器官移植的嵌合机理

移植的目的是希望移植物存活并产生免疫耐受，不需长期使用免疫抑制剂。但如何使得移植物长期存活及产生免疫耐受，其机理仍不清楚。近年来，美国学者Ｓｔａｒｚｌ等人提出了移植免疫耐受的“嵌合机理”〔１，２〕，它使人们对移植免疫的一些问题有了更新的认识。１嵌合...     

肾移植术后受者体内微嵌合状态的研究

目的:探讨肾移植术后受者体内微嵌合状态与移植肾功能、排斥反应之间的关系.方法:采用对人类性别决定基因SRY扩增的巢式PCR方法,对接受79例男性供肾的女性肾移植患者外周血的微嵌合进行检测分析.结果:总的微嵌合发生率为55.70%(44/79),其中移植后6个月内微嵌合的发生率为35.71%,6～18个月内发生率为46.67%,18个月以上发生率为71.43%.10例患者术后14 d至6个月连续观察发现微嵌合的出现呈波纹式动态变化.嵌合阳性患者的排斥反应发生次数明显少于嵌合阴性患者(P＜0.05),但二者血肌酐值差别无显著性(P＞0.05).结论:微嵌合阳性患者的排斥反应发生率明显降低.     

器官移植术后引流管护理的探讨

器官移植越来越广泛地应用与临床。成功的手术关系到各个环节的密切合作。做好器官移植病人的护理工作直接关系到手术的成败 ,而做好引流管护理也是护理工作中至关重要的一环 ,我院 2 0 0 1年 1月～ 2 0 0 2年 4月行器官移植 133例 ,现将其引流管护理工作报道如下。1　临床资料133例患者中 ,肝移植 3例 ,术后平均管道 5条 ;胰肾联合移植 1例 ,术后管道 13条 ;肾移植 12 9例 ,术后平均管道 2～ 3条。除 1例肝移植患者空肠引流管检有白色念珠菌外 ,其余均外无发生感染和意外 ,均能如期顺利地拔除各引流管。2　护理措施2 .1　心理准备　术前多…     

器官移植术后肺部感染病原学分析

目的：探讨器官移植术后肺部感染原学特点。方法：对37例器官移植术后肺部感染患者的临床资料进行回顾性分析。结果：术后第一个月多为医院内获得性细菌感染，第2－6个月多为病毒感染和机会病原体感染，6个月后感染谱与社区相似。结论：临床医生应当了解器官移植后肺部感染的的谱并采取适当的处理措施。     

器官移植术后曲霉菌感染致死4例

1　临床资料　 2 0 0 0 / 2 0 0 1西京医院器官移植后死亡患者 4例 ,其中 ,心脏移植 3例 ,小肠移植 1例 ;肝功能变化 :在 4例器官移植患者中 ,AL T值增高 1例 ,AST值增高 3例 ,AL P值增高 4例 ,GGT值增高 4例 ,检测值的增高幅度不大 ;心功能变化 :在 3例心脏器官移植患者中 ,L DH值、CK值和 HB-DH值均有明显的增高 ,超出正常参考值的 5～ 10倍以上 ;肾功能变化 :在 4例器官移植患者中 ,BU值、CRE值和 U A值均有明显的增高 ,超出正常参考值的 10～ 2 0倍以上 ;痰液涂片结果 :4例患者的痰液中均发现有真菌孢子 ;痰液培养结果 :痰…     

器官移植术后带状疱疹治疗的临床研究

目的探讨半导体激光联合药物治疗器官移植术后带状疱疹的有效方法。方法将42例器官移植术后并发带状疱疹的患者随机分为治疗组和对照组,对照组21例给予更昔洛韦静脉滴注,维生素B1、维生素B12肌注;治疗组21例除给予对照组相同药物外,同时加用半导体激光照射皮损处,每日1次。两组疗程均为10天,观察记录水疱结痂时间、疼痛缓解时间及疼痛基本消失时间。结果治疗组的疼痛缓解时间、止疱时间、结痂时间均明显短于对照组（P〈0.05）,总有效率明显高于对照组。结论半导体激光联合药物治疗器官移植术后带状疱疹起效快,疗效显著。     

