盐酸多柔比星脂质体注射液犬体内药物动力学研究

目的研究Beagle犬静脉滴注多柔比星脂质体注射液后,犬体内脂质体包合多柔比星(L-DOX)、游离多柔比星(F-DOX)和多柔比星总量(T-DOX)药动学特点。方法采用甲醇沉淀蛋白处理血浆样品以纯化血浆中T-DOX;采用固相萃取分离血浆中L-DOX和F-DOX。采用LC-MS/MS方法测定处理后样品中T-DOX、L-DOX、F-DOX浓度。结果 Beagle犬静脉滴注多柔比星脂质体注射液0.3、1.0和2.0 mg·kg~(-1)后,犬体内T-DOX的ρ_(max)分别为4.35、18.84和29.92 mg·L~(-1);AUC_(0-t)分别为144.0、546.7和1204 mg·h·L~(-1);L-DOX的ρ_(max)分别为4.77、19.93和32.17 mg·L~(-1);AUC_(0-t)分别为153.9、574.7和1 294 mg·h·L~(-1);F-DOX的ρ_(max)分别为13.00、26.53和40.70μg·L~(-1);AUC_(0-t)分别为158.2、445.2和1171μg·h·L~(-1)。结论犬给予盐酸多柔比星脂质体注射液后,血浆中主要存在形体为L-DOX。在0.3～2.0 mg·kg~(-1)剂量范围内,犬体内N-DOX和F-DOX均呈线性药动学特征。     

唾液酸修饰盐酸多柔比星脂质体的药效学考察

目的考察唾液酸(sialic acid,SA)修饰盐酸多柔比星(doxorubicin hydrochloride,DOX)脂质体的肿瘤治疗效果。方法分别制备普通DOX脂质体、聚乙二醇化的DOX脂质体和SA修饰DOX脂质体,并以质量分数5%葡萄糖注射液和DOX溶液为对照,考察了3种脂质体对S180荷瘤小鼠的肿瘤治疗作用。结果 SA修饰DOX脂质体的肿瘤抑制率最高,为97.77%,与其他制剂比较具有极显著差异(P<0.01)。结论 SA修饰脂质体能够使DOX更大程度地发挥抗肿瘤作用,具有较好的临床应用前景。     

硫化氢对多柔比星致心肌细胞凋亡的保护作用

目的:研究硫化氢对多柔比星引起的心肌细胞凋亡的保护作用及其机制.方法:以硫氢化钠(NaHS)作为供体,先用不同浓度NaHS处理心肌细胞,再加入多柔比星(DOX)致其凋亡.应用胎盘蓝染色测量细胞的存活率;应用Annexin V和PI双染流式术检测其凋亡情况;应用比色法检测凋亡相关蛋白CASPASE-3和CASPASE-9的活性.结果:分别以DOX(5μmol·L-1)+ NaHS(50μmol·L-1)、DOX(5μmol·L-1)+ NaHS(100 μmol·L-1)、DOX(5μmol·L-1)+ NaHS( 200 μmol·L-1)浓度处理的各组细胞存活率均较单用DOX组(5μmol·L-1)增高;以DOX(5μmol ·L -1)+ NaHS(200 μmol·L-1)处理的细胞凋亡率较单用DOX组(5μmol·L-1)降低,以DOX(5μmol·L-1)+ NaHS(200μmol·L-1)处理的细胞的caspase-3和caspase-9活性较单用DOX组(5μmoloL-1)降低,各项指标差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:硫化氢可以保护DOX引起的心肌细胞损伤,抑制DOX引起的心肌细胞凋亡.     

HPLC法测定载多柔比星氧化石墨纳米粒中的药物含量

摘 要 目的:建立氧化石墨（Graphene Oxide,GO）纳米粒中多柔比星 (Doxorubicin,DOX)含量测定的高效液相色谱方法。方法: 采用DiamonsilTM ODS-C¹⁸色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为十二烷基硫酸钠（SDS）溶液(2.88 g·L^-1)-乙腈（1∶1）,加入0.5 ml·L^-1三乙胺和4 ml·L^-1磷酸;流速1.0ml·min^-1;检测波长254 nm。结果:制剂中辅料对DOX含量的测定无干扰,DOX的质量浓度在1～100 μg·ml^-1内线性关系良好（r =0.999 8）,平均加样回收率为100.03%（RSD=1.5%,n=9）。GO纳米粒中DOX载药量高达2.35 mg·mg^-1。结论:含量测定方法准确可靠、简单易行,可用于氧化石墨纳米粒中多柔比星的含量测定。     

