人胃低分化粘液腺癌细胞系和克隆株体外侵袭能力的定量研究

本文对人胃低分化液液腺癌ＭＧｃ８０－３及其克隆株Ｃ２、Ｃ３、Ｃ５、Ｃ１１体外侵袭能力进行定量研究。以鸡胚心肌作为肿瘤细胞侵袭的靶器官，用半自动数字图像分析仪肿瘤细胞对其侵袭能力。结果表明：ＭＧｃ８０－３母系及其克隆株的侵袭力不同，第１天和第３天时Ｃ２、Ｃ１１的侵袭力明显高于ＭＧｃ８０－３有Ｃ３、Ｃ５，到第５和第７天时，ＭＧｃ８０－３及其克隆重株的侵袭力无明显不同。各细胞系（株）２４小时开始粘附、包     

人胃低分化粘液腺癌和克隆株体外增殖粘附能力的研究

本实验用溴化二甲噻唑二苯四氮唑（ＭＴＴ）染色，酶标仪测定人胃低分化粘液腺癌ＭＧｃ８０－３及其克隆株体外增殖力，用改良的双层琼脂法测定其克隆形成率。用体外超声粉碎机粉碎脐带静脉内皮细胞及内皮下基质后包被９６孔板、作为人造的血管壁，然后用酶标仪定量分析ＭＧｃ８０－３及其克隆株的粘附力。用扫描电镜观察肿瘤细胞粘附血管壁的形态学过程。结果显示：ＭＧｃ８０－３及其克隆株之间体外的增殖力不同。其中Ｃ１１体外增殖力最强，Ｃ３最弱；Ｃ１１干细胞数最多，Ｃ５干细胞数最少。ＭＧｃ８０－３及其克隆株Ｃ２、Ｃ３、Ｃ１１的粘附力有明显不同。其中３０ｍｉｎ时Ｃ２的粘附力最高，Ｃ５最低；６０ｍｉｎ、９０ｍｉｎ、１２０ｍｉｎ时Ｃ１１粘附力最高，Ｃ５最低。扫描电镜观察ＭＧｃ８０－３对血管内皮粘附的形态学改变，显示３０ｍｉｎ时大部分癌细胞开始粘附于内皮细胞的表面，伸出丝状伪足附着在管腔内表面，癌细胞多数是几个一起粘附；随时间延长粘附癌细胞的数量增多，癌细胞附着处内皮细胞收缩，其间的基质被粘附的癌细胞溶解形成沟壑。结果提示：同一母系及不同克隆株之间增殖力、粘附力存在异质性，增殖力、粘附力之间密切相关。另外，本实验用定量方法筛选出粘附能力较强克隆     

人单核细胞白血病细胞系SHI-1的诱导分化和凋亡

  目的 对本实验室建立的一株新的人单核细胞白血病细胞系SHI-1进行诱导分化和凋亡的研究。方法 以瑞特染色、四唑氮蓝还原试验（NBT）、流式细胞仪（FCM）检测Annexin V以及CD11b和CD14表达的改变后和DNA凝胶电泳等方法观察三丁酸甘油酯（TB）作用后SHI-1细胞的改变;以瑞特染色、FCM检测Annexin V以及CD11b和CD14表达的改变等方法观察三氧化二砷（As2O3）作用后SHI-1细胞的改变。结果 SHI-1细胞经TB处理后,可出现典型的凋亡形态学改变,部分细胞出现部分分化,NBT实验显示还原率上升,FCM结果示CD11b的表达无改变,而CD14的表达上调,Annexin V的检测结果显示SHI-1细胞经TB作用24 h后凋亡率明显上升,可见典型的DNA梯带。SHI-1细胞经As2O3作用后可见典型的凋亡形态学改变,部分细胞可见部分分化的改变,SHI-1细胞CD14的表达上调,CD11b的表达无改变,FCM检测Annexin V显示凋亡率明显上升。TPA作用24 h后SHI-1细胞基本贴壁,形态不规则,有伪足形成。结论 TB对SHI-1细胞具有诱导分化和凋亡的双向调节作用。TPA可诱导SHI-1细胞分化和贴壁。0.5 μmol／L、1.0 μmol／L和2.0 μmol／L As2O3可诱导SHI-1细胞发生凋亡和部分分化。     

人肝癌细胞诱导分化的体外研究

作者8年来选用全反式继甲酸（RA）为主要分化诱导剂，用体外细胞培养的方法，并用一系列形态学、生物学、生物化学的分子生物学的新技术和指标来研究RA对人肝癌细胞对SMMC－7721的逆转（分化诱导）作用，获得令人振奋的可喜成果。体外实验有利于药物直接作用于细胞，便于观察指     