肾移植30例术后微嵌合监测方法的比较

目的：比较肾移植术后微嵌合体检测的不同方法，并对其在肾移植术后微嵌合体监测中的合理应用进行探讨。方法：对30例接受男性供肾移植的女性受者进行检测，聚合酶联反应方法测定人性别决定基因(PCR—SRY)、聚合酶联反应-序列特异性寡核苷酸探针杂交方法测定人类自细胞抗原(HLA)-DQA分型(PCR—SSOPH—HLA—DQA)、序列特异性引物聚合酶联反应方法测定HLA—DR分型(PCR—SSP—HLA-DR)微嵌合体，比较其灵敏度、阳性检出率(敏感性)及费用。结果：经稀释实验对比PCR—SRY的灵敏度高于另外2种方法；微嵌合体总阳性检出率3种方法分别为PCR—SRY63％；PCR—SSOPH—HLA—DQA56．6％；PCR—SSP-HLA—DR43．3％；所耗费用PCR-人性别决定基因(PCR—SRY)最低，PCR-SSOPH—HLA—DQA最高。结论：3种方法均可用于肾移植术后微嵌合体的监测，接受男性供体的女性受者微嵌合体监测方法首选PCR-SRY，而男性受者肾移植术后微嵌合体监测以选择PCR—SSP—HLA—DR方法为宜。     

器官移植术后患者心理健康及影响因素研究进展

当今我国已经成为世界上第二移植大国,并且随着器官移植的种类和数量的不断增加,移植技术的不断进步,关于器官移植的研究也呈现多方向的发展[1]。与此同时器官移植术后的心理问题逐渐成为公众关注的焦点,随着生物-心理-社会医学模式的转变,患者术后的心理健康也必将成为评价器官移植成败的指标之一。以下对器官移植术后心理健康现状简要分析。     

器官移植术后受者人巨细胞病毒的PCR检测

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对３０例器官移植受者血，尿标本进行人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ检测。结果显示，１６例ＨＣＭＶＤＮＡ阳性，阳性率５３．３％，提示ＰＣＲ是一种敏感特异，简便快速，能早期诊断ＨＣＭＶ感染的方法，适用于监视器官移植病人术后ＨＣＭＶ感染。     

异基因干细胞移植患者基因状态研究

目的：应用PCR-STR技术,研究干细胞移植患者外周血、口腔黏膜上皮细胞及毛根的基因型变化。方法：对44例干细胞移植患者的血液、口腔拭子及毛根进行分型。结果：44例患者移植后外周血检出单一供者基因分型,毛根均检出单一受者基因分型,口腔黏膜上皮细胞有16例检出单一受者的基因分型,28例检出供者、受者的混合基因分型。结论：移植后外周血干细胞可以转变为口腔黏膜上皮细胞,这对干细胞治疗各种血液恶性疾病及法医学应用具有较高的参考价值。     

异基因造血干细胞移植中嵌合体的STR-PCR定量检测

目的:研究异基因造血干细胞移植后供者单个核细胞、CD3+T细胞、CD15+粒细胞植入情况。方法:采集22例清髓性外周血干细胞移植患者移植前及移植后不同时间的骨髓标本,应用免疫磁珠进行CD3+T细胞、CD15+粒细胞分选,常规提取DNA,PCR扩增后,进行毛细管电泳,确定基因位点及峰面积,计算供者嵌合率。结果:22例患者均在中位时间+12d(+9d～+15d)造血恢复。骨髓单个核细胞在+7d时供者嵌合率为70%,+14d供者嵌合率均超过90%,+21d和+28d供者嵌合率均超过95%以上。CD15+粒细胞在+7d时嵌合率为40%,在+14d、+21d和+28d供者嵌合率>95%。CD3+T细胞在+7d、+14d、+21d和+28d供者嵌合率分别为65%、80%、84%和90.9%。移植后早期完全嵌合组急性GVHD发生率高于混合嵌合组。结论:在+28d3群细胞均可达到供者完全嵌合状态。定量检测对判断早期植入、预测复发,指导临床干预治疗具有重要意义。     

Quantitative assessment of hematopoietic chimerism by quantitative real-time polymerase chain reaction of sequence polymorphism systems after hematopoietic stem cell transplantation

Background  Analysis of changes in recipient and donor hematopoietic cell origin is extremely useful to monitor the effect of hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) and sequential adoptive immunotherapy by donor lymphocyte infusions. We developed a sensitive, reliable and rapid real-time PCR method based on sequence polymorphism systems to quantitatively assess the hematopoietic chimerism after HSCT.