HPLC测定多柔比星壳寡糖硬脂酸胶团中药物的含量

目的采用高效液相色谱法测定壳寡糖硬脂酸嫁接物胶团（CSO-SA）中的多柔比星（DOX）的含量。方法采用Shim-pack VP-ODS色谱柱（150mm×4.6mm,5μm）,以0.01mol·L^-1的十二烷基硫酸钠溶液-乙腈-甲醇（50∶50∶6）为流动相,内含0.6‰（v/v）的磷酸,流速1.0mL·min^-1,检测波长254nm,柱温25℃。结果多柔比星在0.4～8μg·mL^-1时,浓度与峰面积呈良好的线性关系,Y=52.926X-3.761（r=0.9999,n=3）,定量限为（0.05±0.014）μg·mL^-1（S/N〉10,n=3）。高、中、低三个浓度的日内RSD为1.82%、0.86%、0.65%,日间RSD为1.73%、0.88%、0.75%,平均加样回收率为（99.38±1.22）%。结论本测定方法操作简便,结果准确。     

盐酸多柔比星脂质体注射液在Beagle犬体内的药动学及血红蛋白结合研究

目的研究盐酸多柔比星脂质体注射液在Beagle犬体内的药动学及多柔比星与血红蛋白的结合情况。方法 Beagle犬按1.0 mg·kg-1静脉滴注盐酸多柔比星脂质体注射液,不同时间点采集血样。采用LC-MS/MS法分别测定全血及血浆中药物浓度,应用Win Nonlin 6.4计算分析软件计算其主要药动学参数;并采用体外方法分别研究游离多柔比星及多柔比星脂质体与血红蛋白的结合情况。结果 Beagle犬静脉滴注盐酸多柔比星脂质体注射液后,全血及血浆中药物含量相近。游离多柔比星在质量浓度为0.500和10.0 mg·L-1时,犬平均血红蛋白结合率分别为66.09%和62.35%。多柔比星脂质体在质量浓度为0.500和10.0 mg·L-1时,不与血红蛋白结合。结论 Beagle犬静脉滴注盐酸多柔比星脂质体注射液后,在血循环中驻留时间较长。药物主要分布在血浆中,与血红蛋白结合微弱。     

载多柔比星PEG-PLGA纳米胶束制备及其抗三阴性乳腺癌作用

目的制备载多柔比星(Dox)聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸(PEG-PLGA)纳米胶束,并研究其抗三阴性乳腺癌作用。方法以D,L-丙交酯和乙交酯为原料,采用本体聚合法合成PEG-PLGA共聚物,通过透析法制备Dox-PEG-PLGA纳米胶束;核磁共振1HNMR对其结构进行表征;透射电子显微镜观察纳米粒形态;激光粒度仪测定平均粒径、粒径分布;紫外分光度法测定纳米粒的载药率、包封率及体外释放;MTT法评价Dox-PEG-PLGA对鼠TNBC细胞4T1的细胞毒性,并通过流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测药物内吞。结果制备的纳米胶束呈圆形,大小较为均一,平均粒径约为135 nm,载药率为(9.70±0.33)%,包封率为(71.63±1.33)%;且工艺重现性良好,在96 h下呈现缓慢释放。Dox和Dox-PEGPLGA 24 h半数抑制浓度(IC50)分别为2.355 428和14.446 3μg·mL~(-1)。结论 Dox-PEG-PLGA纳米胶束具有较小的粒径、良好的缓释性能并能显著提高抗肿瘤效能。     

高效液相色谱法测定果蔬中残留的噻苯咪唑、邻苯基苯酚及联苯

目的:建立同时测定果蔬中残留的噻苯咪唑(TBZ)、邻苯基苯酚(OPP)及联苯(DP)的 HPLC 法,并对乌鲁木齐地区部分高档水果中保鲜剂的残留状况进行初步评估。方法:在碱性条件下,用乙醚提取果蔬中 TBZ、OPP 及 DP 3种保鲜剂,以甲醇-乙腈-5 mmol·L~(-1)十二烷基磺酸钠溶液(磷酸调 pH:4.5)(55:10:35)为流动相,流速1.0 mL·min~(-1),荧光检测(λ_(ex)=285nm,λ_(em)=320 nm),进样量10μL。结果:TBZ、OPP 及 DP 的线性范围分别为0.01～8,0.007～10,0.01～20μg·mL~(-1);相关系数均大于0.999;最低检测限分别为0.01,0.007,0.01 μg·mL~(-1);平均回收率为71.4%～93.2%;RSD 为0.6%～6.5%。结论:本实验建立的 HPLC-荧光检测,方法准确可靠,适合于果蔬中噻苯咪唑、邻苯基苯酚及联苯残留的测定。     