三氧化二砷诱导人鼻咽低分化鳞癌裸鼠移植瘤细胞分化的研究

背景与目的:既往研究发现三氧化二砷(As2O3)可诱导白血病细胞的分化,但对实体瘤细胞的诱导分化作用报道甚少。本实验拟探讨As2O3对人鼻咽低分化鳞癌可移植瘤在BALB/C裸鼠体内生长的影响,重点观察其诱导鼻咽癌细胞分化的作用。方法:以人鼻咽低分化鳞癌鼠移植癌细胞株CSNE-1为研究对象,观察腹腔注射As2O3(5mg·kg-1·d-1连续10天后,每周给药3次,连续3周)对人鼻咽癌移植瘤在BALB/C裸鼠体内生长情况的影响。用光学显微镜和电子显微镜观察移植瘤细胞形态变化,用免疫组化法检测瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果:腹腔注射As2O3后,人鼻咽癌BALB/C裸鼠移植瘤生长被抑制,抑瘤率为75.4%。同时,瘤组织中癌细胞密度减少,细胞皱缩,胞浆红染,瘤组织分化渐成熟,出现角化细胞和角化珠;间质结缔组织增多。透射电镜下肿瘤细胞出现成熟分化及明显角质化,细胞表面微小突起增多,细胞间桥粒增多并以桥粒互相连接,细胞核浆比例减少,胞浆中出现大量张力原纤维并围绕核周。癌细胞PCNA在阴性对照组呈高表达,PI(PCNA阳性细胞指数)为(95.2±5.0)%,而As2O3组癌细胞PCNA表达明显减少,PI为(53.6±7.0)%(P<0.001)。结论:As2O3抑制人鼻咽低分化鳞癌BALB/C裸鼠移植瘤的生长,这种抑制作用可能与其诱导癌细胞向成熟方向分化有关     

丁酸钠对胃癌细胞株AGS增殖分化的影响及其机制

背景与目的:研究表明丁酸钠能够抑制多种肿瘤细胞增殖,诱导其分化。本实验研究丁酸钠对人胃癌细胞AGS增殖和分化的影响及其可能的作用机制。方法:用不同浓度(0～4.0mmol/L)的丁酸钠分别对AGS细胞进行处理,应用MTT法检测细胞的增殖率,光学显微镜和电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测细胞周期分布,RT-PCR和Westernblot检测细胞周期蛋白激酶抑制剂P21表达的变化。结果:不同浓度丁酸钠处理AGS细胞24～72h后,细胞增殖受到显著抑制,抑制率最高达81.54%;细胞超微结构发生明显改变;S期细胞明显减少,G1期细胞比例逐渐增多,并伴有DNA倍体的改变;p21 mRNA及蛋白水平表达显著上调。且随着时间、浓度增加,这些效应均有增强趋势。结论:丁酸钠可能通过上调细胞周期蛋白激酶抑制剂P21的表达,将细胞周期阻滞于G1期,从而显著抑制AGS细胞的增殖,并在一定程度上逆转其恶性表型。     

转染金属蛋白酶抑制剂对胃癌细胞体外侵袭能力的影响

目的：探讨基质金属蛋白酶抑制剂（ＴＩＭＰ－２）对ＳＧＣ－７９０１胃癌细胞体外侵袭能力的影响。方法：将人全长ＴＩＭＰ－２基因经脂质体包裹转染ＰＡ３１７细胞系，Ｇ４１８筛选，感染人ＳＧＣ－７９０１胃癌细胞系，经体外细胞增殖、细胞电泳率、软琼脂形成和侵袭小室的实验综合分析其生物学行为改变。结果：经ＴＩＭＰ－２基因转不的ＳＧＣ－７９０１细胞和ＭＦＣ细胞和细胞电泳率。软琼脂形成和侵袭能力均明显低于对照组，而     

人脑胶质瘤组织培养的干细胞样细胞具有体外高侵袭能力

目的:分离培养人脑胶质瘤干细胞样细胞(glioma stem-like cell,GSLC),研究其体外侵袭力。方法:选取中国医科大学第一医院神经外科2008年10月至2009年1月间住院患者手术切除的脑胶质瘤组织8例,以无血清成球培养法培养胶质瘤细胞球;免疫细胞化学实验检测其CD133的表达;荧光免疫显微镜观察其分化后胶质细胞标志物GFAP和神经元标志物TU-20的表达;matrigel侵袭实验检测其侵袭力,并与原代脑胶质瘤细胞进行比较。结果:成功分离培养出人脑胶质瘤细胞球细胞,该细胞表达干细胞标志物CD133;能自我更新与增殖;诱导分化后,GFAP和TU-20均为阳性表达,提示其为GSLC。胶质瘤细胞球细胞侵袭细胞数显著多于原代胶质瘤细胞[(261.23±87.20)vs(116.08±63.88)个,P<0.01];此外,胶质瘤细胞球细胞穿过matrigel胶后可再次聚集成球状生长。结论:成功分离培养人脑胶质瘤组织中的GSLC,其体外具有较高的侵袭力,可能参与脑胶质瘤的侵袭和转移。     

