急性冠状动脉综合征患者树突状细胞介导的热休克蛋白60特异性细胞毒作用

目的:探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者体内是否存在树突状细胞(DC)介导的热休克蛋白60(HSP60)特异性的T细胞毒反应。方法:分离ACS患者(ACS组),稳定性心绞痛(SA)患者(SA组)和正常人(对照组)外周血单核细胞,制备DC。流式细胞仪检测HSP60负载及未负载的DC CD86的表达及各组T细胞中CD45RO+细胞的百分比;二氮唑法(MTT)法检测各组DC刺激自体淋巴细胞增殖的能力,并检测各组DC诱导的细胞毒T细胞(CTL)对负载HSP60的人脐静脉内皮细胞(HUVECS)的杀伤活性;酶联免疫吸附法(ELISA)测定HSP60冲击T细胞后干扰素γ的分泌。结果:与未负载HSP60的SA组和对照组的DC比较,ACS组的DC以及负载HSP60对照组的DC CD86表达较高;ACS 组的DC及HSP60负载的DC刺激自体细胞毒T细胞增殖的能力增强;ACS组的DC及HSP60负载的DC诱导的细胞毒T 细胞对负载HSP60的人脐静脉内皮细胞有高度的杀伤作用;ACS患者体内存在HSP60致敏的记忆性T细胞。结论:ACS患者体内存在强烈的DC介导的HSP60抗原特异性T细胞毒反应。     

树突状细胞在大肠癌免疫治疗中的应用

树突状细胞(DC)是最有效的抗原提呈细胞，在触发和调节免疫反应、产生免疫应答方面起重要作用。造血干细胞在分化成为DC后，主要分布于外周非淋巴组织，进一步分化成具有诱发免疫应答或免疫耐受的DC。DC摄取并提呈肿瘤相关抗原(TAA)给初始T细胞，T细胞活化后通过识别TAA产生特异性主动免疫，杀伤肿瘤细胞。大肠癌作为恶性肿瘤的一种，可以利用其特异性表面抗原作为TAA，诱导主要组织相容性复合体(MHC)限制性细胞毒反应，产生杀瘤细胞作用。临床前和临床研究证明以DC为基础的主动性免疫治疗在大肠癌手术后微小残存病和控制肿瘤生长方面发挥了一定作用。     

致耐受性树突状细胞和调节性T细胞在支气管哮喘中的作用

支气管哮喘是树突状细胞(dendritic cells,DC)介导的以辅助性T细胞2(T-helper type2,Th2)优势免疫为特征的气道炎症性疾病,DC在变应原触发哮喘的始动环节中发挥中心作用.调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是一种特殊的T细胞,能够通过多种机制影响DC和效应性T细胞,从而发挥免疫抑制作用.DC不仅对入侵病原体产生免疫应答,而且对无害物质维持免疫耐受.这些具有致耐受性的DC通过多种不同的路径诱导Treg,上调Treg数目和(或)功能,从而抑制免疫应答.应用致耐受性DC作为靶点,有望为哮喘免疫治疗开辟新的途径.     

树突状细胞与l型糖尿病

树突状细胞(DC)是体内最主要的抗原提呈细胞。对DC在l型糖尿病发病机制中的作用有促进和预防两种不同看法。当前研究认为。DC是一种生物特性及功能多样性细胞。在l型糖尿病发病过程中，不同类型DC、不同生理状态的DC以及DC所处微环境的不同，将影响其表达双信号的能力和诱导辅助性T细胞(Th细胞)分化的方向。进而对免疫耐受和免疫平衡的调节发挥不同作用。本文就此作一综述。     

胰腺癌细胞总RNA转染树突细胞与胰腺癌-树突融合细胞激发特异性细胞毒T淋巴细胞能力的比较研究

目的比较人胰腺癌MiaPaCa-2细胞总RNA电转染树突细胞(Dendritic Cell,DC)与DCMiaPaCa-2融合细胞体外激发抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(Cytotoxic T Lymphocyte,CTL)能力的差异。方法自6例胰腺癌患者外周血单核细胞中分离、培养DC。使用电穿孔法将MiaPaCa-2细胞总RNA转染DC,使用细胞融合方法将胰腺癌MiaPaCa-2细胞抗原负载DC,以未负载抗原的DC为对照。使用流式细胞术(FCM)检测PE-MUC/FITC-CD86抗体双标细胞评估融合效率;四甲基偶氮唑盐(MTT)检测转染各组DC存活率;混合细胞培养法评价各组DC体外刺激自体T淋巴细胞增殖能力;ELISA法检测各组DC体外激发抗原特异性CTL因子释放量。结果采用PEG-DMSO诱导的DC与MiaPaCa-2的融合细胞同时表达DC表型和MUC1分子,CD86与MUC1双阳性表达率为(42.3±7.30)%;融合细胞组DC存活率呈时间依赖性下降,转染后96h的存活率降低至62.81%,而MiaPaCa-2总RNA转染组DC细胞存活率稳定在85%左右,两组间差异有统计学意义(P0.05);转染MiaPaCa-2总RNA DC刺激自体T细胞增殖指数(DC:T=1:10)为8432±611.25,显著高于DC-MiaPaCa-2融合细胞(DC:T=1:10)5672±107.51(P0.05);且MiaPaCa-2总RNA转染DC激发特异性CTL分泌IL-12p70、IL-10和IFN-γ细胞水平亦显著异于DC-MiaPaCa-2融合细胞(P0.05)。结论胰腺癌细胞总RNA转染DC较胰腺癌-树突融合细胞有更强的体外抗原特异性CTL激发能力。     