二甲双胍通过改善自噬功能障碍保护多柔比星诱导的心肌细胞损伤

目的 探讨二甲双胍(metformin,Met)保护DOX诱导的心肌损伤的作用机制。方法 (1)H9C2细胞经0.1～10 mmol·L^-1Met预处理后加入1μmol·L^-1 DOX处理24 h,MTT法检测细胞存活率,Annexin V-PI染色后流式细胞技术检测细胞凋亡率,使用ROS试剂盒检测细胞内ROS蓄积情况;(2)使用Western blotting检测0.1,0.3,3 mmol·L^-1 Met对DOX激活自噬水平的调节作用,并使用25μmol·L^-1 AG-126考察ERK信号通路调节DOX诱导心肌细胞损伤中的作用;(3)10 nmol·L^-1BafA1用于探索Met恢复DOX阻断心肌细胞自噬流的研究,流式细胞技术检测吖啶橙细胞内溶酶体pH的变化。结果DOX(1μmol·L^-1)的接触会使H9C2细胞的存活率显著下降(P<0.05),同时心肌细胞内ROS累积增加(P<0.05),凋亡细胞比例升高(P<0.05),不同浓度的...     

多柔比星脂质体与表柔比星在乳腺癌化疗中的应用效果比较

目的 比较多柔比星脂质体与表柔比星在乳腺癌化疗中的应用效果。方法 选取2018年6月—2020年6月湖南省妇幼保健院收治的乳腺癌化疗患者84例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,各42例。对照组治疗方案为“表柔比星+环磷酰胺×4→多西他赛×4”,观察组治疗方案为“多柔比星脂质体+环磷酰胺×4→多西他赛×4”。2组同以21 d为1个疗程,持续治疗4个疗程,每2周复查1次乳腺B型超声检查。比较2组近期疗效,治疗前后肿瘤标记物[血清细胞角蛋白12-1(CYFRA12-1)、糖类抗原15-3(CA15-3)、血清癌胚抗原(CEA)]水平及不良反应。结果 观察组患者疾病控制率(DCR)为95.24%,高于对照组的80.95%(χ²=4.087,P=0.043);治疗4个疗程后,2组CYFRA21-1、CEA、CA15-3水平均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P均<0.01); 2组患者过敏反应、心肌损害、脱发等不良反应Ⅲ～Ⅳ度发生率的比较差异均无统计学意义(P> 0.05),但观察组Ⅰ～Ⅱ度发生率均低于对照组(P <0.05)。结论 多柔比星脂质体相较...     

多柔比星斑马鱼胚胎心脏发育毒性表现

目的通过观察多柔比星的斑马鱼胚胎心脏毒性表现,为其作为心脏毒性评价模型提供可靠的检测指标。方法选择发育正常的6hpf(hours post fertilization)斑马鱼胚胎暴露于多柔比星2.16～34.48μmol·L-148h。显微镜观察72hpf斑马鱼心血管系统的形态学改变。通过DVC摄像系统测定心率;测量静脉窦-动脉球(SV-BA)间距,HE染色观察斑马鱼心肌结构。结果多柔比星2.16μmol·L-1组斑马鱼心血管系统形态无改变,但心率下降,为(166±5)min-1;SV-BA间距增加,为(237±13)μm。多柔比星4.31μmol·L-1可引起斑马鱼出现心包水肿,心脏畸形,心率减低,为(166±5)min-1;SV-BA间距增加,为(268±13)μm。随着多柔比星浓度增加,斑马鱼出现体长缩短、体节发育异常、脊柱弯曲、卵黄囊水肿、出血、心脏缩小等多种表型改变。心脏组织切片显示,多柔比星8.62μmol·L-1可引起斑马鱼心包腔变大、心脏缩小、心肌层变薄和心肌细胞减少。结论多柔比星对斑马鱼胚胎心脏毒性作用的表现与对哺乳动物的毒性作用表现相同,有望成为评价药物心脏发育毒性的模型。     