纤维连接蛋白—paxillin通路对人胃癌细胞系AGS体外侵袭力的影响

目的 研究纤维连接蛋白激活paxillin后对人胃癌细胞侵袭力的影响,探讨抑制paxillin影响胃癌细胞侵袭力的机制。方法 以递增浓度的纤维连接蛋白刺激人胃癌细胞株AGS,以免疫沉淀和蛋白质印迹法检测胃癌细胞内paxillin第118位酪氨酸（tyr-118）磷酸化的变化,同时以改良Boyden小室法检测细胞侵袭力变化。设计合成paxillin siRNA并进行效果比较,观察siRNA抑制纤维连接蛋白促胃癌细胞内paxillin tyr-118磷酸化及细胞侵袭力的改变。结果 纤维连接蛋白能促进AGS细胞 paxillin tyr-118磷酸化的增强和胃癌细胞侵袭力（P<0.05）,并在一定范围内具有剂量依赖性。siRNA干预后,胃癌细胞内paxillin tyr-118磷酸化及细胞侵袭力均有显著降低（P<0.05）。结论 纤维连接蛋白可有效增强胃癌细胞的侵袭力,paxillin tyr-118磷酸化在此过程中起关键作用,使用paxillin siRNA可以抑制纤维连接蛋白促人胃癌细胞侵袭的作用。     

75例胃粘膜活检中粘液细胞癌的临床病理分析

 本文总结分析75例活检诊断的胃粘液细胞癌，详细描述了粘液细胞癌的临床病理特征，着重讨论了胃活检粘膜中，粘液细胞癌容易漏诊或误诊的原因，并提出了需与粘液细胞癌鉴别的有关病变。通过观察和实验，本文作者支持球样异型增生是胃粘液细胞癌重要的癌前病变的观点。     

E-Cadherin在胃癌中的表达及意义

目的　探讨上皮型钙粘蛋白 (E -Cadherin ,E -Cad)的表达与胃癌的分化、浸润、淋巴结转移的关系。方法　采用免疫组化S -P法和抗E -Cad抗体对 65例胃癌及正常胃粘膜上皮组织E -Cadherin表达进行研究。结果　早期胃癌及进展期胃癌组织中E -Cadherin表达阳性率分别为 85 7%、5 0 0 % ,正常胃粘膜上皮全部表达 ,E -Cadherin的表达与癌组织分化程度及淋巴结转移密切相关 (P <0 0 1) ,与浸润深度相关 (P <0 0 5 )。结论　上皮型钙粘蛋白表达对评估胃癌的浸润、转移具有重要意义 ,检测E -Cadherin可以作为判断胃癌预后的指标     

55例胃癌组织中组织蛋白酶B的观察研究

 组织蛋白酶B(CB)为一溶酶体酶, 能降解许多细胞外基质成分。 其与许多人类及啮齿类肿瘤的生长浸润有关。 本文采用免疫组化技术使用特异的免抗人肝CB抗体来研究人胃癌组织中的CB表达情况。 结果显示:与正常胃组织相比，胃癌组织中CB的表达明显增高, 且肿瘤细胞中CB表达增加与浸润深度、生长类型及淋巴结有无转移有关, 而与组织学类型无关, 统计学上有显著性差异(P<0.05)。 提示CB在胃癌组织中的表达与肿瘤的生长浸润有关, CB在肿瘤的浸润过程中起一定的作用。     

PPARγ激活剂罗格列酮对人胃癌MGC803细胞周期及其PTEN表达的影响

目的探讨不同浓度的罗格列酮对人胃癌MGC803细胞增殖及其PTEN蛋白表达的影响。方法不同浓度的罗格列酮(12.5、25、50、100μmol/L)分别与MGC803细胞系共同培养48 h后,采用流式细胞仪检测罗格列酮对MGC803细胞周期的影响,免疫细胞化学检测MGC803细胞PTEN蛋白表达。结果罗格列酮使MGC803细胞停滞于细胞周期G1期,呈剂量依赖性,并诱导PTEN表达上调。结论罗格列酮可以通过诱导PTEN表达上调,使MGC803细胞停滞于细胞周期G1期,进而抑制人胃癌MGC803细胞生长,这可能是PPARγ激活剂抗肿瘤的机制之一。     