Methods  A panel of 29 selected sequence polymorphism (SP) markers was screened by real-time PCR in 101 HSCT patients with leukemia and other hematological diseases. The chimerism kinetics of bone marrow samples of 8 HSCT patients in remission and relapse situations were followed longitudinally.

Results  Recipient genotype discrimination was possible in 97.0% (98 of 101) with a mean number of 2.5 (1–7) informative markers per recipient/donor pair. Using serial dilutions of plasmids containing specific SP markers, the linear correlation (r) of 0.99, the slope between −3.2 and −3.7 and the sensitivity of 0.1% were proved reproducible. By this method, it was possible to very accurately detect autologous signals in the range from 0.1% to 30%. The accuracy of the method in the very important range of autologous signals below 5% was extraordinarily high (standard deviation <1.85%), which might significantly improve detection accuracy of changes in autologous signals early in the post-transplantation course of follow-up. The main advantage of the real-time PCR method over short tandem repeat PCR chimerism assays is the absence of PCR competition and plateau biases, with demonstrated greater sensitivity and linearity. Finally, we prospectively analyzed bone marrow samples of 8 patients who received allografts and presented the chimerism kinetics of remission and relapse situations that illustrated the sensitivity level and the promising clinical application of this method.

Conclusion  This SP-based real-time PCR assay provides a rapid, sensitive, and accurate quantitative assessment of mixed chimerism that can be useful in predicting graft rejection and early relapse.

     

STR-PCR半定量检测嵌合体方法在异基因造血干细胞移植中的应用

目的:应用短串联重复序列-聚合酶链反应(STR-PCR)半定量方法检测异基因造血干细胞移植后供者细胞比例并探讨其临床意义。方法:给30例接受移植的患者行移植后嵌合体检测,采集外周血提取DNA,对9个STR位点行聚合酶链反应扩增,扩增完成后行聚丙烯酰胺凝胶电泳及硝酸银染色显影,再计算嵌合率。结果:30例患者均检测到供者细胞,24例达到完全嵌合(CC),6例形成混合造血(MC)。在移植后14 d,稳定植入的患者多数表现为CC。CC组的aGVHD发生率高于MC组,7例患者在复发前检测到嵌合率(donor cell,DC)下降,经相应免疫治疗后有3例达到CC。结论:监测异基因造血干细胞移植后嵌合率的动态变化过程,PCR-STR是一种简单经济的方法,可根据嵌合状态指导个体化免疫治疗,对患者的长期存活有重要意义。     

肾移植器官保存研究进展

维持器官保存期间供肾的活力是器官移植成功的前提条件和根本保障。目前，单纯低温保存仍是各大器官移植中心首选且最常用的保存方法。随着供体需求量的增加，越来越多的老年供体和边缘供体被用于临床，这对传统的器官保存方法提出了更高的要求。该文着重对肾移植器官保存液及器官机械灌注的最新进展进行综述。     

异基因造血干细胞移植后嵌合状态的追踪监测

目的:应用荧光标记短串联重复序列(STR)复合扩增技术,探讨多个STR基因座在异基因造血干细胞移植后嵌合体状态评估中的作用.方法:对31例移植后患者进行追踪检验,分别PCR复合扩增各病例组常染色体9个STR基因座和Amelogenin基因座,扩增产物经DNA自动分析仪分离后,GeneScan扫描,Genotyper分型.结果:7例患者血由第1次检验结果与供者STR分型一致变为混合型,4例死亡,3例复发;4例患者血由第1次检验结果与供者一致变为受者自身型,均死亡;1例患者血由混合型变为与供者STR分型一致,无复发;1例患者血两次检验均为混合型,已死亡;其余18例患者血均与供者血STR分型一致,其中16例目前预后较好,2例已死亡.结论:复合扩增STR基因座具有较高的个体识别力,检测灵敏、准确、快速,在对异基因造血干细胞移植患者的植入情况进行动态检测的研究中有用,对移植物植入或被排斥、疾病复发均有预警作用,同时必须结合临床症状,及时地进行STR检测,以便于早期实施临床干预治疗.     