巯基化阿霉素的两种合成方法的比较

目的：探索合成供金纳米粒载药系统研究用模型药物巯基化阿霉素的可行方法。方法分别采用2-亚氨基硫烷盐酸盐（2-IT）法和琥珀酰亚胺-S-乙酰基硫代乙酸酯（SATA）法合成巯基阿霉素,通过高效液相色谱（HPLC）、飞行时间质谱（MS-ESI）及核磁共振氢谱（1 H NMR）验证巯基阿霉素的合成,并考察反应物摩尔比、反应时间等因素对合成巯基阿霉素的影响。结果1 H NMR确证DOX-SATA出现了与硫酯基团相连的质子信号,表明新合成的化合物中含有硫酯基团。 HPLC及MS-ESI结果显示,两种方法均能合成巯基阿霉素,2-IT法生成的巯基阿霉素,随着反应时间延长易发生环化,形成环化巯基阿霉素。 SATA试剂法合成巯基阿霉素过程中不易发生副反应,合成的巯基阿霉素较为稳定。结论通过两种方法的比较,SA-TA法合成巯基阿霉素的方法较为可行。     

吗丙嗪对阿霉素作用下大鼠脂质过氧化的影响

采用比色法测定GSH-Px,SOD活性及丙二醛含量,注射阿霉素后,大鼠全血、心肌中GSH-Px及红细胞SOD活性明显下降,心肌丙二醛含量显著升高,给予不同剂量的吗丙嗪后,GSH-Px及SOD活性有明显回升,并呈剂量依赖关系;而心肌丙二醛含量明显下降,提示阿霉素可能通过自由基途径对机体产生影响,而吗丙嗪通过提高体内抗氧化酶的活力,减轻脂质过氧化损伤而对心肌起保护作用。     

Pharmacokinetics of doxorubicin in sarcoma patients

Summary The pharmacokinetics of doxorubicin has been studied in 26 sarcoma patients receiving polychemotherapy. Mean elimination half-life was 34.7±16.6 h and the total plasma clearance was 29.5±9.31·h^–1·m^–2. No relationship was found between the pharmacokinetic parameters and the response to treatment, or its toxicity. Special attention was paid to the early-phase kinetics of the drug (3–20 min after injection). A correlation between the early clearance and the ages of the patients was observed. The early clearance was clearly correlated with the total plasma clearance measured over 48 h after injection, indicating the importance of the distribution phase in the overall kinetics of the drug.     

康莱特联合阿霉素的体外抗肿瘤活性

目的探讨康莱特与阿霉素联合应用的体外抗肿瘤活性及其相关机制。方法将康莱特与阿霉素单独及联合应用于骨肉瘤细胞,采用MTT法检测细胞毒性作用,流式细胞仪定量分析凋亡细胞所占比例,倒置相差显微镜、荧光显微镜下观察凋亡细胞形态改变。结果康莱特质量浓度达到1 g.L-1时,细胞抑制率不再明显改变,但如与1 mg.L-1阿霉素合用将使细胞抑制率进一步提升(P<0.01)。细胞形态观察及凋亡率测定也显示,康莱特与阿霉素联用可诱导更多骨肉瘤细胞凋亡。结论康莱特与阿霉素合用可高效杀伤肿瘤细胞。     

Population pharmacokinetics of doxorubicin in Indian cancer patients using NONMEM

The population pharmacokinetics of doxorubicin were evaluated based on a mixed-effect model using the NONMEM (VI) program. Doxorubicin in plasma was measured using high-performance liquid chromatography. Plasma concentration measurements (85 plasma samples) of doxorubicin from 28 patients with cancer receiving doxorubicin (with other co-medication) ranging from 20–120?mg by infusion over 1–2?h were analyzed according to a two-compartment model both in FO and FOCE methods. Additive proportional error model was used to describe inter-individual and residual variability. The influence of covariates such as age, body surface area, gender, and clinical laboratory values (SGOT, SGPT) on total body clearance (CL) and volume of distribution (Vd) were examined. No covariate was found to affect the CL and Vd of unchanged doxorubicin. The CL and Vd estimated by FO method were 1.42?L/h and 51.1?L, respectively, and FOCE method are 1.43?L/h and 51.4?L, respectively. The inter-individual variability for CL and Vd and residual variability were 45.8%, 36%, and 12.6%, respectively. The population means and inter-individual and residual variability of pharmacokinetics of doxorubicin were evaluated using the NONMEM program. The results of this study show that the population pharmacokinetic approach could be useful to manage doxorubicin cardio toxicity using sparse data in a clinical setting.     

