/G1期停滞.