多发性骨髓瘤细胞免疫功能的研究

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者细胞免疫功能变化及其临床意义。方法采用流式细胞术检测天津医科大学总医院2008年1月至2009年12月住院诊疗的40例MM患者T细胞亚群、树突状细胞(DC)、效应性T细胞、辅助性T细胞(Th)及调节性T细胞数量变化,分析MM患者细胞免疫指标与血红蛋白(Hb)、β2微球蛋白(β2-MG)、白蛋白、血清肌酐及血清钙的相关性。结果与对照组相比,初诊组CD4+/CD8+、DC1/DC2、CD8+CD25+/CD3+T细胞的比值均降低;Th1/Th2比值显著降低(P0.05);CD4+CD25+/CD3+T细胞的比值升高(P0.01)。与初诊组相比,化疗后MM患者CD4+/CD8+、DC1/DC2及Th1/Th2比值显著升高(P0.05)。CD8+CD25+/CD3+T的比值升高。与稳定期MM患者相比,进展期患者CD4+/CD8+、DC1/DC2、Th1/Th2及CD8+CD25+/CD3+T均降低,CD4+CD25+/CD3+T升高。CD4+/CD8+、DC1/DC2及Th1/Th2降低的MM患者,同时伴有β2-MG和肌酐升高(P0.01),血红蛋白降低(P0.01),白蛋白及血清钙降低。CD4+CD25+/CD3+T及CD4+CD25+CD127low/CD4+T升高的MM患者,伴有β2-MG和血清肌酐上升,血红蛋白和白蛋白降低。结论 MM患者T细胞亚群、DC、辅助性T细胞及效应性T细胞均有不同程度数量减少和功能下降,调节性T细胞相对数量增多,这些异常和MM病情及预后相关。     

绿脓杆菌菌毛制剂(佰安)免疫效能的实验研究

目的 研究绿脓杆菌菌毛制剂(佰安)对机体的免疫刺激作用。方法 用流式细胞术检测佰安对慢性HBV感染者外周血树突状细胞(DC)表面分子的影响以及佰安对T细胞的活化作用。结果 佰安在体外对CD11c^ 型DC的细胞数有促进作用，而与HBsAg联用后，其表达CD11c^ 、CD80^ 、CD86^ 型DC的细胞数增加更加显著。结论 佰安与HBsAg联用可增强DC的抗原提呈能力，活化T细胞，诱导细胞的免疫反应，可望作为治疗慢性乙型肝炎的药物之一。     

树突状细胞与肺部疾病关系研究现状

树突状细胞(DC)是功能最强的抗原呈递细胞(APC).与其他APC如巨噬细胞、B细胞相比,DC具有独特的刺激处女(naive)型T细胞的能力.DC在启动免疫方面及决定免疫走向方面起着关键作用.肺部DC主要存在于气道和靠近肺泡的间质中.许多肺部疾病与DC有关.本文综述DC在肺部的分布,DC的成熟和功能,DC与T、B淋巴细胞,以及DC与哮喘、肺部肿瘤、支气管扩张等肺部疾病的关系,其中重点综述DC与哮喘的关系.     

白血病抗原冲击致敏的树突状细胞诱导的抗肿瘤免疫反应

目的：研究树突状细胞(DC)的体外培养扩增及诱导特异性的抗肿瘤免疫反应。方法：使用mGM-CSF加mIL-4培养诱导骨髓细胞分化，采用反复冻融法制备L7212白血病细胞的冻融抗原(TAA)，在DC培养的第3天加入TAA，将TAA冲击致敏的DC与T淋巴细胞共培养，获得肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)，采用MTT法检测CTL对L7212细胞的杀伤作用及其对野生型L7212细胞再攻击的免疫保护作用。结果：MTT检测发现CTL对L7212细胞有特异性杀伤抑制作用，L7212抗原冲击致敏的DC能显著提高和延长野生型L7212细胞再攻击小鼠的生存率和存活期。结论：mGM-CSF和mIL-4配伍可有效地从小鼠骨髓细胞中诱导出大量的成熟的功能性DC，L7212白血病TAA冲击致敏的DC可诱导机体产生较强的抗肿瘤免疫反应。     

负载肿瘤抗原的DC体外诱导抗肿瘤免疫反应的实验研究

目的 研究自体及同种异体树突状细胞(DC)体外负载肿瘤抗原后刺激T淋巴细胞增殖及诱导抗肿瘤免疫反应的能力.方法 利用细胞因子诱导人骨髓单个核细胞生成DC,尼龙毛柱法分离T淋巴细胞,3H-TdR掺入法检测负载肺癌细胞凋亡小体的自体及同种异体DC体外刺激T细胞增殖反应,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测负载肺癌细胞凋亡小体的自体及同种异体DC刺激的T细胞对肺癌细胞和乳腺癌细胞系MCF-7的杀伤作用.结果 骨髓细胞诱生的自体及同种异体DC负载肿瘤抗原后,均具有刺激T淋巴细胞增殖的能力,负载肿瘤抗原的自体及异体DC激活的T淋巴细胞后均可杀伤两种靶细胞,T细胞对MCF-7的杀伤力明显低于对患者肺癌细胞的杀伤力. 结论人自体或异体DC体外负载细胞性肿瘤抗原后,可有效地刺激T淋巴细胞的增殖,产生特异性肿瘤杀伤作用.