大小鼠之间造血干细胞嵌合体抗异种移植物抗宿主病

目的探讨克服异种骨髓移植间强烈的移植物抗宿主病(GVHD)的措施。方法(1)将12只SD大鼠经5.0 Gy亚致死剂量全身照射后,4 h内每只经尾静脉输入28只正常BALB/c小鼠骨髓细胞8×107个。2 d后从腹腔注射环磷酰胺(Cy)100 mg/kg·b.w.,诱导形成对BALB/c小鼠产生特异性免疫耐受的嵌合体大鼠10只。(2)24只BALB/c小鼠接受9.0 Gy致死剂量全身照射后随机均分为3组,照射后4 h内经尾静脉注射骨髓细胞进行移植。A组输注正常SD大鼠的骨髓细胞4×107个;B组输注正常SD大鼠的骨髓细胞4×107个和脾细胞2×107个;C组输注嵌合体SD大鼠的骨髓细胞4×107个和脾细胞2×107个;观察GVHD的发生情况。结果A组有2只小鼠死于感染和放射损伤,所有对象均未观察到明显GVHD表现。B组平均累积存活时间为10 d[95%可信区间为(8,12)],死前均出现不同程度的典型GVHD表现。而C组除2只小鼠分别于移植后18、31 d死亡外,其余的均存活超过150 d。三组间比较有统计差异(P<0.002)。结论对有受者嵌合体的供者进行异种骨髓移植,有助于克服异种移植物抗宿主病。     

多器官联合移植的免疫抑制治疗

目的　探讨多器官联合移植术后的免疫抑制治疗方法。方法　对 2例 1型糖尿病并发尿毒症患者施行改良式胰液肠腔引流式胰、十二指肠及肾一期联合移植 ;1例高龄酒精性肝硬化终末期并发慢性肾功能不全尿毒症患者和 1例肝硬化肝功能衰竭肝移植术后移植肝、肾功能衰竭患者施行一期肝肾联合移植 ;1例慢性乙型病毒性肝炎、肝硬化、原发性肝细胞肝癌合并胰岛素依赖型糖尿病患者施行同期原位肝 -异位胰十二指肠联合移植术。术后采用抗胸腺淋巴细胞球蛋白 (ATG)、抗CD2 5单克隆抗体诱导 ,他克莫司 (FK5 0 6 )、霉酚酸酯 (MMF)及激素三联维持治疗。结果　 5例患者术后移植物功能恢复良好 ,其中 1例胰肾联合移植患者术后出现 1次FK5 0 6导致的肾中毒 ,1例肝肾联合移植患者和肝胰联合移植患者术后发生 1次急性排斥反应 ,分别经调整药物剂量和抗排斥治疗后逆转。目前 5例患者全部存活 ,移植物功能正常。结论　多器官联合移植术后采用ATG、抗CD2 5单克隆抗体诱导 ,FK5 0 6、MMF及激素三联维持治疗是安全有效的 ,用药期间应监测移植物功能和FK5 0 6的血药浓度 ,防止排斥反应和FK5 0 6中毒。     

肾脏移植物血管内皮细胞嵌合现象预后观察

目的:用荧光原位杂交方法(FISH)观察移植肾中血管内皮细胞被受体内皮细胞替代(内皮嵌合)的现象,并分析内皮嵌合对肾脏移植物预后的影响。方法:移植后2周到4个月男性供者、女性受者的移植肾穿刺活检标本34例,选择Y染色体长臂Yq12区域(异染色质区)DNA片段作为探针,同时选择X染色体着丝粒区(α卫星DNA)探针作为对照,通过在石蜡切片标本上进行间期细胞双色荧光原位杂交,分析血管内皮细胞被受体替代的现象,分析其对移植肾预后的影响。结果:肾脏移植物中血管内皮细胞嵌合现象较普遍存在,内皮细胞的分布呈灶状,供者内皮细胞和受体内皮细胞可相邻存在。血管内皮细胞嵌合的发生与否移植肾1年血清肌酐值分别为(115.88±25.06)μmol/L,(118.16±18.85)μmol/L,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:肾脏移植物中血管内皮细胞可以被受者来源的内皮细胞所替代,对移植后1年的肾功能无明显影响,内皮嵌合对移植肾的长期存活的影响有待进一步观察。     

调节性树突状细胞治疗在器官移植应用

树突状细胞(DCs)是一种具有较强可塑性的抗原递呈细胞,可通过不同的方法“程序化”DCs而达到致耐受原特性。近来有资料显示药理学调控DCs可产生强有效的调节性DCs。文章对调节性DCs研究进展及其在器官移植方面的临床应用作一综述。