西红花酸对多柔比星致大鼠心脏毒性的影响

目的：研究西红花酸减轻多柔比星心脏毒性的作用并探讨其机制。方法：建立多柔比星损伤大鼠心脏模型，灌胃给予西红花酸，观察动物心电图变化，测定血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、超氧化物歧化酶（SOD）、全血谷胱甘肽过氧物酶（GSH—Px）和丙二醛（MDA）的变化，用光镜及透射电镜观察心肌的病理改变。结果：西红花酸可以有效改善多柔比星诱导的大鼠心电图异常，如QRS复合波变宽、Q＆T间期延长、T波高耸以及心率变缓（P〈0．05），阻滞多柔比星引起的总SOD，Cu-Zn-SOD，全血GSH—Px活性降低和LDH，CK活性升高及MDA的升高（P〈0．05）；改善心肌超微结构的病理变化。结论：西红花酸可以减轻多柔比星的心脏毒性。     

枸橼酸二甲双胍阿霉素脂质体的制备

目的制备二甲双胍阿霉素脂质体并对其制备工艺进行优化。方法以二甲双胍阿霉素脂质体的包封率为评价指标,对其处方和制备工艺进行筛选和优化。分别考察了磷脂与胆固醇的比例、水化介质中阴离子的种类、水化介质的浓度、水化介质的pH值、载药温度、载药时间对二甲双胍阿霉素脂质体包封率的影响。结果最终优化的处方为m(hydrogenated soybean phosphatidylcho-line,HSPC)∶m(cholesterol,CH)∶m(polyethylene glycol 2000-cholesteryl hemisuccinate,mPEG2000-CHEMS)=3.0∶1.0∶1.0,以pH为7.00的300 mmol.L-1的枸橼酸二甲双胍为水化介质,60℃载药60 min,所制备的脂质体包封率可达98.7%。结论以枸橼酸二甲双胍离子梯度法制备的阿霉素脂质体包封率高,方法可行。     

聚合胶束载药多柔比星的研究进展

多柔比星（阿霉素，adriamycin）是临床上广泛使用的抗癌药，但其对正常组织的毒性和固有的多药耐药性是急需解决的问题。聚合胶束作为抗癌药的载体具有靶向作用，可减少毒副作用，提高抗癌药物的化疗指数。现对国外聚合胶束载药阿霉素的制备、理化性质、体外释放、生物学分布、抗肿瘤活性及靶向性进行综述。     

Biodegradable intraprostatic doxorubicin implants

Systemic chemotherapy is not effective in the treatment of prostate-confined cancer. We developed biodegradable, doxorubicin-loaded cylinders for intraprostatic implantation and evaluated the feasibility of using regional intraprostatic drug therapy to treat prostate-confined cancer. Cylinders were prepared using poly(lactide-co-glycolide) (PLG) or PLG copolymers. The in vitro and in vivo drug release, intraprostatic pharmacokinetics, and histopathology in dogs implanted with the cylinders were studied. The doxorubicin-loaded cylinders made of PLG polymers of 7.9 to 54 kDa molecular weight (MW) had a diameter of ~800 mum, drug loading of 10% to 30% (wt/wt), and even distribution of crystalline drug throughout the matrix. Burst release varied from 3% to 73%, and 7-day cumulative release from 4% to 90%. Decreasing polymer MW and increasing drug loading were associated with higher initial burst release and overall release rates. The in vivo drug release from cylinders (33-kDa PLG, 30% drug loading) in dog prostates was rapid (approximately 80% in 48 hours). Spatial drug distribution, visualized using confocal fluorescence microscopy, showed high concentrations confined to the lobule containing the implant (referred to as the implanted lobule), with steep concentration gradients over the septa separating the lobules. Concentrations in the implanted lobule were about 8 times higher than concentrations delivered by an intravenous injection. The implants caused necrotic cell death in the implanted lobule, without damage to prostatic nerve bundles or the urethra. These results indicate the feasibility of using biodegradable PLG cylinders as intraprostatic implants to selectively deliver high drug concentrations to prostate tissue.