乙酰肝素酶的表达调节及其与胃癌侵袭转移的关系

乙酰肝素酶是目前发现的哺乳动物细胞中唯一能切割细胞外基质中硫酸乙酰肝素蛋白多糖侧链—硫酸乙酰肝素的一种葡萄糖醛酸内切酶,在肿瘤侵袭转移中起重要作用。本文就乙酰肝素酶的分子结构特点、表达调节及其在胃癌侵袭转移中的作用等方面的研究进展进行综述。     

早期胃癌的病理形态观察及组织发生学探讨

目的 探讨早期胃癌的组织发生学。方法 对１６例早期胃癌及癌周病变进行了病理形态观察。结果 其中２例为多灶性癌，占７５％（１２／１６）。同一病例的各个癌灶互不相连，且各个癌灶的分化程度及组织学类型不同。癌扣伴有没程度的萎缩性胃炎、肠上皮化生、胃腺囊及异型增生。结论 早期胃癌具有多灶性生长的特点。提示临床医生胃镜检查应注意多点取材，以防漏诊；以及正确定手术范围，防止手术残留。『     

肿瘤坏死因子-α诱导人胃癌细胞凋亡的实验研究

目的　探讨肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)对人胃癌细胞的作用及规律。方法　用不同浓度的TNF -α作用于胃癌细胞 ,48小时后 ,观察细胞生长和凋亡的情况。结果　加入不同浓度的TNF -α后 ,胃癌细胞的生长出现不同程度的抑制和凋亡 ,且TNF -α的浓度愈高 ,细胞相对抑制愈高。结论　TNF -α能诱导胃癌细胞凋亡 ,抑制细胞生长 ,并在一定的范围内存在剂量效应关系。     

胃肠免疫标志物在胃印戒细胞癌中的表达意义

[目的]探讨胃肠免疫表型标志物在胃印戒细胞癌中的表达及其与临床病理特征的关系.[方法]免疫组织化学EnVision法检测94例胃印戒细胞癌中胃免疫表型标志物MUC1、MUC5AC和肠免疫表型标志物MUC2、CD10的表达.[结果]胃肠免疫表型标志物表达水平与印戒细胞癌形态学分型无关(P＞0.05).MUC2、CD10在进展期癌中阳性表达率均显著高于早期癌,差异有统计学意义(P＜0.01).MUC1、MUC5AC在进展期癌中的阳性表达率均低于早期癌,差异有统计学意义(P＜0.05).生存分析显示,胃型印戒细胞癌5年生存率明显高于肠型和混合型印戒细胞癌(P＜0.05).[结论]胃型印戒细胞癌的生物学行为和预后均较肠型和混合型印戒细胞癌好.胃肠免疫表型标志物对胃印戒细胞癌的治疗及预后评估有一定的指导意义.     

胃癌中RUNX3蛋白表达与胃癌关系的研究

背景与目的:探讨RUNX3基因表达与胃癌发生发展和转移的关系。材料与方法:采用羊抗人RUNX3蛋白抗体和枸橼酸_微波_SP免疫组织化学方法检测胃癌标本和正常胃组织阳性细胞数及阳性率,并采用Westernblot检测胃癌中RUNX3蛋白的表达状况。结果:免疫组化结果表明RUNX3在正常胃组织中阳性率100%,在胃癌中阳性率为51.13%,两者间的差异具有统计学意义(P<0.05);RUNX3蛋白的丢失在胃癌中占48.87%,并且与胃癌的组织类型、淋巴结转移状况有关。Westernblot结果表明RUNX3在胃癌组织中表达明显低于相应正常胃组织,且高分化胃癌中RUNX3蛋白表达高于低分化胃癌。结论:RUNX3可能是胃癌发生中重要的候选抑癌基因。     

残胃癌临床X线诊断（附30例分析）

本文目的是提高对残胃癌的Ｘ线诊断水平。材料与方法：３０例残胃癌均经病理学证实，作者回顾分析了其ＧＩ表现。结果：病变发生于贲门部１８例（６０％），体部８例（２７％），吻合口４例（１３％）。互线表现：３例早期残胃癌均为隆起型，２７例进展期残胃癌分３种类型：①增生型（１７例）；②溃疡型（５例）；③浸润型（５例）。结论：作者认为，残胃癌的诊断标准有待进一步讨论；残胃癌发生率毕罗氏Ⅱ式术后高于毕罗氏互式术后；气钡双重造影是诊断残胃癌的有效方法。